UVM

Armendáriz Puente Alvar, Vigueras Lemus Rodrigo, Xospa Hernández Dennise

Andrea.
Práctica: CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA.
Práctica No. 3
Grupo de Laboratorio: 1
Materia: Desarrollo Analítico.
Profesor de la materia: Ariana Labastida Polito.
Fecha de la Práctica: 11/ Abril/ 2019.

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

Por Armendáriz; Vigueras y Xospa

RESUMEN: " La cromatografía es un método físico de separación mediante el cual los

componentes de una mezcla se separan por distribución de dos fases: una estacionaria y
otra móvil. El proceso de separación de cada sustancia es el resultado de un equilibrio entre
dos conjuntos de fuerzas contrapuestas: las de propulsión, promovidas por el flujo de la
fase móvil y las fuerzas de retención, originadas por la fase estacionaria. De este modo,
cada sustancia migra de manera diferencial, conforme a sus propias características físicas y
al tipo de fuerzas intermoleculares entre ambas. Así en la presente práctica se demostros la
apolaridad de las diferentes sustancias eluyentes para diferentes compuestos , pudiendo
determinar la constante Rf, concluyendo en un resultado optimo para la retención de un
componente .

INTRODUCCION: finales o, lo que es lo mismo, saber cuándo

La cromatografía en capa fina (en inglés
thin layer chromatography o TLC) es una
técnica analítica rápida y sencilla, muy
utilizada en un laboratorio de Química
Orgánica. Entre otras cosas permite:
‐ Determinar el grado de pureza de un
compuesto. Se puede determinar así, por
ejemplo, la efectividad de una etapa de
purificación.1
‐ Comparar muestras. Si dos muestras
corren igual en placa podrían ser idénticas.
Si, por el contrario, corren distinto
entonces no son la misma sustancia.
la reacción ha acabado.2
La muestra a analizar se deposita cerca de
un extremo de una lámina de plástico o
aluminio que previamente ha sido
recubierta de una fina capa de adsorbente
(fase estacionaria). Entonces, la lámina se
coloca en una cubeta cerrada que contiene
uno o varios disolventes mezclados
(eluyente o fase móvil). A medida que la
mezcla de disolventes asciende por
capilaridad a través del adsorbente, se
produce un reparto diferencial de los
productos presentes en la muestra entre el
disolvente y el adsorbente.3

‐ Realizar el seguimiento de una reacción.

Es posible estudiar cómo desaparecen los
reactivos y cómo aparecen los productos
OBJETIVOS: Metodología

 Podemos ser capaz de separar e Preparación de soluciones patrón

identificar los compuestos
presentes en una mezcla 1. Se tomó 1 pastilla de cada analgésico y
deanalgésicos comerciales por se trituró por separado en mortero (excepto
cromatografía en capa fina. la cafeína que es polvo).

2. Se tomaron 4 tubos de ensayo con tapón

MATERIALES Y METODOS: de rosca y se etiquetaron de tal manera que
cada tubo contenía 20 mg de un polvo.
 Cámara de luz UV Posteriormente se le adicionaron 3 mL de
 Cromatofolios acetato de etilo a cada tubo y se agitó
 6 portaobjetos vigorosamente hasta disolución parcial de
 3 capilares las muestras.
 1 varilla de vidrio
 4 vasos de precipitado de 100 mL Preparación de cromatoplacas o
cromatofolios
 1 caja Koplin
 1 pinza de disección
1. Preferentemente se trabajó con los
 1 gradilla cromatofolios o cromatoplacas que
 1 propipeta ya vienen preparados. Aplicación
 1 espátula de la muestra
 1 frasco de boca ancha ámbar 1. Una vez activados las
 2 pipetas graduadas de 10 mL cromatoplacas o cromatofolios se
 2 pipetas graduadas de 5 mL procede a la aplicación de las
 4 tubos de rosca pequeños muestras
 Papel aluminio 2. En este caso se utilizaron capilares
 1 mortero con pistilo y con el capilar se tomó un
pequeño volumen de la muestra
Reactivos: problema (1-5 μL) y se aplicó una
gota sobre la cromatoplaca (o
 Agua destilada cromatofolio) a 0.5 cm
 Acetona aproximadamente del borde
 Etanol inferior de la placa.
 Gel de sílice 60 HF254 para CCF 3. Trazamos esta marca con un lápiz
fino y aplicamos de la misma
 1 tableta Cafiaspirina
manera (evitando llevarse la fase
 1 tableta Aspirina
estacionaria).
 1 tableta Sacidol o bioelectro 4. Se debe evitar rayar la capa
 1 tableta Cafeína adsorbente con el capilar porque
 5 mL Acetato de etilo puede haber pérdida de resolución
 Hexano o desplazamiento deficiente del
 Cloroformo disolvente.
 Yodo
 Metanol Experimento 1
 1. Se desea conocer el tamaño de las 2. Se eluyó la primera con hexano, la
manchas que se separan cuando se segunda con acetato de etilo y la
aplican en el cromatofolio tercera con metanol.
diferentes cantidades de un patrón
de ácido acetilsalicílico o cafeína RESULTADOS Y DISCUSIÓN DE
parcialmente disuelto en acetato de RESULTADOS:
etilo.
2. Para ello se realizaron tres Placas de Silica con acetato de Etilo y
aplicaciones de la disolución del Hexano como eluyente donde se
patrón en un solo cromatofolio, encuentran la aspirina, cafiaspirina,
aplicando primero una gota, en la cafeína y sacidol previamente
segunda aplicación dos gotas y por pulverizadas y diluidas.
último tres gotas.
3. Introducimos el cromatofolio en
una cámara de elución (caja
Koplin) a la que previamente se le
adicionaron aproximadamente 2
mL de acetato de etilo y tapamos.
Cuando el frente del eluyente esté
casi en el borde de la parte superior
del cromatofolio destapamos la
cámara, retírelo con cuidado y
marcamos el frente del eluyente
con un lápiz de punta fina.
4. Dejamos secar al aire libre.
5. Para visualizar las manchas, Fig.1 Aspirina con acetato de etilo.
primero revelamos con la lámpara
de luz UV de onda corta y larga,
marcando el contorno de las
manchas con el mismo lápiz y
luego introduzca el cromatofolio
en una cámara con cristales de
yodo (en cámara de koplin
adicionamos un poco de yodo y
tapar) por 5 min aproximadamente
en campana de extracción.

