CROMATOGRAFIA DE GASES

1. ¿En qué se diferencian la cromatografía gas-líquido y la gas-solido?

R// En la cromatografía gas-líquido, la fase estacionaria es un líquido que se inmoviliza en
un sólido. La retención de constituyentes de muestra implica equilibrios entre una fase
gaseosa y una fase líquida. En la cromatografía gas-sólido, la fase estacionaria es una
superficie sólida que retiene los analitos por adsorción física. Aquí las separaciones
implican equilibrios de adsorción / desorción.

2. ¿Cómo funciona un medidor de flujo de pompas de jabón?

R// Cuando se aprieta una pera de goma que contiene una solución acuosa de jabón o
detergente se forma una película de jabón en el camino del gas; a continuación se mide el
tiempo necesario para que esta película se desplace entre dos divisiones de la bureta y se
calcula entonces el flujo volumétrico.

3. ¿Qué es la programación de temperatura en cromatografía de gases? .Por que

se usa con tanta frecuencia?
R// En la programación de temperatura se aumenta la temperatura de la columna en
forma continua o por etapas a medida que avanza la separación de la muestra. Se usa
para muestras cuya temperatura de ebullición varia ampliamente ya que mejora los
cromatogramas.

4. Defina: a) volumen de retención, b) volumen de retención corregido, c) volumen

de retención especifico.
R//
a. Volumen de retención: El volumen de retención VR está definido por la ecuación:
𝑽𝑹 = 𝒕𝑹 𝑭
donde 𝒕𝑹 es el tiempo de retención y F es la tasa de flujo volumétrico.

b. Volumen de retención corregido: El volumen de retención corregido es el

volumen de retención después de la corrección a la presión promedio dentro de la
columna. Está dado por:
𝑽𝟎𝑹 = 𝒋𝒕𝑹 𝑭

donde j es el factor de corrección de presión dado por la ecuación:

𝟑[(𝑷𝑰 /𝑷)𝟐 − 𝟏]
𝒋=
𝟐[(𝑷𝑰 /𝑷)𝟑 − 𝟏]
Donde Pi es la presión de entrada y P es la presión de salida (presión atmosférica)

c. Volumen de retención específico: El volumen de retención especifico está

definido por la ecuación:
𝑽𝟎𝑹 − 𝑽𝟎𝑴 𝟐𝟕𝟑
𝑽𝒈 = 𝒙
𝒎𝒔 𝑻𝑪
donde, 𝑽𝟎𝑴 es el volumen de retención de una especie no retenida, 𝒎𝒔 es la masa
de la fase estacionaria, y 𝑻𝑪 es la temperatura de la columna en kelvin.

5. Cuál es la diferencia entre un detector sensible a la concentración y un detector

sensible a la masa? .Los siguientes detectores son sensibles a la masa o a la
 concentración? a) de conductividad térmica, b) de emisión atómica, c)
termoiónico, d) de captación de electrones, e) de fotometría por flama, f ) de
fotoionización.

R// Un detector sensible a la concentración responde a la concentración del analito en la

fase móvil, mientras que un detector sensible a la masa responde al número de moléculas
analíticas o iones que entran en contacto con el detector. Las áreas máximas para un
detector sensible a la concentración aumentan a medida que disminuye la velocidad de
flujo porque el analito está en contacto con el detector durante un período más
prolongado. Las áreas de pico para un detector sensible a la masa no se ven afectadas
en gran medida por la velocidad de flujo. Usando CS para sensibilidad a la concentración
y MS para sensible a la masa, encontramos para cada uno de los detectores enumerados:
(a) conductividad térmica (Concentración), (b) emisión atómica (Masa), (c) termoiónica
(Masa), (d) electrón captura (Concentración), (e) llama fotométrica (Masa), (f) ionización
de llama (Masa).

