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PRODUCCIÓN DE POLIHIDROXIALCANOATOS POR MEDIOS

ALTERNATIVOS: UNA APROXIMACIÓN DESDE LA


BIOTECNOLOGÍA

Nicolás Segura Carvajal1; Carlos Andrés Pérez Velásquez2; Santiago Vélez Sierra3; Mario
Ricardo Velandia Ciendúa4; Joe Flórez Barco5
Ingeniería Química, Facultad de minas, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín
nsegurac@unal.edu.co1; caraperezvel@unal.edu.co2; savelezsi@unal.edu.co3;
mrvelandiac@unal.edu.co4; jaflorezba@unal.edu.co5

Resumen
La necesidad de realizar una transición hacia productos y procesos menos perjudiciales para el
planeta se hace cada vez más evidente, por ejemplo, en la exagerada polución, muerte de
especies por residuos antrópicos, entre otros. El presente trabajo trata de plantear una
propuesta alternativa, biotecnológica y amigable con el medio ambiente de producción de
plástico. En un principio, se evaluaron alternativas biotecnológicas para producción de
bioplásticos y se determinó que la opción era mediante microorganismos. Luego, se procedió
a seleccionar el microorganismo con base en criterios económicos (costo de medio de cultivo
y de sustrato) y técnicos (productividad de la cepa). Posteriormente, se procedió a buscar un
residuo agroindustrial que hiciera de materia prima, pero debido a las bajas concentraciones
de sacarosa (sustrato) en estos, se optó por usar sacarosa comercial. Después, se continuó con
el dimensionamiento del biorreactor, teniendo presente la cantidad de plástico a suplir (0,01%
de la demanda de propileno en Colombia). Se determinó, con base en simulaciones, que para
suplir esta demanda son necesarios 3 fermentadores de 4 m3 operando en paralelo. Además de
esto se añadieron otros aspectos como la ruta metabólica, cultivo del microorganismo y
boceto del postratamiento.

Palabras clave: Biotecnología, bioplásticos, polihidroxialcanoatos, microorganismo, Bacillus


Flexus.