Experimento 2

1. Se desea comparar el corrimiento

Fig. 2 Cafiaspirina con acetatto de etilo.
de dos compuestos con diferente
polaridad en diferentes eluyentes.
Para esto se preparan 3
cromatoplacas o cromatofolios y se
aplican en cada una de ellas las
soluciones patrón de ácido
acetilsalicílico y cafeína.
Fig 3. Sacidol con acetato de etilo.
Fig 4. Cafeína con acetato de etilo.
Fig 5. Aspirina, cafeína, sacidol y
cafiaspirina de izquierda a derecha con
hexano.
Compuestos Rf
Cafeína 0.56
Sacidol 0.58
Aspirina 0.6
Cafiaspirina 0.66
Tabla No.1 determinando la constante de
RF (Ratio of Front). Se define
como:Distancia de la muestra desde el
origen/Distancia del eluyente desde el
origen.
La fase móvil consistió en utilizar acetato
de etilo y hexano los cuales tienen en
común la característica de ser apolares. La
fase estacionaria fueron las tiras de papel
poroso ya que esta propiedad les confería
un elevado cociente área
superficial/volumen, con lo cual su
interacción con la fase móvil sería mayor.4
La razón por la que se utilizó la mezcla de
disolventes apolares con una pequeña
porción polar como eluyente se debió a
que el soluto estaba conformado por
compuestos con una baja polaridad, los
cuales se retienen poco en la fase
estacionaria. Por tanto, el eluyente no sólo
actúa como fuerza propulsora sino que,
además, su propia estructura química
contribuye a que los pigmentos puedan
separarse mediante sucesivos equilibrios
de adsorción-desorción. Si el mismo sólo
estuviese constituido por un disolvente no
polar. De esta manera, las moléculas del
soluto se absorben en la fase estacionaria,
y a medida que se produce la elución, van
siendo desplazadas por las moléculas de
disolvente de la fase móvil.5 La retención
del soluto se debe a la competencia que se
establece entrela fase móvil y éste, la cual
radica en la polaridad de ambos. Entonces,
los componentes del soluto más polares se
retienen más rápido que aquellos con una
menor polaridad.6
CONCLUSION:
La adsorción se debe a interacciones
intermoleculares del tipo dipolo-dipolo,
dipolo-dipolo inducido o enlaces de
hidrógeno entre el adsorbente y el soluto.
Las moléculas de soluto se absorben en los
centros polares de la fase estacionaria y, a
medida que se produce la elución, van
siendo desplazadas por las moléculas de
disolvente que constituyen la fase móvil.
La retención de un soluto se puede
justificar por la competencia que se
establece entre el soluto y la fase móvil, la
cual de pende de la polaridad de ambos.
Los fenómenos rectores del proceso de
retención y separación son la adsorción y
la absorción. El primero queda delimitado
a la superficie interfacial es decir se refiere
a la fijación o retención de la sustancia
entre la superficie de las dos fases; se
relaciona con fuerzas químicas y físicas
que dependen de la naturaleza de la
sustancia absorbida, temperatura,
naturaleza del absorbente y concentración.
El segundo fenómeno determina la
retención de una especie química por parte
de una masa y depende de la tendencia que
tiene ésta a formar mezclas o reaccionar
químicamente con la misma.
BIBLIOGRAFÍA:
1. Wade, L.G. Jr., Química Orgánica,
2ª. Edición, México, Ed. Prentice
Hall Hispanoamericana, S.A. de
C.V., 1993.
2. McMurry, J., Química Orgánica,
5ª. Edición, México, Ed.
International Thomson Editores,
S.A. de C.V., 2001.
3. DOMINGUEZ, Xorge Alejandro.
Cromatografía en Papel y en Capa
Delgada. Serie de Química.
Organización de los Estados
Americanos. Nº 16. U.S.A. 1975
4. GÖTZ, Wolfgang; SACHS, Albert
and WIMMER, Hans. Thin-Layer
Chromatography. Gustav Fisher.
Verlag. Germany. 1980.
5. JORK, H and WIMMER H. TLC
Report: A Collection of
Quantitative Papers. GIT Verlag.
Germany. 1986.
6. Reactivos de Coloración para
Cromatografía en Capa Fina y en
Papel. Merck. Alemania. 1980.
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