6. Explique los principios de funcionamiento de los detectores que se encuentran

en el problema 5
R//
a. El detector de conductividad térmica se basa en la disminución de la conductividad
térmica del gas portador de helio o hidrógeno provocado por la presencia de moléculas de
analito.
b. El detector de emisión atómica se basa en la intensidad de las líneas de emisión
atómica generadas a partir de algunos de los elementos contenidos en las moléculas del
analito. La atomización del analito y la excitación de la emisión atómica se produce
pasando el eluyente a través de un campo de microondas enérgico.
c. El detector termoiónico se basa en las corrientes iónicas producidas cuando la fase
móvil se quema en una llama de hidrógeno y luego se pasa sobre un cordón de silicato de
rubidio calentado. Se usa principalmente para analitos que contienen fósforo o nitrógeno.
d. El detector de captura de electrones se basa en la atenuación por las moléculas de
analito de una corriente de ion permanente generada en el efluente por ionización de
moléculas de fase móvil con un emisor β. Los grupos funcionales electronegativos son
particularmente efectivos para capturar electrones y reducir la corriente de iones.
e. El detector fotométrico de llama se basa en la radiación emitida por las moléculas
que contienen azufre y fósforo cuando el eluyente pasa a una llama de hidrógeno / aire a
baja temperatura.
f. El detector de ionización de llama se basa en la ionización del analito en una
pequeña llama de aire / hidrógeno. Los iones y electrones producidos son recolectados
por un par de electrodos polarizados que dan lugar a una corriente.

7. ¿Cuáles son las principales ventajas y limitaciones de cada uno de los

detectores que se mencionan en el problema 5?
R//
a. conductividad térmica:
 Ventajas: aplicabilidad general, amplio rango lineal, simplicidad, no destructivo.
 Desventaja: baja sensibilidad.

b. emisión atómica:
Ventajas: selectividad, rango lineal grande, alta sensibilidad, aplicabilidad general.
Desventajas: costos de equipos destructivos y altos.
c. termoiónicas:
 Ventajas: alta sensibilidad para compuestos que contienen N y P, buen rango
lineal.
 Desventajas: destructivo, no aplicable para muchos analitos.

d. captura de electrones:
 Ventajas: alta sensibilidad, selectividad hacia analitos con grupos funcionales
electronegativos, no destructiva.
 Desventajas: respuesta no lineal bajo algunas circunstancias, rango de respuesta
limitado.

e. llama fotométrica:
 Ventajas: selectividad hacia S y P que contienen analitos, buena sensibilidad.
 Desventajas: aplicabilidad destructiva y limitada.

f. ionización de la llama:
 Ventajas: aplicabilidad general, amplio rango lineal, buena sensibilidad, bajo nivel
de ruido, baja sensibilidad hacia la mayoría de los gases portadores y el agua,
simplicidad, facilidad de uso.
 Desventaja: destructivo

8. ¿Cuál es la diferencia entre un cromatograma de iones totales y un

cromatograma de masas?
R// Se obtiene un cromatograma de iones total sumando las abundancias de iones en
cada espectro de masas y trazando en función del tiempo. Se obtiene un cromatograma
de masas controlando un valor de m/z durante el experimento de cromatografía y
trazando la abundancia de iones en función del tiempo.

9. Analice por que la combinación de cromatografía de gases y espectrometría de

masas es tan potente.
R// La combinación de GC con MS permite la identificación de especies que eluyen de la
columna cromatográfica. El cromatograma de iones total proporciona información similar a
un cromatograma de GC convencional. Al monitorear los iones seleccionados, se puede
obtener información sobre especies específicas. Al escanear el espectro de masas
durante el experimento de cromatografía, se pueden identificar especies que se eluyen en
distintos momentos. La cromatografía de gases junto con la espectrometría de masas en
tándem permite realizar identificaciones aún más específicas.

10. ¿Que son los metodos acoplados de cromatografia de gases? Describa

brevemente dos de ellos.
R// Los métodos con guiones combinan GC con una técnica instrumental diferente tal
como espectrometría de masas, FTIR, espectroscopía de RMN o métodos
electroquímicos. El efluente de la columna de GC se controla continuamente mediante la
segunda técnica o se recoge y se mide.