1. Introducción principalmente por polímeros. Luego, en 1930 se


comenzaba a pensar su escalado a nivel industrial [1].
El uso y disponibilidad de los materiales ha sido, a lo
largo de la historia, una condición determinante en el Los plásticos sintéticos han representado un cambio
avance tecnológico, económico y social de la notorio en las formas y relaciones de producción y
humanidad. A finales del siglo XVIII, las consumo después de la segunda mitad del siglo XX y
investigaciones sobre nuevos materiales tomaron auge se han obtenido desde entonces como derivados del
debido a la exigencia de satisfacer nuevas necesidades petróleo. Algunas de las propiedades atractivas de
que la piedra, la madera o el metal no podían suplir. estos compuestos son la facilidad con que pueden ser
En el año 1839 Charles Goodyear logra vulcanizar el trabajados o moldeados, su impermeabilidad, su baja
caucho (antecesor de los plásticos modernos), pero no densidad, su baja conductividad eléctrica, su
fue sino hasta 1908 cuando el químico estadounidense resistencia a la corrosión y a la intemperie, su
Leo Baekeland logra sintetizar por primera vez un resistencia a diversos factores químicos y biológicos y,
material plástico (resina de fenolformaldehído), para en buena medida, su bajo costo [2]. No obstante,
los cuales según la RAE se conocen como materiales debido a su uso desmedido, a su toxicidad después de
que pueden moldearse fácilmente y están compuestos su incineración [3], a su resistencia a la intemperie y a
la degradación por microorganismos, se están carbono) se denominan scl-PHAs y son sintetizados
generando problemáticas serias en cuanto a su por un amplio rango de bacterias como Cupriavidus
acumulación como desecho (solamente en México, se necator y los de cadena media (4 a 16 átomos de
acumulan aproximadamente 1 millón de toneladas al carbono) se denominan mcl-PHAs, sintetizados por
año [2]) en fuentes hídricas, ecosistemas marinos, especies Pseudomonas. También es posible encontrar
playas y ciudades. copolímeros formados por los dos tipos de monómeros
vistos anteriormente, esto se puede dar si se utilizan
Como alternativas de solución, se han implementado diferentes tipos de sustratos [4].
el reciclaje y la producción de plásticos
biodegradables. La primera enfrenta el problema desde Estos polímeros son altamente modificables en su
su desecho, ello implica retos como la correcta estructura, puesto que se pueden tener, si se desea,
separación en la fuente. La segunda lo aborda desde la estructuras aromáticas o halogenadas según sean las
producción misma, haciendo más sencilla su características deseadas, por ejemplo si se le quiere dar
disposición al medio ambiente; aunque existen varias más rigidez o flexibilidad a la cadena polimérica [3a].
familias de plásticos biodegradables entre ellos, están
los completamente biodegradables donde se
encuentran los ácidos polilácticos, los poliésteres
alifáticos, los polisacáridos y copolímeros derivados
de ellos, y los polihidroxialcanoatos (PHA) [4]. La
producción de estos se puede llevar a cabo mediante el
uso de biotecnología, ya que existen microorganismos
que bajo las condiciones adecuadas de fermentación,
producen polímeros. En 1888, se encontraron Figura 1. Estructura de los PHA.
estructuras poliméricas a nivel intracelular en bacterias n varía de 1 a 4, X de 300 a 1000 [4].
de Bacillus megaterium; a mediados de los 30’s se
logró caracterizar uno de estos polímeros, Los PHA son biopolímeros de gran interés comercial
perteneciente a los poliésteres polihidroxialcanoatos; y puesto que tienen propiedades térmicas y mecánicas
a finales de los 60’s se definió su función: reservar similares a los polímeros que provienen de procesos
carbono y energía. Las bacterias Cupriavidus necator, petroquímicos (Polietileno, polipropileno,
Pseudomonas mosselli y Burkholderia sp han poliestireno); adicional a esto, los PHA son
mostrado también producción de PHA’s. Asimismo, biodegradables y no son tóxicos por lo que representan
estos compuestos poliméricos han sido objetos de una alternativa promisoria para reemplazar los
estudio, puesto que es una potencial alternativa a los plásticos convencionales [4].
petroplásticos[4].
Algunas de las aplicaciones industriales de los PHA se
Partiendo del problema generado por los plásticos muestran en la Figura 2, principalmente se destacan la
derivados de la industria petroquímica, el presente industria de materiales, médica, de combustibles y
trabajo pretende aproximarse a un método para microbiología industrial.
producir PHA a escala piloto utilizando
microorganismos y fermentaciones, es decir, por una
ruta biotecnológica.

2. Marco teórico
2.1. Descripción del producto a obtener

Los polihidroxialcanoatos son poliésteres formados Figura 2. Aplicaciones PHA [4].


