La ingenier�a gen�tica es la manipulaci�n directa de los genes de un organismo

usando la biotecnolog�a para modificar los genes, eliminarlos o duplicarlos.

�ndice
1 T�cnicas
1.1 La tecnolog�a del ADN recombinante
1.2 La secuenciaci�n del ADN
1.3 La reacci�n en cadena de la polimerasa (PCR)
2 Biotecnolog�a gen�tica
2.1 Terapia gen�tica
2.2 Implicaciones �ticas
3 Ingenier�a gen�tica en seres vivos
3.1 Ingenier�a gen�tica en bacterias
3.2 Ingenier�a gen�tica en levaduras y hongos
3.3 Ingenier�a Gen�tica en animales
3.4 Ingenier�a Gen�tica en plantas
4 Aplicaciones de la Ingenier�a Gen�tica en medicina e industria farmac�utica
4.1 Obtenci�n de prote�nas de seres vivos
4.2 Obtenci�n de vacunas recombinantes
4.3 Diagn�stico de enfermedades de origen gen�tico
4.4 Obtenci�n de anticuerpos monoclonales
5 Referencias
6 V�ase tambi�n
7 Bibliograf�a relacionada
8 Enlaces externos
T�cnicas
La ingenier�a gen�tica incluye un conjunto de t�cnicas biotecnol�gicas, entre ellas
destacan:1?

Amplificaci�n del ADN2?

La secuenciaci�n del ADN.
La reacci�n en cadena de la polimerasa (PCR).
Plasmocitosis
Clonaci�n molecular
Mutaci�n excepcional
Transg�nesis
Bloqueo g�nico
La tecnolog�a del ADN recombinante
Art�culo principal: ADN recombinante

A. tumefaciens adhiri�ndose a una c�lula de zanahoria.

La tecnolog�a del ADN recombinante consiste en aislar y manipular un fragmento de
ADN de un organismo para "re-combinarlo" con el de otro organismo y as� crear un
organismo geneticamente modificado para un mejor resultado de la manipulaci�n del
adn se toma el ADN de un organismo o un ser vivo y se pone en la gen�tica central
de otro ; as� los descendiente de este organismo o animal tengan la modificaci�n
gen�tica aplicada a su antecesor.3?

Generalmente se trata el ADN con una endonucleasa de restricci�n que origina en

este caso un corte escalonado en las dos hebras dobles de ADN. Los extremos
escalonados de ambas hebras de ADN son complementarios, una condici�n que deben de
tener si se quieren unir. Los dos ADNs as� cortados se mezclan, se calientan y se
enfr�an suavemente. Sus extremos cohesivos se aparear�n dando lugar a un nuevo ADN
recombinado, con uniones no covalentes. Las uniones covalentes se forman a�adiendo
ADN ligasa y una fuente energ�tica para formar los enlaces.

Otra enzima clave para unir ADNs es la transferasa terminal, que puede adicionar
muchos residuos de desoxirribonucle�tidos sucesivos al extremo 3�de las hebras del
ADN. De este modo pueden construirse colas de poli Guanina en los extremos 3� de
una de las hebras de ADN y colas de poli Citosina en los extremos de la otra
cadena. Como estas colas son complementarias, permitir�n que los dos ADNs se unan
por complementariedad. Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por la ADN
ligasa.

El ADN recombinado se inserta en un ADN vector que act�e como veh�culo para
introducirlo en una c�lula hospedadora que lo replique, los vectores o
transportadores m�s utilizados son los pl�smidos y el ADN del fago lambda.

La secuenciaci�n del ADN

Art�culo principal: Secuenciaci�n del ADN
Es un conjunto de t�cnicas que permiten conocer el orden en que aparecen los
nucle�tidos en el ADN,4? que es la base de la informaci�n gen�tica de los
organismos. Esta t�cnica tiene aplicaciones m�dicas, como la b�squeda de alg�n
polimorfismo gen�tico que se asocie con una enfermedad; b�sicas: comparar la
historia evolutiva de un organismo; o forenses.