11. ¿Cuál es el material de relleno que se utiliza en la mayoria de las columnas

empacadas para cromatografia de gases?
R// El material de embalaje más utilizado es partículas de tierra de diatomeas que tienen
diámetros que varían de 250 a 170 μm o de 170 a 149 μm.
12. ¿En qué se diferencian las siguientes columnas tubulares abiertas? a)
Columnas PLOT; b) Columnas WCOT; c) Columnas SCOT
R//
a. Una columna PLOT es una columna tubular abierta de capa porosa, que también se
denomina columna tubular abierta revestida de soporte (SCOT). La superficie interna de
una columna PLOT está revestida con una película delgada de un material de soporte,
como una tierra de diatomeas. Este tipo de columna contiene varias veces una gran fase
estacionaria, al igual que una columna revestida de pared.
b. Una columna WCOT es simplemente un tubo capilar formado a partir de sílice fundida,
acero inoxidable, aluminio, cobre, plástico o vidrio. Sus paredes internas están recubiertas
con una capa delgada de la fase móvil.
c. La columna SCOT se describe en la parte (a) de esta pregunta.

13. ¿Cuáles son las columnas mega capilares? ¿Para qué se utilizan?
R//Las columnas mega capilares son columnas tubulares abiertas que tienen un diámetro
interior mayor (530 μm) que las columnas tubulares abiertas típicas, que varían en
diámetro de 150 a 320 μm. Estas admiten muestras de tamano similar al que se emplea
en las columnas empacadas. El funcionamiento de las columnas tubulares abiertas
megacapilares no es tan bueno como el de las columnas de menor diametro, pero es
significativamente mejor que el de las columnas empacadas.

14. ¿Cuáles son las ventajas de las columnas capilares de silice fundida en
comparación con las columnas de vidrio o las metálicas?
R// Las columnas de sílice fundida tienen mayor resistencia física y flexibilidad que las
columnas tubulares abiertas de vidrio y son menos reactivas con los analitos que las
columnas de vidrio o metal.

15. ¿Qué propiedades debe tener una fase estacionaria liquida en cromatografía de
gases?
R// Las propiedades deseables de una fase estacionaria para GC incluyen: baja
volatilidad, estabilidad térmica, inercia química y características de solvente que
proporcionan valores adecuados k y α para los analitos a separar.

16. ¿Qué efecto tiene el espesor de la película de la fase estacionaria sobre los
cromatogramas de gases?
R// El espesor de la película influye en la velocidad a la que se transportan los analitos a
través de la columna, y la velocidad aumenta a medida que disminuye el grosor. Menos
ancho de banda se encuentra con películas delgadas.

17. ¿Por qué las fases estacionarias en cromatografía de gases están con
frecuencia enlazadas o polimerizadas? .Que significado tienen estos términos?
R// Las fases estacionarias líquidas generalmente están unidas y / o reticuladas para
proporcionar estabilidad térmica y una fase estacionaria más permanente que no se filtre
de la columna. La unión implica unir una capa monomolecular de la fase estacionaria a la
superficie de relleno por medio de enlaces químicos. La vinculación cruzada implica el
tratamiento de la fase estacionaria mientras está en la columna con un reactivo químico
que crea enlaces cruzados entre las moléculas que componen la fase estacionaria.

18. Enumere las variables que originan a) el ensanchamiento de la banda y b) la

separación de la banda en cromatografía de gas-liquido.
R//
a. El ensanchamiento de la banda surge de caudales muy altos o muy bajos, partículas
grandes que conforman el empaque, capas gruesas de fase estacionaria, baja
temperatura y velocidades lentas de inyección.
b. Se mejora la separación de bandas manteniendo las condiciones de modo que k se
encuentre en el rango de 1 a 10, usando partículas pequeñas para empacar, limitando la
cantidad de fase estacionaria para que los recubrimientos de partículas sean delgados e
inyectando la muestra rápidamente.

19. ¿Que son los índices de retención? Explique cómo se determinan.

R// El índice de retención para un analito es una medida de la velocidad a la que se
transporta a través de una columna en comparación con la velocidad de movimiento de
dos alcanos normales, uno que se mueve más rápido que el analito y el otro que se
mueve más lentamente. Para obtener el índice de retención de un analito en una columna
dada, se determina el logaritmo de los tiempos de retención ajustados para los dos
alcanos y el analito. El índice de retención para butano es siempre 400 y para pentano
500. El índice de retención para el analito se obtiene luego por interpolación entre los dos
índices de retención logarítmica del alcano.

