Eicosanoides y drogas relacionadas

91Visión general
“Hormonas locales”: esfera de acción que a menudo se limita al mismo sitio o tejido
anatómico.
Participa en el control de la inflamación, fiebre, coagulación sanguínea, percepción
del dolor, parto.
Derivado del ácido araquidónico y otros ácidos grasos poliinsaturados, que se
producen en los fosfolípidos de membrana.
La mayoría de los efectos mediados por la proteína G se acoplan a los receptores.
Algunos efectos mediados por los canales iónicos y los receptores hormonales
nucleares.
Los Eicosanoides son mediadores que se derivan del ácido araquidónico y otros
ácidos grasos poliinsaturados. Los ácidos grasos precursores se almacenan como
partes de las moléculas de fosfolípidos que forman las membranas del retículo
endoplásmico y el núcleo. A partir de estos fosfolípidos, los ácidos grasos se
movilizan a pedido por la fosfolipasa A2 y luego se convierten enzimáticamente en
los diversos mediadores.
Entre las muchas funciones fisiológicas que están reguladas por los Eicosanoides,
la inflamación, la percepción del dolor y la coagulación de la sangre son de gran
interés en la farmacoterapia.
911 Vías y enzimas clave en la síntesis de eicosanoides.

Esta diapositiva presenta las principales clases de mediadores y las vías

biosintéticas. La liberación de ácido araquidónico de los fosfolípidos de membrana
por la fosfolipasa A2 citoplásmica (cPLA2) alimenta las ciclooxigenasas 1 y 2 (Cox1,
Cox2). Estas enzimas forman la prostaglandina H2, que luego se convierte en otras
prostaglandinas y en tromboxanos por las sintasas específicas posteriores.
El ácido araquidónico también es el sustrato de varias lipoxigenasas (Lox) y de
algunas enzimas del citocromo P450 (P450), que producen Leucotrienos, lipoxinas
y ácidos epoxitrienoicos (EET), respectivamente. Endocannabinoides, que se
forman a partir de los araquidonatos que contienen fosfolípidos a través de vías
separadas, se escinden en ácido araquidónico mediante hidrolasa de ácido graso
amida (FAAH). Alternativamente, pueden metabolizarse primero por Cox2 y
posteriormente por una de las prostaglandinas sintasas, dando lugar a prostamidas.
912 Las señales de calcio activan la cPLA e inician la síntesis de
prostaglandinas y leucotrienos.

El principal lípido de almacenamiento para el ácido araquidónico es el

fosfatidilinositolbisfosfato (PIP). En la estructura de PIP, se destaca el residuo de
araquidonilo.
La síntesis de prostaglandinas y leucotrienos se desencadena por el aumento de
los niveles de calcio citosólico, que puede ser inducido, por ejemplo, por la ruta de
la fosfolipasa C en el sentido de la activación de GPCR. El calcio permite que la PLA
citosólica se una y ataque a la PIP con carga negativa. El ácido araquidónico así
liberado se convierte en precursores de prostaglandinas y tromboxanos por las
ciclooxigenasas asociadas a la membrana (Cox), o alternativamente a precursores
de leucotrienos por lipoxigenasas (Lox).
Estas enzimas se encuentran en las membranas del núcleo y del retículo
endoplásmico.
92Vías biosintéticas de las prostaglandinas y tromboxanos.

Enzimas: ciclooxigenasa (1), tromboxano A2 sintasa (2), prostaglandina D, E, F e I

sintasas (3-6).
Entre los mediadores sintetizados corriente abajo de la ciclooxigenasa y la
prostaglandina H2, el tromboxano A2 desencadena la agregación de trombocitos,
mientras que las prostaglandinas D – I están involucradas en la percepción del dolor,
la inflamación y otros efectos fisiológicos.
En el contexto de la actividad de los trombocitos, las prostaglandinas E y I son
antagonistas del tromboxano.
921 Eicosanoides sintetizados por las lipoxigenasas.
Enzimas: 5lipoxigenasa (7), peroxidasa HPETE (8), 15lipoxigenasa (9), leucotrieno
A4 hidrolasa (10), glutatión-transferasa (11), peptidasas (12,13).
Los leucotrienos son mediadores proinflamatorios; desempeñan un papel
importante en la patogénesis del asma. Las lipoxinas son importantes en la
resolución de la inflamación, es decir, son antiinflamatorias.

