ACTIVIDAD ENZIMATICA

ANNIE JULIETH GALEANO BRITTO, CEFRAINNE GUTIÉRREZ ALVAREZ, JONAS

ALBERTO CERVANTES OSPINO, ALBEIRO JOSÉ LÓPEZ BRUN
Universidad del Magdalena, Facultad de Ingeniería. Carrera 32 No 22 -08. Santa Marta,
Colombia.

RESUMEN
En esta práctica de laboratorio comenzamos rotulando los tubos de ensayo para después
poner en cada uno su respectiva cantidad de extracto de espinaca en mililitros (ml), luego le
agregamos peróxido de hidrogeno para todas las muestras, algunas su hizo a diferentes
temperatura, otras a pH y la concentración. Se hizo con el fin de identificar en una reacción
las enzimas y su respectivo sustrato, además de demostrar el efecto de la temperatura, el pH
y la concentración en la actividad enzimática. Se observo y se analiza cada uno de los
resultados.
Palabras claves: enzimas, sustrato, proteínas, reacción química.

INTRODUCCION
Las proteínas realizan múltiples funciones en los seres vivos. Las proteínas especializadas en
la función catalítica reciben el nombre de enzimas y la sustancia sobre las cuales actúan se
denominan sustrato (Cardellá, Hernández, 2001). Las enzimas son proteínas especiales
capaces de catalizar reacciones químicas. Un catalizador es la sustancia que acelera la
reacción sin modificar las condiciones del equilibrio y que, al final de la reacción, se recupera
sin alterarse. De forma general puede simplificarse el esquema de una reacción en un ser vivo
de la siguiente forma: un sustrato S se transforma en un producto P. para que esta
transformación tenga lugar, el sustrato debe pasar por un estado activado, de energía superior
a la del sustrato antes de la reacción y a la del producto (Pilar Roca, Jordi Oliver, Ana
Rodríguez, 2003). Los factores que afectan la actividad enzimática son la temperatura, el pH
o la concentración.
MATERIALES Y METODOS
Parte A. Efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de una reacción
enzimática.

Se prepararon y rotularon 5 tubos de ensayo, a los cuales agregamos 1.0 ml de extracto de

espinaca (enzima catalasa) a cada uno; luego agregamos simultáneamente en cada tubo el
sustrato (peróxido) en distintos volúmenes de la siguiente manera:

Tabla N° 1. Concentración del sustrato.

 No del Ml Volumen del
tubo. extracto sustrato
de
espinaca
1 1.0 1 ml
2 1.0 2 ml
3 1.0 3 ml
4 1.0 4 ml
5 1.0 5 ml
Parte B. Velocidad de reaccion en funcion de la termperatura.

Se tomaron 3 tubos de ensayo con 2ml de extracto de espinaca (enzima catalasa) y

modificamos sus temperaturas (baño de maría, baño con hielo y temperatura ambiente); luego
agregamos en cada uno de forma simultánea 2ml de sustrato (peróxido de hidrogeno), y se
analizó lo observado.

Parte C. Efecto pH

Se prepararon 3 tubos de ensayos con 2ml de extracto de espinaca (enzima catalasa), luego a
cada tubo le agregamos 5 gotas de la distinta sustancia (ácido nítrico, suero fisiológico y
NaOH); por último, al mismo tiempo, se agregó 2 ml de sustrato (peróxido de hidrogeno) en
cada tubo.

RESULTADOS
Parte A. Efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de una reacción
enzimática.

En las observaciones realizadas, se pudo evidenciar que, al aumentar la concentración de

sustrato, la actividad enzimática aumenta y la reacción es más rápida como lo es en el caso
del tubo 3, 4 y 5 donde se observó la mayor liberación de oxígeno, tal como se muestra en la
tabla N°2. En los tubos 2 y 1 hubo evidencia de burbujeo y su reacción fue más lenta.

Efecto de la concentración del sustrato en

 Tubo Concentración Tiempo
de sustrato
1 0 ml niguno
2 2 ml 11 seg
3 3 ml 8 seg
4 4 ml 4 seg
5 5 ml 2 seg

Parte B. Velocidad de reaccion en funcion de la termperatura.

En esta parte se observo como la temperatura influyo en la actividad enzimatica, en el tubo
2 el cual fue sometido a una temperatura fria y en el tubo 1 con una temperatura alta se
observo que la enzima disminuyo su accion; En cambio en el el tubo 3 en temperatura
ambiente hubo una mayor velocidad de la reaccion en comparacion con las primeras.

