Funciones emergentes de las células T reguladoras en la homeostasis del tejido

CD4 + Foxp3 +las células T reguladoras (Treg) son un subconjunto único de células T auxiliares, que regulan
la respuesta inmune y establecen la tolerancia periférica. Los Treg no solo mantienen el tono y el tenor de
una respuesta inmune por tolerancia dominante sino que, en los últimos años, también se han identificado
como actores clave en la resolución de la inflamación del tejido y como mediadores de la curación del
tejido. Además de ser diversos en su origen (tímico y periférico) y ubicación (linfocida y tejido residente),
los Treg también son fenotípicamente heterogéneos según la orientación de la respuesta inmune en curso.
En esta revisión, discutimos los avances recientes en el campo de la biología de Treg en general, y los Treg
no linfoides y residentes de tejidos en particular. Elaboramos sobre el bien conocido tejido adiposo
visceral, colon, piel y Treg infiltrantes de tumores y poblaciones de Treg de tejidos recientemente
identificadas como en los pulmones, Músculo esquelético, placenta y otros tejidos. Nuestro intento es
diferenciar las Treg en función de las propiedades distintivas de su ubicación, origen, especificidad de
ligando, quimiotaxis y mecanismos supresores específicos. A pesar de los roles cada vez más amplios en el
mantenimiento de la homeostasis sistémica, los Treg son empleados por grandes variedades de tumores
para amortiguar la inmunidad antitumoral. Por lo tanto, una comprensión completa de la biología de Treg
en el contexto de la inflamación puede ser instrumental en el manejo efectivo del trasplante de tejidos, la
autoinmunidad y las respuestas inmunes antitumorales. Tregs son empleados por grandes variedades de
tumores para amortiguar la inmunidad antitumoral. Por lo tanto, una comprensión completa de la biología
de Treg en el contexto de la inflamación puede ser instrumental en el manejo efectivo del trasplante de
tejidos, la autoinmunidad y las respuestas inmunes antitumorales. Tregs son empleados por grandes
variedades de tumores para amortiguar la inmunidad antitumoral. Por lo tanto, una comprensión completa
de la biología de Treg en el contexto de la inflamación puede ser instrumental en el manejo efectivo del
trasplante de tejidos, la autoinmunidad y las respuestas inmunes antitumorales.
Introducción
El sistema inmunitario y el sistema nervioso de los vertebrados son dos sistemas que son cognitivos y están
en continua interacción con el medio ambiente. Esto probablemente explica por qué ambos comparten
paradigmas comunes como el reconocimiento, el aprendizaje o la modulación, y la memoria. Durante
mucho tiempo, la inmunología se ha definido como una ciencia de la discriminación "yo / no-yo" ( 1 ). Sin
embargo, a lo largo del tiempo, el concepto inmunológico de "yo" ha evolucionado, donde la definición
misma de un individuo con límites anatómicos definidos, equilibrio compatible entre sus partes, autonomía
fisiológica y capacidad para replicarse como una unidad es desafiada rápidamente por los simbiontes. La
identidad inmune ahora se considera más fluida que restringida en fronteras estrictas ( 2). Por lo tanto,
además de generar un fondo protector y ofensivo, el sistema inmunológico debe trabajar para mantener
una identidad del organismo mediante la mediación de procesos de intercambio dinámico con el medio
ambiente. Esto no solo implica generar una defensa sólida contra patógenos y toxinas, sino que también lo
hace más importante para suprimir una respuesta inmune demasiado ferviente, frenar las reacciones
autoinmunes y mantener el equilibrio hacia los comensales y los alimentos. Varios mecanismos, como la
eliminación clónica, la edición, la anergia, la ignorancia y la desviación inmunológica, han evolucionado
para protegerse contra la inmunidad autodirigida ( 3 ). Células especializadas con capacidades
inmunosupresoras como las células dendríticas tolerógenas (DC) ( 4 - 6 ), células B reguladoras ( 7 , 8).), las
células linfoides innatas reguladoras ( 9 ), las células T reguladoras tipo 1 (Tr1) ( 10 ) y las células T
reguladoras Foxp3 + (Tregs) ( 11 - 13 ) también han evolucionado.
Las células T reguladoras son posiblemente las células inmunosupresoras más versátiles y funcionan como
centinelas inmunológicos en varios tejidos. Tanto en ratones como en hombres, la pérdida de estas células
esencialmente da como resultado la descomposición de la tolerancia y la autoinmunidad multiorgánica.
Desde su descubrimiento, la biología de los Treg ha sido el campo más dinámico de la investigación
inmunológica y, como resultado, los Treg, que una vez se consideraron como una población
inmunosupresora homogénea, han demostrado ser un tipo celular altamente adaptable y diversificado. Su
heterogeneidad se aprecia ahora en el contexto de origen, localización, diferenciación y mecanismos de
inmunosupresión. En la primera parte de esta revisión, analizaremos brevemente los eventos que
colocaron a los Treg en el centro de la investigación inmunológica.
Concepto de tolerancia "dominante" y el surgimiento de la investigación de células T reguladoras
La tolerancia de las células T es fundamental para regular las respuestas inmunitarias adaptativas, ya que la
ayuda de las células T es esencial para desarrollar una respuesta de anticuerpos a través de las células B (
14 ). La tolerancia de las células T durante mucho tiempo, se estudió a la luz de la "tolerancia recesiva", en
la que las células T con TCR de alta afinidad hacia los autoantígenos se eliminan de forma clónica ( 15 ) o se
someten a "edición de receptores" en el timo ( 16 , 17 ). Las células fuera de control que escapan de estos
procesos centrales encuentran anergia o muerte celular inducida por activación en la periferia ( 15 , 18 ).
Sin embargo, los estudios sobre la tolerancia dieron paso a una era "activa" o "dominante" con el
descubrimiento seminal de la supresión de CD4 +Células T que expresan altos niveles de receptor de
cadena α de IL2 (CD25) de alta eficiencia ( 19 ).
El comienzo de la investigación Treg
Las evidencias preliminares de células supresoras mantenidas en el timo comenzaron a aparecer cuando
varios investigadores informaron que la timectomía neonatal (3 días postnatal, 3dTx) podría inducir
diversas enfermedades autoinmunes en cepas de ratones adecuadas ( 20 - 25 ). Aún más sorprendente fue
el hecho de que los procesos patológicos inducidos de manera similar en ratas podrían revertirse mediante
la reconstitución con células linfoides normales ( 26 ). Varios grupos intentaron identificar marcadores
específicos para distinguir las células supresoras de las células T patógenas en el timo. Se informó que las
células T agotadas de CD4 + CD5 hi inducían un fenotipo autoinmune similar a 3dTx en ratones BALB / cy
C3H ( 27). Otros dos grupos demostraron la capacidad de las células CD4 + CD45RB hi células T en la
inducción de la enfermedad inflamatoria intestinal en ratones BALB / c SCID ( 28 , 29 ) y su resolución
después de la reconstitución con células T totales. Si bien estos estudios demostraron que distintos
subgrupos fenotípicamente de células T son capaces de desarrollar respuestas inmunes discretas, la
identidad específica de las contrapartes que inducen tolerancia sigue siendo difícil de alcanzar. Sakaguchi
et al. en 1995 ( 19 ) descubrió una alta expresión superficial de CD25 en aproximadamente el 8-10% de las
células T CD4 + , que eran CD5 hi y CD45RB a lo largo de concordancia con estudios anteriores. Asano et al.
( 30) demostraron que las células T CD4 + CD25 + aparecen alrededor del día 3 postnatal y aumentan hasta
los niveles de adultos para el día 10. Estos autores fueron los primeros en proponer el término "regulador"
para este subtipo.
Descubrimiento de foxp3
Si bien estudios posteriores con numerosos modelos experimentales de autoinmunidad establecieron su
existencia funcional ( 31 ), el uso de CD25 como marcador para las Tregs siguió siendo controvertido
durante varios años debido a su regulación positiva en todas las células T activadas. Además, parecía
posible que un subconjunto de las células T activadas, en virtud de la marcada regulación al alza del
receptor a2 de IL2 en su superficie, restringiera la respuesta inmune simplemente compitiendo por IL2.
Una línea de ratón denominada "scurfy", con autoinmunidad espontánea (originalmente apareció como
una mutación espontánea en el laboratorio nacional Oak Ridge, EE. UU. Bajo el proyecto Manhattan), se
caracterizó inmunológicamente en 1991. Los ratones Scurfy tienen una mutación recesiva ligada al X que
conduce a Piel escamosa, linfoproliferación, hipergammaglobulinemia, linfadenomegalia, anemia, correr y
muerte prematura ( 32 ). La timectomía redujo la gravedad de la enfermedad pero no la mejoró
totalmente. Sin embargo, cruzar la cepa con ratones nu / nu previno totalmente la enfermedad, lo que
sugiere un origen tímico de células causantes de la enfermedad. Varios otros estudios revelaron que el
escurfy es principalmente un trastorno dependiente de células T ( 33 - 35).) muy similar a la proteína 4
asociada a linfocitos T citotóxicos (CTLA4) ( 36 ) y animales deficientes en el factor de crecimiento
transformante β1 (TGFβ1) ( 37 ). Estas similitudes instigaron investigaciones para identificar el gen
responsable del fenotipo de la escoria. En 2001, Brunkow et al. ( 38 ) identificaron 20 genes putativos en
una región de 500 kb del cromosoma X mediante la secuenciación de cuatro cromosomas bacterianos
artificiales superpuestos. De estos, uno poseía un ORF altamente homólogo con el dominio de unión al
ADN de la familia de proteínas forkhead / HNF3 / winged helix. Se descubrió que este gen en el ratón de la
escoria alberga una mutación de inserción de 2 pb, lo que da como resultado un producto génico truncado,
que elimina el dominio del extremo C-terminal ( 38 ). Los investigadores designaron este gen comoFoxp3 .
Los experimentos de complementación funcional mediante el apareamiento de hembras portadoras de
escurfy con líneas transgénicas Foxp3 dieron como resultado el rescate completo del fenotipo de escurfia,
lo que corrobora la mutación de Foxp3 como la causa ( 38 ).
Alrededor del mismo tiempo, se confirmaron mutaciones en el gen FOXP3 y su región no traducida 3 'en
pacientes humanos con síndrome de IPEX ( 39 , 40 ). El síndrome de IPEX es una inmunodisregulación
polidendinopatía enteropatía ligada al X, originalmente descrita en 1982 por Powell et al. ( 41 ). La
sorprendente similitud en el fenotipo autoinmune de los pacientes con IPEX, scurfy y ratones 3dTx llevó a
varios grupos a examinar la función de Foxp3 en Tregs. Posteriormente, en 2003, tres estudios informaron
que, de hecho, Foxp3 se expresa de forma única por los timocitos CD4 + CD8 - CD25 + y CD4 + CD25
+Células T reguladoras periféricas ( 42 - 44 ) en ratones. La transducción retroviral de Foxp3 indujo la
expresión de CD25 en CD4 + CD25 - células T que eran funcionalmente supresivas y expresaban las
moléculas asociadas a Treg CTLA4 y GITR. La eliminación de Foxp3 en ratones dio lugar a un trastorno
linfoproliferativo idéntico a los ratones con escoria ( 43 , 44 ). Los experimentos mixtos de quimera de
médula ósea demostraron que, de hecho, solo las médulas óseas suficientes en Foxp3 eran capaces de
generar CD4 + CD25 + Tregs ( 44). La evidencia concluyente para Foxp3 como marcador específico de linaje
para ratones Treg provino de ratones Foxp3 eGFP reporter ( 45 ) en los que la expresión de GFP se
encontró solo en células TCRβ + T entre todos los compartimentos celulares hematopoyéticos. La
eliminación condicional de Foxp3 en las células T CD4 + condujo a un trastorno linfoproliferativo que refleja
el fenotipo de escurfy. Estas series de experimentos establecieron a Foxp3 como la identidad molecular
responsable de implementar la firma transcripcional Treg. Investigaciones posteriores revelaron que el
Foxp3El propio gen está regulado por tres secuencias no codificadas conservadas (CNS) 1-3. Los análisis
epigenéticos detallados han identificado CNS1 como el elemento sensible a TGFβ que se requiere para la
generación periférica de Tregs, CNS2 está involucrado con el mantenimiento hereditario de la expresión de
Foxp3, mientras que CNS3 actúa como un elemento pionero para la inducción tímica de Foxp3 ( 46 ). Los
análisis proteómicos demostraron que Foxp3 está interactuando con más de 350 proteínas en complejos
multiproteicos, muchos de los cuales son factores relacionados con la transcripción ( 47 ). Una revisión
detallada sobre la regulación de Foxp3 y la regulación mediada por Foxp3 del transcriptoma de Treg se
puede encontrar en Lu et al. ( 12 ).
Diversidad de desarrollo y fenotípica en Tregs
Los experimentos de timectomía neonatal en ratones confirmaron sin lugar a dudas que el desarrollo
temprano de Treg ocurre en el timo. Una discusión detallada sobre el desarrollo tímico de Tregs se puede
encontrar en la Ref. ( 13 , 48 , 49 ). Brevemente, los marcadores de superficie celular indicativos de la
fuerza de la interacción TCR (CD25, CD5, etc.) sugirieron la participación de la señalización TCR. Los
repertorios TCR de Treg tienen una superposición limitada con la de los no Treg y son en gran medida auto-
reactivos ( 50 ). Los ratones informadores Nur77-GFP que expresan GFP en el locus del gen Nur77 , un gen
temprano expresado tras la estimulación con TCR tienen una mayor expresión de GFP en Tregs tímicos
(tTregs) ( 51). Con respecto a las citoquinas, se informó anteriormente que los ratones que carecen de IL2 o
CD25 ( 45 ) son capaces de generar Treg, aunque a un nivel reducido. Sin embargo, si se elimina la cadena γ
común, las Treg no se forman ( 45 ). Esto sugiere la cooperación entre las citoquinas γ en la expresión y el
mantenimiento de Foxp3 . Por lo tanto, el modelo actual de generación de Treg en el timo gravita hacia
uno instructivo en el que la señalización TCR sustancialmente por encima de la fuerza requerida para la
selección positiva y relativamente cerca de la fuerza que induce la selección negativa inicia la
especificación hacia el estado pre-Treg. En el segundo paso, las citoquinas inducen Foxp3.expresión. Más
recientemente, se demostró que Satb1, un organizador del genoma y factor de transcripción, media al
menos parcialmente la disposición genómica de los super potenciadores responsables del desarrollo de
Treg ( 52 ). Los patrones de superacelerador específicos de Treg se encontraron "preparados" para la
activación incluso en las células T periféricas convencionales.