93Los dos pasos de la reacción de la ciclooxigenasa.

La reacción de la ciclooxigenasa ocurre en dos etapas, que se catalizan en dos
sitios activos separados. En la ciclooxigenasa en el sitio, el ácido araquidónico
reacciona con dos moléculas de O2 para adquirir un endoperóxido y un grupo
hidroperóxido, lo que produce la prostaglandina G2 intermedia. El hidroperóxido se
reduce luego a un grupo hidroxilo simple en el sitio de la peroxidasa, que da
prostaglandina H2.
Si bien los dos sitios activos están bastante cerca en el espacio, no hay una ruta
directa para que el sustrato migre de uno a otro. La prostaglandina G2 debe, por lo
tanto, disociarse del sitio de la ciclooxigenasa y luego volver a unirse al sitio de la
peroxidasa de la misma molécula u otra enzima.

931 Reacciones en el sitio de la ciclooxigenasa.

La característica clave del sitio activo de la ciclooxigenasa es un residuo de tirosina
(Tyr385 en Cox1; resaltado en púrpura) que, para iniciar la reacción, debe ser un
radical. Este radical extrae un solo hidrógeno del ácido raquidónico, que de este
modo se convierte en un radical. El electrón radical luego migra y se combina con
un O2 n-dirradical.
Una cadena de reacciones radicales adicionales y migraciones conducen a la
ciclación y a la combinación de radicales con una segunda molécula de O 2, que
luego recupera el hidrógeno del residuo de tirosilo y, por lo tanto, restaura la enzima
a su estado activo. El producto, la prostaglandina G 2, luego abandona el sitio de la
ciclooxigenasa.
932 Reducción de la prostaglandina G2 a la prostaglandina H2.
El sitio de la peroxidasa contiene hemo como un grupo protésico. Este hemo
"avanza" un electrón a cada uno de los oxígenos en el grupo peroxi del sustrato,
reduciendo sus cargas formales de −1 a −2, y retiene un átomo de oxígeno. El hemo
mismo se reduce luego utilizando dos moléculas de glutatión.
933Interacción entre los sitios de ciclooxigenasa y peroxidasa.

Los dos sitios activos en la molécula de la ciclooxigenasa están cerca en el espacio,

y se requiere una interacción entre ellos para convertir la tirosina en el sitio de la
ciclooxigenasa a su forma de radical activo.
En esta interacción, se extrae un electrón de la forma reducida de la tirosina y se
consume en la reacción de peroxidasa, reemplazando uno de los electrones
derivados del glutatión en la reacción de peroxidasa regular.
En la imagen, se muestra que el ácido araquidónico indica la ubicación del sitio de
la ciclooxigenasa; Tyr 385 es el residuo de tirosina catalítica. La tirosina está
conectada al hemo en el sitio de la peroxidasa a través de un corto tramo de tres
residuos de aminoácidos, que, según se informa, actúa como el conducto de
electrones entre este y el hemo.
934Cebado del radical tirosina 385 y modo de acción del paracetamol.