por unidades o monómeros de hidroxiácidos
polimerizados en forma lineal (Figura 1) producidos La mayor parte de las investigaciones sobre PHA se ha
por bacterias como reserva de nutrientes en su hecho con la intención de introducirlos en el mercado
metabolismo [2]. Se clasifican en dos principales de los plásticos industriales de gran demanda. Sin
grupos según la cantidad de carbonos que contienen embargo, los PHA, además de ser biodegradables y
sus monómeros; los de cadena corta (3 a 5 átomos de renovables, tienen características interesantes. Una de
ellas es que no causan efectos tóxicos, son consumieron 187 mil toneladas [7]) se pretende
biocompatibles. Esto permite utilizarlos en la abordar sólo el 0,01% del consumo nacional; por lo
producción de materiales para aplicaciones médicas, tanto, se espera producir 52 kg por día.
como por ejemplo en la generación de implantes, que
con el tiempo pueden ser eliminados del cuerpo 2.2. Microorganismos
espontáneamente por degradación, o implantes con
fármacos encapsulados para su liberación controlada, 2.2.1. Generalidades
o bien en la obtención de telas hechas con fibras de
PHA para el tratamiento de heridas. Adicionalmente se A mediados del siglo pasado, se descubrió que los
han investigado aplicaciones de los PHA en un área PHA son metabolitos secundarios insolubles en agua,
nueva de la medicina, la ingeniería de tejidos. En la cuyo rol es de reserva de carbono y energía. Estos
agricultura los PHA también pueden tener biopolímeros son producidos principalmente en
aplicaciones. Un ejemplo sería el de los dispositivos condiciones de estrés metabólico, precisamente en
en los que la degradación natural de los PHA permite concentraciones altas de carbono y concentraciones
la liberación de compuestos químicos de manera limitadas de nutrientes esenciales como fosfatos y
dosificada, para aplicación de fertilizantes, fungicidas, nitrógeno. Inicialmente se pensaba que estos
herbicidas, etc [2]. En la Tabla 1. se presentan algunas polímeros únicamente se producían intracelularmente,
propiedades físicas y químicas de un homopolímero de no obstante, mediante modificación genética se ha
cadena corta de PHA (scl-PHAs), de un copolímero evidenciado que los PHA pueden ser depositados
de polihidroxibutirato (PHB) y de polipropileno (PP). extracelularmente [4].
Se ha demostrado mediante el uso de sustratos mixtos
Tabla 1. Propiedades de PHA, PHB y polipropileno. que es posible la biosítensis de copolímeros. En cuanto
Propiedad scl-PHAs PHB PP a la composición estructural de los PHA’s, se ha
encontrado que esta depende principalmente del
PF [°C] 179 137-170 176 sustrato y de la cepa. La cadena lateral (R) puede estar
saturada o no y contener monómeros halogenadas,
TTV[°C] 4 10 a -6 -10 aromáticas, ramificados, entre otros. De hecho, las
técnicas de modificación química de los PHA´s están
MY [GPa] 3,5 0,9-2,9 1,7
siendo centro de estudio, pues sus propiedades físicas
% AR 40 30-38 38 y térmicas son muy sensibles a estos cambios
composicionales [4].
RT [MPa] 5 hasta 690 400
PF: punto de fusión; TTV: temperatura de transición Los PHA’s se producen por dos vías: de novo
vítrea; MY: módulo de Young; AR: alargamiento a la biosíntesis y por beta-oxidación. El primero de ellos
rotura; RT: resistencia a la tracción ocurre cuando el microorganismo crece en fuente de
carbono no convencionales como glucosa, gluconato,
Aunque Colombia, junto con algunos países de Sur acetato, ciclohexano, entre otras. La composición de
América, no están muy avanzados en cuanto a los PHA’s producidos vía de novo es función de la
producción de PHA [5] y a pesar de que la producción fuente de carbono. Por otro lado, la síntesis de PHA’s
de bioplásticos no es competitiva con la de plásticos por beta-oxidación ocurre en presencia de fuentes de
derivados del petróleo —producir un kilogramo de carbono convencionales como ácidos grasos, y la
PHA por fermentación bacteriana, en el 2005, costaba composición de los PHA’s resultantes es
15 USD, mientras que un kilogramo de plástico independiente de la fuente de carbono. La Figura 1(A)
convencional 1 USD [6]—, el presente estudio parte de los anexos muestra distintas rutas metabólicas para
de la premisa del agotamiento cercano de las reservas la producción de PHA´s de acuerdo al sustrato.
fósiles y de la necesidad de proponer procesos más Asimismo, los estudios en este campo se han centrado
amigables con el medio ambiente para realizarse; en definir las respectivas rutas metabólicas, probar
además, varias investigaciones han apuntado a reducir nuevos sustratos, así como mezclas de estos y aislar
costos de producción del PHA para hacer más viable los PHAs [4].
su incursión en el mercado [6]. Debido al alto
consumo de plástico en colombia, específicamente de
polipropileno, en Colombia (en el 2015 se
2.2.2. Selección del microorganismo microorganismo seleccionado es el Bacillus Flexus, el
cual requiere como sustrato la sacarosa y como medio
Se ha encontrado que diferentes clases de bacterias y de cultivo agar nutritivo [9]. Es importante mencionar
microorganismos son capaces de sintetizar que la obtención del sustrato por residuos
polihidroxialcanoatos (PHA) mediante procesos agroindustriales o por compra directa será discutido
metabólicos. Existen diversos procesos de producción posteriormente.
comerciales de PHA a partir de diferentes sustratos y
microorganismos, en la Tabla 2. se muestran algunos Tabla 3. Matriz de selección de microorganismo.
de estos, así como la concentración del producto que
Criterio Peso A1 A2 A3 Total
obtienen. Se puede destacar de esta información que
los procesos que obtienen mayor concentración de CS [USD/kg] 0,18 -18,15 -1,20 -10,84 0,820
producto final son los que tienen como sustrato 0,64 1,50 1,20 0,44 0,638
C-PHA [g/L]
sacarosa y caña de azúcar.
CMC
Tabla 2. Producción comercial de PHA [4]. [USD/Kg] 0,18 -179,72 -624,14 -179,72 0,258