La reacci�n en cadena de la polimerasa (PCR)

Art�culo principal: Reacci�n en cadena de la polimerasa
La t�cnica de la PCR aprovecha la actividad enzim�tica por la que se replica el ADN
en las c�lulas para conseguir una gran cantidad de copias de ADN a partir de
cantidades peque�as.5?Se utiliza una polimerasa o una mezcla de varias que puedan
resistir temperaturas elevadas, siendo la m�s com�n la polimerasa taq.

La t�cnica consiste en realizar varios ciclos de temperaturas elevadas para

conseguir la desnaturalizaci�n del ADN y temperaturas m�s bajas para la
amplificaci�n del ADN desnaturalizado mediante la polimerasa.

Biotecnolog�a gen�tica
En la d�cada de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de las
biotecnolog�as gracias a la elaboraci�n de nuevas t�cnicas que permiten llegar
directamente al material que est� en el origen de todas las caracter�sticas y
procesos vitales, es decir, el ADN. Este conjunto de t�cnicas moleculares de
manipulaci�n gen�tica recibe el nombre de ingenier�a gen�tica.

Su objetivo es la manipulaci�n in Vitro del ADN, la introducci�n de este ADN as�

modificado en c�lulas vivas y la incorporaci�n del mismo como parte del material
hereditario de dichas c�lulas. De este modo, ADN de diversas procedencias, por
ejemplo, la fracci�n de ADN humano que regula la s�ntesis de insulina, puede
introducirse en bacterias de manera que pasa a formar parte de su genoma y lograr
as� que la bacteria adquiera la capacidad de elaborar insulina.

Terapia gen�tica
La terapia gen�tica consiste en sustituir o a�adir, seg�n el caso, una copia normal
de la regi�n defectuosa del ADN para poder solucionar y restablecer la funci�n
alterada, evitando el desarrollo de enfermedades de origen gen�tico,6? como por
ejemplo la facultad defensiva ante las enfermedades infecciosas. Las enfermedades
con las que se ha empezado a trabajar son, entre otras, la deficiencia de la enzima
ADA (adenosina desaminasa), conocida como la de los ni�os burbuja y la DMD o
distrofia muscular de Duchenne.

La posibilidad de curar las enfermedades gen�ticas con un tratamiento espec�fico

justifica los esfuerzos que se est�n realizando en este sentido.

Implicaciones �ticas
La ingenier�a gen�tica tiene aplicaciones en campos muy diversos; dos de los m�s
importantes son la medicina y la creaci�n de nuevas especies o mejora de las
existentes. El progreso en estos �mbitos puede aportar resultados capaces de
aliviar algunos problemas de gran importancia, pero no se debe olvidar que la
explotaci�n comercial de las tecnolog�as requeridas s�lo est� al alcance de unas
pocas empresas multinacionales. Como era de esperar, la tradicional dependencia
econ�mica de los pa�ses subdesarrollados tiene en la ingenier�a gen�tica un nuevo
elemento de desequilibrio. En otro orden de cosas, la ingenier�a gen�tica puede
plantear graves problemas �ticos. Hay opiniones muy diversas sobre d�nde han de
situarse los l�mites de manipulaci�n del material que est� en la base de todos los
procesos vitales.

Al inicio de los experimentos del ADN recombinante, varios investigadores mostraron

su preocupaci�n por los riesgos que se pueden realizar con dichas t�cnicas. En
varios pa�ses se crearon comit�s para discutir el uso y la aplicaci�n de t�cnicas
de ingenier�a gen�tica.

Ingenier�a gen�tica en seres vivos

Ingenier�a gen�tica en bacterias
Son los seres vivos m�s utilizados en Ingenier�a Gen�tica. La m�s utilizada es la
Escherichia coli. Se usa pr�cticamente en todos los procesos de I.G.7?

