2.

MÉTODOS NO ÓPTICOS

2.1. Turbidimetría

Es la medición de la luz transmitida a través de una

suspensión, tiene la ventaja de permitir la valorización
cuantitativa, sin separar el producto de la solución. Las
mediciones, pueden efectuarse con cualquier
espectrofotómetro.

2.1.1. Para qué se utiliza

Se utilizan normalmente en el análisis de la calidad química del agua, para determinar la claridad y para el control
de los procesos de tratamiento. También para la determinación de iones sulfato.

 Se utiliza para el análisis de fibrinógeno, triglicéridos, complejos Ag-Ac y otras sustancias.

 Aplicable cuando la dispersión es suficientemente grande (concentración alta de partículas).

2.1.2. Aplicaciones

Esta técnica de medición posee una gran cantidad de aplicaciones, entre las que destacan tenemos:

 La detección de contaminantes en forma de trazas en una variedad de muestras y la estimación de las

dimensiones de las partículas en diversos fluidos.
 La turbidimetría es empleada en el campo de la biología para cuantificar las células presentes en
determinadas soluciones, y en la observación de cultivos microbiológicos para la fabricación de fármacos
antibióticos.
 En el área de la química que estudia el diagnóstico de tipo clínico, se utiliza el método de
inmunoturbidimetría en la estimación de las estructuras proteicas de tipo sérico que no pueden ser
detectadas mediante otras técnicas clínicas.
 Se empleada en el control de la calidad del agua para estimar la cantidad de partículas suspendidas en
aguas de origen natural, al igual que en el agua de las corrientes de procesamiento.
 Se utiliza este método analítico para estimar la cantidad de azufre presente en muestras de petróleo,
carbón y otras sustancias de naturaleza orgánica; en este caso, se produce una precipitación del azufre en
forma de sulfato de bario.

2.1.3. Instrumentación

TURBIDIMETRO DE PARR

Instrumento que a través del análisis óptico determina la

cantidad de sustancias en un líquido, se emplea en la medición
de partículas en suspensión en un líquido o gas disuelto, tiene
como principio de funcionamiento la detección de las partículas
con una fuente de haz lumínico y un detector de luz fijado a 90
grados del haz original. Puede ser un instrumento portátil o fijo.
También conocido como nefelómetro, aunque puede haber
diferencias entre los modelos de estos instrumentos,
dependiendo del arreglo geométrico de la fuente luminosa con respecto a la fotocelda.

CALORIMETRO DUBOSCQ

Diferentes sustancias químicas absorben diferentes frecuencias de luz. Los colorímetros se basan en el principio
de que la absorbancia de una sustancia es proporcional a su concentración (Ley de Beer-Lambert), y por eso las
sustancias más concentradas muestran una lectura más elevada de absorbancia. Se usa un filtro en el colorímetro
para elegir el color de luz que más absorberá el soluto, para maximizar la precisión de la lectura. Note que el color
de luz absorbida es el opuesto del color de la muestra, por lo tanto un filtro azul sería apropiado para una sustancia
naranja. Los sensores miden la cantidad de luz que atraviesa la disolución, comparando la cantidad entrante y la
lectura de la cantidad absorbida.

Se realiza una serie de soluciones de concentraciones conocidas de la sustancia química en estudio y se mide la
absorbancia para cada concentración, obteniendo así una gráfica de absorbancia respecto a concentración.
Por extrapolación de la absorbancia en la gráfica se puede encontrar el valor de la concentración desconocida de
la muestra.

ESPECTROFOTOMETROS ORDINARIOS

Los espectrofotómetros son aquellos instrumentos en los que se mide fundamentalmente la distribución espectral
de energía radiante en las regiones espectrales: UV, VIS e IR (cercano hasta el medio).

Estos instrumentos utilizan un complejo sistema óptico de selección de longitud de onda (monocromador). Estos
instrumentos pueden seleccionar longitud de onda en forma continua y en algunos casos con precisión de décimas
de nm. Por lo tanto, es posible obtener en forma continua el espectro de absorción de una molécula.

2.2. Nefelometría

Es un método para medir la intensidad de una radiación

dispersa en un ángulo de 90 °C con respecto a la fuente.
Se mide en un espectrofluorímetro. Para determinar la
concentración de analito en este método aplicamos:

Mide la luz dispersada en dirección distinta a la luz

emitida (generalmente con ángulos que oscilan entre 15
y 90º). Utiliza como instrumento el nefelómetro (en el
que el detector se ubica con un ángulo que oscila entre 15 y 90º ej. a 90º). Se suele utilizar para concentraciones
más diluidas. Permite mayor sensibilidad con concentraciones menores de partículas suspendidas. Constituye un
método más exacto para la medida de la opacidad.