La activación de la tirosina 385 comienza con la oxidación del hemo por la

prostaglandina G2 u otro hidroperóxido (ROOH). El hemo oxidado obtiene entonces
un electrón de la tirosina 385 a través del conducto que se muestra en la diapositiva
anterior, activándolo de ese modo; otro electrón probablemente se obtenga de
glutatión (no se muestra). El acetaminofeno intercepta la activación de la tirosina
385 al reducir el hemo mismo.
La inhibición de Cox por el paracetamol es contrarrestada por altos niveles celulares
de hidroperóxidos. Tales concentraciones altas existen en los leucocitos, que
producen peróxido de hidrógeno y otras especies reactivas de oxígeno como
efectores antimicrobianos (ver diapositiva 8.6). Por lo tanto, mientras que el
paracetamol tiene una buena actividad en las neuronas o en las células sensoriales
y, por lo tanto, suprime el dolor y la fiebre, tiene poco efecto sobre la síntesis de
prostaglandinas proinflamatorias en los leucocitos. Se observa una mejor actividad
antiinflamatoria con fármacos que inhiben la enzima de forma redoxindependiente.
94Inhibidores de la ciclooxigenasa no covalentes
Todos los medicamentos que se muestran en esta diapositiva inhiben el sitio de la
ciclooxigenasa de la enzima. Los tres medicamentos en la fila superior inhiben tanto
a Cox1 como a Cox2, mientras que SC560 inhibe solo a Cox1, y rofecoxib solo a
Cox2. Todos los fármacos actúan por inhibición no covalente.
Cox2 se expresa de manera prominente por las células inflamatorias, y se creía que
su inhibición selectiva evitaba los efectos secundarios potencialmente graves que
pueden surgir del bloqueo simultáneo de funciones fisiológicas de "mantenimiento",
que se acreditaron a Cox1. Sin embargo, lo contrario ha resultado ser cierto: un aumento
significativo en la frecuencia de infartos miocárdicos bajo tratamiento con rofecoxib y otros
inhibidores selectivos de Cox2 ha provocado su retirada del mercado. En efecto, los
experimentos con el bloqueo genético de Cox1[68] y Cox2 [69] han arrojado la presunta
dualidad buena o mala incluso antes de que se intridujeran los inhibidores Cox-2.

941 Conformación del ácido araquidónico y del diclofenaco en el sitio activo

Al igual que el ácido araquidónico, tanto la indometacina como el diclofenaco tienen
un grupo ácido carboxílico, y uno podría suponer razonablemente que los tres
carboxilatos interactúan con los mismos residuos de aminoácidos en el sitio activo.
Sin embargo, si bien esto es cierto para el ácido araquidónico y la indometacina, la
cristalografía muestra que el diclofenaco se encuentra en el sitio activo al revés.
Los grupos carboxilo del ácido araquidónico (izquierda) y de la indometacina (no se
muestra) se unen a la tirosina 355 y a la arginina 120. Por el contrario, el grupo
carboxilo del diclofenaco (derecha) está unido por hidrógeno a la serina 530 y a la
tirosina catalítica 385. 1diy.pdb y 1pxx.pdb.
942 Inhibidores de Cox y mutantes de Cox.

Los hallazgos cristalográficos anteriores se confirman mediante mutagénesis

dirigida. La arginina 120, la tirosina 255 o la serina 530 se reemplazaron con
residuos (alanina o fenilalanina) cuyas cadenas laterales no pueden participar en
enlaces de hidrógeno. Un aumento en la concentración de inhibidor requerida para
una inhibición del 50% (IC) en relación con la enzima de tipo salvaje indica que el
mutante se ha vuelto menos susceptible al inhibidor.
Los mutantes que carecían de arginina 120 o tirosina 355 eran virtualmente
resistentes a la indometacina. En contraste, el diclofenaco se vio poco afectado por
estos cambios, pero fue muy sensible al reemplazo de la serina 530 del residuo.
Curiosamente, el piroxicam fue susceptible a los tres cambios, lo que indica que la
unión ávida de este inhibidor involucra a los tres residuos de tipo salvaje. Datos de
[70].
95 El ácido acetilsalicílico es un inhibidor covalente de Cox.