Aunque las células T reguladoras tímicas son adeptas a suprimir las respuestas autoinmunes contra los
autoantígenos, no se puede desarrollar un entorno inmunitario razonablemente tolerante si se montan
respuestas inmunitarias repetidas contra microbios beneficiosos e inocuos, así como también antígenos
alimentarios. En parte, esto se logra mediante la generación de Tregs en la periferia. De hecho, las
evidencias iniciales sugirieron que las Treg pueden generarse mediante la alimentación con antígeno oral (
53 , 54 ), así como por las APC específicas para el antígeno ( 55 ) en ausencia de timo funcional. Además,
CD4 + CD25 convencionales - las células T vírgenes se podrían convertir a CD4 + CD25 + CD45RB - /
bajoCélulas supresoras por coestimulación con TCR y TGFβ. El TGFβ activa los factores de transcripción
Smad2 y 3 ( 56 ) que, de manera redundante, ayudan en la generación de Treg periférica al iniciar una
cascada de interacciones con regiones potenciadoras específicas dentro del locus Foxp3 ( 56 - 58 ).
Contrariamente a las interpretaciones iniciales de que las Treg son una población inmunosupresora
universal, las interrogaciones diligentes llevaron a la identificación de un conjunto bastante diverso y
distinto de subconjuntos heterogéneos. Aparte del sitio de inducción, los Treg se clasificaron en dos
poblaciones separadas: Tregs centrales (cTregs) y Tregs efectores (eTregs) ( 59 , 60 ). cTregs son Treg
comparativamente quiescentes en los tejidos linfoides. Expresan las moléculas homogéneas linfoides
CD62L y CCR7 y dependen de IL2 secretada por Tconv en zonas de células T de tejidos linfoides ( 60). Por
otro lado, los eTregs son principalmente Treg no linfoides que regulan a la baja las moléculas de alineación
linfoides y regulan al alza CD44, ICOS, GITR y otros marcadores inducidos por activación. Para el
mantenimiento, dependen de la señalización ICOS sostenida ( 60 ). La mayoría de estas células expresan el
factor de transcripción BLIMP1 y producen una alta IL10, similar a una población de ICOS + IL10 + Treg en
humanos ( 61 ).
Las investigaciones sobre la supresión mediada por Treg de distintas respuestas inmunes de células T
auxiliares implican un punto de vista contextual T helper-Treg de la heterogeneidad de Treg. Se informó
que las Treg expresan una alta cantidad del factor regulador del interferón (IFN) IRF4, cuya ablación
específica de Treg dio como resultado patologías selectivas relacionadas con Th2 ( 62 ). Estos hallazgos
iniciaron investigaciones similares en otros contextos de células T auxiliares y, de hecho, ahora existe un
paradigma bien establecido en el que, en un contexto inflamatorio Th1, los Treg expresan el factor de
transcripción Tbet, responsable de la especiación Th1, y expresan CXCR3 para acumularse en dichos sitios (
63 ). El factor de transcripción STAT3 se expresa en Tregs en un contexto Th17 ( 64) que ayuda en la
regulación positiva de CCR6 para migrar al intestino y la producción de IL10 ( 65 ). De manera similar, la
expresión de Bcl6 en Tregs demostró ser importante para regular las células Tfh y la expresión de CXCR5 (
66 , 67 ).
Avanzando un paso más y aumentando la complejidad y la diversidad entre las Treg, se descubren varias
subpoblaciones de Treg en tejidos no linfoides. Estas Treg no solo son instrumentales para la supresión de
las respuestas inflamatorias, sino que también se integran en un paradigma biológico más grande para el
beneficio de la homeostasis de órganos y organismos. En las siguientes secciones, revisaremos las
características de las Treg no linfoides, cómo se originan y funcionan para mantener la homeostasis de los
tejidos. Intentaremos dilucidar si, aparte de la ubicación, estos tipos de células pueden identificarse aún
más en virtud de características fenotípicas y funcionales específicas del tejido. Discutiremos
detalladamente las poblaciones de Treg bien caracterizadas en tejidos adiposos (AT), intestinos y piel. así
como intentar destacar algunos de los recientemente identificados en otros tejidos como los músculos, los
pulmones y la placenta. Si bien los Tregs demasiado celosos en los tumores malignos no necesariamente
pueden ser aplastados con Tregs de tejidos normales, pero a cierto nivel, a medida que los Treg perciben el
contexto del entorno en el que residen y son secuestrados por los tumores para su beneficio, también
discutiremos los Tregs infiltrados en tumores para: dilucidar sobre los principios generales que podrían
integrar dicha heterogeneidad.
Tregs Grasas: Inmunosupresión Para La Homeostasis Metabólica
El tejido adiposo es el reservorio natural de calorías del cuerpo. En general, el tejido se clasifica en dos
tipos de tejido antagónicamente funcional: tejido adiposo blanco (WAT) y tejido adiposo marrón (BAT).
WAT almacena el exceso de nutrientes en forma de gotas de grasa durante la sobrealimentación y lo libera
en condiciones de déficit de energía. La MTD, en virtud de una mayor expresión de la proteína de la
proteína 1 de desacoplamiento (UCP1), aumenta la utilización de la energía mediante termogénesis sin
temblor ( 68 ). La WAT está disponible en abundancia y se encuentra principalmente en el tejido
subcutáneo, omenta, mesenterios, tejidos perirrenales y médula ósea, mientras que la BAT tiene una
distribución restringida que se produce principalmente en las regiones interscapulares e inguinales.
En arquitectura
Estructuralmente, la AT es un tejido conectivo suelto que consta principalmente de células grasas
(adipocitos), cada una rodeada por su propia lámina basal y separada por una capa delgada de matriz
extracelular compuesta de fibras reticulares y de colágeno y provista de numerosos capilares. Varias otras
células residentes, así como también transitorias, están esparcidas en AT, a saber, fibroblastos,
miofibroblastos y células inmunes como macrófagos, mastocitos, eosinófilos, neutrófilos y células T. Los
WAT son los depósitos de grasa profesionales ( 69 ) que almacenan el exceso de energía como triglicéridos
sin la lipotoxicidad común que experimentan otros tipos de células ( 70).). Los adipocitos WAT suelen ser
esféricos con una gota de grasa única que ocupa el 90% del volumen celular y una mitocondria alargada
delgada en un lado. Por otro lado, BAT integra las condiciones ambientales a través de respuestas
adrenérgicas del cerebro hacia las temperaturas frías. Los adipocitos en BAT son típicamente poligonales,
contienen triglicéridos en múltiples vacuolas pequeñas y se caracterizan por numerosas mitocondrias
esféricas grandes.
Fat Treg origen y factores de acumulación
La plétora de adipocinas y las conversaciones cruzadas con el sistema nervioso y el sistema inmune han
subrayado la importancia de la AT como un órgano endocrino con profundos efectos sobre la homeostasis
metabólica del cuerpo. Sin embargo, a medida que los adipocitos aumentan de tamaño debido al exceso
de calorías, la hipoxia provoca la acumulación de macrófagos inflamatorios (Figura 1 ) en el tejido adiposo
obeso ( 71 ). La regulación posterior posterior de varias adipocinas inflamatorias ( 72 ) puede activar las
células T CD4 + independientemente de los macrófagos. Cualquier respuesta inmune debe ser regulada
para que no sobreviva a su utilidad; una tarea lograda en gran medida por varios tipos de células inmunes
antiinflamatorias que ya residen en el tejido adiposo ( 73 - 77 ).
Figura 1. Las células T reguladoras del tejido adiposo blanco (WAT) visceral (Treg) están implicadas en la
homeostasis metabólica. Los TAT de WAT se adaptan al ambiente adiposo mediante la expresión de PPARγ
que regula los genes involucrados en el metabolismo de los lípidos. Estas Treg también expresan el
receptor de alarma IL33 ST2 y el receptor de quimiocina adiposa CCR2. Las tregs son abundantes en el
tejido adiposo magro del ratón adulto; Sin embargo, si hay un balance energético positivo sostenido como
en el modelo animal con obesidad inducida por la dieta y alto en grasas, los números de Treg disminuyen
drásticamente. Esto es concomitante a un cambio en el fenotipo de macrófagos de antiinflamatorios M2 a
macrófagos M1 inflamatorios e hipertrofia malsana de adipocitos. La hipertrofia sostenida conduce a la
apoptosis de los adipocitos y la inflamación exacerbada. En general, la disminución de las Treg adiposas se
acompaña de obesidad, resistencia a la insulina, dislipidemia,

En un estudio seminal, Feuerer et al. ( 76 ) identificaron Treg únicos que residen en la grasa en ratones y
humanos AT. Sorprendentemente, a diferencia del compartimento linfoide periférico donde normalmente
el 10-15% de las células T CD4 + son Treg Foxp3 + , casi la mitad de las células T CD4 + gordas son Treg
Foxp3 + , que se acumularon principalmente en la grasa visceral durante un período de tiempo desde su
nacimiento, alcanzando un máximo alrededor de las 25 semanas de edad. En un estudio, se encontró que
esta acumulación característica de Tregs estaba acompañada por una caída repentina a los niveles de la
quinta semana ( 78 ) en ratones de mayor edad, lo que sugiere una correlación negativa entre la frecuencia
de Treg residentes WAT viscerales y la inflamación metabólica relacionada con la edad (Figura 2). En
contraste con este hallazgo, un estudio reciente, informó una acumulación aún mayor de Treg en ratones
más viejos, lo que implica un punto de vista alternativo ( 79 ) (Figura 2 ). La causa de esta discrepancia
puede ser diferentes colonias, prácticas de cría, así como la composición microbiana y dietética. No
obstante, se encontró que los WAT Treg viscerales envejecidos eran funcionales ( 79 ).
Figura 2. Dos escenarios contrastantes de números reguladores de células T (Treg) y su resultado en tejido
adiposo blanco envejecido (WAT). Los WAT Tregs aumentan con la edad hasta alcanzar una meseta y luego
disminuyen abruptamente en ratones de edad avanzada (~ 45 semanas) (parte superior). Si esto se traduce
en una inflamación que conduce a la resistencia a la insulina asociada a la edad no se explora; sin embargo,
(la parte inferior) la evidencia contrastada sugiere que los Treg adiposos blancos continúan aumentando
incluso en el tejido adiposo envejecido, que en concordancia con la "hipótesis de la capacidad de
expansión del tejido adiposo" (ver texto) da como resultado la supresión de la inflamación saludable
necesaria para la remodelación del adiposo. Esto da como resultado un problema de espacio de
almacenamiento que conduce a la deposición ectópica de grasa en órganos viscerales, como el hígado y el
pericardio. Esto se acompaña de lipotoxicidad inducida por ácidos grasos libres y resistencia a la insulina
asociada a la edad.}
En lo que respecta al origen de los ATTreg, los WAT Treg viscerales parecen ser en gran parte de origen
tímico. Una timectomía más allá de las 3 semanas de vida no afecta la población de WAT Tregs visceral en
ratones ( 80 ). Los experimentos de secuenciación de TCRα de ratones "Limitados" [ratones con una
limitada diversidad focalizada restringida a CDR3α ( 81 )] mostraron que el repertorio de TCR de Tregs
grasos son diferentes de las células T grasas convencionales. Además, el repertorio de Treg de grasa
visceral era solo un subconjunto restringido del repertorio de TCR de los ganglios linfáticos (LN) ( 76),
sugestivo de un repertorio TCR abdominal específico distinto de Tregs. Esto indica un suministro continuo
de Tregs desde LN periféricos o una siembra inicial de tTregs seguido de una expansión clonal seleccionada
en AT. La transferencia adoptiva de las Treg marcadas de forma congénica confirmó que las TEG de WAT
viscerales no se derivan significativamente de las Treg circulantes ( 80 ). Además, la expresión muy alta
tanto de Helios como de Neuropilina1 (Nrp1), así como el análisis transcriptómico de los TAT de WAT
viscerales, sugieren su origen tímico y poca o ninguna conversión de células T vírgenes en TAT de WAT
viscerales ( 80 ).
Origen de WAT Tregs subcutáneos y BAT Tregs no se han estudiado con mucho detalle. Sin embargo, las
células T vírgenes aisladas de estos tejidos producen un número significativamente alto de Treg inducidas
que el WAT visceral en los ensayos de conversión in vitro ( 82 ).
