Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
1
indicado diferentes longitudes de onda en la literatura cantidades significativas de ellos en algunos vegetales
para la absorbancia máxima la correlación directa como la remolacha, la acelga, las espinacas y el apio,
entre la absorbancia y la concentración de nitratos es donde se acumulan. También se ingiere nitritos, pero
posible, pero a menudo se ve obstruida por iones en una cantidad menos, en el consumo de lechugas y
inorgánicos y sustancias orgánicas las cuales espinacas.
absorben en el mismo rango UV. En ocasiones se
prefiere la concentración global de NOx nitratos + Otra fuente primordial de nitratos y nitritos son las
nitritos para evitar que se discrimine entre estas conservas de carne, al tener aditivos que se utilizan
especies de iones. Para sortear estas dificultades, para evitar el desarrollo de microorganismos que
utilizan métodos como: calibración que se basa en pueden provocar intoxicaciones tan graves como el
diferentes técnicas quimiométricas y la regresión botulismo. Durante el almacenamiento, después de la
parcial de los mínimos cuadrados ha permitido cosecha y el proceso de marchitamiento de la verdura,
estimar los nitratos(Marie et al., 2017), espectros de se potencia la formación de nitritos. Las
absorción UV basados en regresión lineal concentraciones de nitritos en los tejidos vegetales
múltiple(L.Z. et al., 2012), mediante el espectro del frescos en buen estado son bajas, pero se incrementan
producto de la tetrazotización de bencidina con durante el almacenaje posterior a la cosecha, a través
nitrito(Nagaraj, Gopalakrishna, & Chandrashekara, de la reducción de los nitratos y la disminución del
2016). contenido de agua.
Los nitratos no representan una toxicidad directa En la tabla 1 se resume el contenido de nitrato de
para el ser humano a excepción de un consumo una variedad de verduras, estableciendo como las
masivo. La importancia de los nitratos en nuestra mejores fuentes, las plantas de hoja verde, las
dieta no se debe a su interacción como a su verduras cultivadas en condiciones de poca luz como
transformación, por medio de una serie de procesos las raíces de las plantas.
biológicos complejos en nitritos. Esta transformación
puede plantear ocasionalmente problemas graves a El NO es un compuesto químico muy importante
bebés de menos de seis meses. El metabolismo de los en nuestros cuerpos con funciones de relajar a los
recién nacidos hace efectiva la conversión de los vasos sanguíneos y por lo tanto regular la tensión
nitratos en nitritos en sus tractos gastrointestinales. arterial y oxigenación de los tejidos, regular la
agregación plaquetaria, reduciendo el riesgo de
Esta transformación también se produce, en menor arteroesclerosis, hasta el desempeño de ciertas
grado, en los adultos y constituye una fuente actividades del sistema inmunológico, disminuyendo
importante de nitritos (5 miligramos al día). Pero los infecciones en el intestino, boca y piel.
nitritos actúan de forma poco eficiente con la
hemoglobina normal. Pese a ello, los nitritos en La preparación patentada de un jugo de remolacha
nuestro estómago pueden reaccionar con otros libre de nitrato ha permitido elaborar estudios en los
alimentos parcialmente digeridos para dar cuales se utilizó un placebo como control en estudios
nitrosaminas, que son compuestos cancerígenos. Las de suplementación con nitrato que manejaron esta
nitrosaminas son extremadamente reactivas y atacan verdura, confirmando que el nitrato del jugo de
a otras moléculas de nuestros cuerpos, como el ADN remolacha es el ingrediente activo que producía los
(Sapiña, 2006). beneficios fisiológicos y para el ejercicio (N, n.d.).
2
2500 mg/
Remolacha, apio, fue descrita por primera vez en 1858 por Peter Griess
Muy alto
40 mmol
lechuga, rúcula, (Castañeda & Páez, Hernández M Contreras, 2014).
espinaca
Brócoli, zanahoria,
200-500 mg / coliflor, pepino,
Bajo
3-9 mmol calabaza, jugo de
vegetales V8. Figura 1. Mecanismo de reacción de formación del complejo
para la determinación de nitrito empleando el método Griess.
Espárragos, alcachofa,,
habas, judías verdes,
< 200mmg/ guisantes, pimiento, 2. Método Experimental.
Muy bajo
<3 mmol tomate, sandía, batatas,
papa, ajos, cebolla, 2.1.1. Instrumentos
berenjena
La obtención de las curvas espectrales se realizara
con el uso del espectrofotómetro Shimadzu serie UV-
Para la determinación y cuantificación de nitratos hay Vis 2401 PC, equipo de extracción de ultrasonido,
numerosas técnicas y no existe entre los analistas equipo MSPD.
unanimidad en la selección de la más adecuada, pero
uno de los métodos más fáciles, sencillos y con gran Celdas de cuarzo de 1 cm.
resultados es el método de cataldo, creado por D. A.
