FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

FARMACOGNOSIA

PRÁCTICA Nº 6
Tema:

Alumna:
 SULLCA CHOQUE, ROLANDA

Sección: FB6M1

Ciclo: VI

Turno: MAÑANA

Docente: Q.F. Adela Collantes

Fecha de realización de la práctica: 03 de MAYO del 2019

Fecha de entrega del informe: 10 de MAYO del 2019

Resumen:
En la práctica presente se llevará acabo el análisis cualitativo de los glicósidos
flavonicos y glicósidos antraquinónicos con las reacciones químicas respectivas
con fin de conocer la importancia de glicósidos flavónicos y glicósidos
antraquinónicos en Farmacognosia y Identifica glicósidos flavónicos y licósidos
antraquinónicos cualitativamente.

I. Introducción
Extracción de flavonoides Los flavonoides (en particular heterósidos) pueden ser
degradados por la acción de enzimas, siendo necesario utilizar muestras secas,
liofilizadas o congeladas. Para la extracción, el disolvente se elige en función del
tipo de flavonoide a extraer. La polaridad es un factor muy importante.
Flavonoides de baja polaridad (por ejemplo, las isoflavonas, flavanonas, flavonas
metiladas, y flavonoles) se extraen con cloroformo, diclorometano, éter dietílico,
o acetato de etilo, mientras que los heterósidos flavonoides y agliconas más
polares se extraen con alcoholes o mezclas de alcohol-agua. En el caso de los
heterósidos la presencia de la porción de azúcar incrementa la solubilidad en
agua y alcohol, por lo que soluciones hidroalcohólicas son las más adecuadas.
La mayor parte de las extracciones de especies que contiene flavonoides se
realizan por extracción directa con solventes y también pueden ser extraídos en
Soxhlet, primero con hexano, para eliminar lípidos seguido de acetato de etilo o
etanol para extraer compuestos fenólicos, sin embargo, este método no es
adecuado para compuestos sensibles al calor.
 II. Marco teórico
Antecedentes internacionales
En la actualidad, Colombia ha ganado cada vez más importancia dentro del
sector azucarero gracias a que es uno de los principales productores y
exportadores de este producto. Esto ha impactado de manera positiva la
economía nacional, y además gracias a que los cultivos se encuentran
concentrados principalmente en el Valle del Cauca también contribuyen a la
economía local. Durante el proceso productivo, además de la obtención del
azúcar también se obtienen algunos subproductos tales como la melaza, en la
que algunos estudios han identificado la presencia de compuestos fenólicos
como los flavonoides, los cuales hacen parte de los metabolitos secundarios de
las plantas y a los que se les ha atribuido propiedades antioxidantes. A pesar de
que ya existen algunos estudios sobre estos compuestos en la caña de azúcar,
la información sigue siendo escasa. Es por esto que el objetivo principal de este
proyecto es determinar e identificar la presencia de flavonoides en la melaza
residual de un ingenio azucarero, utilizando técnicas cromatográficas y
espectrométricas, para así darle valor agregado a este subproducto y aumentar
la rentabilidad del sector. Para lograr este objetivo fue necesario realizar un
proceso de extracción, en el cual se utilizaron diferentes condiciones en cuanto
a los solventes y pH. Al final se obtuvieron siete extractos, en los cuales fue
posible detectar por medio de cromatografía de alta eficiencia con un detector de
fotodiodos (PDA) y por medio de espectroscopia UV, la presencia de vitexina,
4′,5′-Dimetil-luteolin-8-C-glucosido, tricina-7-O-glicosido, tricina-4_-O-(treo or
eritro guaiacilglicerl) eter- 7-Oglucopiranoside, Schaftosido y tricina-7-O-
neohesperidoside. En cuanto a los resultados obtenidos mediante la técnica de
espectrometría de masas, fue posible establecer con certeza tres flavonoides
presentes en el extracto de licor de las torres de decoloración los cuales fueron:
Schaftoside -Cglucósido, Diosmetina-8-C-glucósido y tricina-8-C-glucósido.

