UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA - FILIAL JAÉN

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE ENFERMERÍA

Asignatura Microbiología y Parasitología
SEGUNDA UNIDAD
Práctica N° 4. Aislamiento y Siembra de Hongos Levaduriformes y
Filamentosos.

I. INTRODUCCIÓN

Los hongos incluyen los mohos y levaduras y como grupo difiere de los protozoos en virtud de su
pared celular rígida, producción de esporas, carencia de movilidad y posición filogenética.

Los hongos filamentosos están ampliamente distribuidos en la naturaleza y se ven

frecuentemente sobre pan viejo, queso o frutas. Cada filamento crece fundamentalmente en el
extremo por un mecanismo de extensión celular.

Bajo esta denominación se incluye un amplio grupo de organismos de gran heterogeneidad. Entre
las características comunes a todos los hongos pueden destacarse dos:

 Estar formados por una o más células eucariotas.

 Carecen de clorofila u otro pigmento fotosintético.

Los hongos son organismos heterótrofos que necesitan para su nutrición sustancias orgánicas ya
elaboradas; la mayoría son saprófitos - se desarrollan sobre materia orgánica en descomposición -
algunos son parásitos que producen enfermedades en el hombre, animales, vegetales y otros tienen
importancia industrial.

Dentro de los hongos podemos encontrar las levaduras que generalmente son unicelulares y los
filamentosos (mohos) o pluricelulares, estos tienen una estructura denominada "talo" y suele estar
constituida por una serie de filamentos denominados "hifas", que pueden ser ramificadas y
tabicadas, formando, en su conjunto, una estructura denominada "micelio"

Su reproducción puede ser sexual o asexual (gemación, esporulación, fragmentación) y su

clasificación es compleja y se puede realizar atendiendo a diferentes caracteres.

II. OBJETIVOS

1. Realizar un aislamiento de hongos a partir de inóculos variados

2. Describir las estructuras de los hongos filamentosos y hongos levaduriformes
3. Determinar los requerimientos nutricionales y culturales de los hongos.
4. Preparar y observar muestras frescas de los cultivos de hongos logrados y graficar lo
observado indicando las partes que lo componen
5. Investigar sobre el tratamiento de las micosis que afectan a los humanos.
III. MATERIALES Y PROCEDIMIENTOS

III.1 Materiales

Inóculos: levadura comercial, moho blanco en el pan, moho verde en el pan, secreción vaginal.

 Agar Sabouraud  Estilete  Colorante azul de

dispensado en placas  Pinza de rama recta algodón
Petri  Bisturí  Hidróxido de sodio
 Agua destilada  Placas Petri (NaOH)
esterilizada  Láminas portaobjetos  Guantes limpios
 Vaso de precipitación  Laminillas  Mascarilla
de 50 ml cubreobjetos  Microscopio
 Mechero con alcohol  Incubadora compuesto.
 Asa de siembra
 III.2 Procedimientos

3.2.1. Aislamiento y Siembra de hongos levaduriformes (levadura comercial)

Advertencia: Usar guantes y mascarilla para toda la toma de muestra

Primera parte
1. En una placa Petri colocar 2ml de agua destilada y una porción muy pequeña de levadura
comercial y diluirla.
2. Con ayuda de una aza de siembra sacar una alícuota de la dilución y sembrarla en medio
Sabouraud por el método de agotamiento en estría.
3. Poner a incubar a temperatura ambiente durante 7 días.

Segunda parte

4. Una vez logrado el cultivo, preparar muestras frescas de la siguiente manera:

En el centro de una lámina portaobjetos colocar una gota de azul de algodón o de no haber
este reactivo una gota de Na OH.
5. Cubrir con laminilla.
6. Observar en el microscopio utilizando los aumentos de 10X Y 40X
7. Graficar lo observado.