El ácido acetilsalicílico modifica covalentemente la serina 530 en el sitio activo de

Cox1. Esto evita el acceso del ácido araquidónico a la tirosina catalítica y, por lo
tanto, inactiva la enzima. Tenga en cuenta que, a diferencia de la colinesterasa, por
ejemplo, el propio residuo de serina modificado no tiene función catalítica, la
interferencia con la actividad de Cox se debe únicamente a la obstrucción estérica.
El fármaco también acetila el residuo de serina homólogo dentro de Cox2. El sitio
activo de Cox2 tiene un volumen interior mayor, lo que significa que el acceso del
ácido araquidónico a la tirosina catalítica no se evita por completo y la reacción no
se suprime por completo. Sin embargo, la reacción se "descarrila", de modo que la
enzima modificada ya no produce prostaglandina H, sino que ahora convierte el
ácido araquidónico en 15RHETE, que a través de pasos enzimáticos adicionales da
lugar a la epilipoxina A. Al igual que el mediador fisiológico lipoxina A (ver diapositiva
9.2.1), este compuesto tiene actividad antiinflamatoria y probablemente contribuye
a la acción terapéutica del ácido acetilsalicílico [71].
951 Justificación del tratamiento con ácido acetilsalicílico en dosis bajas.

Los pacientes con aterosclerosis avanzada tienen riesgo de infarto de miocardio o

accidente cerebrovascular, que se desarrollan cuando las lesiones ateroscleróticas
en el endotelio vascular desencadenan la formación de coágulos sanguíneos (ver
diapositiva 10.6). La activación y agregación de los trombocitos es un factor clave
en la formación de coágulos sanguíneos, por lo tanto, los medicamentos que inhiben
la agregación de trombocitos desempeñan un papel importante en el tratamiento
preventivo de estos pacientes. Una forma temprana de tal tratamiento fue el ácido
acetilsalicílico de dosis baja. La razón para este tratamiento no es obvia sino más
bien sutil.
Los eicosanoides tienen un doble papel en la agregación de trombocitos (izquierda).
El endotelio vascular inhibe la agregación a través de la secreción sostenida de PGE
y PGI. Cuando el endotelio está dañado, la exposición al colágeno desencadena la
adhesión y agregación de los trombocitos, que se amplifica a través de la secreción
de tromboxanos por parte de las plaquetas. Tanto los tromboxanos que activan los
trombocitos como las prostaglandinas inhibitorias E e I se sintetizan corriente abajo
de la prostaglandina H. El ácido acetilsalicílico inhibe la síntesis de este precursor
común de la ciclooxigenasa: ¿por qué debería esto resultar en una inhibición neta
de la agregación? La respuesta está en las diferentes vidas de las moléculas
enzimáticas en las células endoteliales y en los trombocitos, respectivamente
(derecha). Las células endoteliales son nucleadas y pueden, después de cada
La dosificación del fármaco reemplaza las moléculas de ciclooxigenasa inactivadas
de forma covalente por otras recién sintetizadas. En contraste, los trombocitos
carecen de la síntesis de núcleos y proteínas, y por lo tanto no pueden reemplazar
las moléculas de enzimas modificadas, por lo que el efecto de dosis repetidas será
acumulativo. Con el tiempo, la actividad de la ciclooxigenasa disminuirá mucho más
en los trombocitos que en las células endoteliales.

952 La inhibición de Cox puede promover la síntesis de leucotrienos.

Como hemos visto en la diapositiva 9.1.2, las enzimas ciclooxigenasa y lipoxigenasa
se extraen del mismo conjunto de sustrato de ácido araquidónico. Por lo tanto, si se
inhibe la ciclooxigenasa, más sustrato puede alimentar la síntesis de leucotrienos
que, como varias prostaglandinas, tienen actividad proinflamatoria. Una
consecuencia clínica bien conocida de este efecto es la exacerbación del asma
bronquial en pacientes que toman ácido acetilsalicílico.
La producción de leucotrienos en exceso ilustra que la inhibición de Cox como una
estrategia antiinflamatoria tiene sus limitaciones, y que son deseables estrategias
más selectivas para controlar la acción del eicosanoide.
96 Inhibidores que actúan aguas abajo de la prostaglandina H2.

