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Transcrição e Tradução
Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini
E-mail: marilanda_bellini@yahoo.com
Blog: http://marilandabellini.wordpress.com
Dogma Central
Replicação
RNA
(Tradução)
RIBOSSOMO
PROTEÍNA
2
Gene
Genética – Mendeliana
Porção do cromossomo que determina um único caráter (fenótipo).
• Éxons:
São as sequências de DNA que se expressam, codificam
um gene.
Splicing
Disciplina:
Fundamentos de Genética e Biologia Molecular
Turma: Fisioterapia (1o Ano)
Transcrição
Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini
E-mail: marilanda_bellini@yahoo.com
Blog: http://marilandabellini.wordpress.com
TRANSCRIÇÃO
Expressão gênica
RNA
Complementar a Fita
Molde de DNA
Semelhante a fita de
DNA não-molde
A=U
•Antiparalelismo
•Síntese 5’ 3’
RNA polimerases
Proteínas
Ligam-se e
Processam
DNA
Síntese
mRNA.
RNA polimerases
Proteínas
•RNA-polimerase (RNApol):
Ligam-se e
•Não necessita de iniciador (primer)
Processam
• Funções
DNA reconhecem sequências específicas
de DNA e se ligam a elas
Síntese desnaturam DNA expõem a
seqüência de nucleotídeos a ser
mRNA.
copiada
mantém estável a dupla fita aberta
mantém estável fita híbrida
DNA:RNA
terminam síntese
restauram DNA imediatamente
após à da síntese
RNA POLIMERASE
RNA polimerase específica síntese de RNAs específicos:
• RNA mensageiro
•carrega a informação copiada do DNA sob a forma de
inúmeros triplets (trincas) cada um especificando um
aminoácido.
• RNA transportador
•decifra o código representado pelo mRNA.
• RNA ribossômico
•associa-se com uma série de proteínas para formar os
ribossomos.
RIBOSSOMOS
Complexo RNA-proteína
Etapas:
1. Início:
2. Alongamento:
3. Término:
Transcrição
Etapas:
1. Início:
ligação do complexo de iniciação e da
RNA polimerase à região promotora
2. Alongamento:
3. Término:
Transcrição
Início (mRNA)
+1
Fita molde 3’ 5’
ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ 3’
+1
TBP
Fita molde 3’ 5’
ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ 3’
+1
TBP
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ 3’
+1
TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ 3’
+1
TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ TFIIF 3’
+1
RNA pol II
TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
Fita não-molde
TATAAAA
5’ TFIIF 3’
+1
RNA pol II
TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
TFIIE
TATAAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF 3’
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 )TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
5) RNA polimerase II
6) TFIIE = se liga ao complexo de iniciação e ao DNA, após o
ponto de início da transcrição
Transcrição
Início (mRNA)
-50 -30 -10 +10 +30
+1
RNA pol II
TBP TFIIB
Fita molde 3’ 5’
TFIIA ATATTTT
TFIIE
TATAAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF 3’
1) TFIID = Liga-se a TATA Box
TBP + proteinas associadas
2 )TFIIA
3) TFIIB
4) TFIIF = desespirilização do DNA
5) RNA polimerase II
6) TFIIE = se liga ao complexo de iniciação e ao DNA, após o
ponto de início da transcrição
Transcrição
Início
-50 -30 -10 +10 +30
+1
RNA polimerase
Fita molde 3’ 5’
ATATTTT
TATAAAA
Fita não-molde
5’ 3’
Complexos de transcrição
Fator – Promotor
~
RNA polimerases (I, II e III)
+
Fatores específicos de cada enzima
Ínicio da transcrição
Transcrição
Etapas:
1. Início:
2. Alongamento:
Adição de nucleotídeos à cadeia
polipeptídica, complementando a fita
molde de DNA.
3. Término:
Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
RNA pol II
TBP 5’
3’
TFIIB ACGCTGTA
Fita molde
TFIIA ATATTTT TTATTT
TFIIE
TATAAAA AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
TGCGACAT 3’
Bolha de transcrição
Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’ 3’
RNA pol II
TBP 5’
3’
TFIIB ACGCTGTA
Fita molde
TFIIA ATATTTT UGCGA TTATTT
TFIIE
TATAAAA AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
TGCGACAT 3’
Bolha de transcrição
Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’ 3’
RNA pol II
TBP 5’
3’
TFIIB ACGCTGTA
Fita molde
TFIIA ATATTTT UGCGACAU TTATTT
TFIIE
TATAAAA AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
TGCGACAT 3’
Bolha de transcrição
Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’ 3’
RNA pol II
TBP 5’
3’
TFIIB ACGCTGTA
Fita molde
TFIIA ATATTTT UGCGACAU TTATTT
TFIIE
TATAAAA AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
TGCGACAT 3’
CTTATT
Bolha de transcrição
GAAUAA
GAATAA
Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
5’ 3’
Molécula de RNA precursor
5’
TTATTT
TBP TFIIB
Fita molde 3’ AAUAAA
TFIIA ATATTTT GTACGCTG
TFIIE
TATAAAA CATGCGAC AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
3’
Bolha de transcrição
Transcrição
Alongamento
-50 -30 -10 +10 +30
+1
Molécula de RNA precursor
5’ 3’
7 MG
5’
TTATTT
TBP TFIIB
Fita molde 3’ AAUAAA
TFIIA ATATTTT GTACGCTG
TFIIE
TATAAAA CATGCGAC AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
3’
2. Alongamento:
3. Término:
Reconhecimento da sequência de término;
Complexo de iniciação é desligado do DNA;
RNApol é desligada do DNA;.
