UNIVERSIDAD NACIONAL

“JORGE BASADRE GROHOMANN“

Facultad De Ciencias Agropecuarias
Escuela De Ingeniería
En Industrias Alimentarias

COLORACION GRAM

ALUMNO:
Richard Klever Santos Alarcón

DÍA Y HORA:
Lunes de 8:00 a 10:00am

CURSO:
Microbiología de los Alimentos 1

PROFESORA:
Ing. Amelia Castro G.
I. INTRODUCCION

De gran importancia en Microbiología porque permite

diferenciar dos grandes grupos de bacterias (Gram+ y
Gram-), según se comporten ante esta tinción.
El fundamento radica en la diferente estructura de la
pared celular de ambos grupos: las bacterias Gram+
tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared,
mientras que las bacterias Gram- tienen una capa de
peptidoglicano más fina y una capa lipopolisacarídica
externa.

Tras la tinción con el primer colorante (Cristal

violeta) se efectúa un lavado conetanol que arrastrará
al colorante sólo en las Gram (-), mientras que en las
Gram (+) elcolorante queda retenido y las células
permanecerán azules. Las células Gram (-) se teñirán
después con un colorante de contraste (safranina) para
que puedan observarse.

II. OBJETIVOS

 Utilización de técnicas sencillas para la

observación de microorganismos

 Conocer o manejo del microscopio óptico para la

observación de bacterias (importancia del objetivo
de inmersión)

 Conocer y manejar las unidades de medida de las

células y establecer comparaciones entre tamaños
de procariotas y de eucariotas

 Reconocer los distintos modelos de pared

bacteriana.

III. FUNDAMENTO TEORICO

La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo

de tinción diferencial empleado en bacteriología para
la visualización de bacterias, sobre todo en muestras
clínicas.
Debe su nombre al bacteriólogo danes Christian
Gram (1853-1938), que desarrolló la técnica en 1884.
Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología
celular bacteriana, como para poder realizar una
primera aproximación a la diferenciación bacteriana,
considerándose bacterias gram positivas a las que se
visualizan de color morado, y bacterias gram
negativas a las que se visualizan de color rosa, rojo
o grosella.

Explicación
El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en
todas las células bacterianas (tanto gram positivas
como gram negativas) a través de la pared bacteriana.
El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en
equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl
(Siulterio), los cuales están presente para
solubilizar el yodo, y actúan de mordiente, haciendo
que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a
la pared de la célula bacteriana. El I2 entra en las
células y forma un complejo insoluble en solución
acuosa con el cristal violeta.

La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para

realizar la decoloración, ya que en la misma es
soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos
gram positivos no se decoloran, mientras que los gram
negativos sí lo hacen.

Para poner de manifiesto las células gram negativas se

utiliza una coloración de contraste. Habitualmente es
un colorante de color rojo, como la safranina o
la fucsina. Después de la coloración de contraste las
células gram negativas son rojas, mientras que las
gram positivas permanecen violetas.

La safranina puede o no utilizarse, no es crucial para

la técnica. Sirve para hacer una tinción de contraste
que pone de manifiesto las bacterias gram negativas.
Al término del protocolo, las gram positivas se verán
azul-violáceas y las gram negativas, se verán rosas
(si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se
usó, por ejemplo, safranina).
IV. MATERIALES

 Mechero Bunsen o de Alcohol

 Asa de Siembra o aguja enmangada
 Pinzas
 Portaobjetos
 Muestras bacterianas de origen natural: Yogur, Sarro
Dental, Suelo, etc.
 Palillos
 Microscopios
 Aceite de inmersión
 Soporte de Tinciones
 Goteros
 Pinzas
 Agua destilada
 Colorantes para Tinción: Solución de cristal Violeta
Lugol Safranina Etanol 95%

V. CONCLUSIONES
Aunque las bacterias no aparecen en diferentes medio
que las rodea, difieren mucho químicamente esta
diferencia química es los que permite distinguir las
bacterias por Tinción, pues generalmente, el colorante
reacciona con la célula bacteriana, pero no reacciona
con su medio exterior.

Debido a eso la Tinción es importante para

la microbiología debido a que:

 Proporciona contraste entre el microorganismo y el

medio que lo rodea, permitiendo diferenciar varios
tipos morfológicos.
 Permite el estudio de las estructuras internas de
la célula bacteriana, tales como paredes celulares,
vacuolas o cuerpos celulares.
 Permite el empleo de mayores amplificaciones.

VI. BIBLIOGRAFÍA

http://labmicrofarmaciaulat.blogspot.pe/p/tincion-de-
gram_20.html

https://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Gram