Crecimiento Bacteriano

En microorganismos  aumento del nº de

individuos como resultado de la división celular
 aumento de la masa celular 
multiplicación celular
 Fisión binaria

El crecimiento de una célula procariota

finaliza con su división en dos.
 Tiempo de generación

• Es el tiempo transcurrido, necesario para

que una célula se divida y forme dos.
 Gemación

• Se forma una célula hija

• La célula madre conserva su identidad

• Crecimiento polar
 Biopelículas

• Formas de crecimiento

• Adherencia celular

• Alfombras microbianas
Biopelículas
 Crecimiento

• Suma de los ciclos celulares de todos los

individuos de dicha población.

• Asincrónicos
• Sincrónicos
El crecimiento de una población o cultivo
bacteriano se puede expresar en función
de:
– Aumento de masa del cultivo
– Aumento del número de células
– Velocidad de crecimiento
– Generación 1 Cel = 2 cel
• Tg: tiempo en que una población se duplica
En cada
periodo de
tiempo fijo se
duplica el
numero de
células

Brock, Biología de los Microorganismos, 2009

 Crecimiento en sistemas
cerrados líquidos
El más habitual en laboratorio
Cultivo en frascos, tubos, etc.
No hay aporte nuevo de nutrientes ni
es posible eliminar los productos de
desecho del cultivo Se desarrolla a
través de una curva característica de
crecimiento
 Curvas de crecimiento

Brock, Biología de los Microorganismos, 2004

 Crecimiento críptico

• Crecimiento y división de unas y muerte

de otras

• El numero permanece constante

 Cultivo continuo
(Quimiostato)
 Cultivo balanceado mantenido por
tiempo indefinido por un sistema
abierto de flujo compuesto por:
Una cámara de cultivo de volumen
constante: llega suministro de nutrientes
desde una cámara reservorio
Desde la cámara de cultivo se elimina
parte del cultivo y de sustancias tóxicas
por un dispositivo de drenaje
Brock, Biología de los Microorganismos, 2018
 Quimiostato
• Los microorganismos pueden cultivarse a una
amplia variedad de tasas de crecimiento
exponencial

• Permite crecimientos balanceados debido a que

existe un nutriente limitante

• Permite elegir la densidad de células a la que se

quiere trabajar.
 Medida del crecimiento

• Crecimiento en el laboratorio

• Medios de cultivo
Clasificación de los medios de
cultivo

Definidos Complejos

Composición
Origen Consistencia química

• Naturales • Líquidos • Enriquecidos

• Sintéticos • Semisólidos • Selectivos
• mixtos • Sólidos • Diferenciales
Recuento bacteriano
Recuento de células totales

Cámara de recuento
Petroff-Hauser

Contadores electrónicos
contador Coulter, citometría de flujo
 Cámara de Petroff-Hausser

Brock, Biología de los Microorganismos, 2009

 Recuento de células viables

Recuento de viables por siembra de

muestras de diluciones en placas de Petri
Recuento de viables por siembra en
superficie

Alícuotas 0.1 ml

Brock, Biología de los Microorganismos, 2009

 Métodos turbidimétricos

• Dispersión de la Luz: cuando un haz de

luz paralelo golpea una partícula en
suspensión, parte de la luz es reflejada,
diseminada, absorbida y transmitida.

• "curva de calibración" relacionar

Absorbancia (Densidad Óptica) con el
número de microorganismos totales o con
UFC.
 Espectrofotómetro en medida
del crecimiento

Brock, Biología de los Microorganismos, 2015

Efectos ambientales sobre el
crecimiento microbiano
Temperatura
 Temperaturas cardinales

Optima
V crecimiento

Reacciones enzimáticas a
alta velocidad

Minima Maxima

Temperatura
No funcionamiento apropiado de Desnaturalización de proteinas
membranas Rompimiento de membranas
Clases de microorganismos basados
en su temperatura óptima
 Crecimiento microbiano a bajas
temperaturas

• Mueren si se exponen a Tº normales

• Distribución amplia
 Adaptaciones moleculares

• los fosfolípidos de la membrana celular aumentan

la proporción de ácidos grasos no saturados con
cadenas mas cortas: estado semifluido a bajas
temperaturas.
Enzimas más resistentes al frío. Proteínas
mayor cantidad de hélices α y menor
cantidad de hojas β, mas amino ácidos
polares y menos hidrofóbicos flexibilidad

Proteínas de choque frio

Crioprotectantes: glicerol y proteinas

 Microorganismos hipertermófilos

• Las únicas formas de vida capaces de vivir por encima de

65ºC son todas procariotas.

• Hipertermófilas que pueden llegar a presentar óptimos

cercanos a los 100ºC, Archaea.