Microorganismo Sustrato Cont-PHA % CDW t-F [h] - 72 72 72 NA


(%CDW)
2.3. Características del microorganismo
Alcaligenes latus Sacarosa >75 >60
Bacillus Flexus (Figura 3a) es un microorganismo
Bacillus sp. Sacarosa >90 >90
perteneciente al dominio Bacteria. Es de naturaleza
aeróbica, presenta forma de varilla y es clasificada
Pseudomonas putida Ácidos ~60 ~45 como gram variable. Este último se produce debido al
grasos decrecimiento paulatino en el grosor de la pared de
Cont-PHA: contenido PHA; CDW: Peso seco celular peptidoglicano, lo que conlleva a la aparición de
células teñidas de morado y rosado, después de aplicar
Con el fin de seleccionar un buen par sustrato- el método de tinción de Gram (Figura 3b). Este
microorganismo, se realiza una matriz de selección por microorganismo se ha aislado de aguas residuales,
puntos ponderados; como criterios se toma, a saber: el heces y suelos con alto grado de salinidad (obtenido
costo del sustrato a utilizar (CS) da cuenta de la World Data Centre of Microorganism, WDCM). En
magnitud del costo operacional del proceso; la adición a la producción de bioplásticos, B.Flexus ha
concentración de PHA (C-PHA) tras la fermentación, tomado importancia en el área de la medicina e
da idea de la eficiencia en la producción de PHA del ingeniería ambiental. Priyadarshini et al. [10]
microorganismo; el costo del medio de cultivo (CMC) realizaron un estudio con el fin de obtener
da cuenta de costos operacionales; y por último; el nanopartículas de plata, las cuales potencian la
tiempo de fermentación (t-F), del cual se puede inferir propiedades antibacteriales de drogas usadas contra
el tamaño del biorreactor, para las alternativas microorganismos resistentes a múltiples fármacos
evaluadas el tiempo de fermentación es el mismo y, [11].
por tanto, no influye en la selección. Como
alternativas se proponen Bacillus Flexus (A1),
Cupriavidus necator (A2) y Bacillus sp (A3) debido a
la información disponible de su cinética de
crecimiento celular y formación de producto. Los
pesos de la matriz de ponderación fueron tomados con
base a un experto y a estudios sobre factores
económicos que afectan la producción de PHA por vía
fermentativa [8]; en ambos, se estima que el factor
más influyente es la concentración producida de PHA Figura 3. a) Bacteria Bacillus Flexus. b) Tinción
por las bacterias. En la Tabla 3. se presenta la matriz de gram aplicada a bacteria gram variable.
de selección con la información de los criterios por
alternativa, los pesos para ponderación y el resultado
de la selección ponderada de la matriz normalizada. El
Jebeli et al. A raíz de la alta resistencia a metales polimerización vía esterificación de la 3HB en P(3HB)
pesados como As, Zn, Cr y Ni, y a la capacidad de (poli 3-hidroxibutirato). [14, 15].
metabolización de éstos por parte de B. flexus,
estudiaron las condiciones adecuadas de la bacteria 2.6. Fuente de Energía
para la remoción y tratado de arsénico en aguas
residuales y suelos [12]. Asimismo, otros estudios se Bacillus Flexus emplea sacarosa como fuente de