Otra de las aplicaciones m�s actuales que se han hecho, ha sido modificar
gen�ticamente bacterias que vivan en el sistema digestivo del ser humano en un
lapso m�nimo de 6 meses a 1 a�o, con el objetivo de disminuir el apetito. Esta
investigaci�n se basa en N-acil-fosfatidiletanolamina, y N-acil-etanolamina,
encargadas de mandar se�ales al hipot�lamo, que es el encargado de la ingesta de
alimentos.[cita requerida]

Ingenier�a gen�tica en levaduras y hongos

Son junto con las bacterias los sistemas m�s utilizados. El Saccharomyces
cerevisiae fue el primer sistema eucariota secuenciado completamente.8? Otra
levadura importante es P. pastoris, utilizada para conseguir proinsulina en cultivo
discontinuo y quitinasa en cultivo continuo. En el campo de los hongos destaca por
su labor m�dica el Penicillium.

Otra aplicaci�n ha sido la levadura P. pastoris se ha usado para producir grandes

cantidades de prote�nas, gracias a que es capaz de crecer en los reactores hasta
alcanzar muy altas densidades celulares. Por ejemplo, se ha utilizado para producir
quitinasa humana en cultivo continuo (0,3 g/L/d�a) o proinsulina humana en un
sistema discontinuo (1,5 g/L).

Ratones knockout.
Ingenier�a Gen�tica en animales
La manipulaci�n gen�tica de los animales persigue m�ltiples objetivos: aumentar el
rendimiento del ganado, producir animales con enfermedades humanas para la
investigaci�n, elaborar f�rmacos, etc.

Producci�n animal por ingenier�a gen�tica:

Peces transg�nicos: las principales aplicaciones en animales se han realizado en

peces, debido a que la fecundaci�n es externa, lo cual permite la introducci�n del
gen en el cigoto antes de que se unan el n�cleo del espermatozoide y el del �vulo.
Se han producido carpas transg�nicas que crecen mucho m�s r�pido, debido a la
incorporaci�n del gen de la hormona del crecimiento de la trucha, y salmones
transg�nicos, que resisten mejor las bajas temperaturas.

Mam�feros: se han obtenido ratones transg�nicos, con distintos genes modificados.9?

Sin embargo, todav�a su aplicaci�n para la mejora de especies es preliminar,
enfoc�ndose el estudio desde un punto de vista m�s bien puramente cient�fico.
Ingenier�a Gen�tica en plantas
Actualmente se han desarrollado plantas transg�nicas de m�s de cuarenta especies.
Mediante ingenier�a gen�tica se han conseguido plantas resistentes a enfermedades
producidas por virus, bacterias o insectos.10?Estas plantas son capaces de producir
antibi�ticos, toxinas y otras sustancias que atacan a los microorganismos. Tambi�n
se han conseguido otro tipo de mejoras, como la producci�n de distintas sustancias
en los alimentos que aumentan su calidad nutricional, mejorar las cualidades
organol�pticas de un producto o que ciertas plantas sean m�s resistentes a
determinados factores ambientales, como el fr�o.

Un gran ejemplo de ello es la bacteria Agrobacterium tumefaciens que tiene la

capacidad de transferir ADN entre reinos diferentes. El impacto de este hallazgo
ha tenido grandes aplicaciones en diversos campos de la biolog�a vegetal,
agricultura y biotecnolog�a. As� mismo, esta interacci�n ha dado pie a formular
modelos de se�alizaci�n celular, transporte c�lula a c�lula, importe nuclear de
prote�nas y ADN y mecanismos de integraci�n gen�mica (Tzfira y Citovsky, 2000).
Durante el proceso de infecci�n A. tumefaciens introduce en la c�lula vegetal una
parte de su ADN (ADN de transferencia) el cual es integrado dentro del genoma de la
planta. Los genes del ADN-T son expresados en su hospedero e inducen la formaci�n
de tumores y la s�ntesis de unos derivados de amino�cidos llamados opinas los
cuales son aprovechados por la bacteria.11?

