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ARTÍCULO EN PRENSA

Lebensm.-Wiss. U.-Technol. 37 (2004) 857-864

producción microbiana de tanasa: una enzima con uso potencial en


industria de alimentos

Ruth Belmares una, Juan Carlos Contreras-Esquivel una, ¡Real academia de bellas artes! ul Rodr! ıguez-Herrera una,
Ascensi! sobre Ram! Irez Coronel segundo, Crist! obal Noe Aguilar una,*
una Departamento de Investigación Alimentaria de la Facultad de Química, Universidad Autónoma de Coahuila, Unidad Saltillo, Blvd. Venustiano Carranza, PO BOX 252,

Postal 2500, Coahuila, México


segundo Instituto de Investigación para el De'veloppement, Laboratorio de Microbiología, Universite' de Provence, ESIL, la caja 925, Avenue de Luminy, 132888,

Marsella, Cedex 9, Francia

Recibido el 18 de marzo de 2004; recibida en el formulario 9 de abril de revisado de 2004; aceptado 13 de abril de de 2004

Resumen

Tanasa cataliza la hidrólisis de los ésteres de ácido gálico y taninos hidrolizables. Esta enzima es producida por plantas y microorganismos y se utiliza industrialmente como
catalizadores en la fabricación de ácido gálico. También, se usa potencialmente en bebidas y alimentos. Dos factores críticos, los costes de producción y el conocimiento insu fi
ciente de las características básicas, las propiedades físico-químicas, características catalíticas, los mecanismos de regulación y usos potenciales, limite el uso de tanasa a nivel
industrial. Este trabajo se revisa el estado de los aspectos críticos relacionados con la tanasa, haciendo hincapié en aspectos tales como fuentes, sustratos, los mecanismos de
regulación del metabolismo, propiedades fisicoquímicas, inhibidores, la producción, las aplicaciones y usos potenciales.

r 2004 Sociedad Suiza de Ciencia y Tecnología de Alimentos. Publicado por Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.

palabras clave: tanasa; taninos; mecanismo de regulación; propiedades; Producción; aplicaciones

1. Introducción interesante ( Barthomeuf, Regerat, y Pourrat (1994) ;


García! IA-Pen~ un (1996) ; Chatterjee, Dutta, Banerjee, y Bhattacharyya,
Tanasa o tanino acil hidrolasa (EC, 3.1.1.20) cataliza la reacción de 1996 ; Lekha y Lonsane, 1997 ; García! IaPen~ A et al., 1999 ; Ram!
hidrólisis de los enlaces éster presentes en los taninos hidrolizables y Irez-Coronel, Viniegra-Gonz! alez,
ésteres de ácido gálico. Su producción a nivel industrial es de una manera Y Augur, 1999 ; Aguilar, Augur, Viniegra-Gonz! alez, y
microbiana usando cultivo sumergido (SmC), donde se expresa la actividad Favela, 1999 ; Aguilar, Augur, Favela, y ViniegraGonz!
principalmente de forma intracelular, lo que implica costes adicionales en alez, 2001a, b ; Aguilar, Favela-Torres, ViniegraGonz!
su producción ( Lekha y Lonsane, 1994 ). Tanasa está recientemente alez, y Augur, 2002 ; Van de Lagemaat y Pyle, 2001 ). En estos,
comercializado por Biocon (India), Kikkoman (Japón) ASA Specilaeznyme atractivas ventajas indicados, son los títulos de alta producción (hasta 5,5
GmbH (Alemania) y JFC GmbH (Alemania) con diferentes unidades veces más que en SmC), la naturaleza extracelular de las enzimas y la
catalíticas en función de la presentación del producto. Sin embargo, varios estabilidad a pH y temperatura de amplios intervalos ( Lekha y Lonsane,
estudios han informado de ventajas interesantes entre la tanasa producido 1994 ). Aguilar et al. (1999) productividades reportados de 6,667 UE / Lh y
por cultivo de estado sólido (SSC) en relación con la producida por SmC. 1,275 UE / Lh para SSC y SmC, respectivamente, la actividad de tanasa
Sobre este tema hay pocos informes, pero son claramente máximo expresa intracelularmente es también 18 veces más en SSC que
en SmC, mientras que la actividad extracelular es 2,5 veces más alta en
SSC que en SmC.