han encargado de definir su genoma, en aras de energía para la producción de PHA, por lo tanto, para
potenciar sus propiedades mediante modificación la obtención de dicha materia prima se propone la
genética [13]. extracción de la sacarosa a partir de residuos de la
industria azucarera, sin embargo, se encuentra que los
2.4. Requerimientos nutricionales residuos de los procesos productivos de la industria
azucarera, tales como pulpa de la remolacha, bagazo
El microorganismo aislado se recomienda que sea de caña, entre otros, a pesar de reportar contenido
subcultivado en agar nutritivo de forma inclinada, para considerable de glucosa, presentan bajo contenido de
proporcionar una mayor área de superficie para el sacarosa (<10%) y los procesos extractivos de dicho
crecimiento, y almacenado a 4°C para su uso posterior sustrato tienen cierta complejidad y son costosos
[9]; cabe destacar que este medio se debe subcultivar [15,16,17]. No obstante, las personas han empezado a
con cierta periodicidad para evitar la muerte celular. disminuir el consumo de azúcar debido a las
enfermedades asociadas al alto contenido de azúcar en
En la preparación del inóculo, se transfieren las células la sangre, por lo tanto, se elige sacarosa comercial
microbianas almacenadas al medio de cultivo, el cual, (azúcar) como sustrato para el proceso de producción
se somete a un proceso de incubación a 30°C y 250 de PHA, cuyo precio en el mercado es de 12,93 USD
rpm por 24 h [9]. La composición del medio de cultivo cents/lb a febrero de 2019 [18] y en Colombia, la
para el inóculo, se especifican en la Tabla 4. producción de azúcar fue de 2.334.230 toneladas para
el año 2018 [19].
Tabla 4. Composición del medio de cultivo para el inóculo [9].

Componente Concentración [g/L]

Na2HPO4·2H2O 2,2

KH2PO4 1,5

(NH4)2SO4 1,5

MgSO4 0,2

Sacarosa 20

Extracto de Levadura 1

2.5. Ruta metabólica específica

El esquema de la ruta metabólica para Bacillus Flexus


alimentado con azúcares se presenta en la Figura 4. En
este esquema, los monómeros del polímero, 3HB, son
generados a partir de la condensación de dos
moléculas de acetil-CoA provenientes del ciclo de
Krebs, para así formar también acetoacetil-CoA, Figura 4. Ruta metabólica de biosíntesis de PHA a
mediante la enzima β-cetotiolasa (EC 2.3.1.16). partir de azúcares. [14]
Luego, actúa la enzima Acetoacetil CoA reductasa
(EC 1.1.1.36) generando 3HB-CoA. Por último, la Existen dos etapas principales en el mecanismo de
enzima PHA sintasa cataliza la reacción de producción de PHAs, la primera etapa constituye el
crecimiento del microorganismo y la segunda etapa es Tabla 6. Valor de todos los parámetros cinéticos [9].
la síntesis de PHA y para pasar de una etapa a otra es
𝑘 [g/L∙h] 184,334
necesario garantizar que la fuente de nitrógeno se
agote puesto que esto evita que la célula se siga 𝛽 [1/h] 0,021
reproduciendo a altas tasas y comience a realizar un
proceso anabólico al sintetizar PHA como reserva 𝛼𝑚 [g/L] 11,066
energética [9].
𝑛 [g PHA/g∙h] 0,048
3. PROPUESTA DE DISEÑO 𝑚 [1/h] 0,017
3.1. Crecimiento celular y producción