20. El mismo compuesto polar se analiza por cromatografía de gases con una
columna SE-30 (muy poco polar) y luego con una columna Carbowax 20M (muy
polar). ¿Como variara 𝑲 = 𝑪𝑺 /𝑪𝑴 entre las dos columnas?
R// El coeficiente de distribución para un compuesto polar será mayor en la columna
carbowax 20M que en la columna no polar SE-30.

21. Utilice los datos de retención que se dan a continuación para calcular el índice
de retención del 1 hexeno.

R//

24. La fase estacionaria liquida de la columna descrita en el problema 23 era

didecilftalato, un solvente de polaridad intermedia. Si en lugar de este se hubiera
utilizado un solvente no polar como aceite de silicona, ¿los tiempos de retención de
los tres compuestos serían mayores o menores? ¿Por qué?
R// Dado que los tres compuestos son relativamente polares, serían menos compatibles
con un disolvente no polar tal como un aceite de silicona que con ftalato de didecilo.
Como se gastaría menos tiempo en la fase estacionaria para el aceite de silicona, tR sería
más pequeño.

27. ¿Cuál sería el efecto de los siguientes casos sobre la altura de plato de una
columna? Explique su respuesta.
a) Aumentar el peso de la fase estacionaria respecto al peso del relleno.
b) Disminuir la velocidad de inyeccion de la muestra.
c) Aumentar la temperatura de la portezuela de inyeccion.
d) Incrementar la tasa de flujo.
e) Reducir el tamano de la particula del relleno.
f ) Disminuir la temperatura de la columna.

R//
a. El aumento de VS / VM conduce a un aumento en el espesor de la película df. Este
aumento causa un aumento marcado en CSu (Tabla 26-3) y, por lo tanto, un aumento en
H.
b. La reducción de la velocidad de inyección de la muestra conducirá a la ampliación de la
banda porque todas las moléculas no comienzan a atravesar la columna en el mismo
instante. Eficiencia reducida y un aumento en los resultados H
c. El aumento de la temperatura del puerto de inyección tenderá a disminuir H porque
aumentará la misma tasa de evaporación. Por lo tanto, la muestra se colocará en la
columna en una banda estrecha con menos extensión de zona inicial.
d. Incrementar la velocidad de flujo puede causar aumentos o disminuciones en H
dependiendo del caudal, como se puede ver en la Figura 26-8b.
e. La reducción del tamaño de partícula aumenta el área de la superficie y, por lo tanto,
disminuye el grosor de la película df en el término CSu en las Ecuaciones 26-23 y 26-24.
Una disminución en el tamaño de partícula también hace que el término CMu sea más
pequeño. Ambos efectos conducen a una altura más pequeña de la placa (Tabla 26-3).
f. La disminución de la temperatura disminuirá las velocidades de difusión DM y DS. En la
Tabla 26-3, se puede ver que el término B / u se vuelve más pequeño y los términos CSu
y CMu se vuelven más grandes con la disminución de los coeficientes de difusión. Esto
puede conducir a un aumento en H si los términos CSu y CMu dominan o una disminución
en H si domina el término B / u. En la mayoría de los casos, H aumenta a medida que la
temperatura disminuye.

28. ¿Qué tipo de mezclas se separan por cromatografía gas-solido?

R// La cromatografía gas-sólido se usa principalmente para separar especies gaseosas de
masa molecular baja tales como dióxido de carbono, monóxido de carbono y óxidos de
nitrógeno.

29. ¿Por qué la cromatografía gas-solido no se utiliza tanto como la cromatografía