Por el momento, las mayores aplicaciones comerciales de la tanasa se


* Autor correspondiente. Tel .: + 52-844-416-9213; Fax: + 52-844-439-
0511. dan en la elaboración de té instantáneo o de licor de bellota y en el
Dirección de correo electrónico: cag13761@mail.uadec.mx (CN Aguilar).

0023-6438 / $ 30.00 r 2004 Sociedad Suiza de Ciencia y Tecnología de Alimentos. Publicado por Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados. doi: 10.1016 / j.lwt.2004.04.002
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producción del ácido gálico ( Coggon, Graham, y Sanderson, 1975 ; Chae y Figura 1 presenta algunos ejemplos de taninos hidrolizables ( Mueller-Harvey,
Yu, 1983 ; Pourrat, Regerat, Pourrat, y Jean, 1985 ; García! IA-N! 2001 ).
ajera, 2002 ), Que es una A fin de mantener su capacidad de unión, galotaninos deben tener más
compuesto intermediario importante en la síntesis del fármaco de dos constituyentes de ácido gálico esterificado al núcleo de la glucosa.
antibacteriano, trimetroprim, utilizado en la industria farmacéutica ( Sittig, Los taninos hidrolizables pueden ser fácilmente hidrolizados bajo
1988 ) Y también en la industria alimentaria; ácido gálico es un sustrato condiciones ácidas o alcalinas suaves; con agua caliente o
para la síntesis química o enzimática de la galato de propilo, un potente enzimáticamente ( L! opez-
antioxidante. Además, la tanasa se utiliza como agente clarificante en R! IOS, 1984 ).
algunos vinos, zumos de frutas y de bebidas refrescantes con avour fl café Los taninos condensados ​o proantocianidinas ( Figura 2 ) son
( Lekha, Ramakrishna, y Lonsane, 1993 ). compuestos complejos constituidos por grupos avonoid FL (de 2 a 50) que
se consideran no ser hidrolizable. Sus principales componentes son
cianidina y delfinidina que son responsables por el sabor astringente de
En el caso de los vinos, es importante señalar que los principales taninos frutas y vinos ( Sánchez, 2001 ). El efecto negativo de los taninos en la
presentes son las catequinas y epi-catequinas, que puede ser un complejo alimentación animal se debe a su capacidad para unirse macromoléculas
con galactooligosacáridos catequinas y otros galoilo se derive. La cantidad haciéndolos indigerible ( Mendez, 1984 ). Los taninos forman complejo
de catequina en los vinos blancos es de alrededor de 10 a 50 mg / l, estable con enzimas y minerales necesarios para los microorganismos
mientras que en otros vinos que puede alcanzar 800 mg / l ( Ribereau-Gayon, ruminales. También son responsables de un sabor amargo, lo que reduce
1973 ). El cincuenta por ciento del color de los vinos es debido a la presencia considerablemente el consumo de alimento. Sin embargo, bajas
de los taninos, sin embargo, si estos compuestos se oxidan a quinonas por concentraciones de tanino en la alimentación han demostrado aumentar la
el contacto con el aire que se podría formar una turbidez indeseable, asimilación de nitrógeno en los rumiantes, haciendo mayores tasas de
presentando graves problemas de calidad. El uso de la tanasa puede ser crecimiento y producción de leche ( Nip y Burns, 1969 ).
una solución a estos problemas.

