“UNIVERSIDAD NACIONAL JOSÉ FAUSTINO SÁNCHEZ

CARRIÓN”

"Año de la lucha contra la corrupción e impunidad"

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y METALÚRGICA

Escuela de Ingeniería Química

ASIGNATURA: Biotecnología
TEMA: “Manejo de Microscopio, Tinción Gram y Siembra en Agar Nutritivo”
ÁREA: Laboratorio de Agronomía
DOCENTE: Ing. Robert W. Ocrospoma Dueñas
ESTUDIANTES DE ING.QUIMICA CÓDIGO DEL ALUMNO
ROSALES GUTIERREZ, Katsuyoshi Jeancarlo 16351014

CICLO: V
FECHA DE INICIO: de mayo 2019

FECHA DE ENTREGA: de mayo 2019

HUACHO-PERÚ

2019
 E.P INGENIERIA QUÍMICA

DEDICATORIA

Dedico el trabajo a Dios y luego a

mis padres que día a día impulsan
mi persona para ser un profesional
del futuro, pudiendo cumplir metas
y objetivos trazados en mi proyecto
de vida.
 E.P INGENIERIA QUÍMICA

AGRADECIMIENTOS

Agradezco al Ingeniero Robert W. Ocrospoma Dueñas por impartirnos sus conocimientos y

brindarnos su asesoría en el área de laboratorio de Fenómenos de Transporte que se harán de
mucha utilidad cuando se quiera desarrollar en el ámbito laboral.
 E.P INGENIERIA QUÍMICA

INDICE
CARATULA ............................................................................................................................

DEDICATORIA ......................................................................................................................

AGRADECIMIENTO ..............................................................................................................

INDICE……………………………………………………………………………………...

RESUMEN ...............................................................................................................................

ABSTRACT .............................................................................................................................

INTRODUCCION ....................................................................................................................

OBJETIVOS .............................................................................................................................

objetivo general ............................................................................................................

objetivo específico ........................................................................................................

FUNDAMENTO TEORICO ....................................................................................................

MATERIALES Y EQUIPOS ...................................................................................................

DISEÑO DE LA PRACTICA……………………………………………………………...

CONCLUSIONES ....................................................................................................................

RECOMENDACIONES ..........................................................................................................

BIBLIOGRAFIA ......................................................................................................................

CUESTIONARIO .....................................................................................................................

ANEXO ....................................................................................................................................
 E.P INGENIERIA QUÍMICA

RESUMEN

En el siguiente trabajo, titulado “Manejo de Microscopio, Tinción Gram y Siembra en Agar

Nutritivo”, veremos cómo es el manejo de un Microscopio lo cual gracias a su existencia

veremos partículas muy pequeñas, dependiendo de la escala nanométrica del microscopio,

también veremos la Tinción Gram en que consiste pintar o tintar a la bacteria con colorantes

especializados para esto para diferencias que tipo son, y por ultimo veremos una siembra en

Agar de una bacteria en este caso la bacilus turigentes mas conocida como la bacteria del

maíz, porque se especializa en proteger cultivos de maíz para que los insectos que se comen

la planta no puedan comérsela y al contacto de comer la planta puedan morir

instantáneamente lo cual esto es mejor que los insecticidas normal porque no mata a todo

insecto en general como por ejemplo no mata a las abejas para la producción de miel hay un

punto a favor para esta fabricación de bacteria que es muy factible.

Palabras claves:

Bacilus Turigentes, bacteria, microscpio, nanométricos, siembra en agar

nutritivo , insectisidas, tinción Gram.

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

ABSTRACT

In the following work, entitled "Microscope Management, Gram Stain and Sowing in

Nutritious Agar", we will see how is the handling of a Microscope which thanks to its

existence we will see very small particles, depending on the nanometer scale of the

microscope, we will also see the Gram stain in which it consists of painting or staining the

bacteria with specialized dyes for this, for differences in type, and finally we will see a

planting of a bacterium in this case, the bacilus turigentes, better known as the corn

bacteria, because it specializes in protecting corn crops so that the insects that eat the plant

can not eat it and in contact with eating the plant they can die instantaneously which is

better than normal insecticides because it does not kill any insect in general, for example it

does not kill The bees for the production of honey there is a point in favor for this

manufacture of bacteria that is very feasible.

Keywords:

Bacilus Turigentes, bacteria, microscopic, nanometric, sowing in nutritive agar,

insecticides, Gram stain.

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

INTRODUCCION
En esta práctica se vera como se usa el microscopio óptico sus partes fundamentales que

tenemos que saber para tener un buen funcionamiento que básicamente es basado en lentes

ópticas, este instrumento nos ayudara a poder ver las diferencias de tamaños de la bacteria

dependiente el zoom nanométrico que pongamos, es algo que podremos ver hay mucha clase

de microscopios lo que varían fundamentalmente de su zoom nanométrico.