Grafica de temperatura vs tiemp

6
Temperatura vs tiempo
Tiempo (Sg)

0
0 20 40 60 80 100
Temperatura °C

Tabla de efectos de temperatura

Temperatura Tiempo
Baño de María 80°C ninguno
Ambiente 37 °C 3 segundos
Baño de hielo 15-20°C 15 segundos
Parte C. efecto del pH en la actividad enzimática.
Como resultado de agregarle acido acético (vinagre) que, tiene un pH acido bajo dentro del
intervalo de 2,4 a 3,4, la actividad enzimática se vio disminuida, esto se ve reflejado en la
poca o casi nada producción de espuma. Al agregarle amoniaco, el cual tiene un pH alcalino
de 11, la actividad enzimática aumento produciendo mas espuma. En el tubo que se le agrego
un sustrato de pH neutro (suero) la actividad enzimática no actividad enzimática pero poca
aunque más que en la de pH acido.

DISCUSION
Se realizaron los procedimientos descritos anteriormente con los cuales se pudo comprobar
y observar la actividad realizada por las enzimas en este caso su actuar como catalizador.

En la Parte A. se quiso demostrar el efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad

de una reacción enzimática, al aumentar la concentración de sustrato, aumenta también la
velocidad de la reacción y es más rápido su acción. Esto resulta lógico, ya que mientras existe
enzima libre, a mayor número de moléculas de sustrato, más moléculas de producto
aparecerán.

En la parte B se pudo determinar como la temperatura es un factor que afecta la acción de la

catalasa del hígado, logrando medir la actividad enzimática a diferentes temperaturas, en las
cuales se mostraron reacciones diferentes.

Al añadir el peróxido de hidrógeno al extracto de hígado en las diferentes temperaturas (Alta,

ambiente, fría), se pudo observar un burbujeo que se desprendió del agua oxigenada al entrar
en contacto con la materia orgánica, esto es debido al tratamiento térmico realizado, el cual
desnaturaliza la enzima catalasa que, en consecuencia, no degrada el peróxido de hidrógeno,
se puede deducir que a temperatura ambiente no va a perder su actividad

Las temperaturas calientes y frías, son temperaturas extremas en las cuales las enzimas
disminuyen su acción y se inhiben totalmente, debido a la desnaturalización de la molécula
proteica, de la cual están conformadas las enzimas. A la temperatura ambiental las enzimas
presentan su mejor funcionamiento, es decir, se encuentran en un rango óptimo de
temperaturas. Esto era de esperarse, ya que cada enzima tiene un rango de temperatura
óptima.
En la parte C se demostró cómo afecta el pH a las enzimas pudimos determinar la capacidad
de reacción de cada una en diferentes concentraciones de químicos, la primera muestra
observamos cómo afecta un pH acido en las enzimas (Ácido nítrico) dando como resultado
la no activación de las enzimas, esto se debe a que en pH extremos las enzimas se
desnaturalizan y pierden su actividad catalítica. En la segunda muestra que se encontraba con
un pH alcalino la actividad de reacción con respecto a esa muestra fue mucho más activa que
en el pH ácido y menos con respecto al pH óptimo para esta enzima. En la tercera muestra se
observa una mejor reacción de las enzimas a la hora de descomponer el peróxido de
hidrogeno ya que este trabajo con suero fisiológico que es una sustancia con un pH óptimo
para las enzimas.

A través de esta experiencia pudimos adquirir conocimientos las enzimas y en este caso sobre
la enzima catalasa y como los distintos factores como la temperatura, el pH, la concentración
del sustrato y de la enzima y la presencia de inhibidores influyen en la actividad enzimática
ya sea acelerando o retardando el tiempo de reacción de esta.

BIBLIOGRAFIA
Cardellá, Hernández, 2000, BIOQUÍMICA MEDICA tomo 1 Biomoléculas, pág. 265.
Pilar Roca, Jordi Oliver, Ana Rodríguez, 2003, BIOQUIMICA Técnicas y Métodos,
Editorial Hélice, Madrid, pág. 180.

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ciencias naturales, capitulo 18. URL:
http://www.quimicaviva.qb.fcen.uba.ar/Semanario/elab.htm. Revista QuímicaViva.
Consultado, 10 de mayo 2018.

Como funciona que, 2015. Que es una enzima y cuales son sus funciones.
URL:http://comofuncionaque.com/que-es-una-enzima/. Consultado. 10 de mayo 2018.

Feduchi, Blasco, Romero, Yánez. 2010. Bioquímica Conceptos esenciales. Editorial

Médica Panamericana. URL:
http://apuntesbioquimicageneral.blogspot.com.co/2014/03/enzimas-iintroduccion.html.
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Lozano, J. Galindo, J. García, J. Martínez, J. Peñafiel, R. Solano, F. 2005. BIOQUIMICA Y

BIOLOGIA MOLECULAR para ciencias de la salud 3ª ed. McGRAW-HILL –
INTERAMERICANA DE ESPAÑA, S.A.U. Madrid España.