3.2.2 Aislamiento y Siembra de hongos filamentosos (moho blanco en el pan)

Primera parte

1. En una placa Petri colocar un trozo de pan enmohecido

2. Con ayuda de una pinza y un bisturí sacar pequeñas porciones de la zona donde ha crecido más
el hongo.
3. Hacer la siembra colocando con la pinza esas pequeñas porciones obtenidas en la superficie del
medio Sabouraud.
4. Usando el aza de siembra incinerada y fría presionar sobre el inóculo para que se adhiera al
medio.
6. Poner a incubar a temperatura ambiente durante 7 días.

Segunda parte

6. Una vez logrado el cultivo, preparar muestras frescas de la siguiente manera:

7. En el centro de una lámina portaobjetos colocar una gota de azul de algodón o de no haber este
reactivo una gota de Na OH.
8. Cubrir con laminilla.
9. Observar en el microscopio utilizando los aumentos de 10X Y 40X
10. Graficar lo observado.

3.2.3 Aislamiento y Siembra de hongos filamentosos (moho Verde del pan)

Primera parte

1. En una placa Petri colocar un trozo de pan enmohecido

 2. Con ayuda de una pinza y un bisturí sacar pequeñas porciones de la zona donde ha crecido más
el hongo
3. Hacer la siembra colocando con la pinza esas pequeñas porciones obtenidas en la superficie del
medio Sabouraud.
4. Usando el aza de siembra incinerada y fría presionar sobre el inóculo para que se adhiera al
medio.
5. Poner a incubar a temperatura ambiente durante 7 días.

Segunda parte

6. Una vez logrado el cultivo, preparar muestras frescas de la siguiente manera:

7.En el centro de una lámina portaobjetos colocar una gota de azul de algodón o de no haber este
reactivo una gota de Na OH
8. Cubrir con laminilla.
9. Observar en el microscopio utilizando los aumentos de 10X Y 40X
10. Graficar lo observado.

III.2.1 . Aislamiento y Siembra de hongos levaduriformes (levadura comercial)

Primera parte

1. Con un hisopo estéril sacar una pequeña porción de la muestra biológica contenida en un frasco.
2. Con ayuda del mismo hisopo sembrarla en medio Sabouraud por el método de agotamiento en
estría.
3. Poner a incubar a temperatura ambiente durante 7 días.

Segunda parte

4. Una vez logrado el cultivo, preparar muestras frescas de la siguiente manera:

5. En el centro de una lámina portaobjetos colocar una gota de azul de algodón o de no haber este
reactivo una gota de Na OH.
6. Cubrir con laminilla.
7. Observar en el microscopio utilizando los aumentos de 10X Y 40X
8. Graficar lo observado.

IV. RESULTADOS
Cuadro N°4.1
Gráficos de los resultados Gráficos de las observaciones
Inóculo Procedimiento de cultivo observados en la placa microscópicas

Moho verde
de pan
Moho blanco
de pan

Moho de la
naranja

Secreción
vaginal
(cándida
albicans)

4.2. Observaciones

Los hongos al igual que las bacterias poseen una capacidad de reproducción extraordinaria, se
adaptan muy bien al entorno en que están (Agar Sabouraud), y si encuentran presencia de otro
hongo compiten para la subsistencia en el medio, he allí la presencia de un hongo sobre otro y la
liberación de micotoxinas.
V.CONCLUSIONES

 Describir las estructuras de los hongos filamentosos y hongos levaduriformes

  Los requerimientos nutricionales de los hongos, se clasifican en 2 factores:

1) FACTORES FISICOS
a) Humedad y Agua disponible
La cantidad de agua existente en el ambiente y en los sustratos es uno de los factores
importantes para el desarrollo de los hongos y para la producción de micotoxinas.

b) Temperatura
La temperatura óptima para el desarrollo de los hongos se encuentra entre 25 y 30ºC y el
límite máximo entre 40 y 45ºC. Destacamos que la mayor parte de los hongos no crecen por
debajo de 5ºC y que sin embargo hay hongos como el Aspergillus flavus, Aspergillus
candidus y Aspergillus fumigatus que pueden crecer sin problemas hasta los 55ºC y otros
como el Penicillium expansum y el Penicillium cyclopium que son capaces de crecer a 0ºC.

c) Zonas de Micro flora.

