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• Exercícios.
A base molecular
da informação
genética
Compactação do
material genético
(eucariontes)
• Eucromatina:
– Menos condensada
– Trancricionalmente
ativa
DNA RNA PROTEíNA
Gene
• Definição molecular: sequência completa de nucleotídeos
necessária e suficiente para a síntese de um polipeptídeo ou de uma
molécula de RNA estável.
• Composição:
– Regiões reguladoras (promotor, terminador,...)
– Região codificadora
a montante a jusante
TRANSCRIÇÃO
RNA polimerase
5’ 3’
Fases da
transcrição
• Reconhecimento
do promotor
• Iniciação
• Alongamento
• Terminação
TRANSCRIÇÃO EM
PROCARIOTOS
Procariotos
• Transcrição e tradução simultâneas
• Subunidades da RNA polimerase (E. coli):
– Núcleo da enzima: α, β e β’
– Reconhecimento do promotor: σ
Iniciação
• Ligação do fator σ
(reconhecimento de
promotores de genes
bacterianos)
• Dissociação do fator σ
(libera a RNA polimerase
para o início da
transcrição)
TRANSCRIÇÃO EM
EUCARIOTOS
Transcrição
• Transcrição e tradução
ocorrem em
compartimentos distintos
• As histonas de desligam e
depois voltam a se
associar
• RNA-polimerases:
3. Splicing (Encadeamento)
TRADUÇÃO
Tradução
Código genético
Estrutura secundária do
tRNA (esquerda) e
tradução (abaixo).
P
A
Fases da
tradução
1. Iniciação
2. Alongamento
3. Terminação
REGULAÇÃO DA
EXPRESSÃO GÊNICA
Por quê a expressão gênica deve ser
regulada?
• Adaptação ao ambiente
Ausência da
lactose
Presença da
lactose
Operon lac: controle positivo
• A glicose é preferencialmente utilizada como fonte de energia
pela E. coli.
• Quando os níveis de glicose diminuem, há um aumento do
cAMP, que se se liga à CAP (proteína ativadora de catabólito)
levando a sua ativação e ligação na sequencia alvo do DNA e
ativando a transcrição.
REGULAÇÃO DA
EXPRESSÃO GÊNICA EM
EUCARIOTOS
Regulação da expressão gênica em
eucariotos
• Estado basal: OFF
• Regulação temporal e
espacial
• Os eucariotos são menos
sensíveis às alterações
externas.
• Os hormônios são
importantes reguladores da
expressão gênica.
Principais níveis de
controle
1. Modificações da cromatina
2. Transcricão
3. Modificações pós-transcricionais
4. Degradação do mRNA
5. Tradução
6. Modificações pós-traducionais
Ativação da transcrição
1. Modificações da cromatina (regulação
epigenética)
Ativação da transcrição
2. Início da transcrição (RNApol II)
– Ligação de fatores de transcrição gerais a elementos
proximais do promotor.
– Ligação de fatores específicos a acentuadores,
intensificadores, reforçadores ou enhancers em
eucariotos superiores ou a UAS (sequências
ativadoras a montante) em leveduras.
Sistema GAL em leveduras
• Sistema modelo para o
estudo da ativação
transcricional em eucariotos.
• Na presença de galactose e
ausência de glicose, os
genes GAL são expressos.
• A proteína Gal4 regula vários
genes do metabolismo da
galactose através da ligação
à UASs.
Ausência de galactose Presença de galactose
– Promotor inativo – Promotor ativo
Exercícios
1) A partir da fita de DNA abaixo, crie a fita complementar e o mRNA,
indicando suas orientações:
5’ ATT CAG CGC GTA GCT GAT 3’ senso
2) Qual das seguintes estruturas é compartilhada por procariotos e
eucariotos:
a) Íntrons
b) Cap 5’
c) Fator sigma
d) Cauda poliA
e) Promotores
3) Desenhe um gene eucarioto e um operon procarioto, indicando suas
principais estruturas.
Respostas
1) A partir da fita de DNA abaixo, crie a fita complementar e o mRNA,
indicando suas orientações:
5’ ATT CAG CGC ATA GCT GAT 3’ senso (codificadora)
3’ TAA GTG GCG TAT CGA CTA 5’ anti-senso (molde)
5’ AUU CAG CGC AUA GCU GAU 3’ mRNA
2) Qual das seguintes estruturas é compartilhada por procariotos e
eucariotos:
a) Íntrons (eucariotos)
b) Cap 5’ (eucariotos)
c) Fator sigma (procariotos)
d) Cauda poliA (eucariotos)
e) Promotores (eucariotos e procariotos)
Respostas
3) Desenhe um gene eucarioto e um operon procarioto, indicando suas
principais estruturas.
Referências
GRIFFITHS, A.J.F. et al. Introdução à Genética. Ed. Guanabara-Koogan, Rio de Janeiro, 2008.
ZAHA, A. et al. Biologia Molecular Básica. Ed. Mercado aberto, Porto Alegre, 2003.