Adaptación del tejido y fenotipo
El hecho de que las Treg extralinfeas se adapten al contexto y al microambiente se explica mejor por la
mayor expresión del factor de transcripción PPARγ en las Treg grasas ( 83 , 84 ). Los estudios de co-
inmunoprecipitación confirmaron la interacción PPARγ con Foxp3, lo que sugiere un eje visceral de
expresión génica mediada por Foxp3-PPARγ específico para WAT ( 83 ). Usando un ratón informador
Blimp1-GFP, Vasanthkumar et al. ( 84 ) demostraron que la mayoría de los WAT Treg viscerales se
encuentran en la categoría de eTregs. Para identificar los factores de supervivencia para eTregs,
informaron que las WAT Treg viscerales expresan específicamente Il1rl1, que codifica el receptor de alarma
IL33 ST2. Tanto la deficiencia de IL33 en general como la deficiencia de ST2 intrínseca de células T dieron
como resultado una reducción específica en el número y el porcentaje del compartimento de Wreg Treg
visceral ( 84 ). En entornos in vitro , tanto IL2 como IL33 fueron capaces de inducir la proliferación y la
regulación positiva de ST2 en una fracción de células T tras la estimulación con TCR que dependía de
MyD88 ( 84 ). El desarrollo y la proliferación de WAT Treg viscerales parece depender de dos señales: (1)
TCR reticulación que induce la expresión de PPARγ y ST2 a través de BATF e IRF4, ambas se unen a las
regiones intrónicas de los genes Pparg e Il1rl1 ( 84 ) y ) IL33 quea través de MyD88 alimenta la expresión de
ST2 ( 84 ). De acuerdo con el concepto de adaptación local, PPARγ en WAT Tregs visceral regula al alza la
expresión de genes del metabolismo de los lípidos como Dgat1 (diacilglicerol O -aciltransferasa 1), que
codifica una enzima que cataliza el paso terminal en la síntesis de triacilglicerol utilizando diacilglicerol y
acilo graso. como sustratos; y Pcyt1a (colina-fosfato citidilil transferasa A), una enzima involucrada en la
regulación de la biosíntesis de fosfatidilcolina ( 83). Es posible que estos productos genéticos permitan a las
TEG viscerales sobrevivir en un ambiente lipotóxico y / o permitir la utilización de ácidos grasos como
combustible metabólico. Aparte de estos factores esenciales, los WAT Treg viscerales también expresan
altos niveles de GATA3, Klrg1, el marcador de activación temprana CD69 y el receptor de quimiocinas de
firma adiposa CCR2. BAT Tregs son muy similares a WAT Tregs en el nivel transcripcional con expresiones
más altas de PPARγ, IL10 y quimioquinas X ligandos 1 y 2 ( 85 ). Las transcripciones poco expresadas fueron
aquellas que codificaban el factor 7 de células T específicas de señalización de TCR y la citoquina IFNγ ( 85 ).
Los regímenes de WAT son jugadores importantes en el síndrome metabólico
Citoquinas proinflamatorias de origen adiposo, como TNFα, IL6 y IFN tipo 1, se han sugerido como
causantes de la resistencia a la insulina y el síndrome metabólico ( 86 - 88 ). Además, se encontró que los
sujetos obesos humanos eran deficientes en las Treg circulantes, cuyos niveles se correlacionaban
inversamente con el peso corporal y el IMC ( 89 ). Teniendo en cuenta el fenotipo principalmente
inmunosupresor de las Treg, se espera que las Treg grasas desempeñen un papel importante en el control
de la inflamación del tejido adiposo y, a su vez, afecten la homeostasis metabólica general del cuerpo. De
hecho, en ratones Foxp3 DTR , en el que el gen que codifica el receptor de toxina diftérica (DTR) se
introduce en el locus Foxp3 ( 90), El agotamiento del Treg tras la administración de toxina diftérica (DT),
conduce a una inflamación del tejido WAT visceral ( 76 ). Sin embargo, la eliminación total de Treg también
inicia una fuerte respuesta inflamatoria sistémica ( 90 ). Por lo tanto, se requería un modelo visceral WAT
específico para la eliminación de Treg. Esto se logró mediante la eliminación específica de Treg de PPARγ,
lo que resultó en una reducción de más del 80% en los TAT de WAT viscerales, sin ningún efecto en la
población de Treg esplénica ( 83 ). Esta disminución en la población de Treg se acompañó con una marcada
infiltración de células inflamatorias en WAT visceral ( 83 ). En un modelo de obesidad inducida por la dieta
alta en grasas, los números de WAT Treg se reducen drásticamente (Figura 1), que puede rescatarse
mediante el tratamiento con un ligando de PPAR sintético pioglitazona, que mejora la sensibilidad a la
insulina al trabajar con PPARγ1 y 2 y afecta el metabolismo de los lípidos ( 91 ). Su administración fue capaz
de mejorar los parámetros metabólicos en ratones de tipo salvaje pero no en ratones que albergan Treg
deficientes en PPARγ, lo que sugiere un papel directo de la expresión de PPARγ en las TEG de WAT
viscerales.
Curiosamente, se ha informado que el papel de los WAT Treg viscerales en los animales que envejecen es
opuesto a lo que se observó en animales comparativamente jóvenes. Contrariamente a los animales
obesos, el agotamiento de WAT Treg visceral en animales de edad mejoró los parámetros metabólicos y
rescató la resistencia a la insulina inducida por envejecimiento ( 79 ) (Figura 2 ). La eliminación específica
de Treg de PPARγ condujo a un menor aumento de grasa y más peso magro con la edad (más de 45
semanas). El tamaño de los adipocitos fue menor y la trigliceridosis hepática disminuyó. Un aumento en las
Treg totales por el complejo inmune del anticuerpo IL2-IL2 resultó en una reducción en la absorción de
glucosa por los adipocitos envejecidos, lo que sugiere una función de almacenamiento comprometida ( 79).
Se obtuvieron resultados similares con la administración externa de IL33. En general, este estudio revela
un papel cooperativo inesperado de las TEG viscerales en la resistencia a la insulina asociada a la edad y la
inflamación metabólica. Una explicación de este hallazgo aparentemente contraintuitivo podría extenderse
por la llamada hipótesis de la "capacidad de expansión del tejido adiposo". Esta hipótesis postula que en
un estado de "balance energético positivo" surgen complicaciones metabólicas porque WAT no es capaz de
expandirse aún más y acomodar el exceso de calorías, esencialmente alegando que el síndrome metabólico
que surge de la nutrición excesiva y la obesidad es en realidad un problema de espacio de almacenamiento
( 92 ) . De hecho, los modelos animales donde AT inflamación se controla resultado en una disminución de
AT hiperplasia en un modelo de ratón alta en grasas inducida por la dieta de la obesidad ( 93), que causa
depósitos de lípidos ectópicos (esteatosis hepática, dislipidemia, etc.) y empeoramiento de los parámetros
metabólicos ( 93 ). Además, los ratones ob / ob obesos que se hicieron transgénicos para la adiponectina
de longitud completa y por lo tanto tenían niveles de adiponectina equivalentes al tratamiento con un
agonista de PPARγ, mostraron una expansión de WAT desinhibida que conduce a obesidad mórbida pero
mejoró la sensibilidad a la insulina y otros parámetros metabólicos ( 94 ) debido a reducción de la
deposición de lípidos ectópicos en el hígado y los músculos ( 94 ). Dadas estas observaciones, aún está por
verse si la acumulación de WAT Treg visceral relacionada con la edad y la forma en que la produce.
BAT Tregs ayuda en la termogénesis
Una ablación Treg generalizada también altera el perfil metabólico de los ratones con respecto a las BAT.
La eliminación mediada por DT de Tregs en ratones Foxp3 DTR dio como resultado un consumo reducido
de oxígeno en todo el cuerpo en un modelo de exposición a baja temperatura a corto plazo ( 85 ). El hecho
de que un estudio reciente analice en detalle los TAT de BAT es un tema que está a la vanguardia de la
homeostasis metabólica y que sus intervenciones son altamente dependientes del contexto. Mientras que
una dieta a corto plazo (2 semanas) con alto contenido de grasa y alto contenido de azúcar (HFHS),
promoviendo la termogénesis ( 95 ), el aumento de las BAT Tregs, en realidad disminuyó las WAT Treg
viscerales en ratones adultos jóvenes ( 82). Por el contrario, una dieta HFHS a largo plazo (16 semanas)
redujo significativamente los TAT de WAT viscerales, pero no tuvo impacto en el porcentaje de Treg de
BAT. Esto sugiere que el tenor de la ingesta calórica puede tener un efecto específico en los tejidos Treg.
De acuerdo con el papel de las BAT Treg en la termogénesis sin temblor, el tratamiento con ADRB3
(receptor adrenérgico β-3) incrementó las Treg en BAT. Sin embargo, los ratones "sin betal" que son
deficientes en los tres (receptores β-1, 2 y 3 adrenérgicos) no tenían un porcentaje reducido de BAT Tregs,
lo que sugiere un papel redundante de la señalización adrenérgica en la acumulación de BAT Treg per se .
El agotamiento de Treg, seguido de la estimulación β-3, por otro lado, dio como resultado niveles
reducidos de genes termogénicos y lipolíticos BAT ( Ucp1, Ppargc1a, Pparg, Prdm16, Lpl)., etc.)
confirmando la funcionalidad de Treg en la termogénesis BAT ( 82 ). Será interesante saber si esto resulta
en una adaptación metabólica reducida en la exposición al frío. Además, si estos efectos son intrínsecos a
los Tregs solo se puede determinar con la eliminación de Adrb3 específica de Treg . Por lo tanto, estos
estudios confirman el papel de las Treg en las BAT que van más allá de la inmunosupresión y asocian
activamente las Treg con las adaptaciones frías del cuerpo mediante la regulación de la lipólisis y la
termogénesis.
Regulaciones Intestinales: Preservando El Holobionte
El sistema digestivo de los mamíferos realiza dos funciones muy importantes: la digestión y la absorción de
alimentos y la conformación de un ecosistema microbiano intestinal. Según estimaciones recientes, el
colon humano alberga aproximadamente 4 × 10 13 bacterias ( 96 , 97 ), una densidad (10 11 / mL) más alta
entre cualquier hábitat microbiano ( 98 ). Tiene una tarea desconcertante para implementar de manera
eficiente un balance de "cerdos de oro" entre dos eventos aparentemente opuestos; permite la absorción
de nutrientes pero controla la exposición a sustancias nocivas, protege contra patógenos invasivos pero
facilita la colonización de comensales y los ayuda a prosperar.
Arquitectura
La provisión excesiva de antígenos microbianos y de alimentos ha resultado en adaptaciones estructurales
típicas en el intestino ( 99 , 100 ) y en la evolución de células inmunes intestinales especializadas para la
vigilancia inmunológica y el mantenimiento de la tolerancia ( 101). El intestino delgado (duodeno, yeyuno e
íleon) con una superficie de absorción máxima creada por grandes pliegues circulares (plicas) y
proyecciones similares a los dedos (vellosidades y microvilios), ha evolucionado como el órgano primario
para la absorción de alimentos. El plegamiento da como resultado la formación de invaginaciones
profundas, criptas de Lieberkühn, que albergan células de Paneth que secretan moléculas antimicrobianas
tras la exposición a antígenos bacterianos. Varias células enteroendocrinas y células mucosas productoras
de moco también se intercalan entre las células epiteliales del intestino delgado. El intestino grueso (ciego,
colon y recto) alberga la mayoría de los comensales y realiza las funciones vitales de absorber el agua y las
vitaminas al mismo tiempo que convierte los alimentos no digeridos en heces. Las grandes paredes
intestinales están protegidas del contenido luminal por dos capas de moco,102 , 103 ).
Histológicamente, el tracto intestinal contiene cuatro capas: mucosa, submucosa, musculatura propia y
adventicia o serosa. La mucosa es la capa donde se producen la mayoría de los procesos inmunitarios.
Consiste en una capa epitelial, que tiene linfocitos intraepiteliales dispersos (IEL), lámina propia
subyacente (LP) y una mucosa muscular muscular de capa delgada. El LP consiste en tejido conectivo no
celular, como colágeno y elastina, sangre y linfáticos, miofibroblastos y terminaciones nerviosas, y está
densamente lleno de células inmunes que incluyen células mononucleares, células plasmáticas, linfocitos B
y T, incluyendo Treg, eosinófilos, macrófagos, y mastocitos ( 104 ).
Diferentes partes del intestino se drenan en LN separados, como drenajes de duodeno en un LN incrustado
en tejido pancreático; Los LN mesentéricos drenan yeyuno, íleon, ciego y colon ascendente; dos LN
pequeños en el tejido pancreático drenan el colon transverso y el colon descendente y el recto drena
principalmente a los LN caudales ( 101). Las variaciones anatómicas también definen en gran medida las
variaciones antigénicas del intestino. Mientras que el intestino delgado lucha por el equilibrio contra los
antígenos alimentarios, los intestinos grandes tienen una carga abrumadora de antígenos microbianos. Por
mucho que sean extraños al cuerpo, son igualmente esenciales. Por lo tanto, para la economía de la
respuesta inmune es altamente deseable asimilar a aquellos en el yo inmunológico. La población intestinal
de Tregs es posiblemente el tipo de célula más importante para contener la respuesta inmune contra los
antígenos microbianos de alimentos y inocuos y el mantenimiento de la homeostasis intestinal ( 105 , 106
).
Origen de las Tregs Intestinales
Al igual que otros tejidos no linfoides, las Treg también están enriquecidas en LP intestinal con colon que
alberga el 25–35% ( 107 - 109 ) y el intestino delgado con 10–15% ( 109 , 110 ) Treg entre el total de células
T CD4 + . A propósito del medio inflamatorio prevaleciente y del ambiente antigénico, los Treg colónicos se
desarrollan en gran medida contra los antígenos microbianos. Los ratones GF, desprovistos de cualquier
microbiota, tienen varias veces menos cantidad de Treg colónicos en comparación con los ratones libres de
patógenos específicos (SPF) ( 111 , 112 ). Un tratamiento antibiótico de amplio espectro a largo plazo
también reduce las Treg colónicas en ratones SPF ( 111). Como el intestino delgado es el asiento para la
absorción de nutrientes, la mayoría de los Treg LP del intestino delgado (siLP) no se desarrollan contra
antígenos bacterianos, como lo demuestra un número comparable de Tregs en ratones SPF y GF ( 109 ). Sin
embargo, una vez que los ratones GF se crían como ratones libres de antígeno (AF) mediante la provisión
de una dieta elemental solo después del destete, hay una marcada disminución en las Tregs de siLP ( 109 ).