En la fabricación de cerveza, la tanasa se podría utilizar ya que los


taninos están presentes en cantidades bajas. Cuando las proteínas de la
cerveza son en considerablemente altas cantidades una turbidez 3. tanasa
indeseable es presentado por el cumpliendo con estos taninos. Este
problema podría resolverse con el empleo de la tanasa. La curtiduría ef fl Tanasa cataliza la descomposición de los taninos hidrolizables tales
uents contiene altas cantidades de taninos, principalmente polifenoles, que como ácido tánico, methygallate, galato de etilo,
son contaminantes peligrosos, por esta razón, el uso de la tanasa norte- galato de propilo y isoamylgallate. Una reacción típica de tanasa es
representa un tratamiento barato y efectivo para la eliminación de estos la escisión hidrolítica de (-) galato de epigallocatechin3-ol ( Fig. 3 ) ( Bajpai y
compuestos. Patil, 1997 ; Lekha y Lonsane, 1997 ).

Aunque tanasa está presente en plantas, animales y microorganismos,


que se produce principalmente por los microorganismos ( Ayed y Hamdi,
2002 ; Nishitani y Osawa, 2003 ).
2. Sustratos tanasa tabla 1 presenta algunos de los estudios microorganismos para la producción de
tanasa.
Los taninos se encuentran ampliamente distribuidos en diferentes producción y aplicación tanasa han sido ampliamente estudiados, los
partes (corteza, agujas, duramen, hierbas, semillas y flores) de plantas estudios relativos a la tensión de aislamiento y mejora, desarrollo de
vasculares. Son un grupo de complejos sustancias cadenas oligoméricas procesos y aplicación de tanasas han conducido a un gran número de
caracterizadas por la presencia de compuestos polifenólicos. Ellos tienen publicaciones y patentes cientí fi cos. Tabla 2 presenta algunas de las
un peso molecular mayor que 500, alcanzando valores por encima de patentes publicadas con respecto a la producción de tanasa y aplicación.
20.000 kDa. Una de las principales características de taninos es su
capacidad para formar complejos fuertes con proteínas y otras
macromoléculas, tales como almidón, celulosa y minerales. Los taninos se
clasifican fi en dos grupos principales: taninos hidrolizables y condensados
​( Lekha y Lonsane, 1997 ; Aguilar y Gutie' rrez-S! 4. La producción de tanasa

anchez, 2001 ). Los hongos filamentosos de la Aspergilo género han sido ampliamente
Los taninos hidrolizables están constituidos por varias moléculas de ácidos utilizados para la producción de tanasa. Aunque la producción de tanasa por Aspergilo
orgánicos, tales como gálico, elágico, ácidos digálico y Chebulic, esterificado puede ocurrir en ausencia de ácido tánico, este hongos tolera concentraciones
a una molécula de glucosa. Las moléculas con un núcleo de ácido quínico en de ácido tánico tan altas como 20% sin tener un efecto perjudicial tanto en
lugar de glucosa también se han considerado como los taninos hidrolizables. crecimiento y la producción de la enzima. Los estudios sobre
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OH

CO OH

O
OH
HO
OH OH

HO O
O CO O CO OH

HO OCO
HO
OH OH

HO OH
CO OO

CO OH
HO
(UNA)
OH

OH
O
HO
O

HO HO

O HO OH
OH
OCOCO
OH
OOOCO O
HO HO
O
O
OH C=O C=
(DO)

OH
(SEGUNDO)
OH OH HO OH OH

OH
HO
HO
HO COOH

HO COOH

HO
HO (MI)

COOH

HO
(RE)
OH

Fig. 1. Los taninos hidrolizables y algunos de sus constituyentes. A. galotanino, B. elagitanino, C. El ácido elágico, D. ácido Hexahydroxyphenic y E. El ácido gálico.

OH
OH OH
OH
OH
O HO
HO

OH O
HO OH OH
OH CO
OH OH

O OH
HO

HO OH O OH
OH

OH OH OH

O O OH HOOC O OH
HO HO

HO OH
OH OH

Fig. 2. Los taninos condensados ​o proantocianidinas. Fig. 3. reacción típica de tanasa.