Un análisis de sensibilidad para encontrar la


Para que el microorganismo crezca y produzca PHA se
concentración inicial de biomasa que maximiza el
requiere un medio de cultivo con la descripción de la
rendimiento del sustrato y minimiza el tiempo de
Tabla 5. Dicho cultivo se debe encontrar a 30 °C y con
fermentación fue realizado. El modelo se simuló en el
una agitación de 250 rpm.
software MATLAB R2015a utilizando el algoritmo de
Tabla 5. Composición del medio de cultivo para producción Runge-Kutta 4.. El resultado de la simulación se
de PHA [9]. muestra en la Figura 5. De dicha simulación se puede
observar que el sustrato se alcanza a consumir en 48
Componente Concentración [g/L] horas, tiempo en el que se producen 13,05 g/L de PHA
y 3,31 g/L de biomasa residual. Estos resultados se
KH2PO4 13,0 obtuvieron con una biomasa inicial de 365 mg/L.
(NH4)2HPO4 4,0

MgSO4·7H2O 1,2

Ácido Cítrico 1,7

Triptona 2,0

Sacarosa 20

Para el cálculo de la producción de PHA se utiliza un


modelo cinético reportado por Divyashree et al. [9].
Dicho modelo consiste en un sistema de tres
ecuaciones diferenciales las cuales describen los
cambios en el tiempo de la biomasa residual, el
sustrato y el PHA. Figura 5. Dinámica del fermentador.

3.2. Diseño industrial del proceso


𝑑𝑋𝐵𝑅 (1)
= 𝑘𝑋𝑠 𝑋𝐵𝑅
𝑑𝑡 Para la obtención de PHA como producto final se
requieren ciertas unidades de operación para la
𝑑𝑋𝑠 𝑋𝐵𝑅 (2) producción, medición y postratamiento del
= −𝛽𝑋𝐵𝑅 (1 − )
𝑑𝑡 𝛼𝑚 biopolímero [20].