Antecedentes nacionales
El presente estudio determina los metabolitos secundarios, así como los tipos de
flavonoides, presentes en hojas de Ficus benjamina L. provenientes del campus
de la Universidad Nacional Agraria La Molina. Para ello, se realizaron ensayos
fitoquímicos que dieron “positivo” para cumarinas, fenoles, azúcares reductores,
quinonas, antraquinonas, proteínas, saponinas, grupos funcionales (como
cetónicos y aldehídos), flavonoides y anillos aromáticos. En la extracción e
identificación de los tipos de flavonoides, se utilizó un extracto de las hojas
obtenido a partir de una mezcla de agua: acetonitrilo: metanol; aplicando la
técnica de cromatografía en capa fina, se utilizó como fase estacionaria una
placa de aluminio impregnada de sílicagel 60 F254; y como fase móvil, un
solvente BAW (n-butanol: ácido acético: agua) en proporción 4:1:5. La placa
resultante se reveló en luz UV, mostrando mejor visibilidad de colores utilizando
onda larga (358 nm) y se identificó la presencia de flavanonas y flavonas sin 5-
OH libre y flavonoles con un 3-OH libre y con/sin 5-OH libre.

Antecedentes locales
La investigación tuvo como objetivo obtener extractos de flavonoides de la
cáscara de naranja tangelo (Citrus reticulata x Citrus paradisi) y aplicarlos como,
antioxidante natural en el aceite vegetal Sacha inchi (Plukenetia volubilis). La
información se obtuvo de las pruebas experimentales, que se realizó en siete
etapas: caracterización física y química de la naranja tangelo y del aceite vegetal
sacha inchi, obtención de los extractos de flavonoides por soxhlet , detección de
los flavonoides de cada extracto por cromatografía de capa fina y cromatografía
de papel, identificación y cuantificación de los flavonoides por cromatografía
líquida de alta resolución (HPLC), determinación de la capacidad antioxidante de
cada extracto de flavonoide y finalmente se evaluó la actividad antioxidante en
el aceite sacha inchi, del extracto que tuvo la mayor capacidad antioxidante, para
lo cual se utilizó un diseño multifactorial con dos factores : extractos de
flavonoides y concentración con tres niveles: 0,05%; 0,1% y 0,15% y 16 bloques
que son los tiempos. Los resultados mostraron que en el extracto acuoso se
encontró la mayor cantidad de flavonoides: 100,3724 mg/g, siendo la naringina
con 81,1727 mg/g el flavonoide que se encontró en mayor proporción. A la
concentración del 0,1% el extracto de flavonoide presentó el menor índice de
peróxido a las 384 horas. Se concluye que los flavonoides presentes en la
cascara de naranja tangelo pueden ser utilizados como extractos crudos sin
necesidad de purificaciones parciales o totales, para conseguir aumentar la vida
útil del aceite sacha inchi.

GLICÓSIDOS _ Los flavonoides

Los flavonoides son pigmentos vegetales, que poseen un esqueleto carbonado
básico C6-C3-C6.

Se conocen más de 200 flavonoides naturales los que se encuentran

extensamente distribuidos entre las plantas, tanto libres como formando
glicósidos. Estos últimos contribuyen a darle color a las flores, frutos y hojas. Las
agliconas son más frecuentes en los tejidos leñosos. Hay poco más de 4() C-
glicoflavonoides que también contribuyen a darle color a numerosos vegetales.

Los flavonoides pueden estar hidroxilados en posición 3,5, 7,8,3'y 4' y estos
oxhidrilos a su vez pueden estar metilados, acetilados, sulfatados, glicosilados.
Esto hace que los flavonoides presenten todos los matices de solubilidad, desde
totalmente solubles en agua, hasta insolubles en ella, pero solubles en éter
etílico.
Los flavonoides que se encuentran en forma de glicósidos, poseen generalmente
la fracción azucarada en posición 3, dando origen a los 0-Glicósidos y C-
Glicósidos, los primeros hidrolizables y los segundos no (sólo en condiciones
drásticas). De todas formas, las glicosilaciones también pueden ocurrir en otras
posiciones.
Poseen el grupo CROMOFORO (CROMONA), formado por la fusión de y-pirona
y un anillo bencénico. La cromona presenta un sustituyente fenilo en posición 2
dando lugar a la flavona.