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la producción de tanasa por Aspergilo se han llevado a cabo en cultivos de síntesis en fermentación en estado sólido. Sin embargo,
estado sumergido y sólidos. Dependiendo de la cepa y las condiciones de independientemente del mecanismo implicado, que ha sido bien aceptado
cultivo, la enzima puede ser constitutiva o inducible, que muestra que, debido a la compleja composición de los taninos hidrolizables,
diferentes patrones de producción. compuestos fenólicos tales como ácido algunos de sus productos de hidrólisis induce la síntesis de tanasa ( Aguilar
gálico, pirogalol, galato de metilo y ácido tánico induce la síntesis tanasa ( Bajpai et al., 2002 ). La adición de fuentes de carbono tales como glucosa,
y Patil, 1997 ). Sin embargo, el mecanismo de inducción no se ha fructosa, sacarosa, maltosa, arabinosa al medio de cultivo a
demostrado y hay cierta controversia sobre el papel de algunos de los concentraciones iniciales de 10 a 30 g / l mejora la producción de tanasa
componentes taninos hidrolizables en la síntesis de tanasa ( Deschamps, por Aspergillus niger. necesidades de nitrógeno pueden ser suministrados
OTUk, y Lebeault, 1983 ). Por ejemplo, el ácido gálico, uno de los por diferentes fuentes orgánicas e inorgánicas. El nitrógeno inorgánico
constituyentes estructurales de algunos taninos hidrolizables, tales como puede ser complementado como sales de amonio (sulfato, carbonato,
ácido tánico, se ha reportado como un inductor de la síntesis de tanasa cloruro, nitrato, fosfato monohidratado) o sales de nitrato (sodio, potasio o
bajo fermentación sumergida, mientras que reprime tanasa amonio). Otros requisitos nutricionales tales como potasio, magnesio, zinc,
fosfato y azufre se suministran como sales. A pesar de que A. niger

tabla 1
no requiere la suplementación cofactor, ácido fólico y pantoténico son
Los microorganismos utilizados para la producción de tanasa finalmente añadió al medio de cultivo. Un medio típico para la producción
de tanasa por
Las bacterias Bacillus pumilus
Aspergillus niger se presenta en Tabla 3 . la producción de tanasa en
Corynebacterium Bacillus
polymyxa sp cultivo sumergido por Aspergilo sp. se mejora a altas tasas de aireación.
Klebsiella pneumoniae Se ve favorecida al 30-33 valores de C y pH inicial de 3,5 a
Streptococcus bovis Selenomonas
ruminantium
Levadura Candida sp.
japonica Saccharomyces
Tabla 3
cerevisiae Mycotorula
medio de cultivo típico para la producción de tanasa por Aspergillus niger
hongos Aspergillus niger Aspergillus
oryzae Aspergillus japonicus
Constitucion Concentración inicial (g / l)
Aspergillus gallonyces Aspergillus
awamori Penicillium Los taninos 50
chrysogenum Rhizopus oryzae Glucosa 10
Trichoderma viride Fusarium (NUEVA HAMPSHIRE 4) 2 HPO 4 5
solani Mucor sp. K 2 HPO 4 1
MgSO 4 7H 2 O 1
ZnSO 4 7H 2 O 0.1
NaCl 0,005

Tabla 2
patentes publicadas relacionadas con la producción de tanasa o aplicación

Año Título Patente No.

