NUMERACIÓN DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESÓFILOS VIABLES

1. INTRODUCCION

El análisis de los alimentos está catalogado por diversas técnicas y métodos

para determinar microorganismos que se encuentran viables en los
alimentos ya sean sólidos como las carnes, verduras y frutas, o líquidos ya
sea leche y jugos de frutas; entre estos métodos tenemos la numeración
de microorganismos aerobios mesófilos, la cual nos permite determinar
cuántos microorganismos contaminantes presenta un alimento sobre su
superficie o en su interior.

Por otro lado, las técnicas para poder encontrar la numeración de aerobios
mesófilos viables son: el recuento de colonias en placa por profundidad,
superficie o por goteo; otro el Método del número más probable (MPN) de
gérmenes como cálculo estadístico del número de células viables. El
recuento total de bacterias en placa es un método útil para obtener una
idea del grado de frescura o pronta alteración de los alimentos,
dependiendo de la cantidad de bacterias presentes.

En el grupo de los mesófilos aerobios se incluyen todas las bacterias,

mohos y levaduras capaces de desarrollarse a 30º C en las condiciones
establecidas. En este recuento se estima la microflora total sin especificar
tipos de microorganismos. Un recuento bajo de aerobios mesófilos no
implica o no asegura la ausencia de patógenos o sus toxinas, de la misma
manera un recuento elevado no significa presencia de flora patógena.
Ahora bien, salvo en alimentos obtenidos por fermentación, no son
recomendables recuentos elevados.

Un recuento elevado puede significar:

 - Excesiva contaminación de la materia prima.
- Deficiente manipulación durante el proceso de elaboración.
- La posibilidad de que existan patógenos, pues estos son mesófilos.
- La inmediata alteración del producto. El recuento de mesófilos nos indica
las condiciones de salubridad de algunos alimentos.

2. OBJETIVOS

- Cuantificarlapoblacióndemicroorganismosaerobiosviablesendetermina
da muestra.

- Conocer el número de microorganismos aerobios mesófilos que

contiene un alimento

- Familiarizarse con métodos directos para la obtención de

microorganismos utilizando el método de recuento de colonias en
placa.

- Determinar si el producto alimenticio que se analiza está en condiciones

aptas para el consumo humano.

- Determinar cuántos microorganismos presenta la muestra que

analizamos.

3. MATERIALES

Placas Petri.
Pipetas bacteriológicas de 1 y 10 ml.
Baño de agua regulado a 44-46 °C para mantener el agar licuado
Incubadora regulada a 29-31°C
Contador de colonias
 Agar plate count.
Muestras de un alimento

4. PROCEDIMIENTO

a) Técnicas empleadas

a.1 Computo del recuentro estándar en placa:

 Seleccionar 2 placas correspondientes a una dilución que

contenga entre 30 y 300 colonias utilizando un contador de
colonias.
 Si las placas de 2 diluciones consecutivas presentan recuentos
menores a que 30 y mayores que 300, tomar el promedio de los
2 recuentos.
 Si el número de colonias de las placas de 2 diluciones
consecutivas están dentro del rango de 30 - 300, computar el
recuento para cada una de las diluciones y establecer la relación
de los 2 recuentos. Si el cociente es menor que 2, reportar el
promedio de los 2 valores, pero, si el recuento mayor contiene 2
veces o más a menor, en este caso se reportara el recuento del
menor.
 Multiplicar por el factor de dilución reciproco de la dilución
utilizada. Reportar el resultado como numero de
microorganismos aerobios mesófilos por gramo o mililitro según
el caso.

a.2 Computo del estimado del recuentro estándar en placa:

 Si las placas de todas las diluciones muestran más de 300

colonias, dividir cada duplicado de placas de la dilución más alta
en secciones darles convenientes (2,4,8) y contar todas las
colonias en una o más secciones. Multiplicar el total en cada caso
 por el factor apropiado para obtener el número de colonias de
colonias por toda la placa. promediar los estimados de las 2
placas duplicadas y multiplicar por la dilución correspondiente
reportar el resultado como un estimado del número.

 Si no hubiese colonias en placas de la mayor concentración,

reportar el estimado como menor que la inversa de la dilución.

5. RESULTADOS

𝑈𝐹𝐶 𝑛𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 ∗ 𝑒𝑙 𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑠𝑖𝑜𝑛

=
𝑚𝑙 𝑚𝑙 𝑠𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑝𝑙𝑎𝑐𝑎

𝑈𝐹𝐶 32 𝑥104
=
𝑚𝑙 1 𝑚𝑙
UFC/ml= 320000/g – suelo
 Placa 1:11 colonias
Placa 2: 7 colonias
Promediar: 9colonias

𝑈𝐹𝐶 𝑛𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 ∗ 𝑒𝑙 𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑠𝑖𝑜𝑛

=
𝑚𝑙 𝑚𝑙 𝑠𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑝𝑙𝑎𝑐𝑎

𝑈𝐹𝐶 9 𝑥104
=
𝑚𝑙 1 𝑚𝑙
UFC/ml= 90000/g – suelo

Placa 1: 3 colonias
Placa 2: 2 colonias

𝑈𝐹𝐶 𝑛𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 ∗ 𝑒𝑙 𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑠𝑖𝑜𝑛

=
𝑚𝑙 𝑚𝑙 𝑠𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑝𝑙𝑎𝑐𝑎

𝑈𝐹𝐶 2.5 𝑥104

=
𝑚𝑙 1 𝑚𝑙
UFC/ml= 25000/g – suelo

6. CONCLUSIONES
 - Cuando el recuento de meso aerobios se utiliza para determinar la
aceptacion o rechazo de un alimento, únicamente se considera el
recuento standard y nunca el estimado.
- La prevención para que los microorganismos infesten los alimentos, es
la refrigeracion
- Con este método, podemos controlar los microorganismos en nuestros
alimentos,

7. BIBLIOGRAFIA

- MANUAL PRÁCTICO DE MICROBIOLOGÍA-Tomo I: Microbiología

Ambiental I ManacordaA. M., Cuadros D. P y Álvarez A. S. Año 2007

- Gamazo, C., López-Goñi, I., y R. Díaz. 2005. Manual práctico

demicrobiología. Ed. Masson. S.A. Barcelona. España

- R. Díaz, y col. 1999. Manual Práctico de Microbiología. 2a edición.

Ed.Masson, Barcelona.