Los flavonoides presentan dos bandas de absorción al U.V.:

- banda I, pertenece al cinamoilo,y oscila entre 300-380 nm
- banda II, pertenece al benzoilo, y oscila entre 240-280 nm

Los máximos de absorción varían de acuerdo a la ubicación y naturaleza de los

sustituyentes. Así la curva espectral de la rutina tetrahidroxiflavona), presenta
dos máximos: 260 nm y 360 nm.
Identificación:

GLICÓSIDOS _ Antraquinónicos
Las hidroximetil antraquinonas son constituyentes de numerosos laxantes.
También se encuentran en la naturaleza en las formas reducidas como antronas
y antranoles que son inestables y al estado libre se transforman rápidamente en
antraquinonas.
Antraquinonas: Los derivados antraquinónicos presentes en las drogas
purgantes pueden ser:
• Dihidroxifenoles como el crisofanol
• Trihidroxifenoles como la emodina
A menudo se encuentran presentes otros grupos como el metilo en el crisofanol,
el hidroximetilo en la aloemodina y el carboxilo en la reína. Cuando estas
sustancias se encuentran al estado de heterósidos, el azúcar puede estar unido
a cualquier grupo hidroxilo originando Oheterósidos, siendo más frecuente la
unión al grupo hidroxilo del C-3, 6 y 8. También existen los C-heterósidos, al
unirse el C-1 de la glucosa al C-10 de la genina, como es el caso de la aloína en
el áloe y los cascarósidos en la cáscara sagrada. Los C-heterósidos son
fuertemente resistentes a la hidrólisis ácida normal, por lo que en estos casos es
necesario someter estos compuestos a una hidrólisis oxidativa con cloruro férrico
(ver figuras página 21)).

III. Objetivo:

 Conoce la importancia de glicósidos flavónicos y glicósidos antraquinónicos

en Farmacognosia

 Identifica glicósidos flavónicos y glicósidos antraquinónicos cualitativamente

IV. Descripción morfológica

Usos tradicionales

Antiinflamatorios y analgésicos

Usos medicinales
Propiedades anticancerosas: muchos han demostrado ser tremendamente
eficaces en el tratamiento del cáncer. Se sabe que muchos inhiben el crecimiento
de las células cancerosas. Se ha probado contra el cáncer de hígado.
Propiedades cardiotónicas: tienen un efecto tónico sobre el corazón,
potenciando el músculo cardíaco y mejorando la circulación. Atribuidas
fundamentalmente al flavonoide quercetina aunque aparece en menor
intensidad en otros como la genisteína y la luteolina. Los flavonoides disminuyen
el riesgo de enfermedades cardíacas.
Fragilidad capilar: mejoran la resistencia de los capilares y favorecen el que éstos
no se rompan, por lo que resultan adecuados para prevenir el sangrado. Los
flavonoides con mejores resultados en este campo son la hesperidina, la rutina y
la quercetina.
Propiedades antitrombóticas: la capacidad de estos componentes para
impedir la formación de trombos en los vasos sanguíneos posibilita una mejor
circulación y una prevención de muchas enfermedades cardiovasculares.
Disminución del colesterol: poseen la capacidad de disminuir la concentración
de colesterol y de triglicéridos.
Protección del hígado: algunos flavonoides han demostrado disminuir la
probabilidad de enfermedades en el hígado. Fue probado en laboratorio que
la silimarina protege y regenera el hígado durante la hepatitis. Junto con
la apigenina y la quercetina, son muy útiles para eliminar ciertas dolencias
digestivas relacionadas con el hígado, como la sensación de plenitud o los
vómitos.
Protección del estómago: ciertos flavonoides, como la quercetina, la rutina y
el kaempferol, tienen propiedades antiulcéricas al proteger la mucosa gástrica.
Antiinflamatorios y analgésicos: la hesperidina por sus propiedades
antiinflamatorias y analgésicas, se ha utilizado para el tratamiento de ciertas
enfermedades como la artritis. Los taninos tienen propiedades astringentes,
vasoconstrictoras y antiinflamatorias, pudiéndose utilizar en el tratamiento de las
hemorroides.9
Antimicrobianos: isoflavonoides, furanocumarinas y estilbenos han demostrado
tener propiedades antibacterianas, antivirales y antifúngicas.
Propiedades antioxidantes: En las plantas los flavonoides actúan como
antioxidantes, especialmente las catequinas del té verde. Durante años se
estudió su efecto en el hombre, y recientemente (5 de marzo de 200723) se ha
concluido que tienen un efecto mínimo o nulo en el organismo humano como
antioxidantes.
 V. Parte experimental y Resultados:

