UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSÉ DE CALDAS

FACULTAD DE CIENCIAS Y EDUCACIÓN

LICENCIATURA EN QUÍMICA
ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL

ESPECTROMETRÍA ULTRAVIOLETA - DETERMINACIÓN DE LA

CONCENTRACIÓN DE VAINILLINA EN MUESTRA COMERCIAL

Laura Fernanda Hurtado 20171150012

Angie Vanessa Rivera 20171150057
Daniel Ricardo Rodríguez 20171150004
Nicoll Fernanda Ruiz 20171150037

RESUMEN

Palabras clave: ​Vainillina, Hidróxido de sodio, Longitud de onda, Absorbancia.

MARCO TEÓRICO
La Espectrofotometría​: es una de las
técnicas experimentales más
utilizadas para la detección específica
de moléculas. Se caracteriza por su
precisión, sensibilidad y su
aplicabilidad a moléculas de distinta
naturaleza (contaminantes,
biomoléculas, etc) y estado de
agregación (sólido, líquido, gas). Los
fundamentos físico-químicos de la
espectrofotometría son relativamente
sencillos. Las moléculas pueden
absorber energía luminosa y radiación electromagnética.
almacenarla en forma de energía
interna. Esto permite que se inicien
ciclos vitales de muchos organismos,
entre ellos el de la fotosíntesis en
plantas y bacterias.
Cuando decimos que una sustancia
química absorbe luz de longitud de
onda λ, esto significa que las
moléculas de esa sustancia absorben
fotones de esa longitud de onda. (1)
El espectrofotómetro es un
instrumento con el que se apoya la
espectrofotometría para medir la
cantidad de intensidad de luz
absorbida después de pasar a través
de una solución muestra.
Con el espectrofotómetro, la cantidad
de una sustancia química conocida
(concentraciones) también puede
determinarse midiendo la intensidad
de la luz detectada. Dependiendo del
rango de
longitud de onda de la fuente de luz,
se puede clasificar en dos tipos
diferentes:
● Espectrofotómetro UV-Vis​:
utiliza luz en el rango
ultravioleta (185 – 400 nm) y
rango visible (400 – 700 nm) del
espectro de radiación
electromagnética.
● Espectrofotómetro de
infrarrojos​: utiliza luz en el
espectro de infrarrojos (700 –
15,000 nm) del espectro de
Extracción líquido-líquido
El término extracción se define como
la transferencia de una sustancia de
una fase a otra. Aunque también se
utilizan técnicas de extracción
sólido-líquido, la más frecuente es la
extracción líquido-líquido, conocida
simplemente como extracción, que se
lleva a cabo entre dos líquidos
inmiscibles utilizando un embudo de
decantación. Las dos fases líquidas se
una extracción son:
● Fase Acuosa: ​agua o
disolución acuosa.
● Fase Orgánica: ​disolución o
disolvente orgánico inmiscible
con el agua. [1]
La distribución de solutos entre las
diferentes fases es el resultado de los
fenómenos de partición o adsorción.
La separación implica la diferencia de
solubilidades de una sustancia en dos
disolventes inmiscibles, en otras La metil vainillina es un compuesto
palabras, la disolución selectiva. empleado en la ​industria de la
alimentación así como la etil vanillina.
La forma etil es mucho más cara pero
por el contrario posee unas notas
mucho más fuertes, y se difiere por la
existencia de un grupo etoxi
(–O–CH​2​CH​3​) en vez de un grupo
metoxi (–O–CH​3​).
El extracto de ​vainilla natural es una
Imagen 1 tomada de mezcla de cientos de compuestos
https://rodas5.us.es/file/23a16560-123f-bec5-ec5b- diferentes que van incorporados a la
44a3042a281d/2/laboratotio_quimica_organica_SC
vainilla. La vainilla artificial es una
ORM.zip/pagina_16.htm
solución de vainillina pura,
Vainillina generalmente de origen sintético.
Debido en parte a la escasez y lo caro
La vainillina o
que resulta el empleo de vainilla
4-hidroxi-3-metoxibenzaldehído​, es un
natural, ha existido un largo interés en
compuesto orgánico con la fórmula la preparación sintética de su
molecular C​8​H​8​O​3​. Sus ​grupos
componente predominante. La primera
funcionales incluyen el ​aldehído​, ​éter y
vez que se sintetizó comercialmente la
el ​fenol​. Es el compuesto primario de
vanillina comenzó su proceso con un
la vaina de la ​vainilla​. La vainilla
compuesto natural denominado
sintética se emplea como ​agente
eugenol​. En la actualidad la vainillina
saborizante en ​alimentos​, bebidas y
artificial está elaborada de ​guaiacol
elementos farmacéuticos. Es una de
petroquímico​, o procedente de ​lignina​,
las sustancias olorosas más
un constituyente natural de la ​madera
apreciadas para crear ​aromas
lo que le convierte en un ​subproducto
artificiales. Es un compuesto cristalino de la ​industria papelera​.
de color blanco soluble en ​cloroformo
y ​éter con fórmula química La vainillina artificial basada en la
(CH​3​O)(OH)C​6​H​3​CHO. lignina se dice que suele tener un
perfil de sabores más rico que
aquellos procedentes de ​aceites
esenciales​. La diferencia es debida a
la presencia de ​acetovanillona en la
versión de lignina del producto, una
impureza no encontrada en la
vainillina sintetizada del guaiacol.

