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Coloración
Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el
contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias que
usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos
que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. Los diferentes
colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de
tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo), poblaciones celulares
(por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltar organelas
dentro de células individuales.
Tinción de Giemsa
Material
-Cubeta.
-Varillas paralelas.
-Pipetas Pasteur.
-Cronómetro.
-Colorante de Giemsa.
Procedimiento
-Cubrir las extensiones con solución extemporánea de Giemsa recién diluída (1/10 gotas con
agua destilada) y dejar actuar durante 10 minutos.
-Lavar las extensiones con agua destilada para eliminar los restos de colorante.
-Observar los frotis sanguíneos teñidos al microscopio óptico (Colocar un gota de aceite de
inmersión).
Tinción de Wright
Este colorante va a permitir suministrar un medio para estudiar la sangre y determinar las
variaciones y anormalidades de su estructura, forma y tamaño de eritrocitos, su contenido de
hemoglobina y sus propiedades de coloración. Esta coloración es conocida como poli
cromática debido a que se produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un
colorante acido (eosina) y otro básico (azul de metileno).
Materiales
-Cubeta.
-Varillas paralelas.
-Pipetas pasteur.
-Cronómetro.
-Colorante de Wright.
Procedimientos
-Cubrir las extensiones con un volumen conocido de solución de Wright durante 5-8 minutos.
Se producirá la fijación de la extensión.
-Añadir el mismo volumen de agua destilada, soplando ligeramente con la pipeta para
homogeneizar la mezcla, durante 3-4 minutos. Se producirá la tinción de la extensión.
-Lavar los frotis teñidos con agua destilada hasta eliminar los restos de colorante.
Es un líquido acuoso de color azul intenso, utilizado en la laboratorio clínico para reencuentro
de reticulocitos (son eritrocitos no nucleado e inmaduros que contiene R.N.A y que continúan
sintetizando hemoglobina después de la pérdida del núcleo.
Materiales:
-Microscopio de 100X
-Portaobjetos
-Tubo comercial con azul de crecil brillante al 1% o azul de metileno
-Pipeta pasteur
Procedimientos:
Anticoagulantes:
Se debe tener en cuenta que los vasos sanguíneos son conductos que transportan sangre a
través de todo el organismo humano. Si se produce una herida en dichos vasos, la sangre
comenzará a brotar rápidamente, por fuera de su cauce normal. Para evitar el desangramiento
(es decir, que la sangre fluya de forma ininterrumpida por fuera de los vasos sanguíneos), el
organismo reacciona a través de sustancias que coagulan la sangre, es decir, la convierten de
líquida a sólida, para “cerrar” la herida. Entonces, se denomina coagulación, al proceso por el
cual la sangre se solidifica, primero en apariencia de gel, hasta solidificarse completamente. La
sustancia que interviene en el proceso de coagulación es una proteína (fibrinógeno) que se
encuentra en la sangre, que al experimentar un cambio químico (como consecuencia de una
lesión), convierte la sangre en insoluble.
1-Anticoagulantes de acción indirecta: Este tipo de anticoagulantes son aquellos que por
medio de su intervención con otras proteínas alteran el funcionamiento de las cascadas de
coagulación, esta acción también sucede cuando actúan en otras vías metabólicas.
Entre los anticoagulantes de acción indirecta se encuentran: • Inhibidores medianos de
antitrombina III • Inhibidores de síntesis de factores de coagulación • Derivados del dicumarol
• Heparina no fraccionada • Heparina de bajo peso molecular • Danaparoide sódico
2-Anticoagulantes de acción directa: Estos anticoagulantes son aquellos que son capaces de
inhibir la cascada de la coagulación. Entre los anticoagulantes de acción directa, se encuentran:
• Inhibidores directos de trombina • Hirudina • Argatroban
-EDTA: Ácido etilendiaminotetraacético. Actúa por efecto quelante sobre el ión calcio, lo que
impide la formación de los complejos procoagulantes. Útil para recuentos celulares, sobre
todo en auto analizador, tiene la ventaja de permitir la realización del hematocrito y de frotis
sanguíneo hasta dos horas después de la extracción de la muestra, también impide la
aglutinación de las plaquetas.
-ACD: Se usa en bancos de sangre para conservar las unidades de sangre y estudios
metabólicos eritrocitarios.
-Oxalato: Forma de sal sódica, potásica o amónica, actúan precipitando los iones calcio. El
oxalato altera las concentraciones de los componentes del plasma y mientras más concentrado
se utilice, mayor es la alteración, por ello no debe utilizarse por encima de los 3 mg/ml de
sangre.
-Tirofiban: Asociado a la heparina es más efectivo que la heparina sola en pacientes con
síndromes coronarios isquémicos y es eficaz reduciendo complicaciones isquémicas asociadas
a angioplastias transluminales percutáneas.
-Warfarina: Estos medicamentos presentan ventaja de poder ser administrados por vía oral y
de poseer un efecto prolongado en el tiempo, con gran variabilidad interindividual, por ello
necesitan controles periódicos para su ajuste terapéutico.
Importancia
2. Permite el estudio de las estructuras internas de la célula bacteriana, tales como paredes
celulares, vacuola o cuerpos celulares.
3. permite el empleo de mayores amplificaciones