PREPARACIÓN Y OBSERBACIÓN DE CELULAS SANGUÍNEAS

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE EDUCACIÓN Y CIENCIAS HUMANAS

LIC CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIÓN AMBIENTAL

ll SEMESTRE

BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

AUTORES: JAIDER VARGAS LOZANO

MARIA TORRES BARON

LUZDEIS TRUJILLO ESPITIA

NATALIA CASTRO ESPINOSA

Resumen

La sangre es un tipo de tejido conjuntivo especializado que tiene la función de hacer llegar el
oxígeno y el alimento a todas las células del cuerpo, y retirar el anhídrido de carbono y las
sustancias de desecho. Está constituida por organelas polimorfonucleares (basófilos, neutrófilos y
eosinófilos y por organelas mononucleares (monocitos y linfocitos). El objetivo fue observar a
través del microscopio las diferentes organelas celulares, para este cometido se usaron tres tipos
de tinción para poder observar y detallar las diferentes organelas celulares a nuestro acomodo las
cuales fueron: tinción de Giemsa, tinción de Wright y tinción con hematoxilina, con estos tres tipos
de tinción pudimos observar organelas tales como Eritrocitos, linfocitos, neutrófilos. Siguiendo
esta secuencia en la primera tinción se pudo observar muchos eritrocitos y algunos neutrófilos, en
la segunda tinción se observaron muchos eritrocitos, algunos neutrófilos, escasos monocitos y
linfocitos, en la tercera no obtuvimos buenos resultados ya que solo observamos eritrocitos, esto
se debió a que quizás no se realizo correctamente el procedimiento para este tipo de tinción de
esta manera pudimos ver experimentalmente como está compuesta nuestras células sanguíneas y
como son las formas de sus organelas.
INTRODUCCIÓN
El cuerpo humano adulto tiene entre 4,5 y 6
litros de sangre. El 55% es plasma, que es la
parte líquida, compuesta por agua, sales
minerales y proteínas. El 45% restante se
compone de glóbulos rojos, glóbulos blancos
y plaquetas. La sangre también transporta
gases, hormonas, vitaminas, glucosa, etc.__1
La sangre tiene la función de hacer llegar el
oxígeno y el alimento a todas las células del
cuerpo, y retirar el anhídrido de carbono y las
sustancias de desecho. _2
Por la circulación sanguínea viajan tres tipos
de células:
1.- Los glóbulos rojos
. También llamados eritrocitos. Constituyen
aproximadamente el 40% del volumen
sanguíneo. Se producen en la médula ósea.
Son células en forma de disco bicóncavo que
no tienen núcleo. En la sangre hay
normalmente entre 4 y 5,5 millones por
milímetro cúbico (mm3). Viven unos 120 días.
Su tamaño es de unas 8 micras (8 milésimas
de milímetro). Su función es transportar el
oxígeno desde los pulmones hasta las células
de todos los tejidos corporales. Para ello
utilizan una proteína llamada hemoglobina,
que contiene hierro y es capaz de trasportar
moléculas de oxígeno. La hemoglobina es lo
que da el típico color rojo a los eritrocitos.
Cuando por alguna enfermedad hay falta de
eritrocitos en la sangre se padece de anemia.
El índice hematocrito es un indicador sobre el
porcentaje de glóbulos rojos que hay en la
sangre por unidad de volumen; lo normal esta
entre 42% y 50% en hombres y entre el 38% y
47% en mujeres. Las características de la
membrana de los eritrocitos definen los
grupos sanguíneos. _3
2.- Glóbulos blancos o leucocitos
Son células defensivas que forman parte del
sistema inmunológico. Tienen la función de
combatir los microorganismos y cuerpos
extraños. Se producen en la médula ósea. En
la sangre hay entre 4.000 y 10.000 leucocitos
por milímetro cúbico. Los glóbulos blancos
están dispersos por todo el cuerpo, y muchos
de ellos se adhieren a las paredes de los vasos
sanguíneos o los traspasan para ir a otros
tejidos o allí donde sean necesarios._4
Hay varios tipos de leucocitos, que se
clasifican en:
- Polimorfonucleares:
Son células defensivas que tienen un núcleo
polimorfo con numerosos gránulos en su
citoplasma. Se clasifican a su vez en 1)
neutrófilos, 2) basófilos y 3) eosinófilos. Los
neutrófilos son los encargados de fagocitar o
"comerse" sustancias extrañas, como las
bacterias y los agentes externos que entran
en el cuerpo; son los leucocitos más
numerosos y su cantidad aumenta cuando
hay una infección. Los basófilos segregan
sustancias anticoagulantes y participan en el
control de la inflamación. Los eosinófilos son
células fagocitarias que eliminan los
complejos antígeno-anticuerpo y que por su
capacidad citotóxica tienen una función de
defensa ante los microorganismos no
fagocitables, como los parásitos. _5
- Mononucleares:
- Linfocitos:
Son los leucocitos de menor tamaño y las
células del sistema inmunológico
especializadas en regular la inmunidad
adquirida. Se localizan en los ganglios
linfáticos. Los linfocitos son los encargados de
la producción de anticuerpos y de la
destrucción de células defectuosas. Hay dos
tipos: 1) los linfocitos T tienen una función
inmunológica celular; 2) los linfocitos B se aire libre, después de seca la muestra se llevo
encargan de fabricar los anticuerpos. _6 al microscopio para observar.

