CULTURA

OBJETIVO: identificar espécie causadora da patogenia

OBS: não se faz cultura de hanseníase pois não de sabe a técnica, o diagnóstico acaba
sendo clínico

NOÇÕES GERAIS
- Meios de cultura = nossos alimentos
OBS: Alguns microrganismos são fastidiosos e se alimentam de coisas específicas.
A Neisseria não se desenvolve em sangue normal, temos que aquecer a amostra
para, assim, liberar o fatores internos da hemácia e ela se desenvolver. Para isso,
pode usar aquecer a amostra para destruir a membrana citoplasmática da
hemácia e liberar o fator de crescimento interno, então, a partir de 12h o sangue
começa a ficar escuro
OBS: "Fatores de crescimento" são micronutrientes
OBS: quando o material para exame é o liquor e estar turvo, suspeita-se de
meningite
- No próprio processo infeccioso há seleção do mais fortes também. Dessa forma, em
cultura polimicrobiana, normalmente tem, no máximo 2 colônias diferentes. Quando
tem mais, geralmente, é erro de colega, pois entre elas mesmo existe competitividade
e uma destrói a outra.
OBS: Cada colônia de bactéria diferente na amostra polimicrobiana veio de um
tipo de bactéria diferente. Comumente são das espécies: E. coli, K. pneumoniae
(kpc) e P. aerujine
OBS: A amostra deve ser coletada da ferida em si, porque é lá o local onde tem
célula viva, não pode ser pus porque é amorfo.

PASSO A PASSO PARA REALIZAR CULTURA

1) Fazer Coloração Gram para saber se é Gr+ ou G-
2) Identificar o arranjo
a) Se for g+ e cocos: faz prova Bioquímica Catalase (se a catalase for
positiva é staphylococus, se for catalase negativa é Streptococcus)
OBS: não se sabe qual é a espécie, mas sabe se é estafi ou estrepe
b) Se for g+ e bacilo: entra no grupo das enterobactérias
c) se for g- e bacilo: faz prova bioquímica
OBS: Toda cultura pode ser precedida de exame Gram, mas não é obrigatório
OBS: Pode se semear cultura de todo e qualquer material semeável.
 ANTIBIOGRAMA
FUNÇÃO: determinar o perfil de sensibilidade ou resistência aos antibióticos in vitro
OBS: streptococcus piogenes não precisa fazer esse teste porque ele é sensível a todos
os antibióticos existentes.
ETAPAS DO PROCEDIMENTO DE ACORDO COM PORFÍRIO
1) Preparo de uma suspensão de bactérias de cultivo recente
2) Inoculação desta suspensão na superfície de uma placa de Ágar Müller Hinton
3) Adição dos discos de papel impregnados com antimicrobianos.
4) Incubação em estufa
OBS: O processo de antibiograma dura 24h, mas a realização de Cultura+Antibiograma=
pode durar até 92h (48h-72h de cultura + 24h de antibiograma)

ETAPAS DO PROCEDIMENTO NA INTERNET

(https://www.aviculturaindustrial.com.br/imprensa/antibiograma/20080303-111908-3608)
1º passo: Coletar material de secreções dos animais e remeter ao laboratório,
sob refrigeração. Estas secreções podem ser secreções de diarréias no caso de
problemas entéricos, secreções nasais e pulmonares no caso de problemas
respiratórios (coletar com swab nas duas últimas), e outras secreções.
2º passo: O laboratório recebe o material e faz a cultura dos microorganismos
presentes na secreção a partir de meios de cultura e ambiente controlado.
3º passo: A partir do crescimento bacteriano, o laboratório isola as cepas que
cresceram, identifica e semeia em outra placa para que posteriormente seja
realizado o teste de antibiograma.
4º passo: Após as cepas de bactérias estarem semeadas em uma placa, são
colocados discos de antibióticos na mesma placa para ver a reação das bactérias
frente a estes discos.
5º passo: Aquelas bactérias que forem sensíveis ao antibiótico utilizado serão
inibidas e assim se formará um halo de inibição na placa. Aquelas que são
resistentes não morrerão e não formará o halo de inibição.
6º passo: O halo de inibição é lido a partir de um padrão de medição pré-
estabelecido e as colônias são caracterizadas em Resistentes, Intermediárias e
Sensíveis
ANÁLISE DOS RESULTADOS
Após a realização do antibiograma deve-se avaliar alguns aspectos:
a) Padrão de crescimento ou Inibição ao redor de cada disco
b) Medição do tamanho de cada halo
Com o auxílio de uma régua, mede-se o diâmetro dos halos inibitórios de cada disco e
compara com os padrões dispostos nas tabelas apropriadas, afim de determinar se a
bactéria em análise é sensível, intermediária ou resistente ao antimicrobiano testado.

INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS

· SENSÍVEL:
Significa que a bactéria analisada apresenta susceptibilidade ao antibiótico
utilizado no disco e é ACONSELHÁVEL A UTILIZAÇÃO DO ANTIBIÓTICO para
combater a doença causada pela bactéria analisada. Esse resultado é visto
quando não há crescimento próximo ao disco de antibiótico e o valor da
medida do halo de inibição está acima do preconizado para o antibiótico
utilizado.

· RESISTENTE:
Significa que a bactéria analisada apresenta resistência ao antibiótico
utilizado e a EFICÁCIA DA DROGA ESTÁ COMPROMETIDA, não exercendo
efeito satisfatório no controle da(s) doença(s). Este resultado é visto quando
não há halo de inibição ou o halo é pequeno, indicando que a bactéria
conseguiu crescer perto do antibiótico pelo mesmo não causar efeito de
inibição no agente.

· INTERMEDIÁRIO:
Significa que a bactéria analisada apresenta resistência intermediária ao
antibiótico utilizado no disco e a EFICÁCIA DA DROGA ESTÁ SUSPEITA DE
ESTAR COMPROMETIDA, podendo não exercer efeito satisfatório no
controle da(s) doença(s). Esse resultado é visto quando a medida do halo
de inibição está entre a medida de resistência e de sensibilidade das
bactérias

IMPORTÂNCIA
O antibiograma facilita na investigação de antibióticos efetivos contra a proliferação
bacteriana no organismo e indica aqueles medicamentos mais adequados para tratar a
patologia. Assim, evita-se erros de prescrição, para que não seja prescrito um
medicamento em que a bactéria já seja resistente, tornando o tratamento mais eficiente
e rápido.