Producción De Bioetanol A Partir De La Fermentación

Alcohólica Del Jugo De Caña De Azúcar

RESUMEN

En este trabajo se busca la producción de energías renovables a partir de biomasas para la

obtención de Bioetanol, a partir, de jugo de caña de azúcar, ricos en azucares reductores. Se tuvo
en cuenta los parámetros para determinar el contenido de glucosa, el crecimiento microbiano
(shaccaromyces cerevisiae) en la fermentación y la producción de alcohol respectivamente. Se
obtuvo la concentración de glucosa a través de absorbancia. En la determinación de la producción
de alcohol se llevó a cabo mediante destilación y peso específico respectivamente. Finalmente el
grado de alcohol obtenido fue significativo en el jugo de caña de azúcar.

Palabras claves: jugo de caña; fermentación; alcohol; absorbancia; glucosa.

SUMMARY

In this work looks for the production of renewable energies from biomasses for the obtaining of
Bioethanol, to dividing, of juice of sugar cane, rich in sweeten reducers. The parameters were born
in mind to determine the content of glucose, the microbial growth (shaccaromyces cerevisiae) in the
fermentation and the production of alcohol respectively. The concentration of glucose was obtained
across absorbancia. In the determination of the production of alcohol it was carried out by means of
distillation and specific weight respectively. Finally the degree of obtained alcohol was significant in
the juice of sugar cane.

Key words: juice of cane; fermentation; alcohol; absorbancia; glucose.

INTRODUCCIÓN

El mundo se enfrenta a un agotamiento de recursos energéticos, principalmente los no renovables.

Es por ello que el interés en el desarrollo de combustibles renovables se ha convertido en un tema
de gran interés. La idea de muchos países se ha centrado en el tema de los biocombustibles como
fuente de energías alternativas y en los avances de la biotecnología para desarrollar la
transformación de estos en energías más limpias y seguras que los combustibles común mente
conocidos.

La biotecnología ofrece una solución con el uso de energía solar en forma de biomasa, la cual está
representada por material lignocelulósico y los cultivos de plantas ricas en energía.

Biocombustibles se define como combustibles sólidos, líquidos y gaseosos obtenidos a partir de

biomasa, ya sea de origen animal o vegetal. El termino biomasa en la actualidad se ha aceptado
para denominar al grupo de productos energéticos y materias primas de tipo renovable que se
originan a partir de la materia orgánica formada por vía biológica. Cannel 2003 destaca que una
hectárea de cultivo rico en energía usada para la producción debido combustibles líquidos
(bioetanol, biodiesel), puede evitar la emisión de 0,2 – 2,0 toneladas de carbono a la atmosfera. En
comparación con el empleo de combustibles fósiles [1].

Actualmente se han centrado todos los esfuerzos hacia la producción de bioetanol a partir de la caña
de azúcar, pero teniendo en cuenta los altos volúmenes necesarios y la diversidad de pisos térmicos
existentes en el territorio colombiano.
El biocombustible más importante es el alcohol carburante (EtOH), el cual puede ser utilizado como
oxigenante de la gasolina, elevando su contenido de oxígeno, lo que permite una mayor combustión
de la misma, disminuyendo las emisiones contaminantes.

Alcohol a partir de Caña de Azúcar.

La principal materia prima para la producción de EtOH es la caña de azúcar, ya sea en forma de
jugo de caña o como melazas (subproducto de la industria azucarera). Se pueden obtener cerca de
70L de EtOH/ton de caña y 9L EtOH/ton de melaza grado C, además de cerca de 100kg de azúcar
(Moreira y Goldemberg, 1999)6. Para efectos de costeo, Murtagh (1995) estimó que se debe esperar
un rendimiento de 58 galones de EtOH a partir de 1 ton de melazas que contengan un 46% de
azúcares [6].

El microorganismo más utilizado es S. Cerevisiae por su capacidad de hidrolizar la sacarosa de la

caña de azúcar para su conversión hasta glucosa y fructosa, dos hexosas fácilmente asimilables;
además puede desarrollarse en condiciones anaeróbicas, pero se necesitan pequeñas cantidades
de O2 para la síntesis de sustancias como ácidos grasos y esteroles. La reacción general de la
fermentación se puede representar como:

La fermentación alcohólica puede llevarse a cabo por lote, por lotes alimentados o en forma continua.
Los procesos continuos tienen mayores ventajas frente a los procesos por lotes debido a los
menores costos del biorreactor, menores requerimientos de mantenimiento y operación, mejor
control del proceso y mayor productividad. El 30% de las plantas productoras de bioetanol en Brasil
emplean el cultivo continuo (Monte Alegre et al., 2003) [5].

La clave de este proceso son las mayores densidades celulares, las cuales se pueden alcanzar por
inmovilización de células, recuperación y reciclaje de biomasa o control del crecimiento celular. Sin
embargo, las levaduras cultivadas por períodos prolongados en condiciones anaeróbicas
disminuyen su capacidad de producir alcohol. Adicionalmente, a tasas de dilución altas que
garantizan productividades elevadas, el sustrato no alcanza a ser consumido completamente, por lo
que los rendimientos disminuyen. Generalmente en la industria, aunque la productividad es
importante, es más relevante la conversión del sustrato considerando que la mayor parte de los
costos de producción corresponden a la materia prima (Gil et al., 1991) [4].