Sin embargo, un subconjunto de Tregs permanece en el colon y en el intestino delgado de los ratones GF y
AF, presumiblemente específicos de los autoantígenos gastrointestinales.
Secuenciación de Treg TCR de colon de ratones modificados genéticamente con repertorios policlonales
limitados encontró que el uso de TCR de Treg de colon era diferente de la de otros tejidos ( 113 ). Además,
hubo muy poca similitud en el uso de TCR entre Tregs y células Foxp3 - T efectoras o efectoras ( 113 ).
Quimeras estables hechas de transducción retroviral de Treg TCR colónica a progenitores de médula ósea
dieron como resultado la inducción de TCR respectivos que expresan Tregs preferentemente en colon
mientras que no se encontraron células con TCR específicas en el timo ( 113 ). La transferencia adoptiva de
células T vírgenes de las líneas transgénicas hechas de TCR colónicos resultó en una conversión muy
eficiente a Treg inducidas periféricamente (pTregs) en LNs mesentéricos y colon (114 ). Además del
repertorio de TCR específico, se ha encontrado que la expresión en superficie alta de Helios, un factor de
transcripción de la familia Ikaros ( 115 ) y Nrp1, un co-receptor unido a la membrana para el factor de
crecimiento endotelial vascular y la semafina ( 116 , 117 ), es asociado con tTregs. Aunque el origen exacto
de células T reguladoras en base a estos marcadores es discutible ya que su expresión puede ser regulada
en los entornos inflamatorios ( 118 , 119 ), sin embargo, la mayoría de los estudios han informado de
enriquecimiento de Helios - y / o NRP1 - pTregs en el compartimiento de Treg colon ( 107 , 114 ). Además,
la frecuencia del Foxp3 colónico.+ Helios - Nrp1 - Tregs se reduce significativamente en ratones GF en
comparación con ratones SPF ( 116 ). Además, el tratamiento de ratones SPF con antibióticos de amplio
espectro disminuyó el Helios - Tregs colónico ( 111 ). Los estudios moleculares en el locus del gen Foxp3
han identificado un potenciador, CNS1, que tiene un papel prominente en la generación de pTreg en
tejidos linfoides asociados al intestino ( 46 ). CNS1 contiene un elemento de respuesta TGFβ-NFAT ( 46 ) y
sitios de unión para el receptor del ácido retinoico (RAR) y el heterodímero del receptor X del retinoide,
receptor del ácido retinoico (RA) ( 120 ). Se ha demostrado que TGFβ y RA pueden inducir de
novogeneración de pTregs tras la activación del antígeno a través de CD103 + DC ( 121 , 122 ) (Figura 3 ).
De hecho, los ratones con deficiencia de CNS1 tienen menos Treg LP al destete ( 46 ). Sin embargo,
recientemente se informó que la deficiencia de CNS1 en las células T transgénicas TCR colónicas solo
retrasa la generación de pTreg y, en última instancia, las células T se convierten en Foxp3 + Tregs ( 114 ).
Figura 3 . Diferenciación de subtipos de células T reguladoras (Tregs) en el intestino grueso. Las Treg
colónicas se diferencian en tres subtipos diferentes en función de RORγt (Rorc) y la expresión de GATA3
junto con Foxp3. Foxp3 + RORγt - células comprenden ~ 15% de colon Tregs, su función en el colon no es
mucho dilucidado pero se supone que estos son responsables de establecer la tolerancia a antígenos de la
dieta. El segundo y mayor subconjunto de Tregs colónicos es Foxp3 + RORγt +Tregs, que constituyen
aproximadamente el 50% del total de Tregs colónicos. Estas células están involucradas principalmente en
la tolerancia microbiana y se han descrito varios mecanismos que contribuyen a su generación. Desde la
izquierda, los ácidos grasos de cadena corta generados por la fermentación microbiana pueden diferenciar
las células T ingenuas en Foxp3 + RORγt +Tregs en lámina propia (LP). El butirato, específicamente, puede
contribuir a la expresión y función de Foxp3 en virtud de su función inhibidora de histona desacetilasa
(HDAC), así como puede convertir las células dendríticas (CD) en células tolerógenas generadoras de Treg
al suprimir sus niveles de IL12 e IL6 y la expresión de la subunidad NFκB Relb. El metabolito de la vitamina
D 1,25-dihidroxi vitamina D3 diferencia las células T vírgenes en Tregs activando su receptor nuclear. TGFβ
junto con el metabolito de vitamina A generado en DC, el ácido retinoico todo trans diferencia las células T
vírgenes en Treg en presencia de antígenos microbianos. Foxp3 + RORγt + Tregs despliega diversos
mecanismos para establecer la tolerancia dominante con la producción de IL10 y la supresión directa de las
células Th17 como prominentes. Un subconjunto especial de Foxp3+ RORγt + Tregs expresan cMAF y es
fundamental para establecer la tolerancia a los patobiontes en la homeostasis. Foxp3 + RORγt + cMaf +
Tregs se identifican contra epítopos específicos de Helicobacter hepaticus y suprimen las células Th17
específicas del epítopo. Se ha demostrado que en ausencia de pTregs, la siembra temprana de Treg tímicos
(tTregs) ocurre en el LP colónico. Estos tTregs se expanden en un nicho que es independiente de la
señalización de MHCII e IL2 pero depende de los antígenos microbianos. Estos Tregs llenan posteriormente
el compartimiento Treg LP. Sin embargo, no se sabe si estos pueden diferenciarse en todos los subtipos
Treg. Un tercer subtipo de Tregs expresa GATA3 (no RORγt) y constituye aproximadamente un tercio del
total de Tregs. Estos Foxp3+ GATA3 + Tregs expresan el receptor ST2 que se une a la alarma IL33 inducida
por daño tisular. Foxp3 + GATA3 + Treg son instrumentales para suprimir la inflamación y facilitar la
reparación de tejidos por la secreción de anfiregulina sobre el daño tisular
Si bien los pTregs son ampliamente aceptados como la fuente principal de la población intestinal de Treg,
al menos en un entorno experimental donde la generación de Treg extratímicos se ven comprometidos, los
Treg generados tímicamente pueden migrar a LP intestinal y proliferar para llenar el nicho (Figura 3 ) . Se
ha informado que en un modelo de TCR limitado, el repertorio de TCR de tTregs y Tonic de colon se
superponen considerablemente ( 123 ). Otro estudio que utiliza ratones K14-Aβb (Keratin 14 transgénicos,
K14), que tienen una expresión restringida de MHCII en el epitelio cortical tímico y, por lo tanto, no puede
proporcionar señales MHCII periféricas para la generación de Treg extraatímico, mostró que mientras la
población de Treg disminuyó significativamente en mLN y bazo, el compartimento intestinal Treg estaba
bastante intacto ( 124). Se encontró que el nicho LP Treg de estos ratones estaba habitado por Tregs de
origen tímico a temprana edad. Este fenómeno de llenado de nicho no fue dependiente de IL2 sino que fue
inducido por la presencia microbiana, ya que el tratamiento con antibióticos de amplio espectro disminuyó
tanto el Treg grande como el de siLP (siTreg) (Figura 3 ). Sin embargo, a una edad más avanzada; los tTregs
generados recientemente se excluyeron del LP, probablemente debido al nicho Treg ya ocupado ( 124 ). En
conjunto, por lo tanto, los datos disponibles sugieren un origen periférico de la mayoría de las Treg
intestinales y el origen tímico de un pequeño subconjunto. Sin embargo, estos mecanismos de origen y
desarrollo no pueden ser mutuamente excluyentes y es probable que las contribuciones de diferentes vías
afinen la composición final del compartimiento de Treg intestinal.
Tregs se especializan en múltiples subconjuntos en los intestinos
Los análisis transcriptómicos y funcionales de las Treg intestinales han identificado en gran parte tres
subconjuntos especializados. Sobre la base del factor de transcripción y la expresión molecular de
superficie, estos subconjuntos son GATA3 + Helios + (Nrp1 + ), receptor huérfano relacionado con el
receptor retinoico γt (RORγt) que expresa RORγt + Helios - y RORγt - Nrp1 - (Helios - ) subconjuntos
(Figuras 3 y 4 UNA).
Figura 4 . Diferenciación de subtipos de células T reguladoras (Tregs) en el intestino delgado. (A) Lámina
propia del intestino delgado (LP) Las Treg se diferencian en los tres subtipos mencionados en la Figura 3 ;
sin embargo, Foxp3 + RORγt - Tregs son la población primaria que forma aproximadamente el 50% del
compartimiento siTreg. Se generan principalmente en respuesta a macromoléculas dietéticas y se propone
que sean útiles para contener las alergias infantiles. Foxp3 + RORγt + y Foxp3 + GATA3 + Treg son
aproximadamente el 15% y el 35% del total de siTregs, respectivamente. (SEGUNDO)Algunos siTregs se
desplazan continuamente dentro y fuera del compartimento epitelial del intestino delgado. Mientras que
la mayoría de estos Tregs regresan al LP, una fracción de ellos pierde su expresión Foxp3 y reprime la
expresión ThPOK dentro de la capa epitelial. Posteriormente, desrepresan el locus CD8a para convertirlo
en linfocitos intraepiteliales intra positivos epiteliales CD4 + CD8αα +
GATA3 se expresa en aproximadamente un tercio de las Treg intestinales y se puede inducir en CD4 +
Foxp3 + Treg con el compromiso TCR ( 110 ). Que la mayoría de estos Tregs sean Helios + y no se vean
afectados por la presencia microbiana, sugiere su origen tímico ( 107 ). Sin embargo, tras la participación
de TCR, GATA3 puede inducirse también en CD4 + Foxp3 - células T vírgenes , tanto en in vivo como en
Treg polarizando in vitro ( 110 ). Si bien la expresión de GATA3 no es necesaria en condiciones
homeostáticas, en condiciones inflamatorias, la falta de GATA3 en Treg dificulta su acumulación en los
sitios inflamatorios ( 110). GATA3 y Foxp3 interactúan tanto a nivel de proteínas como de genes en Tregs (
47 ). GATA3 se une al locus Foxp3 y su eliminación en Tregs reduce la expresión de Foxp3 ( 47 , 125 ).
Ocupa un número significativo de genes, que son objetivos directos de Foxp3 y, por lo tanto, colabora con
Foxp3 para establecer el programa de expresión del gen Treg. De hecho, la eliminación de GATA3
específica de Treg da como resultado una patología intestinal con un aumento de la producción de
citoquinas Th2 a partir de células T efectoras intestinales grandes ( 47 ). La mayoría de las Treg de GATA3 +
en el colon expresan ST2, que está regulada por la expresión de GATA3 de forma directa ( 108 ). Las
alarmas como la IL33 se producen en el daño tisular local ( 126, 127 ) y, por tanto, limitan la autolesión en
parte activando GATA3 + ST2 + Tregs ( 108 ). ST2 + Tregs muestran una producción y activación mejoradas
de IL10 y TGFβ ( 128 ). IL23, por otra parte, parece regular el efecto de IL33 en Tregs derivadas de timo a
través de la señalización STAT3 ( 108 ).

CD4 + Foxp3 + RORγt + Tregs en el intestino es otro subconjunto de Tregs especializado en inmunidad
microbiana. Estos comprenden aproximadamente el 50% del total de Tregs en el colon, que se pierden
fácilmente en ratones con GF o durante el tratamiento con antibióticos ( 107 , 129 ) (Figura 3 ). También se
encuentra una pequeña población que consta de aproximadamente 10 a 15% de Tregs en el intestino
delgado ( 107 ) (Figura 4 ). La mayoría de los RORγt + Tregs no expresan Helios ( 107 , 129 ) o Nrp1 ( 130), lo
que sugiere su origen extra-tímico. Sin embargo, estas células han reducido sustancialmente la metilación
de CpG dentro de la región potenciadora de CNS2 del locus Foxp3 , que se sabe que está bien
correlacionada con la expresión estable de Foxp3 ( 130 , 131 ). No todas las bacterias pueden provocar una
población similar de RORγt + Tregs, ya que se encontró que existe una gradación de la capacidad de
inducción de Treg ( 107). La información mecanicista sobre por qué ciertas bacterias tienen una capacidad
superior para inducir Tregs intestinales que otras han comenzado a emerger solo recientemente. Se ha
informado que los ácidos grasos de cadena corta producidos durante la fermentación del almidón y otras
fibras dietéticas por cepas de clostridia, principalmente butirato y propionato pero no acetato, pueden
contribuir a la generación de Treg en el colon. Mecánicamente, esto se atribuye a sus propiedades
inhibitorias de la histona desacetilasa ( 132 ) que resultan en un aumento de la acetilación del locus de
Foxp3 ( 133 , 134 ) (Figura 3 ). Además de actuar directamente sobre las células T, el butirato también
afecta la capacidad de DC para inducir la diferenciación de Treg. Derribo de relb, que codifica la subunidad
NFκB, se ha demostrado que genera CD tolerogénicas al inhibir su maduración ( 135 , 136 ). De hecho, el
tratamiento in vitro con butirato reprime los genes de respuesta de lipopolisacáridos, incluidos Il12, Il6 y
Relb en DC ( 133 ) (Figura 3 ). En una nota de traducción, en pacientes con EII humanos, las bacterias
productoras de butirato de colon disminuyen ( 137 ) y el transportador de butirato de la mucosa, el
transportador de monocarboxilato 1, está regulado a la baja ( 138 ). También es posible que las Treg
colónicas se generen de una manera específica para el antígeno. De hecho, se ha informado que los TCR de
Treg colónicos interactúan con bacterias colónicasin vitro ( 113 ). Muy recientemente, se ha demostrado
que las células T colónicas con TCR relacionadas con los epítopos de un Helicobacter hepaticus patobionte
inducen pTregs en condiciones homeostáticas ( 139 ). Este estudio establece el papel de los pTregs
colónicos en la inducción y el mantenimiento de la tolerancia a los patobiontes también.