La Tinción Gram consiste básicamente en tintar la bacteria de un colorante, esto se hace con

una pequeña parte de la bacteria se usan materiales que sean primero libres de cualquier

bacteria para hacer este proceso pasa al fuego que es un paso de esterilización y recién pasa

a la bacteria que la colocamos en placas petris le echamos el colorante y identificamos que

tipo es.

Ya por ultimo veremos como sembrar una bacteria o como le denominan siembra de cultivo

bacteriano en una métrica con tapa ya habiendo ahí adentro un medio de cultivo se divide

en cuadrantes, y en cada cuadrante colocamos a las bacterias con una diferente grafica o

movimiento primero juntas y luego las separamos para notar la diferencia.

Fuente: Microscopio Optico- Mundo Microscopio

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL:

Manejo de Microscopio, Tinción Gram de Bacillus Thurigiensis y Siembra en Agar

Nutritivo

OBJETIVO ESPECÍFICO:

Aprender a tener una buena manipulación del Microscopio Óptico

Saber usar los colorantes en la Tincion Gram

Saber diferencias los colorantes en la Tincion Gram

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

FUNDAMENTOS TEORICOS

1. MICROSCOPIO ÓPTICO:

El microscopio óptico es un microscopio basado en lentes ópticas. También se le conoce

como microscopio de luz (que utiliza o <<fotones>>) o microscopio de campo claro. El

desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton Van Leeuwenhoek. Los

microscopios de Leeuwenhoek constaban de una única lente pequeña y convexa, montada

sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iva a examinar (la

muestra). Este uso de una única lente convexa se conoce como microscopio simple, en el

que se incluye la lupa, entre otros aparatos ópticos.

Los microscopios electrónicos de transmisión utilizan electroimanes, para concentrar un

haz de electrones en un vacío sobre una muestra sumamente fina. En los modelos modernos

se consiguen aumentos de hasta 1000000X. En 1962 se desarrolló el primer microscopio

electrónico de barrido(“Scanning”). Este permite generar imágenes tridimensionales de la

superficie de un objeto con magnificaciones de 100000X o más.

1.1. SISTEMA ÓPTICO:

El sistema óptico esta basado en la especialización de las siguientes partes:

-OCULAR: Es la lente situada cerca del ojo del observador. Su magnificación es

generalmente 10x (es el nivel de zoom)

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

-OBJETIVO: Lentes situadas cerca de la preparación. Generalmente las magnificaciones de

los objetivos secos son de 4X (objetivo de rastreo), 10X (objetivo de baja potencia) y 40 o

45X (objetivo de alta potencia). El objetivo de inmersión en aceite es de 100X.

-DIAFRAGMA: Utilizado para regular la cantidad de luz que entra en el condensador

-CONDENSADOR: Lente que concentra la fuente de luz sobre la preparación.

-FOCO O FUENTE DE ILUMINACIÓN: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador

1.2. SISTEMA MECANICO:

El sistema mecánico esta basado en la especialización de las siguientes partes:

-SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: La base y el brazo

-PLATINA: Lugar donde se coloca la preparación

-CABEZAL: Contiene los lentes oculares. Puede ser monocular o binocular

-REVOLVER: Contiene los lentes objetivos y permite intercambiar los objetivos.

-TORNILLOS DE ENFOQUE: Hay dos tornillos de enfoque aproximado y el

micrométrico el enfoque correcto.

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

MATERIALES Y EQUIPOS

Microscopio Optico: Instrumento que utilizamos para poder ver las

bacterias, o algunos otros seres vivos que se ven a escalas

nanométricas.

(Fuente: mundo microscopio)

Asa de Siembra: Se emplea para transportar, arrastrar,

trasvasar inóculos (pequeño volumen que contiene

microorganismos en suspensión), en este caso lo usamos

para transportas un poco de bacteria de un lado a otro. (Fuente: Propia del estudiante)

Mechero: Lo utilizamos para limpiar el asa de siembra

de cualquier bacteria.

(Fuente: Propia del estudiante)

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

Láminas de Vidrio: Instrumento que usamos para poner

las muestras del Bacilus turigentes antes de echarle el

colorante

(Fuente: Propia del estudiante)

Colorantes: Instrumento que se usa para

diferencias a las bacterias tenemos:

-Cristal Violeta: gran positiva

-Lugol: Penetra el colorante

-Alcohol acetonal: decolorante) 90% pureza

- Rosado Safranina: gran negativa (Fuente: Propia del estudiante)

Placa Petri: Esta lleno del gel que nosotros lo usaremos

para el procedimiento de siembra

(Fuente: Propia del estudiante)

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

Pisceta: Lo usamos fundamental para limpiar las laminas de

vidrio luego de echar el descolorante.