MATERIALES Y MÉTODO

Los reactivos e instrumentos usados para la clarificación, fermentación, conté de microorganismos

y destilación son brindados por el Centro de Investigación para el Desarrollo de la Ingeniería (CIDI)
y los laboratorios de microbiología de la Universidad Popular Del Cesar- Valledupar (Colombia).

Materia prima
Se trabajó con jugo de caña de azúcar, suministrado por un puesto de venta artesanal de este
producto en el mercado de la ciudad de Valledupar. El cual, tenia (ºBrix inicial 17,9 = 20 % sacarosa).
Filtrado y pasteurizado:

El jugo se le realizo un proceso de filtrado manual con un Ph= 5,29, para luego ser sometió a un
calentamiento de 75ºC por 15 para realizar el proceso de pasteurizar.

Figura 1. Filtración del jugo

Microorganismo:

Se utilizó una cepa de Saccharomyces cerevisiae.

Figura 2. Saccharomyce cerevisiae

Curva patrón de glucosa:

Para la realización de la curva patrón se empleó el reactivo DNS (3,5-dinitrosalicilico).

Figura 3. Adición del reactivo

Activación de la levadura S. Cerevisiae:

Se tomó 1 un beaker con el 30% del jugo de caña y se llevó a 35ºC, a esta temperatura se inoculó
2g/L de Sacharomyces c y el medio de fermentación (Fosfato y magnesio) y se mantuvo por 1
horas.
 Figura 3. Activación de la levadura Saccharomyces cerevisiae

Fermentación:

Se vertió el jugo de caña pasteurizado (1600ml) al Biorreactor donde los sustratos del jugo se
ajustaron a un pH de 5.29 utilizando ácido clorhídrico al 1N en donde ya estaba activada la levadura,
la reacción fermentativa se mantuvo a 28.7ºC, 400 rpm por 48 horas, en ausencia de oxígeno.

Figura 3. Adición del reactivo

Determinación de azúcar reductor al jugo de caña:

Se determinó por espectrofotometría, mediante el método DNS

Se tomó la muestra de jugo de caña (0,1 ml en un balón aforado se completó hasta 100 ml con
agua). Después de tomaron 3 tubos de ensayo y se adiciono a cada uno 1ml de esa solución se
agito en el vortex y se adiciono 1 ml de DNS, se agito nuevamente y se incubaron en agua a 90ºC
por 5 minutos, pasado ese tiempo se enfrió con escarcha de la nevera por 5min. Luego en un tubo
(#4) de ensayo se adiciono 1 ml de agua destilada más 1ml de DNS, por último se tomó la lectura
de la absorbancia en el espectrofotómetro.

Figura 4
Proceso por espectrofotometría
Cinética de formación de Biomasa:

Se determinó por conteo en Cámara de Neubauer; el seguimiento de la formación de biomasa se

llevó a cabo durante 3 días (o por disponibilidad del laboratorio) con la ayuda de un microscopio,
tomamos la muestra (jugo de caña) la llevamos al laboratorio, en cada uno de ellos observamos el
crecimiento microbiano y se pudo realizar el conteo respectivo. Se utilizaron distintas
concentraciones las cuales fueron desde 10−3 hasta 10−4 las cuales se determinaron para que fuera
más fácil el conteo.
Para obtener la concentración de microrganismo en los respectivos conteos se utilizó la fórmula:

Σcelulas
[ ]=
𝐹𝐷𝑥 10−𝑥
Donde: Σ𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠: es el número de célula contadas.
𝐹𝐷𝑥 10−𝑥 : El número de concentración utilizada.

Figura 5. Microscopio Figura 6. Cámara de neubauer Figura 7. Conteo de levadura.

Determinación del porcentaje en volumen de alcohólico:

Esta se hace con los ºBrix, se realizan 6 tomas, de las cuales se tomaron 3 lecturas y se sacó un
promedio (14,8), luego realizamos una fórmula de alcohol probable, donde se remplazamos los ºBrix
obtenidos y hallamos el alcohol probable. Luego se realizó la destilación en los cuales se destilaron
450 ml del jugo para un total 340 ml destilado y un residuo del jugo de 70 ml. Los grados de alcohol
fueron de 9.

MEDICION DE CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

MATERIALES Y EQUIPOS:

1. Microscopio
2. Cámara de neubauer
3. Cubre objetos
4. Pipeta automática y punta
5. Tubos de ensayos
 PROCEDIMIENTO

1. En el primer procedimiento extrajimos una muestra del jugo de caña fermentado la llevamos al
laboratorio de microbiología
2. Segundo procedimiento hicimos distintas diluciones para hacer el respectivo conteo a medida
que iban incrementando las levaduras íbamos utilizando las diluciones

3. Tercer procedimiento con la pipeta automática echamos la dilución correspondiente ala

cámara de neubauer para analizarla en el microscopio

4. Una vez ya puesta la muestra empezamos a enfocar en 10x y 40x una vez enfocada
empezamos el conteo de las Saccharomyces cerevisiae
5. Este proceso lo repetimos durante 5 veces
6. Luego de las mediciones realizamos los cálculos el cual llevaremos a Excel para realizar la
curva de crecimiento
 Tiempo (hora) Nª levadura/mol
2 15𝑥104
12 45,9𝑥104
18 43,5105
24 76,3𝑥105
48 85𝑥105

CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO

9000000

8000000

7000000

6000000
LEVADURA/ML

5000000

4000000

3000000

2000000

1000000

0
0 10 20 30 40 50 60
TIEMPO (HORA)