a. Realizar el análisis cualitativo de FLAVONOIDES

ESTRUCTURA GENERAL DE LOS FLAVONOIDES

Los flavonoides naturales suelen presentar al menos tres hidroxilos fenólicos y

se encuentra generalmente combinados con azucares en forma de glicósidos,
también se presentan con relativa frecuencia como agliconas libres [1,2].
Varios sub grupos de flavonoides son clasificados de acuerdo con la sustitución
del anillo C. Aquí se lleva acabo el estado de oxidación del anillo heterocíclico
y la posición del anillo B[2].
 PARTE EXPERIMENTAL
Análisis cualitativo de FLAVONOIDES
Heterósidos flavonoides DROGA REACCIÓN PROCEDIMIENTO REACCIÓN Resultado Resultado
POSITIVA
Hesperidósido Naranja H2SO4 cc mg de Coloración
Citrus sinensis hesperidina+ naranja ++
Fam. gotas de H2SO4 La reacción identifica
Rutaceae cc mediante la
coloración la
presencia de
flavononas
HCl cc mg de Precipitado
hesperidina+ blanco +
gotas de HCl cc La reacción identifica
mediante la
presencia de
precipitado la
presencia de
flavononas
HNO3 mg de Coloración
hesperidina+ pardo rojizo ++
gotas de HNO3 La reacción identifica
mediante la
coloración la
presencia de
flavononas
 NaOH 30% mg de Coloración
hesperidina+ amarillo +++
gotas de NaOH naranja La reacción identifica
30% mediante la
coloración la
presencia de
flavononas

Hesperidósido

HESPERIDINA
La aglicona o genina es una flavonona denominada hesperitina (fig. izq).
La aglicona es el disacárido reductor rutinosa, formado por una ramnosa (6-desoxi-L-manosa) unida a una glucosa
mediante un enlace glicosídico de tipo (1β͢ 6).
Tiene efectos vasoprotectores, mejora el estado de los capilares aumentando su resistencia y reduciendo su permeabilidad. Además de
reducir los niveles de colesterol, se le atribuyen propiedades antioxidantes, antiinflamatorias y anticancerígenas.
Heterósidos flavonoides DROGA REACCIÓN PROCEDIMIENTO REACCIÓN Resultado Resultado
POSITIVA
Rutinósido Ruda Wilson 0.5mLWilson A + Coloración
Ruta (Ác.borico+citrato 0.5mLWilson amarilla. ++
graveolens de sodio) B+0.5mL de La reacción identifica
Fam. extracto (30 min. mediante la
Rutaceae en oscuridad) coloración la
presencia de
flavonoles
Shinoda 0.5mL de Coloración
extracto+ virutas rosada +++
de Mg +gotas La reacción identifica
HCl cc mediante la
coloración la
presencia de
flavonoles
FeCl3 0.5mL de Coloración
extracto +gotas verde +++
FeCl3 La reacción identifica
mediante la
coloración la
presencia de
flavonoles
 Rutinosa:
La glicona es el disacárido reductor rutinosa, formado por una ramnosa (6-desoxi-L-manosa) unida a una
glucosa mediante un enlace glicosídico de tipo (1b®6). La aglicona o genina es un flavonol
denominado quercetina

Tiene efectos vasoprotectores ya que mejora el estado de los capilares aumentando su resistencia y
reduciendo su permeabilidad. También tiene propiedades antioxidantes y antiinflamatorias.

Heterósidos flavonoides DROGA REACCIÓN PROCEDIMIENTO REACCIÓN Imagen Resultado

POSITIVA
Quercetinósido Cebolla Pb(CH3COO)2 0.5mL de Precipitado
Allium cepa L. extracto +gotas color +++
Familia Pb(CH3COO)2 amarillo La reacción identifica
Liliaceae mediante
precipitado la
presencia de
flavonoles
FeCl3 0.5mL de Coloración
extracto +gotas verde en frio, +
FeCl3 rojo oscuro La reacción identifica
en caliente mediante la
coloración la
presencia de
flavonoles
 QUERCETINOSIDOS
La quercetina es un flavonol.
En las plantas, la quercetina se encuentra unida a azúcares, formando glucósidos hidrofílicos muy difíciles
de absorber. Estos últimos son hidrolizados en el intestino delgado. Así, tras la hidrólisis, la quercetina
aglicada es absorbida eficientemente.

La quercetina produce un efecto vasodilatador y antihipertensor. Es eficaz en todos los modelos de

hipertensión analizados, independientemente del origen de la hipertensión, del estado del sistema
renina-angiotensina, del estrés oxidativo, del óxido nítrico y de otros factores.