Las t�cnicas de ingenier�a gen�tica tambi�n permiten el desarrollo de plantas que

den frutos de maduraci�n muy lenta. As�, es posible recoger tomates maduros de la
tomatera y que lleguen al consumidor conservando intactos su sabor, olor, color y
textura. La mejora de la calidad de las semillas es tambi�n un objetivo.

Las aplicaciones farmac�uticas son otro gran punto de inter�s. La biotecnolog�a

permite desarrollar plantas transg�nicas que producen sustancias de inter�s
farmacol�gico, como anticuerpos, ciertas prote�nas u hormonas, como la hormona del
crecimiento.

Aplicaciones de la Ingenier�a Gen�tica en medicina e industria farmac�utica

Obtenci�n de prote�nas de seres vivos
Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento, factores de
coagulaci�n, etc., tienen un inter�s m�dico y comercial muy grande. Antes, la
obtenci�n de estas prote�nas se realizaba mediante su extracci�n directa a partir
de tejidos o fluidos corporales. En la actualidad, gracias a la tecnolog�a del ADN
recombinante, se clonan los genes de ciertas prote�nas humanas en microorganismos
adecuados para su fabricaci�n comercial. Un ejemplo t�pico es la producci�n de
insulina12?que se obtiene a partir de la levadura Sacharomyces cerevisae, donde se
copia el gen de la insulina en humanos.

Obtenci�n de vacunas recombinantes

El sistema tradicional de obtenci�n de vacunas a partir de microorganismos
pat�genos inactivos, puede comportar un riesgo potencial. Muchas vacunas, como la
de la hepatitis B,13? se obtienen actualmente por ingenier�a gen�tica. Como la
mayor�a de los factores antig�nicos son prote�nas lo que se hace es clonar el gen
de la prote�na correspondiente.

Vacunas atenuadas: Se eliminan los genes de virulencia de un agente infeccioso para

provocar una respuesta inmune. El organismo modificado gen�ticamente puede usarse
como lo que es llamado una vacuna �viva� sin que exista riesgo de que se revierta
al tipo virulento.

Actualmente se est� ensayando una vacuna de cepas estables del Vibrio cholerae,
�ste se encuentra desprovisto del gen que codifica para su enterotoxina, la cual
provoca la enfermedad. Otro ensayo existente ha sido en la Salmonella, donde se le
han quitado ciertos genes que aunque no son virulentos, convierten a la cepa en
atenuada una vez desaparecidos, es decir que disminuyen su virulencia 1, 000, 000
de veces. Su efectividad ha logrado demostrarse en ovejas, bovinos, pollos y hasta
en humanos recientemente

Vacunas de organismos recombinantes vivos: Para estas se utilizan microorganismos

no pat�genos a los cuales se incorporan genes de agentes pat�genos que codifican
para los ant�genos que desencadenan la respuesta inmune. El virus vacunal tiene un
genoma amplio y secuenciado que permite acomodar varios genes for�neos en su
interior por lo que es un vector recombinante muy utilizado. A partir de �ste
m�todo se ha logrado desarrollar la vacuna contra la rabia insertando el genoma del
virus, provocando la respuesta inmune en el organismo del hospedador. De igual
manera se han ensayado las expresiones de genes que codifican para ant�genos de
virus de la hepatitis B, de la gripe y del herpes simple. Con este m�todo, se
podr�a lograr el desarrollo de vacunas que inmunicen simult�neamente para varias
enfermedades, insertando en el virus recombinante varios genes de distintos
organismos pat�genos a la vez.