1974 Conversión de té verde y el té natural deja usando tanasa USP3812266


1975 La producción de tanasa por Aspergilo JP7225786
1975 soluble de té en agua fría UKP1280135
1976 La extracción de té en agua fría GP2610533
1976 solubilización enzimática de crema de té USP3959497
1985 éster de ácido gálico (s) preparación EP-137601
1985 Preparación de ésteres de ácido gálico, por ejemplo galato de propilo EP-137601
1985 El tratamiento enzimático de la fuga del té negro EP135222
1987 Preparación de tanasa JP62272973
1987 Fabricación de tanasa con Aspergilo JP62272973
1988 La producción de tanasa por Aspergillus oryzae JP63304981
1988 Elaboración de tanasa por fermentación JP63304981
1989 Preparación de recubrimiento por pulverización de hormigón en el eje minería SUP1514947
1989 catequina antioxidante y preparación de ácido gálico JP01268683
1989 la producción de tanasa mediante el cultivo de Tamarii Aspergillus EP-339011
1989 Nuevo Aspergillus niger cepa B1 EP307071
1989 Tanasa proceso de producción por Aspergilo y su aplicación para obtener ácido gálico EP339011
1992 método de preparación tanasa JP4360684
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6.5. La actividad enzimática máxima se alcanza después de 1 a 3 días de Las células también pueden ser interrumpidas mecánicamente para recuperar
cultivo. la tanasa acotada. Recientemente, Ramírez-Coronel, Viniegra-González,
la producción de tanasa se ha estudiado sobre todo en fermentación Darvill y Taladro (2003) producido una tanasa extracelular por las culturas de
sumergida; Sin embargo, pocos estudios se han llevado a cabo también en estado sólido de
condiciones de fermentación en estado sólido. El salvado de trigo se ha Aspergillus niger. La enzima se purificó hasta homogeneidad a partir del
utilizado como apoyo y única fuente de nutrientes para la producción de caldo de cultivo libre de células por enfoque isoeléctrico preparativo y por
tanasa por FPLC usando intercambio aniónico y cromatografía de filtración de gel.
Aspergillus niger en SSC. soportes innert, tales como médula canne azúcar análisis SDS-PAGE, así como estudios de localización gel de puri fi tanasa
o espuma de poliuretano, impregnado con un medio de fi cultura Ned han ed indicaron la presencia de dos formas de la enzima.
sido también utilizado ( Aguilar et al., 2001a, b ). Dos diferencias principales
se encuentran cuando se sumergen y se comparan las condiciones de
estado sólido: (i) producción y la productividad rendimiento tanasa son más
altos en SSC que en SmC; (Ii) ubicación tanasa bajo condiciones de SSC es 6. inmovilización tanasa
principalmente extracelular, mientras que se limita al micelio en condiciones
SmC. Dado que una fracción de la tanasa producido permanece limitada a la
célula en condiciones de fermentación sumergida, la biomasa producida se
Es importante tener en cuenta que tales niveles de actividad más altos puede reciclar como biocatalizador. Varias estrategias pueden ser
en tanasa SSC sean de SMC han sido claramente asociada con la utilizadas para la concentración de tanasa o purificación e inmovilización
producción concomitante de actividades proteolíticas en el sistema último después de la extracción de la biomasa (fermentación sumergida) o del
cultivo ( Aguilar et al., 2002 ; Viniegra-Gonz! medio de cultivo (sumergido una fermentación en estado sólido). Con el fin
alez et al., 2003 ). También, en SSC la de aumentar la actividad específico de la preparación enzimática, tanasa
tanasa producida exhibe una mayor tolerancia a la amplia gama de pH y la debe concentrarse. Para eso, los métodos clásicos, tales como sal o
temperatura ( Lekha y Lonsane, 1994 ). Para la optimización de la precipitación con disolventes, ultrafiltración seguido de intercambio iónico o
producción de tanasa, Pinto, Bruno, Hamacher, Terzi, y Couri (2003) evaluado cromatografía de exclusión de tamaño, así como la extracción con
la relación tánico ácido / salvado de trigo, diferentes niveles de humedad, disolventes se pueden utilizar ( Lekha y Lonsane, 1994 ). Una vez que la
la adición de fuentes de nitrógeno adicionales, la adición de fosfato actividad de tanasa se ha concentrado y eventualmente purificado, que
suplementaria y la concentración de nitrógeno suplementario y el fosfato puede ser inmovilizado para reutilizar la preparación enzimática. Agarosa,
se añade al medio. Sus resultados mostraron que mejor medio fue con quitosán, alginato y diferentes materiales silíceos derivatizados se pueden
15% de ácido tánico, 37,5% de humedad inicial, utilizar para la inmovilización tanasa ( Sharma, Bhat, y Gupta, 2002 ).