- Monocitos: Técnica con hematoxilina: se hizo un

Son las células sanguíneas de mayor tamaño.
Después de viajar por la sangre llegan al
tejido conectivo, d_7
Objetivo.
Observar e identificar mediante el uso del
microscopio y técnicas de coloración
adecuadas el tejido sanguíneo y las diferentes
clases de células que lo constituyen y sus
principales organelas.
extendido sanguíneo, se dejo secar , se llevo
al puente de coloración se agregó alcohol
metílico y se dejo actuar por 5 min, pasados
los 5 minutos se agrego directamente el
colorante de hematoxilina y eosina y se dejó
actuar por 15 minutos, pasado este tiempo se
lavo la muestra, se seco con una servilleta y
luego se dejo secar al aire, después de seca la
muestra se llevo al microscopio para
observar.

Metodología.

Con la ayuda del docente se prepararon tres Resultados

muestreas de sangre, las cuales se observaron
en el microscopio, una muestra se le aplico el Técnica de tinciónReactivos y
colorante de Giemsa, a otra muestra se le colorantes
aplico el colorante de Wright y a la ultima se utilizados
le aplico la colorante hematoxilina. Técnica de May- Alcohol metílico
Gruwald Giemsa (5min), Giemsa y
Técnica de May-Gruwald Giemsa: Se Azul de Metileno (7-
deposito una gota de sangre en un extremo 10 min)
de un portaobjetos y con la ayuda de otro Técnica de Wright Alcohol metílico (5
portaobjetos se hizo un extendido de la min), Wright
muestra deslizando suavemente el
portaobjeto hacia el otro extremo, se dejó
secar la muestra al aire. Después de seca la
muestra se llevó al puente de coloración y se Técnica con Alcohol metílico
le agregó alcohol metílico, luego se agregó el hematoxilina (5min), Eosina y
colorante de Giemsa y azul de metileno, se Hematoxilina
espero de 7-10 minutos a que actuaran los
colorantes, se lavó la muestra, se secó y luego
se llevo al microscopio para observar con el
objetivo de observación (40x)

Técnica de Wright: se realizó un frotis

sanguíneo, se dejo secar al aire libre, la
muestra se llevó al puente de coloración, se le
adiciono a la muestra alcohol metílico,
pasados 5 minutos se agrego directamente el
colorante de Wright, se dejaron pasar 5
minutos, se lavo la muestra y luego se seco
con una servilleta y después se dejo secar al
 Figura 2: observación de células sanguíneas
mediante tinción de Wright en 40x

Esta muestra fue coloreada con la técnica de

Técnica de May-Gruwald Giemsa Wright con la cual se pudieron observar
algunas organelas celulares como eritrocitos,
neutrófilos, plaquetas y algunos linfocitos.

Técnica con hematoxilina

Neutrófilo. Glóbulos rojos

Figura 1: observación de células sanguíneas
mediante la tinción de Giemsa en 40x

se observaron claramente los eritrocitos y Glóbulos rojos teñidos Eritrocitos rojizos

aunque los neutrófilos son escasos se Figura 3: observación de células sanguíneas
pudieron observar algunos de estos. mediante tinción de Hematoxilina

Técnica de Wright Esta muestra fue coloreada con Hematoxilina

con la cual se pudieron observar muchos
eritrocitos.

