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Metodología: Lector de microplacas (Fotometría)

Colocar 30 µL de la muestra problema


en un tubo limpio

Adicionar

420 µL de buffer Acetatos 0.1


M pH 5.0

Centrifugar a 5,000 rpm


por 5 min.

Transferir 30 µL de la dilución
de la muestra a un pozo de la
microplaca
Adicionar con
micropipeta de 8
canales

DMP 7.06 Mm o
170 µL de la mezcla de ABTS 1.18 mM
reacción

Blancos y Lecturas de
Introducir la microplaca al
controles absorbancia
lector de microplacas

Bco.: 200 µL Control (-): 30 µL Monitorear por 15 DMP 468 ABTS 436
dH2O dH2O + 170 µL minutos nm nm
(DMP o ABTS)
Metodología: Espectrofotometría

Colocar 30 µL de la muestra problema


en un tubo limpio

Adicionar

420 µL de buffer Acetatos 0.1


M pH 5.0

Centrifugar a 5,000 rpm


por 5 min.

Transferir 200 µL de la dilución de DMP 7.06 Mm o


la muestra + 800 µL de la mezcla de ABTS 1.18 mM
reacción a una celda

Calibración Introducir la celda al Lecturas de


espectrofotómetro absorbancia

1 mL de Agua
desionizada Realizar 3 repeticiones con DMP y DMP 468 ABTS 436
3 repeticiones con ABTS nm nm

Tomar valores de Abs. cada 30


seg. en un rango de 00:01:30 min
hasta 00:05:00 min

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