INFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO

Bioquímica y laboratorio
Informe No.3, (09/10/2018)
Instituto Tecnológico Metropolitano

LABORATORIO EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN

DE LÍPIDOS

Diego León Castaño Muñoz

Sandra Milena Bolívar Cuartas
Yiceth Carina Mosquera Bonilla
Instituto tecnológico metropolitano
Correo: diegocastano76395@correo.itm.edu.co
zamiboku@gmail.com
yicethmosquera232789@correo.itm.edu.co

Resumen:. Los lípidos son moléculas que componen las membranas biológicas, son fuentes de almacenamiento de energía y carbono,
reguladores del metabolismo intracelular, reguladores hormonales, entre otras funciones. Los lípidos son sustancias que al ser no polares se
pueden extraer de células y tejidos mediante disolventes orgánicos. La finalidad de la práctica es extraer y cuantificar los lípidos presentes en la
yema de huevo, en donde se hacen diferentes pruebas para llegar a esto entre estas la prueba de solubilidad y emulsión de los lípidos y la
extracción de los lípidos y la identificación de éstos en el sobrenadante específicamente triglicéridos y colesterol.

Palabras clave:

1. Introducción Las funciones de los lípidos también son variadas.

El huevo, es desde la antigüedad, un alimento muy
importante para el hombre y su consumo es casi
generalizado en todo el mundo en la actualidad. El
huevo está formado por tres constituyentes básicos: la
cáscara, yema y clara[1]. La cáscara representa en
promedio alrededor del 10% del huevo, la clara
alrededor del 57% y la yema alrededor de 1/3 (33%)
[2].
El huevo contiene aproximadamente un 11 % de
fracción grasa (5 g por huevo de 50 g) depositada
exclusivamente en la yema. De la fracción grasa el 66
% son triglicéridos, un 28 % son fosfolípidos y un 5 %
colesterol. Del porcentaje de ácidos grasos (AG) en el
huevo entero, un 3 % son AG saturados (AGS), un 4
% son AG monoinsaturados (AGMI) y un 2 % son
poliinsaturados (AGPI), del cual un 1,4 % corresponde
al ácido linoleico esencial. En cuanto al colesterol, el
porcentaje de este en el es de 410 mg por 100 g de
huevo entero (205 mg en un huevo de 50 g) y se
deposita en la yema. [3]
Los lípidos son un grupo heterogéneo de
biomoléculas. Se consideran lípidos moléculas como
los fosfolípidos, los esteroides, los carotenoides, las
grasas y los aceites, que se diferencian mucho en
cuanto a estructura y función.
Diversas clases de moléculas lipídicas (p. ej ., los
fosfolípidos y los esfingolípidos) son componentes
estructurales importantes de las membranas celulares.
Otro tipo, las grasas y los aceites (ambos son
triacilgliceroles), almacenan energía de modo eficaz.
Otras clases de moléculas lipídicas son señales
químicas, vitaminas o pigmentos. Por último, algunas
moléculas lipídicas que se encuentran en las cubiertas
externas de varios organismos tienen funciones
protectoras o impermeabilizantes. [4]
El colesterol es el tercer tipo de lípido en importancia
cuantitativa en las membranas de las células animales
donde contribuye al mantenimiento de la fluidez de
membrana y establece interacciones con ciertas
proteínas de membrana que pueden regular la
actividad de éstas. A diferencia de otros lípidos, el
colesterol se distribuye más o menos en la misma
proporción en las dos capas de la membrana y, junto a
esfingolípidos, estructura las balsas de membrana
(microdominios de la membrana enriquecidos en
colesterol y ciertos esfingolípidos en los que abundan
proteínas implicadas en funciones fundamentales para
la célula como la transducción de señales o la
endocitosis).
Además, el colesterol es precursor biosintético de las
hormonas esteroides, de la vitamina D y de los ácidos
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biliares glosario; abunda como tal en la bilis y en las  Separe el sobrenadante para el análisis de
lipoproteínas plasmáticas se encuentra tanto libre colesterol y triglicéridos.
como esterificado con ácidos grasos de cadena larga.
[5] Identificación de lípidos
En este informe, se presentaran y analizaran los Colesterol:
resultados de la extracción y cuantificación de los
ácidos grasos.  Adicionar 2 ml de sobrenadante en un tubo
de ensayo más 20 gotas de anhídrido
2. Parte experimental acético y 4 gotas de ácido sulfúrico
2.1 Materiales y equipos concentrado. La aparición de una coloración
- Mortero verde es indicadora de la presencia de
- Beakers, Erlenmeyer, probetas colesterol.
- Tubos de ensayo
- Balanza Triglicéridos:
- Embudo  Adicionar 2 ml de sobrenadante en dos tubos
- Baño María
de ensayo.
- Agitador
- Papel filtro  Adicionar 5 gotas de Sudan III a un tubo y 5
- Mortero
gotas de tinta roja al otro tubo.
- Beakers, Erlenmeyer, probetas
- Tubos de ensayo  Agitar y dejar reposar.
- Balanza
- Embudo  Observar y anotar los cambios.
- Baño María
- Agitador 3. Datos
- Papel filtro
2.2 Procedimiento
Prueba de solubilidad y emulsificación