Discusión

Técnica de May-Gruwald Giemsa

En esta tinción se pudieron observar los

eritrocitos y los neutrófilos, lo cual indica que
la tinción tuvo buenos resultados, pero no los
resultados deseados porque no pudimos
observar otras estructuras celulares. también
al ver cómo están los eritrocitos podemos
decir que hicimos un buen extendido
sanguíneo sobre el portaobjetos ya que no se
encuentran en grandes cantidades los
glóbulos rojos juntas.
Técnica de Wright
En esta tinción se pudieron observar los
eritrocitos y los neutrófilos, plaquetas entre
otras organelas celulares de las células
sanguíneas, en general fue una buena tinción
la realizada, los eritrocitos están distribuidos
algo separados lo cual nos indica que hicimos
un buen extendido sanguíneo, también se
pudieron observar linfocitos estos tomaron
una coloración violeta ya que así se tiñe su
núcleo con los colorantes aplicados.
Técnica con hematoxilina.
En esta tinción solo vimos muchos glóbulos
rojos aglomerados de color purpura y otros
eritrocitos de color rojizo. Esta fue la tinción
donde no obtuvimos buenos resultados, ya
que no pudimos observar otras organelas
celulares además de los eritrocitos. Ahora la
pregunta es ¿por qué los glóbulos se ven tan
juntos y casi todos purpuras?
Causas de error en la tinción del extendido
sanguíneo.
Una extensión de sangre bien teñida debe
caracterizarse por una buena diferenciación
de células subcelulares de los leucocitos,
definición compleja de glóbulos rojos y de la
ausencia de precipitados o artefactos no
deseados. Los colorantes utilizados durante la
practica pueden producir pocos satisfactorios
en la coloración del extendido sanguíneo
siendo algunos de estos malos resultados las
siguientes:
- Extendidos excesivamente gruesos
- Tiempo prolongado dando lugar a la
sobretensión
- Lavado insuficiente
- empleo de solución diluyente o
colorante demasiado alcalino.
En este caso los eritrocitos aparecen azules,
purpuras o verdes. _8
Con esta información deducimos que la
coloración se vio purpura porque se hizo un
lavado insuficiente o quizás el colorante fue
demasiado alcalino, aunque lo mas probable
es que haya sido lavado insuficiente, además
las células se ven muy aglomeradas ya que no
se hizo un buen extendido sanguíneo.
Otra pregunta qué nos surgió al realizar esta
practica es la siguiente: ¿para que se utilizó el
alcohol metílico.?
La respuesta a esta pregunta es muy sencilla
es utilizado para fijar el extendido de sangre.
La mejor pregunta que non hicimos fue la
siguiente:
¿Porque no pudimos observar basófilos?
Los basófilos son importantes para indicar
reacciones inflamatorias, pero su activación
descontrolada también se ha vinculado a
alergias y otras reacciones de
hipersensibilidad ¿Por qué? cuando el
sistema inmunitario detecta un alergeno
activa la producción de un tipo de anticuerpo
que es capaz de adherirse a la superficie de los
basófilos. cuando nuestro organismo vuelve a
tener contacto con el alergeno, este es
detectado por los anticuerpos unidos a los
basófilos, lo que induce que se libere el
contenido de sus gránulos. _9
Según lo anterior es más probable encontrar
basófilos en personas que tengan una alergia
y como las muestras que tomamos la persona
a quien se la tomamos no tenia una alergia en
el instante por eso es difícil estas cosas.
CONCLUSION
Las células sanguíneas desempeñan un papel
muy importante en los organismos que la
contienen ya que mediante esta se da el
intercambio de dióxido de carbono por
oxígeno y las células se alimentan, también
podemos decir que según su forma las células
sanguíneas tendrán una función en
específico.

Bibliografía.

(1,2,3,4,5,6,7): Articulo-composición de la
sangre-por Saraí Sánchez-universidad de
Carabobo-facultad de odontología-tomado
de:
https://www.academia.edu./38751435/com
posiciondelasangre.

(8): Rodak B. Hematología: fundamentos y

aplicaciones clínicas. 2 ed. Rondinome s, trad.
Buenos aires: Medicina panamericana 2004
884 pág.

(9): 1. Falcone F.H, Haas and Gibbs. B.F(2000).

The human bashophil: a new apreciation of its
role in immune responses. Blood, 96(13),
4028-38
2.Mukai, k, and Galli, sj. (2013) basophils in: Ls
John Wiley and sons Ltd, Chichester.