1.7 sulfato de amonio y 2,0% de fosfato de sodio. La presencia de fosfato


mostró una gran importancia para la optimización, porque promovido Abdel-Naby, Sherif, El-Tanash y Mankarios (1999)
aumento en el nivel de síntesis y una disminución muy expresiva en el tanasa inmovilizada desde Aspergillus oryzae en diversos portadores, sin
tiempo de producción máxima, de 72 a 24 h de fermentación. El proceso embargo, que la enzima inmovilizada sobre chitosanglutaraldeheyde
optimizado promovido un aumento de 861% en el rendimiento y 2,783% en mostró la actividad más alta. La enzima unida retuvo 20,3% de la actividad
la productividad. fi específica originales. Por otra parte, Sharma et al. (2002) tanasa
inmovilizada desde A. niger en Concavalina A Sepharose-via bioaf fi
interacción nidad. La preparación inmovilizada era bastante estable a la
reutilización, no hubo pérdida de la actividad enzimática después de tres
5. extracción tanasa ciclos y retuvo actividad 81% incluso después de la sexta ciclo. la hidrólisis
del éster utilizando la enzima inmovilizada condujo a una conversión de
tanasa extracción depende en gran medida del sistema de fermentación 40% en ácido gálico, en comparación con el 30% obtenido con la enzima
utilizado. Desde tanasa es principalmente extracelular cuando se produce libre.
por SSC, que se puede extraer fácilmente con agua o un tampón. De dos a
tres volúmenes de la extracción agente se mezcla bien con la masa
fermentada y se prensan para obtener el extracto enzimático. Tanasa lugar
durante su producción por SMC depende del tiempo de cultivo ( Rajakumar
y Nandy, 1983 ). Es principalmente intracelular en el inicio del cultivo y se 7. Propiedades de tanasa
secreta más al medio de cultivo. Sin embargo, hasta el 80% de tanasa se
mantuvo acotada para el micelio cuando se alcanza el máximo titter tanasa La tanasa de algunas Aspergilo cepas tiene un peso molecular
general. tanasa acotada puede ser extraído después de la hidrólisis de la alrededor de 150-350 kDa. Su actividad y pH estabilidad son 5-6,0 y
pared celular con enzimas digestivas tales como quitinasa. 3,5-8,0, respectivamente, mientras que las temperaturas Optima de 35 C a
40 C han sido reportados. Tanasa es estable durante varios meses a 30 C.
tanasa producida por Penicillium cepas presentes
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características similares en términos de pH y actividad de temperatura y de tanasa es la producción de ácido gálico y galato de propilo ( Kar,
estabilidad. Cuando el ácido tánico se usa como sustrato Km valores de Banerjee, y Bhattacharyya, 2002 ). El anterior se utiliza en la industria
11.25mM y 0.048mM se obtuvieron con Aspergilo y Penicillium, respectivamente. farmacéutica para la síntesis de fármacos antibacterianos y en la industria
( Yamada, Iibuchi, y Minoda, 1968 ; Adachi, Watanabe, y Yamada, 1971 ; Libuchi, alimentaria como sustrato para la síntesis química de los conservantes de
Minoda, y Yamada, 1972 ; alimentos, tales como pirogalol y galatos. Por otro lado, galato de propilo
es un alimento antioxidante muy importante ( Sharma y Gupta, 2003 ).
Aoki, Shinke, y Nishira de 1976 ; Chae y Yu, 1983 ). Tanasa puede contribuir a plantar la degradación de la pared celular
Ramírez-Coronel, Viniegra-González, Darvill y Taladro (2003) producido mediante la escisión de algunos de los enlaces cruzados existentes entre
dos formas de tanasa por cultivo estado sólido con masas moleculares de los polímeros de la pared celular ( García-Conesa, Ostergaard, Kauppinen,
90 kDa y 180 kDa. La tanasa tenía un punto isoeléctrico de 3 8, un óptimo y Williamson, 2001 ). Tanasa puede usarse potencialmente para la
de temperatura de 60-70 C y un pH óptimo de 6 0. La especificidad de degradación de los taninos presentes en los uents ef fl de curtidurías, que
sustrato de la tanasa se determinó mediante análisis HPLC de sustratos y representan serios problemas ambientales ( Van de Lagemaat y Pyle, 2001 ).
productos de tanino. La enzima fue capaz de eliminar el ácido gálico de También, se puede utilizar en la preparación de alimentación de los
ambos taninos condensados ​y hidrolizables. secuencias internas fueron animales utilizando como soporte de cultivo los desechos miceliales de la
obtenidas de cada uno de los gel-purificado y formas de tanasa digerida fabricación de penicilina ( Nuero & Reyes, 2002 ).
con tripsina. Las secuencias de péptidos obtenidos a partir de ambas
formas fueron idénticos a secuencias dentro de una segundo- glucosidasa
de Aspergillus kawachii. La tanasa purificado se ensayó para determinar segundo-