Vacunas de subunidades: Para agentes infecciosos que no se pueden mantener en

cultivo, se a�slan los genes que codifican para las prote�nas causantes de la
respuesta. Dichos genes se pueden clonar y expresar en un hu�sped alternativo tales
como bacterias, levaduras o l�neas celulares de mam�feros. Luego de insertado el
gen de inter�s, la bacteria o levadura recombinante inicia con la producci�n de
subunidades de prote�nas en grandes cantidades, mismas que son recolectadas y
purificadas para utilizarlas como vacunas. La vacuna contra la hepatitis B fue la
primera puesta en el mercado y siendo producida por este m�todo.

Vacunas de ADN: Consisten en pl�smidos en los que se introduce tan s�lo una
diminuta cantidad del material gen�tico del pat�geno contra el que se pretende
luchar. Al inyectar el pl�smido en el m�sculo o la piel, �ste penetra dentro de la
c�lula y llega al n�cleo, comandando entonces la producci�n de los ant�genos del
pat�geno que desencadenar�n la respuesta inmune. As�, se traslada la f�brica de la
vacuna a los tejidos del hu�sped. En la actualidad se realizan ensayos de diversas
vacunas de este tipo, algunos ejemplos son la vacuna para la hepatitis B, para la
malaria, para la gripe, para el herpes simple y para el SIDA.

Diagn�stico de enfermedades de origen gen�tico

Art�culo principal: Diagn�stico gen�tico preimplantacional
Conociendo la secuencia de nucle�tidos de un gen responsable de una cierta
anomal�a, se puede diagnosticar si este gen an�malo est� presente en un determinado
individuo.

Hasta ahora ha sido posible la localizaci�n de los genes responsables de la

fibrosis qu�stica, la distrofia muscular, la hemofilia o el Alzheimer.14? Para
identificar estos genes se usan sondas de ADN.

La clonaci�n de genes puede rendir dos tipos de productos: el DNA clonado, �til
como reactivo espec�fico en ensayos de diagn�stico por hibridaci�n o bien los
productos proteicos de los genes clonados (ant�genos purificados para
inmunodiagn�stico en producci�n de vacunas).

Hay descritas cerca de 500 enfermedades hereditarias producidas por mutaciones

recesivas. Las t�cnicas de ingenier�a gen�tica han servido para diagnosticar
algunas de ellas, por ejemplo, la anemia falciforme.

Obtenci�n de anticuerpos monoclonales

Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el c�ncer y
diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los primeros s�ntomas.

El interfer�n fue el primer medicamento producido por ingenier�a gen�tica.15? Es

utilizado como medicamento complementario a la quimioterapia para la cura del
c�ncer. Su producci�n era cara hasta 1980, pero genes de interfer�n fueron
introducidos en bacterias usando tecnolog�a de recombinaci�n del ADN permitiendo
as� el cultivo masivo y purificaci�n de las emisiones bacterianas.

Referencias
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Consultado el 27 de noviembre de 2017.
V�ase tambi�n
Organismo modificado gen�ticamente
Clonaci�n
Biolog�a sint�tica
Bio�tica
Anticuerpos monoclonales
Ingenier�a gen�tica humana
Transformaci�n (gen�tica)
Contaminaci�n gen�tica
Transg�nesis
Transfecci�n
Transducci�n (gen�tica)
Vector gen�tico
Vida sint�tica
Reprogen�tica
Gen�tica dirigida
Edici�n de genoma
Bibliograf�a relacionada
Ver el portal sobre Ingenier�a Portal:Ingenier�a. Contenido relacionado con
Ingenier�a.
Sandel, Michael J. (2007). Contra la perfecci�n: la �tica en la �poca de la
ingenier�a gen�tica. Marbot Ediciones SCP. ISBN 978-84-935744-4-4.
Marta Izquierdo Rojo (1999). Ingenier�a Gen�tica y Transferencia G�nica. Pir�mide.
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�Ingenier�a Gen�tica�. Consultado el 30 de marzo de 2010.
�Introducci�n a la Biotecnolog�a�. Consultado el 30 de marzo de 2010.
Enlaces externos
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