Sorprendentemente, se encontró que aunque tales Treg son RORγt + , sus capacidades supresoras
funcionales principales se implementan mediante la expresión del factor de transcripción cMAF ( 139 )
(Figura 3 ). cMAF compensa la polarización Th17 produciendo IL10 corriente abajo a la señalización TGFβ1-
STAT3 ( 140 ). H. hepaticuslos ratones colonizados con deleción de Rorc específica de Treg no tuvieron un
aumento significativo en las células Th17 colónicas mientras que los ratones con deleción de Maf específica
de Treg tuvieron células Th17 significativamente altas ( 139 ). Por lo tanto, RORγt + pTregs en el colon
establecen la tolerancia a los comensales así como a los patobiontes y suprimen la inflamación de una
manera dependiente de cMAF.
El tercer subtipo Treg (CD4 + Foxp3 + RORγt - ) fue identificado muy recientemente. La mayoría de estas
células expresan niveles bajos de Nrp1 y, por lo tanto, son pTregs. Estas células constituyen
aproximadamente el 50% de Silp Tregs y 15% de Tregs colónica ( 109 ) (figuras 3 y 4 A). Su localización
sugiere que estos se generan principalmente contra antígenos dietéticos. De hecho, el tratamiento
antibiótico a largo plazo de los ratones SPF no pudo reducir su número en el intestino, mientras que RORγt
+ Nrp1 lo pTregs se redujeron varias veces. Por otro lado, el destete de los ratones SPF a la dieta AF redujo
drásticamente el RORγt - Nrp1 - pTregs (109 ). La transferencia adoptiva de células T CD4 + OTII vírgenes en
ratones con dieta de AF provoca principalmente la respuesta inmune de las células Th1, mientras que las
respuestas Th17 y Th2 fueron comparables a los animales con SPF. Sin embargo, los pTregs generados en
este modelo fueron principalmente RORγt + Nrp1 - pTregs, lo que sugiere que los antígenos de la dieta
también pueden generar RORγt + pTregs en ausencia de microbiota ( 109 ).
Si bien TGFβ es, con mucho, el factor más importante en lo que respecta a la generación y acumulación
intestinal de pTregs ( 141 - 143 ), una modulación generalizada de pTregs intestinales puede lograrse por
varios otros factores como la vitamina A dietética, la vitamina D, la niacina (Vitamina B3), ácido fólico
(vitamina B9) y triptófano [revisado en la ref. ( 144 )]. El ácido retinoico todo trans, un metabolito de la
vitamina A, producido por las CD facilita la generación de novo de Foxp3 + Tregs de poblaciones de células
T CD4 + CD25 - vírgenes en ratones ( 121 , 145 ) (Figura 3). También juega un papel importante en la
regulación al alza de los marcadores CCR9 y CD103 (integrina αE) de tripa en pTregs ( 146 ). Alimentar a los
ratones con una dieta deficiente en vitamina A o un tratamiento con inhibidores de RAR reduce el RORγt +
pTregs en el colon, mientras que GATA3 + Tregs no se ven afectados ( 129 ). Del mismo modo, RORγt -
pTregs en el intestino delgado tampoco se ven afectados por la vitamina A o la AR ( 109 ). El metabolito 1
de la vitamina D, 25-dihidroxivitamina D3 se une al receptor nuclear de la vitamina D3 en las células T CD4
+ y promueve la expresión de Foxp3 ( 147 ) (Figura 3). Recientemente, se demostró que en pacientes
humanos con colitis ulcerosa, un agonista de la vitamina D3 puede convertir las células T CD4 + en pTregs (
148 ).
Funciones de las Tregs Intestinales
Foxp3 + GATA3 + Treg intestinales expresan alto nivel de ST2 ( 108 ). Estas células T reguladoras expresan
altos niveles de factor de reparación de tejidos, un factor de crecimiento similar a EGF Amphiregulin ( 108 ,
149 ) (Figuras 3 y 4 A). Parece que la reparación tisular mediada por la anfirregulina podría ser un
mecanismo generalizado empleado por los Treg residentes en el tejido, como lo demuestra su función
evolutiva en el residente del pulmón y los Treg intratumorales ( 150 , 151 ). Foxp3 + RORγt + Tregs
expresan niveles elevados de ICOS, CTLA4 y las nucleotidasas CD39 y CD73 en conjunto, lo que indica
funciones reguladoras sólidas (107 , 129 ). Curiosamente, Foxp3 + RORγt + Treg se ha implicado en la
regulación de la inmunidad mediada por Th2 y Th1 / Th17 en dos estudios independientes, lo que implica
que las condiciones de alojamiento de los animales son un factor determinante importante del tipo de
respuesta inmune ( 107 , 129 ). siLP Foxp3 + RORγt - Tregs trabaja principalmente para contener la
inmunidad Th1. Cuando las células T OTII se transfieren a ratones AF, las células T se convierten
principalmente en células IFNγ + OTII y las Treg inducidas son principalmente Tbet + , aunque la extensión
de dicho RORγt -La inducción de pTreg en condiciones de FA se vio gravemente comprometida en
comparación con las condiciones de SPF ( 109 ). Como consecuencia, en un modelo experimental de alergia
a los alimentos, donde los ratones SPF BALB / c fueron destetados en una dieta de aminoácidos, se
informaron casos de diarrea más altos que los ratones en comida normal ( 109 ). Si bien estos resultados
ponen de relieve una función importante de RORγt - pTregs para frenar la alergia a los alimentos, otros
análisis transcriptómicos y fenotípicos podrían proporcionar pistas adicionales sobre sus funciones.
Es de destacar que una función más de siTregs se identificó recientemente al observar la población de IEL.
Se observó que las Treg LP también migran al compartimiento epitelial, donde una fracción de ellas
pierden la expresión de Foxp3 ( 152 ). Además, estos Tregs luego renuncian a la expresión de ThPOK que
conduce a la represión del locus Cd8 y, por lo tanto, se convierten en un CD4 + CD8αα + IEL ( 152 ) (Figura 4
B). Los IEL tienen una maquinaria citotóxica e inmunorreguladora que sugiere un papel tanto en el
mantenimiento de la barrera mucosa como en la eliminación de células epiteliales intestinales estresadas (
153 ).
Piel Tregs: mantiene tu cabello en
La piel es el órgano más grande que representa casi el 15% del peso corporal humano adulto. Al ser
nuestro exterior, siempre está expuesto a agresiones ambientales, microbianas, físicas y químicas. La piel
también alberga más de 10 12 bacterias / m 2 ( 154 ) en la superficie de los espacios intercorneocíticos.
Arquitectura de la piel
Anatómicamente, la piel se compone de tres capas, la epidermis externa, la dermis media y la capa interna
de tejido subcutáneo ( 155 ). Los queratinocitos diferenciados terminalmente en la epidermis sintetizan la
proteína queratina protectora, parecida a una hebra larga, y forman una barrera física. Los productos de
diversas sudor y glándulas sebáceas intercalados en la unión epidérmica-dérmica junto con los péptidos
antimicrobianos desarrollan una piel hidrófila ácida que actúa como una barrera bioquímica ( 154). La
unión epidérmica-dérmica también alberga folículos pilosos. El componente celular de la epidermis se
compone de células de Langerhans (CD especializadas en la piel) y linfocitos T. La dermis está compuesta
por capas de fibras de colágeno gruesas y delgadas que proporcionan un marco mecánico para albergar los
vasos sanguíneos y varias células inmunitarias como las CD dérmicas, las células T αβ y γδ, las células NK,
las células B, los macrófagos y las células cebadas ( 154). Comprensiblemente, dada la naturaleza expuesta
de la piel, es altamente vulnerable a las respuestas inmunes excesivamente celosas contra los comensales
de la piel y los antígenos propios. Las Treg son un componente importante para establecer la tolerancia y la
homeostasis en la piel. De hecho, tanto los pacientes con IPEX de ratón de escurf como los humanos
presentan respuestas inmunes fulminantes en la piel. Un estudio que examinó a niños con síndrome de
IPEX informó que más del 70% de los niños presentaron dermatitis atópica y eccema con 1,5 meses como
edad promedio de aparición de los síntomas ( 156 ).
Origen y acumulación de piel Treg
Normalmente, 30–50% y 20–30% del total de células T CD4 + son Tregs en piel de ratón y humana,
respectivamente ( 157 , 158 ). Es difícil establecer el origen de las Treg cutáneas, dada la escasez de
información específica. Sin embargo, se ha demostrado que una onda de Tregs puebla la piel en el período
neonatal temprano en un modelo de colonización bacteriana de la piel en ratones ( 159 ). Además, la
restricción de la emigración linfoide de las células T mediante el tratamiento con el antagonista del
receptor de esfingosina-1-fosfato FTY720 dio lugar a una acumulación preferencial de Treg en el timo en
lugar de LN que drenan la piel, lo que sugiere su migración directamente desde el timo ( 159). En los seres
humanos, las células Treg y Tconv cutáneas comparten muy pocas secuencias TCRβ y estas Treg presentan
una región FOXP3 CNS2 completamente desmetilada , lo que sugiere su estabilidad y origen tímico ( 157 ,
160 , 161 ). Esto es poco sorprendente ya que los Tregs de la piel establecen tolerancia no solo a los
autoantígenos sino también a los comensales. ¿Cómo se generan las Treg comensales específicas de
antígeno en el timo? Una posibilidad parece ser las DC plasmocitoides (pDC) que se ha demostrado que
son capaces de absorber antígenos periféricos inocuos al timo ( 162 ) y los LN ( 163 ) para inducir
tolerancia. En general, los pDC no están presentes en la piel pero pueden acumularse en presencia de
afecciones inflamatorias ( 164, 165 ). Otra probabilidad es que algunos tTregs tengan TCR con suficiente
reactividad cruzada a los antígenos microbianos y, por lo tanto, pueden expandirse y acumularse
específicamente en los sitios donde el antígeno está presente. Sin embargo, si las Treg de piel son tímicas
por su origen, los mecanismos relativos quedan por aclarar.
El modelado de la expresión inducible de un autoantígeno, al fusionar el dominio transmembrana del
receptor de transferrina, la GFP y los aminoácidos 230-359 de la ovoalbúmina de pollo en la epidermis de
ratón, reveló que las Treg circulantes no son capaces de suprimir la respuesta inmune primaria contra OVA,
aunque inició la activación de Tregs ( 166 ). La inflamación se resolvió espontáneamente y cualquier
expresión posterior de antígeno condujo a una respuesta inmunitaria corta y atenuada. Un análisis
adicional reveló que una fracción de Treg persistía en la piel que expresaba un bajo nivel de CD25 pero un
mayor KLRG1, CTLA4 y CD127, similar a las células T de memoria ( 166 ). Cabe señalar aquí que un estudio
reciente que examina los cambios transcripcionales, epigenómicos y funcionales en la inflamación
experimentó Tregs que emplean el Foxp3El sistema DTR presentó que los Treg revierten la mayoría de los
cambios inducidos por la activación y pierden la capacidad de supresión acentuada con el tiempo ( 167 ).
Un informe anterior reveló que las Treg cutáneas expresan CCR4 y la molécula de adhesión Integrina αE,
CD103 ( 168 ). En un estudio mixto de quimera de médula ósea, las Treg deficientes en CCR4 no pudieron
reconstituir el compartimiento Treg de la piel ( 168 ). CCL17 y CCL22 son ligandos de quimiocinas conocidos
para CCR4 ( 169 , 170 ), que se expresan diferencialmente en la piel inflamada principalmente por células
endoteliales y CD dérmicas, respectivamente ( 171). Estas moléculas manejan secuencialmente la
localización de células T en la piel, donde CCL17 promueve el reconocimiento vascular y la extravasación y
CCL22 guía la migración posterior en la piel ( 172 ). Más del 70% de las Treg en la piel expresan GATA3,
aunque su eliminación en las Treg no altera el perfil de Treg ni causa un fenotipo manifiesto relacionado
con la piel en condiciones homeostáticas ( 110 ).
Debido a que la piel está muy expuesta a comensales y patógenos, es imperativo especular que un ajuste
fino de efector y respuestas inmunes supresoras ha evolucionado. La microbiota comensal que reside
dentro de la piel ha demostrado calibrar la inmunidad de barrera ( 173 , 174 ). Para identificar los
mecanismos detrás del desarrollo de la tolerancia a los comensales de la piel, Scharschmidt et al. realizó
algunos experimentos elegantes con antígeno peptídico modelo que expresa Staphylococcous epidermidis
, un comensal de piel humana que coloniza eficazmente la piel de ratón ( 159).). Sorprendentemente, la
colonización de la piel en ratones adultos no evocó ninguna tolerancia a las bacterias, como se ve por la
respuesta inflamatoria al volver a desafiar. Sin embargo, cuando los ratones neonatales se colonizaron
durante una semana durante la segunda semana postnatal, hubo una atenuación apreciable de la
respuesta inflamatoria al volver a la prueba después de 3 a 4 semanas. La respuesta moderada se asoció
con un marcado enriquecimiento de las Treg específicas de antígeno en la piel y el drenaje de LN y la
tolerancia podría revertirse con el tratamiento con FTY720 ( 159 ). Otro estudio también ha demostrado
que las Treg, generadas muy temprano en la vida en una ventana perinatal definida, desempeñan un papel
muy distinto en el mantenimiento de la tolerancia propia ( 175). Así, en ratones, se produce una ola
abrupta de infiltración de Treg en un período postnatal temprano definido para establecer la tolerancia
dominante hacia los comensales de la piel ( 159 ) (Figura 5 ).