En un silo pueden existir pequeñas zonas del alimento con alto contenido en humedad
susceptibles de desencadenar un desarrollo fúngico, lo cual puede después provocar un
aumento general de humedad en el sustrato y consecuentemente una mayor contaminación
fúngica y predisposición para la producción de micotoxinas.
Veamos ahora dentro de las estaciones del año, verano e invierno, como se pueden crear
estas zonas de microflora en el interior de los silos.

d) Integridad física de los granos.

Los tegumentos intactos del grano dificultan el acceso del hongo al almidón endospérmico.
Los granos partidos son más susceptibles de invasión y desarrollo fúngico, que los granos
enteros. Esencialmente esto es debido a un aumento de la superficie de cultivo y una mayor
predisposición para que el hongo contacte con la parte interna del grano, la cual es más
vulnerable que la cutícula o parte externa.

2) FACTORES QUIMICOS
a) pH.
Los hongos toleran un gran intervalo de pH ( 2,5 - 7,5 ), de un modo general soportan mejor
el medio ácido que el alcalino. Es de destacar que ellos mismos son capaces de alterar el
pH, utilizando como fuente de energía los ácidos orgánicos del alimento o los
excretados por bacterias acidificantes que pueden aparecer durante el periodo de deterioro
del alimento (3).

b) Composición del sustrato.

Los hongos no son exigentes desde el punto de vista nutricional y ellos se nutren de los
micro y macro-elementos existentes en el sustrato donde se desarrollan. Sin embargo la
composición del sustrato está muy ligada a la producción de la micotoxina.

c) Nutrientes minerales.
 Los nutrientes minerales, están relacionados con la composición del sustrato y a pesar de
que el hierro y el zinc son los elementos más importantes para un desarrollo fúngico, tanto
estos como otros pueden ser necesarios para la producción de micotoxinas.

d) Potencial de Oxi-Reducción ( O2/CO2 ).

La mayor parte de los hongos son aerobios y por lo tanto necesitan oxígeno para el
desarrollo de sus reacciones metabólicas. Una carencia de oxígeno condiciona el
crecimiento de los hongos y la ausencia total puede llegar a producir la muerte de éstos.

 Moho de pan (Rhizopus): de color negro y forma agranulada (parece algodon)

 Tratamiento de micosis que afectan a humanos.

Tratamiento de una infección micótica

En el caso de una infección micótica que afecte el cuerpo o la cara, se le recomendará una loción
antimicótica. Si la infección es generalizada o si se ve afectado el cuero cabelludo, es posible que el
médico le recete un medicamento antimicótico que se deberá tomar por boca.
En el caso del pie de atleta, su farmacia dispone de cremas, aerosoles y polvos específicos. Los
agentes tópicos más efectivos son la terbinafina, los azoles y la ciclopiroxolamina.

Prevención de las infecciones micóticas

Las infecciones micóticas pueden transmitirse por contacto directo persona a persona.
Recomiéndele a su niño que se mantenga alejado de las personas o mascotas infectadas. Lleve a sus
mascotas al veterinario para que las revise si tiene sospechas de infecciones micóticas.
Recomiéndele a su niño que no comparta con amigos elementos personales como peines o
sombreros. Aliéntelo a tener un buen nivel de higiene y a usar calzado en lugares públicos.

VI. BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA

 https://www.msdmanuals.com/es-pe/professional/enfermedades-
infecciosas/hongos/generalidades-sobre-las-micosis
 https://raulcalasanz.files.wordpress.com/2010/12/hongos.jpg
 https://www.tuasaude.com/es/hongos-en-la-piel/
 https://pt.slideshare.net/iesjuliocarobaroja/tema-18-microbiologia-7843650

VII. ANEXOS