 Adicionar 2ml de agua en un tubo de ensayo

y 2ml de solvente orgánico (acetona,
cloroformo, éter) en otro tubo de ensayo.
 Adicionar 1ml de aceite a cada tubo y agitar
con fuerza.

 Dejar reposar en la gradilla y observar cada

tubo. Anotar las observaciones.
Extracción de lípidos a partir de yema de huevo
 Separe una yema de huevo en un beaker de
100ml.

 Adicionar 15ml de una mezcla de éter etílico

(etanol: éter 2:1). Agite suavemente con
varilla de vidrio para homogenizar.
 Adicionar lentamente sin dejar de agitar 15ml
de acetona. Se debe observar una separación
Imagen 1. Prueba de solubilidad y emulsificación
de la solución en dos fases, la disuelta
(colesterol + triglicéridos) y un
precipitado insoluble o coágulo.
 Centrifugar a 3000rpm durante 5 min.

Imagen 2. Resultado de la extracción de lípidos a partir de yema de
huevo.
Imagen 3.Identificación de lípidos: Colesterol
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Imagen 4. Identificación de lípidos: Triglicéridos prueba con tita
roja
Imagen 5. Identificación de lípidos: Triglicéridos prueba con Sudan
III
4. Profundización
- ¿Cuál es la importancia de la emulsificación
de lípidos en el organismo y como se da este
proceso en condiciones fisiológicas
normales?
Esto es importante, ya que, las grasas por sí solas no
son fáciles de degradar, y se tienen que desintegrar
para que se pueda realizar más fácilmente el proceso
de digestión, con ayuda de enzimas digestivas. [6]
Los lípidos son moléculas muy apolares y las enzimas
presentan ciertas dificultades para metabolizarlos en
bruto. Para perder esa apolaridad, los ácidos grasos son
emulsionados por las sales biliares en el intestino; las