Imagen 2. Estructura Vainillina.

METODOLOGÍA Añadió 5 mL de cloroformo y se
agitó suavemente.
Método: E ​ l método utilizado en este 2. Se repitió extracción con 2.5
informe según 1Sampieri [1], es un mL.
método cuantitativo, por tuel hecho de 3. Se permitió la separación de las
que hacemos mediciones de dos capas y se dreno la capa
absorbancias precisas con el uso de orgánica en un erlenmeyer.
un espectrofotómetro, utilizando 4. Se Repitió el proceso de
soluciones preparadas mediante extracción de la solución
cálculos y cantidades pesadas y acuosa dos veces más con
medidas a volúmenes determinados. porciones de 5 mL de
Mediante enfoques correlacionales y cloroformo y se combino todos
explicativos. los extractos orgánicos en el
erlenmeyer.
Materiales: Los materiales utilizados 5. Se Transfirió la capa orgánica
en esta práctica fueron: al embudo de decantación y se
agregó cuidadosamente 15 mL
● Embudo de Decantación. de NaOH 0.1 M y se agito bien.
● Pipetas 10, 5 y 2 mL. 6. Se separó la capa acuosa y se
● Pipeteador. colocó en un balón aforado de
● Matraces de aforo. 50 mL. Se Extrajo dos veces
● Beaker 50, 100 y 150 mL. más la capa orgánica con
● Pinzas. porciones de 15 mL de NaOH
● Soporte universal 0.1M.
● Espectrofotómetro. 7. Se transfirió las soluciones
acuosas extraídas al balón
Reactivos: aforado y se completó a
● Cloroformo. volumen con NaOH 0.1M.
● Sln NaOH 0.1N 8. Se Tomó una alícuota de 0.5
● Escénica de Vainilla. mL de esta solución y se diluyó
● Agua destilada. a 25 mL con NaOH 0.1M en
balón aforado.
Procedimiento: 9. Se usó como blanco la solución
Parte 1: de NaOH 0.1M, y se midió la
1. En un embudo de decantación absorbancia de 220, 300, 308,
se agrego 5 mL de agua 490 nm en el
destilada y 0.5 mL de esencia espectrofotómetro.
exactamente medida. Se
Parte 2:
1
Roberto Hernández Sampieri 1. Se preparó una solución a partir
Director del Centro de Investigación y del de la muestra comercial de
Doctorado en Administración de la vainillina, 100mL a una
Universidad de Celaya
 concentración de 2000 ppm Parte 2
(microgramos/mililitro), usando A partir del procedimiento de la parte
como solvente NaOH. dos del procedimiento expuesto en la
2. Luego a partir de la solución metodología, podemos resumir los
anterior se preparó una resultados en la siguiente tabla:
solución stock, 100mL de 20
ppm (microgramos/mL), usando
Sln Sln Vol Abs Abs Abs
como solvente NaOH. vai Sto um . . .
3. A partir de la solución anterior nilli ck en 350 350 350
se prepararon varias soluciones na (mL fina nm nm nm
a 0.5, 1, 2, 3,4,5, 10 ppm (20 ) l
(microgramos x mL), usando μ/m (mL
L) )
como solvente NaOH,
llevándolas a un volumen final 0,5 0,2 10 0,0 0,0 0,0
de 10mL. 5 5 55 5
4. Se determinó la longitud de
1 0,5 10 0,1 0,1 0,1
onda máxima de la muestra de
3 3 3
vainillina en el equipo
shimadzu. 2 1 10 0,3 0,3 0,3
5. Las soluciones anteriores 5 5 5
fueron puestas en el 3 1,5 10 0,3 0,3 0,3
espectrómetro, para medir tres 8 85 9
veces sus absorbancias a la
longitud de onda determinada 4 2 10 0,4 0,4 0,4
7 7 75
anteriormente, usando como
blanco la solución de NaOH. 5 2,5 10 0,5 0,5 0,5
8 8 8