2.1.1. Para qué se utiliza

Se utilizan normalmente en el análisis de la calidad química del agua, para determinar la claridad y para el control
de los procesos de tratamiento. También para la determinación de iones sulfato.

 Preferible para concentraciones bajas de partículas, ya que la dispersión es menor y la disminución de

intensidad del haz incidente es pequeña.
  Se suele utilizar para medir concentraciones específicas de colonias de bacterias en algún medio de
cultivo, o de muchas proteínas utilizando el principio de dispersión luminosa molecular.

2.1.2. Aplicaciones

Los estudios nefelométricos ocupan una posición muy importante en los laboratorios clínicos. Las aplicaciones van
desde la determinación de inmunoglobulinas y proteínas de fase aguda, del complemento y de coagulación.

 Detección de complejos inmunes

 Cuando una muestra biológica contiene un antígeno de interés, éste se mezcla (en una solución
buffer) con un anticuerpo para formar un complejo inmune.
 La nefelometría mide la cantidad de luz que se dispersa por la reacción antígeno-anticuerpo (Ag-Ac),
y de esta manera se detectan los complejos inmunes.
Este estudio puede ser llevado a cabo por dos métodos:
Nefelometría del Punto Final: Esta técnica puede ser utilizada para el análisis del punto final, en la cual
el anticuerpo de la muestra biológica estudiada es incubado por veinticuatro horas. El complejo Ag-
Ac es medido utilizando un nefelómetro y la cantidad de luz dispersada es comparada con la misma
medida llevada a cabo antes de la formación del complejo.
Nefelometría cinética: En este método, la tasa de la formación de complejos es monitoreada de forma
continua. La tasa de reacción depende de la concentración del antígeno de la muestra. Las medidas
se toman en función al tiempo, por lo cual la primera medida es tomada al tiempo “cero” (t=0).

 La nefelometría es utilizada generalmente en análisis de calidad química del agua, para la

determinación de claridad y para controlar los procesos de su tratamiento.
 También se utiliza para medir la contaminación del aire, en el cual se determina la concentración de las
partículas a partir de la dispersión que éstas producen en una luz incidente.

2.1.3. Instrumentación

esta requiere una instrumentación especial, aunque existen analizadores que permiten efectuar medidas
nefelometrías en un ángulo de 90 (teóricamente se obtendría mayor sensibilidad en ángulos menores). Mide las
partículas suspendidas en liquido

NEFELÓMETRO

Un nefelómetro es un instrumento para medir partículas suspendidas en un

líquido. Esto lo hace empleando una fotocelda colocada en un ángulo de 90° con
respecto a una fuente luminosa. La densidad de partículas es entonces una
función de la luz reflejada por las partículas a la fotocelda. Cuanta más luz se
refleje en una determinada densidad de partículas depende de las propiedades
de las partículas como su forma, color y reflectividad. Estableciendo a una
correlación de trabajo entre turbidez y sólidos suspendidos (que más útil, pero
generalmente una más difícil de cuantificación de partículas) debe ser
establecido independientemente para cada situación.

A los nefelómetros usados en las pruebas de calidad del agua, comúnmente se

les llaman turbidímetros. Sin embargo, puede haber diferencias entre los
modelos de turbidímetros, dependiendo del arreglo geométrico de la fuente luminosa con respecto a la fotocelda.
Un tubímetro nefelométrico siempre monitorea la luz reflejada por las partículas y no la atenuación debida a la
turbidez.

ESNEFELÓMETRO C-102

Este nefelómetro realiza un análisis de agua casi completo: cloro libre y total,
bromo, pH, hierro, yodo y ácido cianúrico. En el modo de medición de turbiedad
puede elegir entre los valores de calibración dados o los valores definidos por el
usuario. Por medio del reloj de tiempo real integrado puede recuperar
presionando la tecla los últimos datos de calibración. En el rango de medición de
turbiedad se puede poner un punto de calibración libre entre 0,0 y 50,0 NTU
(NTU Nephelometric Turbidity Unit = FTU Formazin Turbidity Unit / Ratio 1:1). La
turbiedad se mide con el método USEPA.