Figura 5. Las células T reguladoras cutáneas (Tregs) facilitan la morfogénesis del cabello y establecen
tolerancia a los comensales de la piel. Las Treg de la piel colonizan la piel del ratón en el período postnatal
temprano, coincidiendo con la colonización microbiana inicial y el desarrollo del folículo piloso. Los
microbios de la piel entran en el folículo piloso que induce la producción de quimiocina CCL20 a partir de
células infundibulares que atraen a un gran número de Treg que expresan el receptor CCR6
correspondiente. Los Treg acumulados posteriormente establecen tolerancia a estos comensales. Además,
durante la fase de reposo del crecimiento del cabello (telógeno) que inicialmente coincide con la entrada
comensal en el folículo piloso, se observa un gran número de Treg en contacto con las células madre del
folículo piloso (HFSC) en el bulbo del folículo. Estos Tregs proporcionan un ligando de muesca Jagged1 a las
células madre. La señalización de Notch desencadena la fase activa del ciclo de crecimiento del cabello
(anágeno). Tregs se reducen en fase anágena alrededor de HFSCs
Tanto los Treg como los comensales de la piel están localizados en los folículos pilosos y en el ratón, el
momento de la infiltración de Treg (semana 2 postnatal) coincide con el desarrollo del folículo piloso ( 176 ,
177 ). Por lo tanto, se especuló que los folículos pilosos podrían tener un papel en el ingreso de Treg en la
piel. Se ha demostrado que las quimiocinas de diferentes partes de los folículos pilosos como CCL2 de
istmo, CCL20 de infundíbulo y CCL8 de queratinocitos de abultamiento generan un tipo específico de
células de Langerhans ( 178 ). De manera similar, en un modelo de ratón de arresto por morfogénesis del
folículo piloso específico de la piel, la población de Treg de piel se redujo sin afectar la población de Treg en
el intestino o el drenaje de LN en ratones neonatales ( 179). Investigaciones adicionales revelaron que la
piel de ratón SPF neonatal produce una alta cantidad de quimiocina CCL20 cuyo receptor CCR6 se encontró
enriquecido en Tregs cutáneos (Figura 5 ). Se confirmó mediante experimentos de transferencia adoptiva
que las Treg deficientes en CCR6 estaban en desventaja competitiva para reconstituir el compartimento de
células T de la piel ( 179 ). Las Tregs en neonatos también expresan CCR8 alto y su ligando CCL22 se
expresa, a su vez, en la piel. Sin embargo, su contribución en el establecimiento y / o mantenimiento de las
Tregs de la piel aún no se ha examinado. La expresión de ARNm de CCL20 también aumenta en explantes
de piel fetal humana tras la exposición a comensales cutáneos y componentes bacterianos ( 179). Por lo
tanto, se muestra que la morfogénesis del tejido (generación de folículos pilosos y la posterior producción
de quimioquinas por las células del folículo piloso) y los comensales cooperan en el desarrollo de una
tolerancia inmune específica del tejido. Sería interesante extrapolar este modelo a otros sistemas de
órganos habitados por microbios. Se desconoce si estos mecanismos sostienen a lo largo de la vida,
particularmente en la vida adulta. Anteriormente, se informó que los ratones GF de 8 a 12 semanas de
edad tenían aproximadamente dos veces más Treg cutáneos que los animales con SPF ( 180 ). Es posible
que otros factores desconocidos, además de los comensales, aumenten la población de Treg en la piel de la
GF adulta o la falta de respuesta inmune sintonizada contra los comensales desvíe los recursos
inmunitarios hacia antígenos propios y, a su vez, enriquezca los Treg específicos para el autoantígeno en la
piel.
La exposición a rayos ultravioleta (UVB) de longitud de onda corta también enriquece y acumula Treg en la
piel del ratón ( 181 ). La exposición a UVB daña el auto-ARN en los queratinocitos, que es detectado por
TLR3 para generar una respuesta inflamatoria ( 182 ). De hecho, los Treg que acumularon la exposición
post-UVB fueron Nrp1 + con Foxp3 CNS2 altamente desmetilado ( 181 ). Estas Tregs expresaron moléculas
homing como CD103, CCR4 y P-lig y, por lo tanto, también pudieron migrar a las partes de la piel no
expuestas a UVB ( 181 ) (Figura 6 ). Curiosamente, la fototerapia con UVB es un tratamiento eficaz en
afecciones cutáneas autoinmunes, como la psoriasis ( 183 ) y la dermatitis atópica (184 ).
Figura 6 . Las células T reguladoras cutáneas (Tregs) reparan activamente el daño del tejido de la piel. Las
Treg migran a la piel en virtud de las interacciones secuenciales de las quimiocinas CCL17 y CCL22 con su
receptor CCR4. CCL17 es secretada por células endoteliales en la piel inflamada y ayuda en la extravasación
de Tregs, CCL22 gestiona la migración posterior de Tregs. En caso de inflamación inducida por una herida
en la piel, las Treg adquieren un fenotipo altamente activado con una mayor expresión en la superficie de
CTLA4 e ICOS. Estos Tregs suprimen activamente la producción de IFNγ de los macrófagos inflamatorios
Ly6C + . Además, los Tregs expresan una gran cantidad de EGFR, lo que ayuda en su capacidad de
reparación de tejidos. En el caso de daño cutáneo inducido por la luz UVB de onda corta, CD103 + capta el
ARNm propio de los queratinocitos .Células dendríticas (CD) que inducen la inflamación cutánea. Estos DC
se suprimen por Tregs que tienen una alta expresión superficial de CD103 y P-lig y, por lo tanto, pueden
migrar a la piel no inflamada, luego de la exposición a los rayos UV.
Adaptaciones del tejido y funciones homeostáticas
Fieles a la naturaleza de las Treg residentes en los tejidos, donde se ha demostrado que no solo desarrollan
tolerancia inmunológica sino que también se acostumbran y ayudan a la fisiología local, se ha descubierto
que las Treg cutáneas en los folículos pilosos modulan las células madre del folículo piloso (HFSC), además
de Estableciendo tolerancia a comensales. En la piel del ratón, se encontró una gran cantidad de Treg
durante la fase telógena del crecimiento del folículo piloso, que se caracteriza por la quiescencia, seguida
solo por una fase de proliferación activa llamada anágena. La población de Treg disminuye durante la fase
anágena. Y a medida que estas fases se alternan en la piel del ratón, también lo son los números de Treg
asociados con el folículo piloso ( 158 ) (Figura 5 ). Los animales con agotamiento transitorio de Treg
durante telogen, no progresaron a la fase anágena y no pudieron volver a crecer pelos (158 ). No se
relacionó con la inflamación, ya que el agotamiento transitorio de las Treg no provocó ningún evento
inflamatorio importante en la piel y el co-agotamiento de los efector CD4 + , CD8 + , neutrófilos que
expresan Gr-1 o células mieloides CD11C + no rescató la proliferación de HFSC ( 158 ). Esto sugirió un papel
no inmune de los Treg en la proliferación de HFSC. Al igual que las Treg en el sistema hematopoyético que
forman un sitio con privilegios inmunitarios para proporcionar un nicho de protección a las células madre
hematopoyéticas ( 185 ), se encontró que las Treg del folículo piloso co-localizaban con las HFSC. Estos Treg
expresan altamente " jagged1 " que codifica un ligando para la vía de señalización de muesca responsable
de la proliferación de HFSC ( 158) (Figura 5 ).
Las células T reguladoras también desempeñan un papel importante en la cicatrización de heridas
cutáneas. Se acumulan en grandes cantidades en el sitio poco después de una lesión en la piel ( 186 ). Estas
Treg son de fenotipo activado con alta expresión de CD25, CTLA4 e ICOS y limitan las células T productoras
de IFNγ y los macrófagos inflamatorios en las heridas ( 186 ). Las Treg involucradas en la cicatrización de
heridas cutáneas demostraron ser dependientes de la vía del EGFR ( 186 ) como en las Treg de cicatrización
pulmonar y muscular ( 150 , 187 , 188 ) (Figura 6 ).
Células T Reguladoras Infiltrantes De Tumores (TI-Tregs): Una Batalla Ganada, Guerra Perdida
Los tumores son heridas que no sanan ( 189 - 191 ). Los tumores sólidos, en particular, se entregan
heterogéneamente en varias etapas de la cicatrización de heridas, que proporcionan factores de
crecimiento esenciales para el crecimiento del tumor. Este secuestro de procesos naturales da como
resultado un aumento de la inflamación y su posterior resolución en el microentorno del tumor,
presumiblemente creando un círculo vicioso. La inflamación por un lado proporciona oportunidades de
crecimiento y metástasis; La resolución de la inflamación ayuda al tumor a escapar de la inmunidad
antitumoral. Por lo tanto, no es sorprendente que muchos tumores sólidos, incluyendo hepatocelular ( 192
), gástrico ( 193 ), pulmón ( 194 ), mama ( 195 ), ovario ( 196 ), cervical (197 ), y los melanomas ( 198 )
convocan números comparativamente grandes de Treg, que a veces representan incluso más del 50% del
compartimiento de células T CD4 + ( 199 ). Para la mayoría de los tumores, la presencia de un gran número
de Treg indica un pronóstico precavido a grave. Sin embargo, varios estudios informaron un papel
favorable de las células T FOXP3 + en los carcinomas colorrectales (CCR) ( 200 - 202 ). Es de notar que la
expresión de Foxp3 no es exclusivo de bona fide Tregs en los seres humanos, a menudo, células T efectoras
expresan FOXP3, aunque transitoriamente ( 203 , 204). Sobre la base de los niveles de expresión de FOXP3
y proteína tirosina fosfatasa isoforma A (CD45RA), FOXP3 sangre periférica humana + CD4 + células T se
pueden clasificar en FOXP3 hi CD45RA - bona fide Tregs que son eTregs altamente supresores y
fenotípicamente; Células T no expuestas de FOXP3 lo CD45RA + y células T efectoras de FOXP3 lo CD45RA -
que no son supresivas en un ensayo de supresión in vitro ( 203 ). De hecho, el análisis cuidadoso de los TIL
en el CRC humano por Saito et al. ( 205) reveló la heterogeneidad de la expresión de FOXP3. Los autores
identificaron que el CRC, donde la mayor expresión de FOXP3 se asoció con resultados favorables, en
realidad se infiltró más con las células T efectoras de FOXP3 lo CD45RA + y los genes inflamatorios
regulados al alza como Il12a, Il12b, Tgfb1 y Tnf . Mayor infiltración de FOXP3 hi CD45RA - células dieron
lugar a un mal pronóstico y una menor supervivencia libre de enfermedad ( 205 ) según lo informado por
otros tumores.
Origen y Acumulación de TI-Tregs.
Como los tTregs y los pTregs difieren en su estabilidad, la información concluyente sobre el origen de TI-
Tregs puede ser muy valiosa para diseñar terapias específicas de TI-Treg en cánceres. Los tumores dirigen
las respuestas inmunitarias contra los antígenos propios asociados a los tumores, así como contra los
antígenos neo propios. Por lo tanto, en teoría, las Treg contra los antígenos propios (tTregs) y las pTregs
contra los antígenos neo-auto son posibles. La presencia de altos niveles de TGFβ en la mayoría de los
tumores sólidos refuerza la idea de la generación de pTregs en microambientes tumorales ( 206 , 207 ). Sin
embargo, se ha demostrado que las TI-Tregs en varios tumores murinos expresan altos niveles de
proteínas Nrp1 y Helios, lo que sugiere un origen tímico ( 208 ). Intentos de conversión in situ de CD4 +
convencionalLas células T a Treg contra tumores que expresan antígenos modelo dieron como resultado la
generación de pTregs intratumorales ( 209 , 210 ), pero las poblaciones monoclonales de células T
específicas de antígeno no recapitulan las condiciones fisiológicas donde las células T específicas de
antígeno representan menos del 5% de TILs ( 211 - 213 ). Los análisis de repertorio de TCR no revelaron
casi ninguna superposición en Foxp3 + y Foxp3 : células T en tumores de próstata autóctonos ( 214 ),
tumores inducidos por carcinógenos ( 215 ) y en tumores heterotópicos trasplantados en ratones ( 216).).
Además, estos estudios confirmaron que hay enriquecimiento y expansión de TCR que llevan Tregs dentro
del microambiente tumoral ( 214 , 216 ). En los cánceres de mama humanos ( 217 ) y en los carcinomas
hepatocelulares positivos para el virus de la hepatitis B (CHC) ( 192 ), el repertorio de TCR muy bajo se
superpone entre las TI-Treg y las células T convencionales sugiere poca o ninguna conversión de las células
T CD4 + convencionales en Treg ( Figura 7 A). Malchow et al. ( 214 ) desarrollaron un ratón transgénico que
expresaba el modelo del antígeno SV40 T del oncogén en la próstata y una cadena TCRβ fija (TRAMP-Foxp3
eGFP TCRβ Tg). Encontraron que las Treg que expresan un solo TCR (MJ23), reactivo a un antígeno de
próstata expresado normalmente, poblaron consistentemente los tumores ( 214 ). Este TCR fue capaz de
impulsar el desarrollo de un clon tTreg. Sin embargo, una deficiencia del regulador autoinmune del factor
de transcripción abolió el desarrollo de estos clones ( 214 ), lo que sugiere que al menos en estas
configuraciones experimentales, se generan TI-Tregs en el timo contra un auto-antígeno expresado en
tejido normal (Figura 7UNA). Recientemente, se descubrieron dos ligandos autoantigénicos naturales
restringidos por MHCII de Tregs MJ23. Ambos ligandos son péptidos no superpuestos que se originan a
partir de la misma proteína prostática (Tcaf3) y mientras que uno se expresa en tumores de próstata de
ratón (MJ23), el otro está asociado con lesiones autoinmunes de próstata (SP33) ( 218 ). Otro estudio que
se centró en las características epigenéticas de las tTregs encontró que las TI-Tregs habían hipometilado
Foxp3 CNS2 en varios modelos de tumores transplantados ortotópicos y heterotópicos, incluso en
diferentes momentos del crecimiento tumoral ( 219 ). Estos hallazgos se confirmaron aún más en las TI-
Treg de diferentes tumores humanos. Cabe señalar que ha habido informes equívocos acerca de que el
CNS2 desmetilado es específico para los tTregs, ya queLa región Foxp3 CNS2 en pTregs también se ha
demostrado que está desmetilada ( 220 , 221 ), muy probablemente luego de una estabilización posterior a
su inducción de novo .