gas-liquido?
R// La cromatografía gas-sólido tiene una aplicación limitada porque los compuestos
activos o polares se retienen más o menos permanentemente en la fase estacionaria.
Además, a menudo se observa una cola severa debido a las características no lineales
del proceso de adsorción física.
 CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS
1. Enumere los tipos de sustancias en los cuales son mas aplicables los
siguientes
metodos de cromatografia:
a) gas-liquido
b) absorcion de liquidos
c) reparto liquido-liquido
d) reparto en fase inversa
e) intercambio ionico
f ) penetracion en gel
g) gas-solido
h) filtracion sobre gel
i) Pares ionicos
R//
a. Especies que son algo volátiles y térmicamente estables.
b. Sustancias orgánicas de masa molecular baja a moderada no polar y particularmente
especies orgánicas isoméricas.
c. Especies moleculares que son no volátiles o térmicamente inestables.
d. La mayoría de los compuestos orgánicos de masa molecular baja a moderada que son
no volátiles o térmicamente inestables.
e. Sustancias que son iónicas o que pueden derivatizarse para formar iones.
f. Compuestos de alta masa molecular que son solubles en disolventes no polares.
g. Gases no polares de baja masa molecular.
h. Compuestos hidrófilos de alta masa molecular.
i. Pequeños iones orgánicos e inorgánicos.
2. Describa tres métodos generales para mejorar la resolución en la cromatografía
de reparto.
R// Tres métodos para mejorar la resolución incluyen:
 Ajuste de kA y kB mediante el empleo de una fase móvil multicomponente y la
variación de los disolventes para encontrar una mezcla óptima.
 Variación en la composición química del sistema solvente de tal forma que hace
que α sea más grande.
 Emplear un empaque diferente en el cual α es mayor.

3. Explique una forma de modificar el factor de retención de un soluto en la

cromatografía de reparto.
R// En la cromatografía de partición, k se varía convenientemente usando un sistema de
dos o más componentes disolventes y variando la relación de los disolventes.

4. .Como se puede modificar el factor de selectividad en a) la cromatografia de

gases y b) la cromatografia de líquidos?
R//
a. En la cromatografía de gases, α se varía generalmente variando el relleno de la
columna.
b. en LC, tanto el relleno de la columna como la composición química de la fase móvil se
pueden variar para producir mejores valores α.
5. Al preparar un gradiente con hexano-acetona para una columna de HPLC rellena
de alumina, ¿es deseable aumentar o disminuir la proporción de hexano a medida
que progresa la elución en la columna?
R// En la cromatografía de adsorción sobre un relleno de alúmina, generalmente es mejor
aumentar la polaridad de la fase móvil a medida que avanza la elución. Por lo tanto, el
tiempo de acetona en hexano debería aumentar a medida que avanza la elución.

6. ¿Que significa el intervalo de respuesta lineal de un detector?

R// El rango de respuesta lineal de un detector es el rango de concentración de analito o
masa sobre el que el detector responde linealmente.

7. Defina:
a) elucion isocratica
b) elucion con gradiente
c) inyeccion a flujo detenido
d) relleno de fase inversa
e) relleno de fase normal
f ) cromatografia de pares de iones
g) cromatografia ionica
h) detector de propiedades de la solucion
i) detector de propiedades del soluto
j) purga
R//
a. En una elución isocrática, la composición del disolvente se mantiene constante durante
toda la elución.
b. En una elución en gradiente, se usan dos o más disolventes y la composición de la fase
móvil se cambia continuamente o en etapas a medida que avanza la separación.
c. En una inyección de flujo de detención, se detiene el flujo de disolvente, se retira un
accesorio en la cabeza de la columna y la muestra se inyecta directamente sobre la
cabeza de la columna. El accesorio se reemplaza y se reanuda el bombeo.
d. Un empaquetamiento de fase inversa es un empaque no polar que se usa en la
cromatografía de partición con una fase móvil relativamente polar.
e. En un empaquetamiento de fase normal, la fase estacionaria es polar y la fase móvil es
relativamente no polar.
f. En la cromatografía de pares iónicos, se añade un contraión orgánico grande a la fase
móvil como un reactivo de emparejamiento iónico. La separación se logra ya sea
mediante la partición del par iónico neutro o como resultado de las interacciones
electrostáticas entre los iones en solución y las cargas en la fase estacionaria resultantes
de la adsorción del contraión orgánico.
g. En la cromatografía iónica, la fase estacionaria es una resina de intercambio iónico, y la
detección se lleva a cabo ordinariamente mediante un detector de conductividad.
h. Un detector de propiedad masiva responde a alguna propiedad de la fase móvil (como
la conductividad térmica o eléctrica) que se ve alterada por la presencia de analitos.
i. Un detector de propiedades de soluto responde a alguna propiedad de los analitos,
como la absorción o la fluorescencia.
j. El burbujeo es un proceso para eliminar gases disueltos de una solución barriendo el
líquido con una corriente de burbujas finas de un gas inerte de baja solubilidad.