• Membranas con ácidos grasos saturados de cadena larga

Adaptaciones a altas temperaturas

• Enzimas termorresistentes, interior molecular muy

hidrófobo

• Aumento en enlaces iónicos

• Solutos: di-inositol fosfato, diglicerol fosfato,

manosilglicerato. Estabilizan proteinas
• En Arqueas hipertermófilas los lípidos en vez de
basarse en ésteres de ácidos grasos (glicerol),
se trata de éteres de hidrocarburos. monocapa
lipídica de C40-bifitanil-tetraéteres
pH
 Acidófilos
Organismos que pueden vivir a un pH < 6
Picrophilus oshimae crece a pH 0,7
 Alcalófilos
Organismos que crecen a pH >10.

Bacillus firmus crecen a pH entre 7.5-11

Encontrado en suelos y lagos alcalinos
Osmolaridad
 Disponibilidad del agua
Las células necesitan agua para crecer
En ambientes marinos (3% NaCl) o en medios con
alto contenido de sal, el citoplasma se deshidrataria
y se encogeria.
Alta [sal]

H2O sale

Osmosis: Tendencia del agua a difundir de regiones de baja

concentración de soluto a regiones de alta concentración.
Adaptaciones a altas concentraciones
de sal
Para evitar la plasmólisis las células pueden
• hacer o importar solutos compatibles

glicerol

• Compuestos no inhibitorios que incrementan la

concentración interna de soluto en la célula ej.
glicerol, manitol, glicina betaina, K+
glicina
betaína
Xerofilos: crecen en ambientes muy secos

Osmófilos: Crecen en ambientes con altas

[azúcar]
Halobacterium salinarium

> 1.5 M NaCl requeridas para el crecimiento

Pueden crecer en soluciones saturadas de

NaCl (6.8 M)
Estanque de
evaporación de
agua salada
Oxígeno
 Microaerófilos
Aerobios
Facultativos

Aerotolerantes
Anaerobios
Obligados
aerobios-anaerobios-facultativos-microaerofilos-aerotolerantes
Formas toxicas del oxigeno
• 3O2: común como se encuentra en el
ambiente (tripletas).

• H 2O 2 peróxido
• OH- Hidroxilo
• O 2- superóxido
CONTROL DE LAS POBLACIONES
MICROBIANAS
Agentes físicos

Temperatura

Filtración

Radiación
 Temperatura: calor

• Punto térmico mortal: temperatura mínima que

mata a todas las bacterias en un tiempo
determinado

• Tiempo térmico mortal: tiempo para que mueran

todas las bacterias a una determinada
temperatura
 Autoclave

 Aplicación de vapor de agua bajo presión

 Aplicaciones:
 Esterilización medios y soluciones en lab.
 Esterilización material quirúrgico
 En industrias alimentarias: conservas,
leche, bebidas
 Pasteurización

 Pasteurización clásica: 63ºC x 30 min

 Pasteurización instantánea (HTST): 72ºC x 15
seg
 Uperización: esterilización por calor húmedo
a 135-150ºC x 1-2 seg: pasterizaciona ultra
altas temperatura (UHT)

 Mata más rápidamente

 Altera menos el sabor
 Actúa en flujos continuos
 Filtración

Filtros de membrana
Los filtros de
membranas son
discos de ésteres de
celulosa con poros
que previenen el
paso de los
microorganismos.
 Radiación

Ultravioleta (220 to 300 nm) usada para desinfectar

superficies y aire. Pobre poder de penetración
.
Radiacion ionzante: Las fuentes de radiaciones
ionizantes son los aparatos de rayos X, los rayos gamma
y los radioisótopos, como el Co60 o el Cs137.
Los efectos de las radiaciones ionizantes son letales,
tanto directos como indirectos, así como mutagénicos.
 Efectos de las radiaciones
ionizantes
 Efecto letal directo (a altas dosis)
 Roturas y entrecruzamientos en el
cromosoma que no se pueden reparar
 Efecto mutagénico
 Daños menores que se reparan por
mecanismos propensos a error
 Efecto letal indirecto: por radiólisis del agua,
que genera radicales OH· letales
 Si además, hay oxígeno formación de
peróxidos y epóxidos que son letales
Radiaciones ionizantes
 Aplicaciones de las radiaciones
ionizantes
Para la esterilización de:

 Material farmacéutico
 Material médico-quirúrgico
 Algunos alimentos envasados.
Reconocida su seguridad por la OMS y
otras agencias sanitarias
Agentes químicos
 Esterilizantes

Destruye TODOS los microorganismos

incluyendo las esporas
 Desinfectantes

Agentes químicos que matan todos los

microorganismos pero no las endosporas o
formas de resistencia.
 Sanitizantes

Menos fuertes que los desinfectantes y

reducen la carga bacteriana o microbiana.
 Antisépticos o germicidas

Agentes químicos que matan o inhiben el

crecimiento de los microorganismos pero no
son tóxicos a animales por tanto pueden ser
usados en tejido vivo
Agentes antimicrobianos
Agentes antimicrobianos