Microbiología

RIDA®COUNT
Para la detección y enumeración de microorganismos

Manual de Uso Rida Count

Apertura de los sobres:
Abra el sobre de aluminio con tijeras. Retire las placas que va a utilizar. Cierre
el sobre. Almacene el sobre en el refrigerador (2 – 8ºC).

Aplicación de la muestra:
1 Levante el film transparente
2 Siembre 1 ml de la dilución de muestra sobre el pad, utilizando una pipeta
3 Cubra con el film. Se puede cubrir sin que se haya absorbido totalmente el
inóculo. c)

Contacto directo:
1 Levante el film transparente. Coloque 1 ml de solución salina estéril sobre el
pad y cubra con el film. Deje reposar por 10 - 30 minutos. a)
2 Levante el film transparente; este puede retirarse totalmente. Debe
conservarse.
3 Haga contacto con el pad sobre la superficie a analizar. Es conveniente
realizar una sanitación posterior del área muestreada.
4 Cubra con el film.

Hisopado:
1 Levante el film transparente. Coloque 1 ml de solución salina estéril sobre el
pad y cubra con el film. Deje reposar por 10 - 30 minutos. a)
2 Utilizando un hisopo seco, hisope la superficie seleccionada
3 Levante el film transparente. Siembre toda la superficie del pad con el hisopo.
4 Cubra con el film.

Filtración:
1 Levante el film transparente. Coloque 0.8 ml de solución salina estéril sobre
el pad. a)
2 Coloque la membrana que se utilizó para realizar la filtración de la muestra
sobre el pad.
3 Cubra con el film. c)

Ambientales:
1 Levante y remueva completamente el film transparente. Este debe
conservarse
2 Exponga la placa con el pad hacia arriba durante hasta 30 minutos.
3 Coloque 1 ml de solución salina estéril sobre el pad. a)
4 Cubra con el film que se ha conservado.
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RIDA®COUNT
Incubación:
Incube las placas durante el tiempo y la temperatura especificadas: b)
Recuento de Aerobios: 35ºC 48 hs
Recuento de Coliformes: 35ºC 24 hs Recuento de E. coli: 35ºC 24-48 h
Recuento de Staph. Aureus: 35ºC 24 hs
Recuento de Salmonella: 35ºC 24 hs
Recuento de Hongos y Levaduras: 25ºC 2-5 días

a) Se puede utilizar agua destilada, solución fisiológica con 0.1 % de peptona. Recomendamos
agua destilada estéril para Hongos y Levaduras.
b) Se pueden apilar hasta 30 placas en la estufa.
c) Haga presión sobre el film transparente para que se adhiera al adhesivo de la base. No
preocuparse si quedan arrugas porque no interfieren en el recuento

Recuento de colonias
Cuente las colonias características que crecen en la superficie con un
marcador o con un contador de colonias. Cuente de 30 a 300 colonias. Si no se
puede contar en todo el pad, cuente las colonias en alguna de las 20 áreas
de la grilla, el recuento debe multiplicarse por el factor correspondiente.
Recuento de Aerobios: Cuente todas las colonias rojas. En caso de colonias
confluentes (recuentos altos) se recomienda hacer diluciones de la muestra.
Recuento de Coliformes: Cuente las colonias azules a verdes.*
Recuento de Hongos y Levaduras: Cuente todas las colonias.*
Recuento de Staphylococcus aureus: Cuente las colonias medianas
(aprox. de 1 mm) color azul - verde y azul -verde claro que aparecen a las 24
hs de incubación. Si no aparecen colonias verdes luego de 24 hs de incubación
la muestra se considera negativa para Staph. aureus *. Marque las colonias
verdes e incube la placa por 6 horas mas. Aquellas colonias verdes que
perdieron su coloración luego de 30 horas son contadas como Staph. aureus.
Recuento de Salmonella: Cuente las colonias puntiformes negras. No deben
No deben contarse las colonias marrones ó negras difusas.
Recuento de E. coli: Cuente las colonias azules.*

*Puede aparecer toda la placa coloreada dentro de las 5 hs de incubación debido a enzimas de
los alimentos. Recomendamos hacer mas diluciones de la muestra en dichos casos. Debe
tenerse especial cuidado en los recuentos de Coliformes de carne cruda, vegetales frescos ó
productos de fermentación ácido-láctica; recuentos de Hongos y Levaduras / Staph. aureus en
carne cruda y vegetales frescos; recuento de E. coli en bivalvos.

Descarte de las placas:

Descarte las placas utilizadas luego de esterilizarlas en autoclave ó de hervirlas
en agua caliente.

Picado de colonias:
Levante el film transparente y pique las colonias seleccionadas con ansa para
estudios posteriores.
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RIDA®COUNT

Precauciones:
Utilice las placas Rida Count luego de leer este manual.

Las placas Rida Count no están diseñadas para diagnóstico clínico,

solamente para recuentos en alimentos.

Para confirmar la presencia de Staphylococcus aureus y Salmonella, se

deben realizar ensayos bioquímicos a partir del aislamiento.

Si las placas presentan coloración previo a su uso, no deben utilizarse.

Ocasionalmente aparecen pequeñas partículas marrones y algunas fibras
del pad desprendidas; ellos no interfieren en el recuento.

Las placas usadas tienen una gran población de microorganismos.

Esterilícelas rápidamente antes de descartarlas.

Almacene los sobres de placas Rida Count a 2 – 8 ºC. Luego de

abierto el sobre, las placas deben utilizarse dentro del mes.