8. ¿Qué es la columna de protección en la cromatografía de reparto?

R// Una columna de guardia es una columna corta a través de la cual fluye la fase móvil
antes de que regrese la región de inyección y la columna analítica en los instrumentos de
HPLC. La composición de la columna de protección es similar a la de la columna analítica,
excepto que las partículas generalmente son más grandes para minimizar la caída de
presión. El propósito de la columna de protección es eliminar materia particulada y
contaminantes de la fase móvil y saturar la fase móvil con la fase estacionaria de modo
que se minimicen las pérdidas de esa fase desde la columna analítica.

9. ¿En que se parecen la cromatografía de reparto en fase normal y la cromatografía

de adsorción?
R// La cromatografía de partición en fase normal y la cromatografía de adsorción son
similares en el sentido de que las fases estacionarias en ambos son polares, mientras que
las fases móviles son relativamente no polares.

10. ¿Cual es el orden en que los compuestos siguientes saldran de una columna
para HPLC que contiene un relleno de fase inversa?
a) benceno, dietileter, n-hexano
b) acetona, dicloroetano, acetamida
R//
a. dietil éter, benceno, n-hexano
b. acetamida, acetona, dicloroetano

11. ¿Cual es el orden de elucion de los compuestos siguientes en una columna para
HPLC con relleno de fase normal?
a) acetato de etilo, acido acetico, dimetilamina
b) propileno, hexano, benceno, diclorobenceno
R//
a. acetato de etilo, dimetilamina, ácido acético
b. hexano, propileno, benceno, diclorobenceno

12. Enumere las diferencias fundamentales entre cromatografia de adsorcion y

cromatografia de reparto.
R// En la cromatografía de adsorción, las separaciones se basan en equilibrios de
adsorción entre los componentes de la muestra y una superficie sólida. En la
cromatografía de particiones, las separaciones se basan en equilibrios de distribución
entre dos líquidos inmiscibles.

13. Enumere las diferencias fundamentales entre cromatografia de intercambio de

iones y cromatografia de exclusion por tamano.
R// En la cromatografía de exclusión por tamaño, las separaciones se basan en el tamaño
y, en cierta medida, la forma de las moléculas con pequeñas interacciones entre la fase
estacionaria y los componentes de la muestra. En la cromatografía de intercambio iónico,
en cambio, las separaciones se basan en reacciones de intercambio iónico entre la fase
estacionaria y los componentes de la muestra en la fase móvil.

14. ¿Que tipos de especies se pueden separar con cromatografia de liquidos de alta
resolucion pero no con cromatografia de gases?
R// Los compuestos no volátiles y térmicamente inestables pueden separarse por HPLC
sin GC.
15. Describa las diferentes clases de bombas que se usan en la HPLC. ¿Cuales son
las ventajas y desventajas de cada una?
R// Las bombas neumáticas son simples, económicas y sin impulsos. Consisten en un
contenedor de disolvente colapsable alojado en un recipiente que puede ser presurizado
por un gas comprimido. Esta bomba tiene capacidad limitada y salida de presión y no es
adaptable a la elución en gradiente. La velocidad de bombeo depende de la viscosidad
del solvente. Las bombas de jeringa accionadas por tornillo consisten en una jeringa
grande en la que el pistón es movido por un tornillo accionado por motor. Son libres de
pulso y la velocidad de entrega es muy variable. Sufren de falta de capacidad y son
inconvenientes cuando se deben cambiar los solventes. Las bombas reciprocantes son
versátiles y ampliamente utilizadas. Consisten en una pequeña cámara cilíndrica que se
llena y luego se vacía por el movimiento hacia adelante y hacia atrás de un pistón. Las
ventajas incluyen un pequeño volumen interno, altas presiones de salida, adaptabilidad a
la elución en gradiente y caudales constantes que son independientes de la viscosidad y
la contrapresión. La salida pulsada debe ser amortiguada.