𝑑𝑋𝑃𝐻𝐴 𝑑𝑋𝐵𝑅 (3) 3.2.1 Producción


= 𝑛𝑋𝐵𝑅 + 𝑚
𝑑𝑡 𝑑𝑡
donde 𝑋𝐵𝑅 es la fracción másica de biomasa residual, La producción de PHA se propone en un fermentador
𝑋𝑠 la del sustrato y 𝑋𝑃𝐻𝐴 la de PHA. Es importante discontinuo en tandas de 48 horas, se requiere una
aclarar que por biomasa residual se refiere al peso de producción diaria de 52 kg y por tanto es necesario
la biomasa sin contar el PHA (ya que la producción es tener más de un fermentador. En este caso se proyecta
intracelular). El valor de los parámetros cinéticos se usar tres fermentadores de 4 m3 cada uno. Con este
presenta en la siguiente tabla. volumen, cada reactor tendrá una producción de 52 kg
de PHA cada 2 días (debido a que en la fermentación ● Filtrado y centrifugación
se producen 13,05 g/L), por lo que si cada día un La solución de acetato de etilo que contiene disuelto el
fermentador se pone en funcionamiento, se mantendrá biopolímero de hace pasar por un filtro metálico con
una producción diaria fija. Se proponen tres tamaño de orificio de 2 micrómetros y se utiliza una
fermentadores y no dos para que el proceso de centrífuga para separar los residuos biomásicos [20].
vaciado, limpieza y llenado se realice en un día entero
El volumen de los reactores fue hallado con base al ● Precipitación, pensado y lavado y secado
flujo a producir y el tiempo requerido para cada tanda. final
Para extraer el PHA de la solución de ácido acético se
3.2.2 Medición utiliza un solvente orgánico bien sea hexano o heptano
en una relación en volumen 1/1 de solución de acetato
Con el fin de monitorear las concentraciones en el de etilo/hexano. Y posteriormente se separan los
tiempo de sustrato, biomasa, y nutrientes se dispone de sólidos con un filtro-prensa. una vez extraído el PHA
una columna de cromatografía de gas para lo cual es se lava con una solución de etanol al 50% en volumen
necesario primero separar la biomasa por medio de para remover la fase hidrocarburo. Cabe resaltar que
una centrífuga a 3000 x g durante 20 minutos seguido todos los solventes utilizados son recirculados al
de la adición de metanol, cloroformo y ácido sulfúrico proceso. Por último, se somete el efluente de la etapa
en tubos sellados para extraer el PHA de las células anterior del proceso a un secado al vacío para obtener
(metanólisis) [9]. el PHA [20]. En la Figura 2(A) de los anexos se
muestra el diagrama de flujo del proceso, allí se
3.2.3 Postratamiento resumen las operaciones unitarias más importantes que
se llevan a cabo para la producción de PHA.
● Precipitación
El PHA producido se encuentra en el interior de la 4. Conclusiones
biomasa por lo que se realiza una precipitación de la
biomasa utilizando fosfato de sodio y cloruro de calcio El uso de microorganismos en procesos industriales
ambos al 1% en peso [20]. representa una alternativa promisoria y en crecimiento
para productos de obtención convencional por
● Filtro-Prensado derivados de petróleo o minería; lo anterior, es debido
Posteriormente para separar los sólidos se utiliza un al aprovechamiento que le pueden dar los
filtro prensa del cual se obtiene una torta constituida microorganismos a diferentes fuentes de carbono,
esencialmente por biomasa [20]. como residuos agroindustriales o azúcares.

● Secado al vacío Bacillus Flexus es un microorganismo promisorio y


Se hacen pasar estos sólidos en un secador rotatorio al eficiente para la producción de PHAs a mediana escala
vacío con el propósito de retirar el agua residual [20]. industrial; además el uso de sacarosa como materia
prima en la producción de PHA por medio de Bacillus
● Molienda Flexus representa una metodología más viable en
Una vez secados los sólidos se hacen pasar por un términos generales que el uso de residuos
molino para obtener un tamaño de partícula entre 1 y 3 agroindustriales, esto, en el marco de la competencia
mm [20], esto se realiza para que la extracción de económica que simbolizan los plásticos derivados del
PHA en la siguiente etapa del proceso sea más petróleo.
eficiente.
Un factor determinante para la síntesis de PHA a partir
● Extracción de Bacillus Flexus es que éste polímero se produce en
Para extraer el PHA de la biomasa es necesario utilizar condiciones de exceso de sustrato y ausencia de
acetato de etilo en una proporción biomasa/acetato de nitrógeno en la etapa de síntesis, dado que es una ruta
etilo de 6/1 en condiciones agitación leve, a 60°C metabólica que los microorganismos utilizan para
durante 2 horas [20]. almacenar energía en las largas cadenas poliméricas,
análogo al glucógeno en los animales.
Es posible producir polímeros biodegradables novel strain, Bacillus flexus and its biomedical
mediante procesos biotecnológicos a mediana escala application. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces,
industrial, pudiendo disminuir así el uso de plásticos 102, 232-237.
provenientes de la industria petrolera. Con solo tres [11] Jebeli, M. A., Maleki, A., Amoozegar, M. A.,
fermentadores (4 m3 c/u) relativamente pequeños es Kalantar, E., Izanloo, H., & Gharibi, F. (2017).
posible suplir un porcentaje comercialmente Bacillus flexus strain As-12, a new arsenic transformer
importante del mercado de los plásticos. bacterium isolated from contaminated water resources.
Chemosphere, 169, 636-641.
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