10 5 10 0,8 0,8 0,8

RESULTADOS
6 6 5
Parte 1
Tabla 1; Autor- Tabla de
A partir de la solución de NaOH y
concentraciones de la muestra de
Vainillina purificada, se tomaron dos
vainillina diluida con absorbancias a
datos de Absorbancia a 350 nm. Esta
350 nm.
solución se le realizaron 3 diluciones:
1. 1:5 v/v
ANÁLISIS DE RESULTADOS
2. 2:5 v/v
3. 1:10 v/v
Parte I
Esta última dilución fue a la que se
tomó las absorbancias que se
Se realizó el proceso usando
presentan a continuación:
Cloroformo el cual es un alcohol con
● Absorbancia 1:​ 0,75
gran capacidad de extracción y con
● Absorbancia 2:​ 0,7
diferente densidad a la mezcla de que absorbe la Vainillina es a 310 nm
agua con Vainillina. aproximadamente:

Parte II
La longitud de onda, en la zona del
ultravioleta, a la que absorbe una
molécula orgánica, en este caso la
vainillina, depende de la fuerza con la Gráfica 1. Concentración vs. Absorbancia de
que estén unidos sus distintos la Vainillina.
electrones. Los electrones que
participan en doble y triples enlaces de Como se observa en la Gráfica 1, se
las moléculas orgánicas no están obtuvo una buena curva de calibración
fuertemente retenidos y, por lo tanto, evidenciado en su coeficiente de
se pueden excitar más fácilmente por correlación lineal.
la radiación; así, las especies que
tienen enlaces insaturados (vainillina)
por lo general presentan picos de
absorción útiles en la región
ultravioleta (200-400 nm).
En la mayoría de experimentos
registrados en la literatura se observa
que el pico más alto de absorción se
presenta en 310 nm.
En el laboratorio se halló que la Gráfica 2. Curva de Ringbom-Vainillina.
longitud de onda para la Vainillina es
de 350 nm en el equipo Shimadzu, se Como se evidenció anteriormente la
obtuvo este resultado debido gráfica 1 es bastante lineal, es por
posiblemente a la matriz de la esencia. esto que en la Curva de Ringbom
(Gráfica 2) no tiene mayor
Teniendo en cuenta la tabla de funcionalidad.
resultados se realizan las gráficas de
concentración vs. absorbancia a una
longitud de onda de 350 nm, sabiendo
que esta longitud fue la hallada
experimentalmente en el laboratorio
para la Vainillina, en la literatura se
registra que la máxima longitud a la
 recordando que el paso óptico (b) es 1
cm, entonces k= E:

Vainillina a 350 nm:

m = 0,1626
0,1626x10mL
k= mV
Cs
t
k= 20ppm
=>
k= 0,0813 ppm​-1
Gráfica 3. Volumen vs. Absorbancia- E= 0,0813
Vainillina.