16. Señale las diferencias entre la cromatografía de una sola columna y la

cromatografía iónica de columna inhibidora.
R// En la cromatografía iónica con columna supresora, la columna cromatográfica va
seguida de una columna supresora cuyo objetivo es convertir los iones utilizados para la
elución en especies moleculares que son principalmente no iónicas y, por lo tanto, no
interfieren con la detección conductométrica de la especie del analito. En la cromatografía
iónica de columna única, se utilizan intercambiadores de iones de baja capacidad para
que las concentraciones de iones en la solución de elución puedan mantenerse bajas. La
detección se basa en las pequeñas diferencias en la conductividad causadas por la
presencia de componentes de muestra eluidos.

17. La espectrometria de masa es un sistema de deteccion extremadamente versatil

para la cromatografia de gases. No obstante, acoplar un sistema de cromatografia
de liquidos de alta resolucion con un espectrometro de masa es una tarea a
menudo dificil. Proporcione las principales razones por las que es mas dificil
combinar la HPLC con la espectrometria de masa que combinar la cromatografia de
gases con la espectrometria de masa.
R// Se necesita una muestra en fase gaseosa para espectrometría de masas. La salida de
la columna LC es un soluto disuelto en un disolvente, mientras que la salida de la columna
GC es un gas y, por lo tanto, directamente compatible. Como primer paso en LC / MS, el
solvente debe ser vaporizado. Sin embargo, cuando se vaporiza, el solvente LC produce
un volumen de gas que es 10-1000 veces mayor que el gas portador en GC. Por lo tanto,
la mayor parte del disolvente también debe eliminarse.

18. ¿Cuál de los detectores de cromatografía de gases de la tabla 27.1 son

apropiados para la HPLC? ¿Por qué algunos de los mencionados son inadecuados
para la HPLC?
R// La comparación de la Tabla 28-1 con la Tabla 27-1 sugiere que los detectores de GC
que son adecuados para HPLC son el espectrómetro de masas, el FTIR y posiblemente la
fotoionización. Muchos de los detectores de GC no son aptos para HPLC porque
requieren que los componentes del analito eluidos estén en fase gaseosa.

19. Aunque la temperatura no afecta las separaciones en cromatografia de liquidos

de alta resolucion como lo hace en las separaciones por cromatografia de gases,
puede desempenar un papel importante. Analice como y por que la temperatura
podria o no influir en las separaciones siguientes:
a) separacion cromatografica en fase inversa de una mezcla de esteroides.
b) una separacion cromatografica por adsorcion de una mezcla de isómeros muy
relacionados.
R// Una serie de factores que influyen en la separación son claramente dependientes de
la temperatura, incluidas las constantes de distribución y las tasas de difusión. Además,
los cambios de temperatura pueden influir en la selectividad si los componentes A y B son
influenciados de manera diferente por los cambios en la temperatura. Debido a que la
resolución depende de todos estos factores, la resolución también dependerá de la
temperatura
a. Para una separación cromatográfica de fase inversa de una mezcla de esteroides, la
selectividad y, como consecuencia, la separación podría estar influenciada por cambios
dependientes de la temperatura en los coeficientes de distribución.
b. Para una separación por cromatografía de adsorción de una mezcla de isómeros, la
selectividad y, como consecuencia, la separación podría estar influenciada por cambios
dependientes de la temperatura en los coeficientes de distribución.

22. En una columna de reparto en fase normal, se determino que un soluto tiene un
tiempo de retencion de 29.1 minutos y una muestra no retenida tiene un tiempo de
retencion de 1.05 minutos cuando la fase movil contiene 50% en volumen de
cloroformo y 50% de n-hexano. Calcule a) k para el soluto y b) la composición de
solventes que disminuiría a k a un valor de alrededor de 10.
R//
Se aplica la ecuación:

𝒌𝟐 ′ ′
= 𝟏𝟎(𝑷𝟏 𝑷𝟐)/𝟐
𝒌𝟏

donde 𝑷′𝟏 y 𝑷′𝟐 son los índices de polaridad de cloroformo y n-hexano, respectivamente.