Heterósidos flavonoides DROGA REACCIÓN PROCEDIMIENTO REACCIÓN Imagen Resultado

POSITIVA

Antocianósido Maíz morado H2SO4 cc 0.5mL de Coloración

Zea Mays L extracto + gotas roja +++
Fam. Poaceae H2SO4 cc
La reacción identifica
mediante la
coloración la
presencia de
ANTOCIANIDINAS
 NaOH 30% 0.5mL de Coloración
extracto + gotas verde +++
NaOH 30%
La reacción identifica
mediante la
coloración la
presencia de
ANTOCIANIDINAS

Antocianósido

LAS ANTOCIANINAS
Son glucósidos de antocianidinas, pertenecientes a la familia de los flavonoides, compuestos por dos anillos aromáticos
A y B unidos por una cadena de 3 C. Variaciones estructurales del anillo B resultan en seis antocianidinas conocidas

Las antocianinas son los principales componentes del maíz morado, en especial el cianidin-3-glucósido. Las antocianinas
han demostrado efecto modulador de radicales libres de oxígeno y diversas citoquinas.
Efectos antioxidantes, hipolipemiantes e hipotensores

La escala empleada en cuanto a las evidencias es la siguiente: +++ alta evidencia, ++ evidencia, + baja evidencia, - No hay evidencia
PARTE EXPERIMENTAL
I. Análisis cualitativo
Compuestos antraquinónicos
Identificación
Procedimiento sen Imagen Resultado sábila Imagen Resultado
Microsublimación Coloración
Colocar en cápsula, 5 mg de droga en roja pardo
polvo. Cubrir con luna de reloj y - -- --
calentar hasta desprendimiento
gaseoso. Al residuo enfriado agregar
++
II gotas de NH4OH.

Al instante de incorporar
el NH4OH se produce la
coloración, luego va
desapareciendo
R. Borntrager Coloración Fase polar: NO SE REALIZO
1g MP+ 10 mL agua+III gotas de rosada rojo cereza
NaOH. Filtrar + X gotas de HClconc. rojiza Fase
Agregar 2 mL de cloroformo y apolar:
separar la fase cloroformo y agregar amarillo
X gotas de NH4OH cc. Agitar
 Sol. alcohólica amoniacal Coloración -
0.5 g de MP+ 5 mL de etanol+ roja pardo
decocción por 5 min.+V gotas NH4OH +++ -- --
cc. Presencia de
glicosidos
antroquinonic
os
R. Schonteten - Fluorescen
mL del ensayo anterior (Sol. -- -- cia a luz UV -- --
alcohólica amoniacal )+ borato de
sodio saturado.

R. Klunge - Coloración
0.5 g MP+ 5 mL de agua + BM a 40° C rojo
x 15 min.+ mg de talco. Filtrar.Al grosella NO SE REALIZO NO SE
filtrado añadir II gotas de CuSO4 + II ++ REALIZO
gotas de NaCl + 5 mL etanol.

La escala empleada en cuanto a las evidencias es la siguiente: +++ alta evidencia, ++ evidencia, + baja evidencia, - No hay evidencia.
 VI. Discusión

 En la práctica desarrollada las algunas reacciones no se presentó

evidencia debido a que el procedimiento desarrollado en la práctica no se
llevó acabo de la mejor manera, es decir, con los cuidados necesarios.

VII. Conclusión

 En conclusión, en la practica desarrolla de logro la identificación

cualitativa de los compuestos flavonicos y antraquinónicos mediante
reacciones físicas y químicas pudiendo identificar en las muestras usadas
los compuestos a identificar.

VIII. Referencias bibliográficas

1. Tamilselvi N, Krishnamoorthy P, Dhamotharan R, Arumugam P,

Sagadevan E. Analysis of total phenols,total tannins and screening of
phytocomponents in Indigofera aspalathoides (Shivanar Vembu) Vahl EX
DC. J. Chem. Pharm. Res., 2012, 4(6):3259-3262. Disponible en:
http://jocpr.com/vol4-iss6-2012/JCPR-2012-4-6-3259-3262.pdf [citado 22
de marzo 2013].
2. Garro G J et al. Analytical Studies on Tara Tannins. Holzforschung. 1997;
51(3). Disponible en:
http://www.fpl.fs.fed.us/documnts/pdf1997/galve97a.pdf [citado 22 de
marzo 2013].
3. Cabello LI. Monografía para el cultivo de la tara Caesalpinia spinosa
(Molina) Kuntze.Perúbiodiverso. Lima, Perú.2009
4. U.S. Department of Agriculture. USDA Database for the Flavonoid Content
of Selected Foods.March 2003. Disponible
en:http://www.nal.usda.gov/fnic/foodcomp/Data/Flav/flav.pdf [citado 22 de
marzo 2013]