9. Observaciones finales
actividad glucosidasa y se demostró para hidrolizar la celobiosa
cientemente fi ef. Sin embargo, hay segundo- Se detectó actividad de El uso de tanasa de diferentes fuentes microbianas puede tener
glucosidasa cuando la enzima se ensayó en presencia de ácido tánico. beneficios para diferentes áreas, tales como las industrias farmacéuticas
alimentos, bebidas, cosméticos y así como la descontaminación ambiental.
El efecto de iones metálicos sobre la actividad de tanasa se estudió Para ello, es necesario un mayor esfuerzo con el fin de desarrollar
recientemente por Kar, Banerjee y Bhattacharyya (2003) . Una mM Mg + 2 o procesos más productivos para la producción de tanasa. En este sentido,
Hg + actividad tanasa activado. Ba + 2, ca + 2, Zn + 2, Hg + 2 y Ag + actividad la fermentación en estado sólido presenta más ventajas que el tipo de
tanasa inhibido a una concentración de 1,0 mM y Fe + 3 y Co + 2 actividad cultivo sumergido. Se necesitan mejoras en la inmovilización tanasa para
tanasa inhibió completamente. Ag +, Ba + 2, el desarrollo del proceso más barato. Para ello, se deben desarrollar
preparaciones enzimáticas con características mejoradas catalíticos.
Zn + 2 y Hg + 2 inhibe competitivamente la actividad de tanasa. Entre los
aniones estudiados, 1 mM de Br o S 2 O 3 2

actividad tanasa mejorada. Tween 40 y la actividad de tanasa Tween 80


mejorada mientras que Tween 60 actividad tanasa inhibido. Lauril actividad
tanasa inhibido Triton X-100 y sulfato. Urea estimuló la actividad tanasa a
Expresiones de gratitud
una concentración de 1,5 M. Entre los quelantes elegidos para el presente
estudio, 1 mM de EDTA o 1,10- o- phenanthrolein inhibió la actividad de
CN Aguilar gracias CONACYT SEP (Proyecto:
tanasa. Dimetil sulfóxido y segundo- mercaptoetanol actividad tanasa
42244) y COAH-CONACYT (COAH-2002-
inhibido a una concentración de 1 mM mientras que el extracto de soja
CO1.2565 y 4652) por su apoyo financiero. El presente trabajo se llevó a
inhibe la actividad de tanasa en concentraciones que varían de 0,05% a
cabo en el marco del programa ECOS (M02A02). R. Belmares y A. Ram!
1,0% (w / v). Entre las fuentes de nitrógeno seleccionados de amonio
IrezCoronel son los destinatarios de un M.Sc. y becas de doctorado de
sulfato ferroso, sulfato de amonio, nitrato de amonio y la actividad tanasa
CONACYT-Me' xico, respectivamente.
mejorada de cloruro de amonio al 0,1% (w / v) de la concentración.

referencias

Abdel-Naby, MA, Sherif, AA, El-Tanash, AB, y Mankarios, A.


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Inducción y represión de los patrones hongos tanasa
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