As fitas do DNA são totalmente renaturadas;
Adição de cauda de poli-A no RNA nascente.
Transcrição
Término
-50 -30 -10 +10 +30
+1
Molécula de RNA precursor
5’ 3’
7 MG
5’
TTATTT
TBP TFIIB
Fita molde 3’ AAUAAA
TFIIA ATATTTT GTACGCTG
TFIIE
TATAAAA CATGCGAC AATAAA
Fita não-molde
5’ TFIIF
3’
+1
Molécula de RNA precursor 7 MG
5’ 3’
5’
AAUAAA
TBP TFIIB
Fita molde 3’
TFIIA ATATTTT GTACGCTGTAAACGAATAAA
TFIIE
TATAAAA CATGCGACATTTGCTTATTT
Fita não-molde
5’ TFIIF
3’
+1
Molécula de RNA precursor 7 MG
5’ 3’
5’
AAUAAA
TBP TFIIB
Fita molde 3’
TFIIA ATATTTT GTACGCTGTAAACGAATAAA
TFIIE
TATAAAA CATGCGACATTTGCTTATTT
Fita não-molde
5’ TFIIF
3’
Clivagem Endonucleotídica
poli-A endonuclease/polimerase
Transcrição
Término
-50 -30 -10 +10 +30
+1
Molécula de RNA precursor 7 MG
5’ 3’
AAUAAA
Fita molde 3’ 5’
...ATATTTT... ...GTACGCTGTAAACGAATAAA...
Fita não-molde5’
TATAAAA CATGCGACATTTGCTTATTT 3’
5’ 3’
7 MG CAUGCGACAUUUGCAAUAAA
AAUAAA AAAAAAAAAAAAAAAAAAA
Cauda de poli-A
Estabilidade
Transporte do núcleo para Citoplasma
RNA polimerase
• É essencial na transcrição...
(1ª etapa da expressão gênica)
VIDA
c
Tipos de RNA
RNA ribossômico
RNA mensageiro
RNA transportador
Correlação Clínica
Processamento do RNA
• Reações de Recomposição – Splicing
• Clivagem íntrons
• Ligação éxons
Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• rRNA
– Autocatalítica
• Transferências de ligação fósfodiéster.
• Extremidade G - 3’-OH
Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• tRNA
– Atividade de endonucleases e ligases
Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• tRNA
– Atividade de endonucleases e ligases
• Endonuclease de recomposição;
• Cliva extremidades dos íntrons.
Processamento do RNA
Reações de Recomposição
• tRNA
– Atividade de endonucleases
e ligases
• Endonuclease de
recomposição;
– Cliva extremidades dos
íntrons.
• Ligase:
– Une as extremidades dos
éxons.
Processamento do RNA
Reações de Recomposição
Processamento
Splicing
Disciplina:
Fundamentos de Genética e Biologia Molecular
Turma: Fisioterapia (1o Ano)
Tradução
Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini
E-mail: marilanda_bellini@yahoo.com
Blog: http://marilandabellini.wordpress.com
TRADUÇÃO
• mRNA proteína.
• Liga-se quimicamente à um
aminoácido específico;
Molécula de mRNA
codon
5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
Gly
Phe His
Glu
Met
Ala
Cys Asp
5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
His
Gly
Met Phe
Ala
Cys
Asp Glu
5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
Ile
Met His
Ala Gly
Cys
Asp
Glu
Phe
5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
Lys
Met
Ala Ile
Cys His
Asp
Glu
Phe
Gly
5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
Met
Ala Lys
Cys
Asp Ile
Glu
Phe
Gly
His
5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
Met
Ala
Cys Lys
Asp
Glu
Phe
Gly
His
Ile
5’ 3’
AU G G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUA
Met
Ala
Cys
Asp Leu
Glu
Phe
Gly
His
Ile
Lys
5’ 3’
G CAU G C GAC GAAU U C G GACACAUAAAA
Met
Ala
Cys
Asp Met
Glu
Phe
Gly
His
Ile
Lys Leu
5’ 3’
U G C GAC GAAU U C G GACACAUAAAAU UA
Met
Ala
Cys
Asp
Glu Asn
Phe
Gly
His
Ile
Lys
Leu Met
5’ 3’
GAC GAAU U C G GACACAUAAAAU UAAU G
Met Ala
Cys
Asp
Glu
Phe Pro
Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met Asn
5’ 3’
GAAU U C G GACACAUAAAAU UAAU GAAC
Met Ala Cys
Asp
Glu
Phe
Gly Gln
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn Pro
5’ 3’
U U C G GACACAUAAAAU UAAU GAAC C CA
Met Ala Cys Asp
Glu
Phe
Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn
Pro Gln
5’ 3’
G GACACAUAAAAU UAAU GAAC C CACAA
Met Ala Cys Asp Glu
Phe
Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn
Pro
Gln
5’ STOP 3’
5’ STOP 3’
AUAAAAU UAAU GAAC C CACAAUAAAAA
Ala Cys Asp Glu Phe
Met Gly
His
Ile
Lys
Leu
Met
Asn
Pro
Gln
5’ STOP 3’
AUAAAAU UAAU GAAC C CACAAUAATAC
Ala Cys Asp Glu Phe
Met Gly
His
Ile
Gln Lys
Pro Leu
Asn Met
5’ 3’
AUAAAAU UAAU GAAC C CACAAUAATAC
Tradução
1 gene 1 proteína
mRNA Citoplasma
Ribossomo + tRNA
Códons + Anticódons = aminoácidos
Proteína
Referências
• 1) LEWIS, B. Genes VII. 7a ed. Artmed Editora, 2001.