Ahora para hallar la concentración se

Ahora se llevarán a cabo los cálculos
hace uso de la siguiente ecuación,
para determinar los epsilon de la
tomando como absorbancia a 0 ppm la
Vainillina a una longitud de onda de
que se puede determinar a partir de la
350 nm, y posteriormente se
relación lineal de la gráfica 1:
determinará la concentración, esto
mediante el uso de las siguientes
A​0ppm350 nm​= k ​Vainillina-350 nm C​
ecuaciones: ​ Vainillina-350-nm
(4)
kCs C​Vainillina-350-nm​=A​0ppm350 nm ​/ k ​Vainillina-350 nm
m= Vt
​(1)
C​Vainillina-350-nm​= 0,05 / 0,0813 ppm​-1
C​Vainillina-350-nm​= 0,615 ppm
Donde:
m; es la pendiente de la ecuación de
Sin embargo esta concentración de
la recta de la gráfica volumen vs
ppm es la que podemos hallar en la
absorbancia correspondiente.
que se tomó como solución stock, es
k; es epsilon por el paso óptico
decir la de 20 ppm, por lo que para
(ecuación 2).
llegar a la concentración de la solución
Cs; concentración de la solución stock.
de 2000 ppm, esta concentración se
Vt; volumen total.
debería multiplicar por 100, así la
concentración de la vainillina en esta
k=Eb ​ (2)
última será de 61,5 ppm, en donde los
mg de vainillina serían 6.15mg por las
Donde:
relaciones de las unidades de ppm.
E; epsilon o absortividad molar.
Y si ahora tenemos en cuenta que la
b; paso óptico (ancho de la celda).
esencia utilizada en esta solución
mV t fueron 200 mg, podremos decir que el
k= Cs
​(3)
porcentaje peso a peso de vainillina
con respecto a esencia será del 3,1%
w-w.
Primero se utilizaran las ecuaciones
Además con la curva de calibración
de la 1 a la 3 para calcular el epsilon,
evidenciada en la gráfica 1 y teniendo
en cuenta que la fase orgánica
separada en la primera parte fue ● Universidad pablo olavide de
diluida 2:5 y luego 1:10, si tomamos la sevilla . (Sf). Práctica 4.
absorbancia de esta solución diluida Espectrofotometría. Google.
podremos hallar su concentración y Recuperado de
aplicando los factores de dilución en https://www.upo.es/depa/webde
sentido inverso tendremos que la x/quimfis/docencia/quimbiotec/F
concentración el extracto es de 189,94 Qpractica4.pdf
ppm (microgramos/mililitro) y si
tenemos en cuenta que se utilizaron
2,5 mL de esencia, podremos decir
que hay 0,19 mg de vainillina por cada
mL de colorante.

CONCLUSIONES

En conclusión pudimos determinar la

concentración de la vainillina en la
esencia de vainilla mediante dos
métodos, el primero utilizando las
ecuaciones que relacionan la
pendiente de la gráfica de Volumen vs
Absorbancia, con el epsilon esperado,
donde encontramos un porcentaje
masa-masa del 3.1%. Y a partir de la
vainillina extraída en la parte 1 de la
práctica, haciendo uso de la curva de
calibración, determinamos la
concentración de vainillina en la
muestra tomada de esencia, teniendo
en cuenta las diluciones realizadas,
llegamos a una concentración de
0.16mg por cada mL de esencia.

BIBLIOGRAFÍA

● Sampieri, R. (2014). Los enfoques

cuantitativo y cualitativo de la
investigaciòn cientìfica. En
Metodologìa de la investigaciòn
(736). Mèxico D.F:
INTERAMERICANA EDITORES,
cS.A. DE C.V