Figura 7 . Origen, acumulación y potenciación funcional de las células T reguladoras infiltrantes de tumores
(Tregs). (A) Los antígenos específicos del tumor pueden ser expresados por células epiteliales tímicas de
manera dependiente del Aire , que luego seleccionan los Treg específicos del antígeno tumoral. Estas Treg
se expanden luego en los ganglios linfáticos que drenan los tumores (LN) con la ayuda de células
dendríticas (DC). Los Treg también pueden ser reclutados directamente para tumores y experimentar
expansión allí. Si bien es probable la conversión intratumoral de las células T efectoras en pTregs, no se
comprende completamente hasta qué punto esto ocurre en condiciones fisiológicas. (B) Un alto número de
TI-Tregs son apoptóticos debido a la expresión suprimida de Nrf2. Estas Treg, al igual que las células
tumorales moribundas, liberan grandes cantidades de ATP, que se convierte en adenosina por las
ectoenzimas CD39 y CD73 de Treg de manera secuencial. La adenosina resultante es altamente supresora
de las células T efectoras CD8 + infiltrantes de tumores . Además, las Treg también producen anfirregulina
en ciertos tipos de tumores, lo que ayuda en la progresión del tumor. (DO)Más del 50% de las TI-Tregs
expresan neuropilina 1 (Nrp1) de superficie, que es un receptor para la Semaforina 4a. Tras la ligadura con
Semaphorin4a, Nrp1 activa la fosfatasa lipídica y el homólogo a la tensina (PTEN), que de pronto
desfosforila el AKT, lo que permite su secuestro en el citosol y la retención nuclear de los factores de
transcripción de Foxo1 / 3 que ayudan a la estabilización y supervivencia de Tregs. Una pérdida de Nrp1
hace que Treg sea altamente susceptible a IFNγ y tales Tregs también producen una gran cantidad de IFNγ
y HIF1α (Tregs “frágiles”). El entorno alto de IFNγ resultante, recíprocamente, puede inducir "fragilidad" en
otros Treg con suficiente Nrp1 también, configurando un círculo vicioso.
En general, las evidencias disponibles apuntan en gran medida hacia un mayor enriquecimiento y
expansión de tTregs dentro de tumores sólidos. Sin embargo, ¿por qué no deberían los niveles más altos
de TGFβ y un entorno de tumor activador impulsar la generación y expansión de pTreg es una pregunta
desconcertante? Probablemente, los experimentos de rastreo de linajes más concluyentes en los tumores
pueden demostrarse más perspicaces.
TI-Tregs añade otra capa de diversificación
Estudios recientes que analizan el transcriptoma de TI-Tregs de cánceres humanos han identificado que
aunque TI-Tregs son muy similares a los Treg residentes en tejidos normales, estos tienen algunas
características específicas y patrones moleculares que pueden utilizarse para la terapia selectiva ( 192 , 217
, 222 ) . Plitas et al. ( 217 ) encontraron que los cánceres de mama, con un fenotipo bastante agresivo,
estaban enriquecidos para las Treg, que eran altamente supresivas en un ensayo de microsupresión y eran
altamente proliferativas basadas en el aumento de la expresión de la proteína nuclear Ki67, un marcador
celular para la proliferación ( 223).). Un análisis adicional del transcriptoma de las TI-Treg de cáncer de
mama y cáncer gástrico, así como las metástasis cerebrales de CPNM y metástasis hepáticas de CCR,
sugirieron un conjunto de genes distintivos para estas células ( 222 ). TI-Tregs expresó BATF, CCR8, CD30,
IL1R2, IL21R, PDL1 y PDL2 junto con FOXP3 e IL2Ra a un nivel muy alto ( 222 ). Recientemente, se demostró
que BATF estaba involucrado en la expresión de conjuntos de genes dependientes del contexto en tejidos
Treg ( 224 ). En los pacientes con IPEX, una mutación de ganancia de función en el locus FOXP3 (A384T) da
como resultado especificidades de unión a ADN expandidas de FOXP3. Su enlace alterado al locus BATF
reprimió la expresión de BATF, lo que condujo a la expresión reprimida de GATA3, ST2 y CCR4 en Tregs (
224). Estos genes son significativos en la conversión de cTregs a eTregs, por lo tanto, su expresión
disminuida condujo a una autoinmunidad generalizada específica de tejido ( 224 ).
Los análisis de transcriptomas de todo el genoma identificaron MAGEH1 , gen de la familia H1 del antígeno
del melanoma, que codifica una putasa ubiquitina E3 putativa que regula potencialmente la supervivencia
y la función de TI-Treg; Receptor de quimiocina (motivo CC) 8 (CCR8), receptor conocido para quimiocinas
CCL1 ( 225 ), CCL8 ( 226 ), CCL16 ( 227 ) y CCL18 ( 228 ) en seres humanos; CD177, una glucoproteína de la
superficie celular unida al glicosilfosfatidilinositol que puede unirse a la molécula de adhesión de células
endoteliales plaquetarias-1 y es conocida por la transmigración y supervivencia de los neutrófilos ( 229 ); y
LAYN , que codifica un nuevo layilin del receptor de superficie de lectina de tipo c, un receptor propuesto
para el hialuronano ( 230). Sin embargo, posteriormente, se ha encontrado que la layilina es altamente
expresada en células T CD8 + citotóxicas infiltrantes de tumores , particularmente aquellas con un fenotipo
exhaustivo ( CTLA4, PDCD1 y HAVCR2 ) exhaustivo ( 192 ). El enriquecimiento de LAYN, MAGEH1 y CCR8 en
muestras de tumores completos se correlacionó significativamente con una reducción de la tasa de
supervivencia a los 5 años de los pacientes con CCR y CPNM ( 222 ). La expresión de CCR8 se enriqueció
exclusivamente en TI-Tregs, mientras que las expresiones CCR2, CCR4 y CCR5 se encontraron también en
otras células Tconv infiltrantes de tumores y / o en sangre periférica. De hecho, se ha demostrado que un
anticuerpo reductor de CCR4 reduce tanto las células Treg como las células Tconv ( 231). Algunos Tregs en
el drenaje de LN también expresaron CCR8 alto, que podrían ser marcados para la infiltración del tumor o
Tregs en micrometástasis dentro de los LN ( 217 ). Como la Tregs de sangre periférica y / o LN no expresan
CCR8, no se aprecia su importancia en el reclutamiento de Treg para tumores. Es posible que CCR8 se
exprese para retener Treg en tumores. De hecho, los ligandos de CCR8 como CCL1 y CCL18 se transcriben
altamente en células mieloides infiltrantes de tumores ( 217 ). Si la expresión CCR8 es un indicador de TI-
Treg altamente supresivas o tiene una importancia funcional adicional, aún no se conoce. Sin embargo, las
Treg humanas expuestas al ligando CCR8 CCL1 y no a CCL8, CCL16 o CCL18 inducen la expresión de CCR8 en
la superficie a través de una vía mediada por STAT3 ( 232). Dichas células, posteriormente, aumentan su
expresión de FOXP3, CD39, Granzyme B e IL10 y son funcionalmente más supresivas en un ensayo de
microsupresión y en un modelo de esclerosis múltiple en ratones ( 232 ).
Función de TI-Tregs
Existe un repertorio de mecanismos conocidos y aún desconocidos que los Treg utilizan para suprimir una
respuesta inmune. Las TI-Treg también usan mecanismos similares que incluyen la producción de
citoquinas inmunosupresoras como IL10 y TGFβ ( 233 , 234 ); secuestro de IL2 ( 235 ); citólisis directa de
linfocitos diana utilizando granzima B y perforina ( 236 ); inmunosupresión basada en contacto que utiliza
moléculas inhibidoras de superficie como CTLA4 ( 237 ), PD1 ( 238 , 239 ), LAG3 ( 240 ), TIM3 ( 241 ) y
supresión de células T mediada por adenosina generada por CD39 / CD73 a través del receptor de
adenosina 2A ( 242 ,243 ). Sin embargo, no se comprende muy bien cómo las TI-Treg tienen una respuesta
supresora muy acentuada. Una gran acumulación de Treg podría ayudar en una supresión exagerada
colectiva, pero no puede explicar la potenciación individual. Recientemente, se demostró que las TI-Tregs
son altamente apoptóticas debido a la expresión comparativamente baja del factor nuclear de la
transcripción como el factor 2 (NRF2) ( 244 ). NRF2 regula el sistema de defensa antioxidante en
macrófagos y células epiteliales ( 245 ). La falta de NRF2 hace que las TI-Tregs sean más apoptóticas en el
microentorno del tumor de estrés oxidativo alto. Pero, debido a la mayor liberación de ATP y la alta
expresión de CD73 / CD39, las TI-Treg apoptóticas generan una gran cantidad de adenosina y, por lo tanto,
se vuelven aún más supresivas ( 244 ) (Figura7 B). Sin embargo, se debe tener en cuenta que la apoptosis
inducida por Imatinib de TI-Tregs mejoró la inmunidad antitumoral ( 246 ).
TI-Tregs en cánceres de mama humanos ( 217 ) y HCC ( 192 ) expresan altamente el gen Il1r2 que codifica
un receptor IL1 señuelo. Además, se encontró que las TI-Tregs son altamente estables debido a la
expresión aumentada de la fosfatasa lipídica y el homólogo de la tensina (PTEN) y el receptor de VEGF
Nrp1 ( 199 , 238 , 247 ). La unión de Nrp1 a su ligando Semafhorin4a incrementó la localización nuclear de
Foxo1 y Foxo3 mediante la inhibición de la fosforilación de AKT que estabilizó los genes distintivos de Treg
y los genes antiapoptóticos ( 247 ) (Figura 7DO). La desfosforilación de AKT se logró mediante la activación
de PTEN por Nrp1. De hecho, los ratones con eliminación de PTEN específica para Treg generan una
respuesta inmune antitumoral acentuada ( 238 ). La expresión de Nrp1 es principalmente importante para
TI-Tregs, ya que la pérdida de Nrp1 incluso de una fracción de Tregs en condiciones experimentales
apropiadas, hizo que todas las Tregs (incluidas aquellas que eran Nrp1 suficientes) fueran "frágiles" ( 199 ).
Esta observación enfatiza que las Treg no solo pueden modular otras células inmunitarias, sino que
también pueden influir fenotípicamente en otras Treg. Se demostró que la fragilidad TI-Treg se induce por
la producción de IFNγ por Treg deficientes en Nrp1 y IFNγ exógeno ( 199 ) (Figura 7DO). Los autores
muestran además que HIF1α fue un factor importante inducido en Tregs frágiles y deficientes en Nrp1, y
tanto HIF1α como IFNγ pueden ser inducidos por hipoxia ( 199 ). Sin embargo, como la mayoría de los
tumores sólidos se vuelven progresivamente hipóxicos ( 248 , 249 ), queda por ver si este fenómeno es
prevalente en los tumores progresivos y, de ser así, si es eficaz para una regeneración significativa de la
respuesta inmune antitumoral. Se ha demostrado que las TI-Tregs expresan altamente el activador del
receptor del factor nuclear κB ligando (RANKL), que al unirse a su receptor RANK expresado en células de
carcinoma mamario aumenta la metástasis pulmonar ( 250 ). RANKL también se ha implicado en la
renovación de células progenitoras de cáncer de mama ( 251) y metástasis de los cánceres de próstata (
252 ) mediante la modulación del inhibidor de la proteína quinasa del factor nuclear κB quinasa α (IKKα).
En general, estos hallazgos sugieren que existe una identidad fenotípica y funcional específica para TI-Treg
y, por lo tanto, es posible seleccionarlos de manera selectiva para desencadenar una inmunidad
antitumoral eficiente.
Otros Tregs en la inflamación del tejido y la homeostasis
A medida que la diversidad en las características y funciones de las Treg tisulares se está desentrañando, se
han descrito varias otras poblaciones interesantes que merecen una caracterización fenotípica y funcional
más detallada.
Central de regeneración
Se informó anteriormente que en un modelo no inflamatorio de la alveologénesis regenerativa, las Treg
aumentaban la proliferación epitelial. Un cocultivo de Treg con células alveolares de tipo II (AT2) aumentó
su proliferación de manera dependiente de CD103 ( 253 ). De acuerdo con estos hallazgos, una población
distinta de Tregs que expresan altos niveles de citoquinas proinflamatorias IL18 (IL18R) y ST2 se ha descrito
en los pulmones ( 150 ). Las Treg IL18R + se expanden temprano en el curso de una lesión pulmonar y
mejoran la reparación del tejido al producir una gran cantidad de proteína de reparación tisular de
anfiregulina de manera "innata", independientemente del compromiso del TCR ( 150 ) (Figura 8UNA). En
animales con deficiencia de anfirregulina específica de Treg, se observó una disminución rápida de las
funciones pulmonares en la infección por el virus de la influenza intranasal, mientras que la respuesta
inmune antiviral estaba intacta ( 150 ). El análisis transcriptómico reveló que estas "Tregs de reparación"
tienen un patrón de expresión génica distinto que indica su competencia en la remodelación de la matriz
extracelular y la reparación de tejidos ( 150 ).