Cataldo en 1975, el cual se basa en la formación de 2.1.2. Productos químicos
una nitración del ácido salicílico con ayuda del ácido
sulfúrico lo que indica que se encuentra en Ácido acético, ácido salicílico, ácido sulfúrico, agua
condiciones altamente acidas y que le permite al destilada, hidróxido de sodio, nitrato de potasio,
complejo absorber a un máximo de 410nm en nitrito de sodio, N(naftil) etilendiamina
soluciones básicas, la absorbancia que presenta el diclorohidratado y sulfanilamida.
complejo Nitrato-N es directamente a proporcional a
la concentración de este compuesto (Cataldo, Muestras de remolacha, previamente trituradas.
Maroon, Schrader, & Youngs, 1975).
2.2. Procedimiento.
La determinación de nitritos en verduras se da por el 2.2.1. Determinación de Nitratos
Método Oficial AOAC 973.31, el cual se basan en la
reacción de Griess. El fundamento de esta 2.2.1.1. Preparación de muestra.
metodología es la reacción entre nitrito-ion
sulfanilamida en medio ácido. Después, el compuesto Técnica de extracción 1: pesar 4 muestras de
diazo sintetizado reacciona con el dihidrocloruro de aproximadamente 1 gr de remolacha previamente
N- (1-naftil) -etilendiamina (NED) (vea figura 1). triturado, en vasos de precipitado, adicionar en cada
Esta parte del proceso genera un compuesto rojo uno de ellos 20 mL de agua destilada y calentar a
profundo azoico. Los productos finales de la reacción ebullición durante media hora, y en caliente dejar por
de Griess son azo-compuestos residuales que tienen media hora en ultrasonido cada una de las muestras.
un alto grado de toxicidad. La prueba de Griess es
una prueba química que detecta la presencia de Filtrar cada una de las muestras; la solución resultante
nitritos orgánicos. La reacción de diazotación de llevarla a un balón de 100 mL, y llenar hasta el aforo
Griess, en la que se fundamenta el reactivo de Griess, con agua destilada.
3
Técnica de extracción 2. Para esta técnica tomar La solución madre se prepara para una concentración
muestras de 0,01 gr de remolacha, previamente de 2000 ppm, la cual se pesa 0,01 g de nitrito de sodio
triturada y mezclar cada una de ellas una pequeña en 50 mL de agua destilada.
castidad de silice, triturar en un mortero con ayuda de
un pistilo y pasar a una columna MSPD. Emplear La solución se preparó en un volumen total de 50 mL,
como diluyente agua destilada. Llevar a balones de 25 los cuales contenían 0,0911g de nitrito de sodio con
mL cada uno de los eluyentes obtenidos de cada un 99,5 % de pureza, la concentración de esta
muestra y llevar al aforo cona agua destilada. solución fue de 1822 ppm.
4
Se tomó exactamente 0,1993 g de muestra de Fernández, isabel, Martínez, G., & López, F. (n.d.).
remolacha, previamente triturada, se macero con Determinación de nitratos y nitritos en lechuga
0,7920 g de sílice gel, posteriormente se empaqueto por HPLC. Retrieved from
en una columna (vea imagen 1), para correr con agua https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/38
destilada. 378/Determinación de nitratos y
nitritos.pdf?sequence=1
Lo extraído se disolvió en un balón aforado de 25
mL con agua destilada hasta completar el aforo. Se L.Z., J., D.M., D., W.G., Z., W.B., W., H.K., F., C.J.,
tomó 5 mL de la solución y se adicionaron en un balón S., & H., Y. (2012). Determination of Nitrite
aforado de 10 mL junto a 2,5 mL de sulfanilamida y Using UV Absorption Spectra Based on
2,5 mL de agente NAD; se dejó en reposo durante 15 Multiple Linear Regression. ASIAN JOURNAL
min para su posterior análisis por el OF CHEMISTRY, 25(4), 2273–2277.
espectrofotómetro UV-Vis. https://doi.org/10.14233/ajchem.2013.13840
Cataldo, D. A., Maroon, M., Schrader, L. E., & N, N. (n.d.). Programa de suplementos deportivos del
Youngs, V. L. (1975). Rapid colorimetric instituto australiano del deporte, jugo de
determination of nitrate in plant tissue by remolacha /nitrato. Retrieved from https://g-
nitration of salicylic acid. Communications in se.com/uploads/blog_adjuntos/jugo_de_remola
Soil Science and Plant Analysis, 6(1), 71–80. cha_y_nitratos.pdf
https://doi.org/10.1080/00103627509366547
Nagaraj, P., Gopalakrishna, B. N., & Chandrashekara,
5
K. (2016). Spectrophotometric determination of
nitrite and nitrate ions by diazo coupling
method. International Journal of Chemical
Studies, 4(3), 101–105.
Qiu-Hua, W., Li-Ju, Y., Yang, L., Lan, L., & Others.
(2017). Methods for the detection and
determination of nitrite and nitrate: A review.
Talanta, 165, 709–720.
https://doi.org/10.1016/J.TALANTA.2016.12.0
44