(Fuente: Propia del estudiante)

DISEÑO DE LA PRÁCTICA

1.-TINCION GRAM:

1. Poner en 4 láminas de vidrio cada nombre de integrante del grupo

(Fuente: propia del grupo)

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

2. Este en cada lamina de vidrio poner una gota de agua destilada con la Pisceta

recordar que la gota no debe de ser muy grande y tiene que estar en el medio de

la lamina.

(Fuente: propia del grupo)

3. Después con el asa de siembra poner al mechero para eliminar cualquier bacteria.
 E.P INGENIERIA QUÍMICA

(Fuente: propia del estudiante)

4. Luego sacar un poco de la bacteria con el asa de siembra cuidadosamente solo

tiene que ser un rose ligero nada mas y tiene que ser poca cantidad.

(Fuente: propia del estudiante)

5. Luego con el asa de siembra pasarlo suavemente por la placa de vidrio por todo

el centro estirando la bacteria por el centro.

6. Luego echar cristal violeta (2 gotas) y al pasar 1 minuto echar agua destilada

para limpiar.
 E.P INGENIERIA QUÍMICA

(Fuente: propia del estudiante)

7. Luego echar el Lugol son 2 gotas para que penetre el colorante y saber que tipo

de bacteria es.

(Fuente: propia del estudiante)

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

8. Luego echar el alcohol acetona que es usado como un decolorante.

9. Antes de terminar echar el rosado de Safranina (2 gotas) para indicar si es una

gran negativa y luego empaquetarlo, para que no entre ninguna bacteria.

(Fuente: propia del estudiante)

2.-SIEMBRA DE CULTIVO BACTERIANO

1.-Dividir lo 4 cuadrantes en la placa Petri para hacer 4 tipos de cultivo distinto

(Fuente: propia del estudiante)

2.- Limpiar el asa de siembra metiéndolo en el mechero

2. Sacar un poco cantidad de la bacteria con el asa de siembra, serrar al

momento de haber agarrado un poco de la bacteria para impedir el ingreso

de humedad.
 E.P INGENIERIA QUÍMICA

(Fuente: propia del estudiante)

3. Luego con la misma figura que dibujamos en el paso uno seguir la línea en

cada cuadrante, levemente en la capa de gel, sugerimos no romper el gel

aunque si se rompe no daña el experimento.

(Fuente: propia del estudiante)

CONCLUSIONES
 E.P INGENIERIA QUÍMICA

La manipulación que un microscopio podría ser fácil, pero al momento de saber

manipularlo hay que tener una buena manipulación

Los colorantes que usamos no determinaron que la bacteria Bacilus Turigentes es

una gran positiva esto fue demostrado al tintar el color cristal violeta

Determinamos que el proceso de siembra de cultivo es un proceso ni muy fácil ni

muy difícil la única dificultad ahí sería el proceso de elaboración ya que hay que

elaborar el gel primero para tener un medio de cultivo con polvo sal, agua con unos

parámetros necesarios para poder tener un buen medio de cultivo

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

RECOMENDACIONES

Guardar silencio en la hora de laboratorio.

No comer en el laboratorio.

Antes de entrar todos los estudiantes tendrán que tener puesto su guardapolvo.

Al terminar de usar los equipos, lavarlos con abundante agua y detergente.

Mantener el orden en el área del laboratorio.

No olvidar que los estudiantes tendrán que tener sus EPP.

No se deben utilizar sin conocer perfectamente su funcionamiento de los equipos

y reactivos que se hará en el laboratorio. En caso de duda, preguntar al profesor.

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

BIBLIOGRAFÍA

Libros:

 Prescott, Harley, Klein. Microbiología. Mc Graw-Hill Interamericana de España. 4ª

ed. 1999. Schaechter M, Medoff G, Eisenstein BI, Guerra H. Microbiología.

 Mecanismos de las enfermedades infecciosas. Ed Panamericana. 2ª ed. Buenos

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

CUESTIONARIO

1. ¿El diámetro del campo visual es directo o inversamente proporcional al poder de

aumento del objetivo?

Se denomina campo visual a lo que se observa a través de algo. También podemos

definirlo como la proporción del plano visible observando a través del microscopio.

Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es

inversamente proporcional al aumento. Para medir el diámetro del campo del

microscopio con cualquiera de los objetos de utiliza el micrómetro.

2. ¿Por qué es importante conocer el tamaño de un organismo microscópico?

Para saber si verdadero tamaño y para saber cómo funciona su organismo, además

para saber que microscopio podríamos usar.

 E.P INGENIERIA QUÍMICA

ANEXOS
E.P INGENIERIA QUÍMICA