La tromboxano A2 sintasa es la enzima que convierte la prostaglandina H2 en

tromboxano A2 (ver diapositiva 9.2). La enzima, así como el receptor para el
tromboxano A2, son inhibidos por el medicamento ramatroban.
La prostaglandina D está implicada tanto en la inflamación como en el dolor. El
fármaco experimental Cay 10471, que es estructuralmente similar al ramatroban,
inhibe los receptores de prostaglandina D.
97 Endocannabinoides.
Arachidonatecattainante, mediadores derivados de la membrana.
Síntesis a demanda, activada por el calcio.
Mediar retroalimentación sináptica negativa.
Receptores CB1 implicados en la percepción del dolor tanto en el sistema nervioso
central como en el periférico.
Los receptores CB2 se encuentran en las células inmunes.
Hemos visto antes que las células postsinápticas ejercen una retroalimentación
negativa sobre las células presinápticas (ver diapositiva 6.9.1). Los mediadores que
realizan este papel son los endocannabinoides. Dos endocannabinoides principales
son la araquidoniletanolamina (AEA, anandamida) y la araquidonilglicerol (2AG).
Estos mediadores actúan sobre los receptores de cannabinoides, que también son
el objetivo de los principales ingredientes activos del cannabis.
Los receptores cannabinoides son GPCR y tienen dos subtipos. Los receptores CB
dominan el sistema nervioso y son el principal objetivo farmacológico. Los
receptores CB modulan la función de las células inmunitarias, pero esta observación
aún no se ha traducido en farmacoterapia.
971 Inhibición de la retroalimentación de la transmisión sináptica por
endocannabinoides.
Tanto la anandamida como el araquidonilglicerol contienen ácido araquidónico
unido a un resto polar que se deriva biosintéticamente de un grupo de cabeza de
fosfolípido. Ambos mediadores se sintetizan en la célula postsináptica en respuesta
a las señales de calcio. Como hemos visto, varios receptores de neurotransmisores
elevarán directa o indirectamente los niveles de calcio.
Los mediadores son liberados por la célula postsináptica en la hendidura sináptica.
La estimulación de los receptores CB presinápticos activa las proteínas G, los
dímeros Gβγ liberados inhiben los canales de Ca cognados y activan los canales
de K, lo que reduce la excitabilidad de la membrana y la liberación del transmisor.
Los mediadores se inactivan por la captación celular y la posterior degradación por
las lipasas (FAAH, MAGL; ver diapositiva 9.7.3).
972 Biosíntesis de Endocannabinoides

Esta diapositiva muestra las vías biosintéticas que producen anandamida

(Narachidonylethanolamine) y 2 araquidonilglicerol (2AG). Los niveles elevados de
Ca activan una Naciltransferasa que transfiere el ácido araquidónico de otra
molécula de fosfolípido a la amina en el grupo principal de fosfatidiletanolamina
(PE).
La anandamida es liberada por la fosfolipasa D (PLD). 2AG es producida por la
diacilglicerol lipasa (DAGL) corriente abajo de la ruta de la fosfolipasa C.
973 Degradación de Endocannabinoides

La anandamida se hidroliza mediante hidrolasa de ácido graso (FAAH) y

2aracidonilglicerol por lipasa de monoacilglerol (MAGL). Ambos mediadores
también pueden ser metabolizados por la ciclooxigenasa 2 para producir
prostamidas, que tienen funciones de señalización adicionales que aún no están
bien caracterizadas.

974 Medicamentos que interactúan con el sistema endocannabinoide.

El Δ9-tetrahidrocannabinol (THC) es el principal ingrediente activo del cannabis y

estimula los receptores CB1 y CB2. HU308 es un agonista selectivo de CB2.
URB597 inhibe la acil amida hidrolasa grasa. UCM707 generalmente se describe
como un inhibidor de la captación celular de endocannabinoides, sin embargo, no
está claro en la actualidad que exista un transportador específico para esta
recaptación. El efecto funcional de ambos inhibidores es amplificar la señalización
endocannabinoide.