Figura 8 . Las evidencias emergentes resaltan un requisito obligatorio de células T reguladoras (Treg) en la
regeneración y reparación de tejidos. (A) Tanto los pulmones como los músculos contienen una población
de Treg que proliferan vigorosamente en la lesión tisular. Las Treg reparadoras del pulmón responden
tanto a la IL18 inflamatoria como a la IL33 de alarmina y producen anfirregulina de manera independiente
de TCR. Las Treg musculares responden a la IL33 producida en el daño muscular y producen anfiregulina
para su reparación posterior. (B) En el pez cebra, mamífero Foxp3 ortholog Foxp3aLas Treg que expresan
(zTregs) están presentes principalmente en el riñón. Sin embargo, al lesionarse el tejido, pronto se
acumulan en el lugar de la lesión. Además de la producción de IL10 antiinflamatoria, los zTregs co-localizan
con las células progenitoras de los órganos y proporcionan factores de crecimiento específicos del tejido a
los progenitores como la neurotrofina3 para los progenitores neurales en la médula espinal, la
neuregulina1 para cardiomiocitos en el corazón y el factor de crecimiento similar a la insulina1 a las células
gliales de Müller en la retina.
Otra población única de tejido Treg se ha encontrado en los músculos esqueléticos, donde en virtud de la
secreción de anfirregulina, ayudan en la regeneración muscular y la curación. Estas células, que
generalmente representan el 10% de las células T musculares en un estado estable, proliferan
vigorosamente después de la administración intramuscular de cardiotoxina, que induce una lesión aguda
inducida por hipercontracción y muerte de miofibrillas ( 254 ), que llega a cerca del 50% de las células T
musculares. población ( 188 ). La alta expresión de Nrp1 y Helios y un repertorio exclusivo y restringido de
TCR sugieren el origen tímico de las Treg musculares y la reactividad a un antígeno muscular local ( 188).
Estas Treg tienen un transcriptoma único en comparación con las Treg de órganos linfoides con varios
genes expresados diferencialmente. Tienen transcripciones reguladas al alza involucradas en la supresión
mediada por Treg ( Il10, Gzmb , etc.), reparación de tejidos ( Il1rl1, Areg , etc.) y regeneración muscular (
255 ) ( Ccr2 ), así como genes que codifican proteínas encontradas en la función muscular contráctil ( 256 )
como nebulina y proteínas similares a nebulina ( Neb, Nebl). El agotamiento de las Treg durante un
episodio de lesión muscular retrasa la curación muscular, muy probablemente debido a la pérdida de la
anfiregulina Treg generada. Además, los progenitores fibro / adipogénicos en los músculos esqueléticos
producen altos niveles de IL33, cuyo receptor ST2 se expresa altamente en Tregs musculares. Por lo tanto,
las Treg musculares parecen estar involucradas en un proceso de reparación inducida por alarmina (Figura
8 A). Curiosamente, la población de Treg muscular disminuye en ratones de la vejez, lo que resulta en un
deterioro del proceso de reparación y regeneración ( 257 ).
Recientemente, un estudio muy elegante y detallado ( 258 ) en pez cebra ha elaborado capacidades de
regeneración de Treg aún desconocidas y espectaculares (Figura 8 B). Los autores encontraron que un
ortólogo de Foxp3 de mamíferos , Foxp3a , que se expresaba exclusivamente en una subpoblación de
células T de pez cebra, estaba regulado al alza de manera más prominente en distintos órganos
regeneradores. Tregs de peces cebra (zTregs) se encontraron predominantemente en los riñones, pero se
infiltraron y proliferaron vigorosamente en los tejidos en regeneración. Al igual que en las contrapartes de
los mamíferos, estas células expresaron altos niveles de Nrp1a y Helios en comparación con las zTregs de
riñón ( 258 ). Se ha reportado que la región CNS1 de Foxp3locus, responsable de la generación de pTreg, no
se encuentra en el pez cebra ( 259 ). Para la identificación del papel de zTreg en la regeneración de
órganos, la eliminación puntual y continua de Foxp3a dio como resultado una regeneración reducida y
retardada en los modelos de lesión de corazón, médula espinal y retina ( 258 ). De hecho, la eliminación de
zTregs redujo las células precursoras específicas del tejido y disminuyó su proliferación ( 258 ). De hecho,
se encontraron zTregs cerca de los progenitores, a veces incluso en contacto cercano ( 258). Sin embargo,
el hallazgo más sorprendente de este estudio es que los zTregs que presumiblemente provienen de un
grupo imparcial común, se volvieron plásticos en un contexto regenerativo específico del tejido y
produjeron factores de regeneración específicos de células precursoras de tejido como la Neurotrophin 3
para los progenitores neurales en la médula espinal en regeneración, Neuregulin 1 para cardiomiocitos en
el corazón lesionado y factor de crecimiento similar a la insulina 1 para células progenitoras de la retina
Müller glia ( 258 ) (Figura 8 B). El hecho de que los zTregs son la fuente principal de estos factores de
crecimiento se confirmó mediante el rescate de la regeneración en tejidos agotados con zTreg mediante
factores de crecimiento recombinantes específicos del tejido ( 258). El potencial de regeneración de zTregs
fue independiente de su potencial inmunosupresor o al menos no dependía de su producción de IL10, ya
que las células deficientes en IL10 eran capaces de inducir la proliferación de células precursoras. Sin
embargo, el potencial de regeneración dependió de Foxp3a, ya que el proceso de regeneración se redujo
significativamente en los tejidos de Foxp3a - / - junto con los niveles de expresión del factor de crecimiento
( 258 ). Por otro lado, la expresión Areg no era dependiente de Foxp3a y su papel en la regeneración era
limitado. Sería interesante extrapolar y confirmar hallazgos similares en tejidos murinos y humanos.
Tolerancia Feto-Materna
Se ha descrito una población igualmente fascinante de Treg que se acumula en la placenta murina para
inducir la tolerancia materna al feto ( 259 ). Decir que los Treg son extremadamente importantes desde el
comienzo del embarazo no será un rebasamiento [revisado en Ref. ( 260 , 261 )]. De hecho, el
apareamiento en sí mismo expande las Treg uterinas e induce una "tolerancia" transitoria a los
aloantígenos paternos ( 260 ). Tanto en humanos como en ratones, el plasma seminal contiene TGFβ y
prostaglandina E, que son potentes inductores de Treg. De hecho, el fluido seminal en humanos y roedores
contiene los niveles más altos de TGFβ medidos entre los fluidos biológicos ( 260 ). Las mujeres con abortos
espontáneos recurrentes han reducido la población de Treg ( 262). La decidual femenina y el útero que
drenan LN Treg es dependiente de CNS1 ( 259 ) y se observó un aumento de la reabsorción fetal y la
infiltración placentaria de células T en ratones deficientes en CNS1. Aparte de su origen periférico más
probable, no se sabe si estas Tregs tienen un perfil fenotípico y funcional distinto, cuyo esclarecimiento
podría ser muy informativo sobre el mejoramiento de la infertilidad, la preeclampsia y otros trastornos
abortivos espontáneos. Muy recientemente, un elegante estudio sobre células presentadoras de antígeno
fetal humano ( 263 ) ha encontrado que las contrapartes fetales de DC son principalmente tolerógenas en
su respuesta. Y, la respuesta primaria es la generación de Treg, incluso más que las CD de adultos, en un
ensayo de diferenciación de Treg in vitro ( 263).). Estas CD se encontraron en varios tejidos fetales,
incluidos el bazo, el timo, la piel, el intestino y los pulmones ( 263 ). Desafortunadamente, los autores no
describieron si las Treg también estaban presentes en estos tejidos. Anteriormente, se ha demostrado que
los Treg fetales humanos promueven la tolerancia a los antígenos maternos no hereditarios ( 264 ), pero
solo recientemente, salió a la luz que los Treg también son necesarios para la supresión de la
autoinmunidad en el útero . Dos niños con síndrome de IPEX, que murieron poco después de nacer,
presentaron evidencias histológicas de estructuras linfoides terciarias, cambios inflamatorios crónicos y
autoinmunidad específica del páncreas exocrino ( 265).). Esto significa que en los entornos
desconcertantes de un embarazo, los Treg son fundamentales para establecer la tolerancia en ambos
extremos de la relación materno-fetal.
Conclusión y perspectivas
La utilidad traslacional de muchos procesos biológicos se ve empañada por la falta de especificidad. Un
dilema similar existe para los biólogos de Treg también; sin embargo, en el caso de los Treg, la selección
terapéutica selectiva parece ser alcanzable en virtud de aprovechar su diversidad fenotípica y funcional
gradualmente establecida. Estudios recientes han proporcionado evidencia de que incluso para los órganos
como los testículos y los ojos, que se consideran convencionalmente privilegiados para la inmunidad; hay
poblaciones de Treg que mantienen la tolerancia dominante y / o la homeostasis del tejido. Mientras está
en el testículo, donde el autoantígeno privilegiado se escapa de los túbulos seminíferos, solo para generar
tolerancia sistémica a través de Tregs ( 266), la retina recluta activamente Treg, que no solo atenúa la
inflamación, sino que también repara la vasculatura, salvando las cegadoras retinopatías neovasculares (
267 ). Otra capa de especificidad se agrega por el descubrimiento de Treg residentes en el tejido y sus
características únicas. Sin embargo, la mayoría de la información, excepto los informes recientes sobre
Treg residentes en la piel y TI-Tregs, son de tejidos de ratón. Hay varias diferencias en la estructura, así
como la fisiología entre ratones y humanos. Por ejemplo, la piel del ratón contiene una capa muscular
delgada paniculus carnosus , que es vestigial en los humanos ( 268). Esto ayuda en la contracción,
revascularización y curación de heridas sin formación de cicatrices en ratones. Por otro lado, la piel
humana se cura por segunda intención dejando cicatrices. Por lo tanto, es importante identificar Tregs de
tejido humano para un esfuerzo informado hacia el uso terapéutico.
Existe la necesidad de establecer de manera concluyente el origen y los factores acumulativos de las Treg
tisulares. Una de las preguntas más apremiantes sobre casi todos los Tregs de tejidos es la identificación de
sus ligandos naturales o antígenos tisulares. Aunque se ha demostrado que, en ciertos casos, los Treg no
necesitan la estimulación de TCR para algunas de sus funciones ( 150), Los Treg con un subconjunto más
pequeño del repertorio específico de TCR pueblan varios tejidos así como tumores malignos. Por lo tanto,
es probable que los ligandos afines que ayudan en la supervivencia y proliferación de Treg en estos tejidos
tengan una contribución significativa en las modulaciones específicas del tejido de catering. Los estudios
de prueba de concepto proporcionan evidencia de que las Treg con especificidad de antígeno definida
(Treg receptor de antígeno quimérico, Treg-CAR) tienen potentes funciones inmunosupresoras junto con la
ventaja de no inducir inmunosupresión generalizada ( 269 ).
La pregunta sigue siendo cómo los Treg se comunican con adipocitos específicos de células tisulares para
establecer un canal de comunicación con el medio ambiente. Más allá de la adaptación al contexto
inflamatorio, existen características de la biología de Treg, que también modulan su efecto temporalmente
en la vida. Por ejemplo, la acumulación de Treg en el envejecimiento WAT induce resistencia a la insulina (
79 ), mientras que su acumulación en el WAT obeso joven la mejora ( 83). Los mecanismos que impulsan
tales resultados específicos deben ser estudiados en detalle. Esta acentuada capacidad de adaptación a
veces se vuelve contraproducente también como se ve en los tumores donde la capacidad supresora
aumenta incluso en comparación con las Treg residentes en tejidos normales y, a su vez, es utilizada por
los tumores para su supervivencia y escape inmune. Aún no se han identificado los mecanismos mediante
los cuales los Treg pueden empujar los límites de sus capacidades funcionales.
Un aspecto importante de la adaptación del tejido es ajustar el metabolismo celular de acuerdo con el
entorno del tejido. Existen grandes lagunas en nuestra comprensión tanto del metabolismo de los
linfocitos Tn como de los linfoides. En Tregs diferenciados in vitro (iTregs), se demostró que Foxp3 suprime
la glucólisis mediante la represión de Myc y ayuda a desarrollar resistencia a l- lactato ( 270 ). De manera
similar, Foxp3 contadores PI (3) K-Akt-mTORC1 para disminuir la glucólisis en iTregs ( 271 ). Por el
contrario, se demostró que el Splenic y el TI-Tregs absorben más 2NBDG, un análogo de glucosa
fluorescente, mientras que las células T efectoras intratumorales mostraron una carencia de glucosa que
conduce a una producción reducida de metabolito glicolítico fosfoenol piruvato, lo que resulta en
funciones efectoras comprometidasa través de la reducción de señalización de calcio-NFAT ( 272 ). Más
recientemente, se descubrió que la glucólisis era instrumental en el tráfico de Treg y la migración a tejidos
inflamados. La inducción de la enzima glucolítica glucoquinasa GCK y el reordenamiento del citoesqueleto
por su asociación con actina demostró ser crítica para el proceso ( 273 ). Estos hallazgos subrayan la
necesidad de estudios extensivos para delinear la reprogramación metabólica no solo de las Tregs tisulares
sino también de las Treg linfoides en condiciones de estado estable y activadas.
Uno solo puede sorprenderse por la diversidad y la plasticidad funcional de los Tregs. Por lo tanto, siempre
surge una pregunta sobre por qué los Treg son los elegidos. Aún está por verse si las diversidades similares
entre otros tipos de células inmunitarias aún están a la espera de descubrimientos, o si Foxp3 y
presumiblemente otros factores desconocidos proporcionan algún grado de singularidad funcional a los
Tregs. Sin embargo, considerando la diversidad de respuestas que van desde el mantenimiento de la
tolerancia inmune hasta la reparación de tejidos, hasta convertirse en un actor principal en el
mantenimiento de la función fisiológica de los tejidos, es probable que se diga que los Treg son el
proverbial "Jack de todos los oficios", y ciertamente , "Maestro" de algunos.