sales biliares son moléculas anfipáticas que se orientan
en una disposición especial, formando micelas, en las
que la parte polar queda hacia la parte acuosa externa
y la apolar se orienta hacia el interior. Esta estructura
permite que las enzimas se puedan insertar entre las
sales biliares, posibilitando la digestión de los lípidos.
[7]
- ¿Cuál es la importancia de la Lecitina en el
proceso de emulsificación?
La característica química más importante de la lecitina
es su poder emulsionante. Las moléculas de
fosfolípidos poseen una parte polar hidrofílica y otra
apolar lipofílica, responsable por el poder de reducción
de la tensión interfacial entre una mezcla aceite/agua
por ejemplo. Ese poder emulsionante es utilizado en
aplicaciones como bebidas, margarinas, aderezos, etc.;
permitiendo la obtención de emulsiones tipo
aceite/agua o agua/aceite. [8]
- Qué son los quimiolicrones, las HDL, VLDL
y LDL
Los quilomicrones son lipoproteínas de tamaño
considerable, formadas por un gran núcleo de
triacilglicéridos y ésteres de colesterol, así
como por colesterol libre y fosfolípidos que
se anclan en la superficie (otorgando polaridad).
Los quilomicrones, al estar constituidos en su
mayoría por triacilglicéridos, tienen una densidad
muy baja. Estas partículas entran en la linfa, y
de ahí se dirigen a la circulación; a través de
la arteria porta llegan al hígado, donde se van a
reestructurar las lipoproteínas para enviarlas a su
destino. Transportan lípidos, así como vitaminas
liposolubles y colesterol. [7]
HDL = Lipoproteinas de alta densidad
LDL = lipoproteína de baja densidad
VLDL= Lipoproteinas de muy baja densidad
En la extracción de lípidos a partir de yema de
huevo, explique la fundamentación bioquímica que
permite la separación de lípidos
Los lípidos pueden clasificarse en lípidos neutros,
como acilgliceroles y ésteres de colesterol, y lípidos
anfipáticos, los cuales están compuestos por una
porción polar y otra no polar, como fosfolípidos y
colesterol libre. Dada su estructura molecular, son
sustancias poco solubles en solventes polares, lo que
permite aislarlos de los tejidos fácilmente utilizando
solventes orgánicos.
Para separar los lípidos de una muestra se utilizan
habitualmente técnicas cromatográficas, como la TLC
o cromatografía en capa delgada. La misma puede
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realizarse en forma monodimensional o
bidimensional, dependiendo de la naturaleza del
compuesto a separar.
¿Qué tipo de lípidos quedan en cada fase
(sobrenadante y precipitado) y que características
bioquímicas tienen? Explique su respuesta
El precipitado (que contiene cefalina y lecitina) los
cuales son fosfolípidos mientras que el sobrenadante
sobrenadante contiene las grasas y el colesterol que
son lípidos saponificables e insaponificables
respectivamente.
Investigue y explique el fundamento bioquímico de
la identificación de colesterol y triglicéridos que se
realizó en la práctica
El colesterol reacciona con anhídrido acético y ácido
sulfúrico concentrado. Se produce una pérdida de agua
y una protonización del colesterol. Se constituyen en
medio anhidro polímeros de hidrocarburos no
saturados de intenso color verde azulado. [9]
La técnica del Sudán III es un método utilizado
generalmente para demostrar la presencia de grasas
mediante tinción de triglicéridos, aunque también tiñe
otros lípidos. Pertenece al grupo de colorantes
indiferentes, que son aquellos que no tienen afinidad
por estructuras ácidas o básicas. Son insolubles en el
agua y tiñen aquellas sustancias que tienen un poder
de disolución superior al del líquido empleado para
preparar la solución colorante. El reactivo Sudán III es
utilizado fundamentalmente para detectar la presencia
de lípidos en una muestra, los cuales se colorean con
dicho reactivo. Esto se debe a que el compuesto Sudán
III, por su baja polaridad, es más soluble en los lípidos
que en el solvente utilizado para su disolución (etanol).
Ello gracias a las interacciones intermoleculares de
tipo puente H y de London (cadena hidrocarbonada)
entre los lípidos y dicho reactivo. [10]
5. Conclusiones
Partiendo de la prueba de solubilidad y
emulsión, se logró corroborar que los lípidos
no son solubles en agua, en donde este
muestra una emulsión con el agua mientras
que en acetona, la cual es un solvente
orgánico, si pudo disolverse, esto debido a las
propiedades que estos presentan.
Por otro lado, se logró hacer la extracción de
lípidos en donde la forma de confirmar la
presencia de este es hacerle las pruebas de
identificación de triglicéridos y colesterol en
el sobrenadante, las cuales fueron positivas
según los parámetros de identificación.
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6. Referencias

[1] «Foodsafety,» [En línea]. [Último acceso: 30 30 2019].

[2] G. H. A, «Huevos y Ovoproductos,» Composición y Calidad

Nutritiva de los alimentos, nº 2, 2010.

[3] BARROETA, «El huevo y sus componentes como

alimentofuncional,» Instituto de Estudio del Huevo.

[4] McKee, Bioquímica. Las bases moleculares de la vida, Mc

Graw Hill Education.

[5] [En línea]. Available:

http://biomodel.uah.es/model2/lip/colesterol-func.htm.
[Último acceso: 30 05 2019].

[6] Pedraza, «Slideshare,» [En línea]. Available:

https://es.slideshare.net/MarisolPedrazaa/digestin-de-las-
grasas. [Último acceso: 30 05 2019].

[7] «Studocu,» [En línea]. Available:

https://www.studocu.com/es/document/universidad-ceu-san-
pablo/bioquimica-metabolica/apuntes/t10-digestion-y-
absorcion-de-lipidos/2450273/view. [Último acceso: 30
mayo 2019].

[8] «Alimentacion,» [En línea]. Available:

http://www.alimentacion.enfasis.com/articulos/16222-
lecitina-soja-el-emulsionante-versatil. [Último acceso: 30
mayo 2019].

[9] «Química Biológica I TP 3 LÍPIDOS,» [En línea]. Available:

http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wp-
content/uploads/2010/08/TP-LIPIDOS.pdf.

[10] J. NAVAS, «Slideshare,» [En línea]. Available:

https://es.slideshare.net/CindyNavasPaladines/determinacin-
cualitativa-de-lipidos. [Último acceso: 30 mayo 2019].
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