UNIVERSIDAD NACIONAL

“SANTIAGO ANTÚNEZ DE
MAYOLO”

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA PROFESIONAL AGRONOMÍA

BIOTECNOLOGÍA AGRÍCOLA

DOCENTE: M. Sc. Ing. Nelly Pilar Caycho Medrano.

TEMA: Producción de plantas haploides.

Integrantes:

 Jesus Ocaña Juan

 Morales Suni Luzmila
 Cashpa Guerrero Jovino

Huaraz – Perú

2019

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 RESUMEN

El desarrollo de la biotecnología vegetal ha permitido la incorporación de

estrategias innovadoras a los métodos tradicionales de mejora, con el fin de generar

una mayor variabilidad genética en este contexto la producción de plantas

haploides, hoy en día uno de los métodos más eficientes para la obtención de

plantas, estas plantas obtenidas son de gran utilidad para generar nuevas líneas

isogénicas y variedades, así como para estudios genéticos.

Es así que a partir del polen es capaz de cambiar su proceso de desarrollo,

reprogramarse y entrar en una nueva ruta denominada embriogénica, tras un

tratamiento de estrés. Tras su reprogramación, la microsporas comienza a dividirse

simétricamente dando lugar a proembriones y embriones que posteriormente

continua se desarrolló regenerando plantas haploides.

Con este trabajo se pretende conocer las formas de obtención de plantas haploides,

ventajas y desventajas de estas; asimismo todo el proceso en la producción de

plantas haploides.

De esta manera los resultados de la investigación bibliográfica obtenidos aportan

nuevas informaciones muy valiosas sobre los mecanismos que controlan el proceso

de reprogramación del polen a embriogénesis, cuyas especies generadas son de gran

importancia económica.
 ÍNDICE
I. Introducción………………………………………………………………...……. 4
II. Objetivos…………………………………………………………………………. 5
2.1 Objetivo general……………………………………………………………….5
2.2 Objetivos específicos………………………………………………………......5
III. Revisión Bibliográfica…………………………………………………..................5
3.1. Importancia de las plantas haploides en la mejora genética……………………5
3.2. Cultivo de anteras……………………………………………………………...6
3.3. Métodos para la obtención de plantas haploides………………………………6
3.3.1. Métodos utilizados en la obtención de plantas haploides para su
aplicación en programas de mejora………………………………………...…7
a) la partenogénesis……………………………………………………....7
b) la ginogenesis…………………………………………………………..8
3.4. La embriogénesis del polen y la duplicación de cromosomas en plantas
haploides como camino rápido hacia la homocigosis………………………………9
3.5. Factores que perjudican el cultivo de anteras……………………………...…11
3.5.1. Genotipo de las plantas donantes……………………………………11
3.5.2. Fisiología de las plantas donantes…………………………………..11
3.6. Producción de plantas haploides a partir de cultivos de anteras aplicados al
fitomejoramiento…………………………………………………………………12
3.7. Variedades obtenidas mediante la producción de plantas haploides desde
cultivos de anteras……………………………………………………………...…13
3.8. Ventajas y desventajas de los haploides…………………………………...…14
IV. Conclusiones……………………………………………………………………..15
V. Recomendaciones……………………………………..………………………….16
VI. Bibliografía…………………………………………………………….…………17

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 I. INTRODUCCIÓN

Hoy en día la aplicación de biotecnología al mejoramiento de las plantas dará lugar a productos
revolucionarios, de los cuales los beneficios que vamos a obtener son que cada vez se
perfeccionen las técnicas ya existentes y que proporcionen apoyo a los programas de
mejoramiento que están actualmente en marcha.

Entre los métodos más usados para la creación de haploides se valen de la hibridación
interespecifica o inter genérica y del cultivo de esporas (masculinas o femeninas)

Los granos de polen de la papa silvestre (Solanum phureja), por ejemplo contiene solo un
núcleo generativo causado por una gametogénesis anormal, después de la hibridación
interespecifica, pero la célula del huevo de Solanum tuberosum es inducida a formar embriones
partenogenicamente, y por ello estos serán haploides, esta vía puede seguirse también en otras
especies poliploides.

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 II. OBJETIVOS:

2.1. OBJETIVO GENERAL.

 Aportar nuevas informaciones valiosas para el estudiante del curso de
biotecnología sobre los mecanismos que controlan el proceso de
reprogramación del polen a embriogénesis.
2.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS.
 Dar a sobre la importancia de las plantas haploides en la mejora genética.
 Informar al estudiante con nueva información valiosa en la producción de
plantas haploides.

III. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA.

3.1. IMPORTANCIA DE LAS PLANTAS HAPLOIDES EN LA MEJORA
GENÉTICA.
Según Ivett, B. (2008). Los métodos tradicionales para la mejora de plantas han
sido practicados durante cientos de años. Actualmente se ha llegado a una etapa
en la que estos métodos son insuficientes para hacer frente a las demandas
mundiales de producción. Los objetivos de mejora a largo plazo no podrían ser
alcanzados a menos que se genere mucha variedad genética que pueda ser
utilizada para tal fin, y que existan métodos que acorten el tiempo necesario
para la obtención de nuevas variedades.
La introducción de las técnicas biotecnológicas y los avances en biología y los
avances en biología molecular han permitido el desarrollo de nuevas
herramientas de gran utilidad en la mejora vegetal. Entre estas las producción
de plantas haploides (plantas que poseen un solo juego de cromosomas “n” esta
herramienta importante ya que permite acortar el plazo requerido para la
obtención de nuevas variedades, siendo un buen complemento de los programas
de mejoramiento tradicional.
Las poblaciones haploides carecen de genotipo heterocigotos y son de gran
utilidad para encontrar genotipos recesivos, tales como las propiedades
organolépticas (propiedad de un alimento) el color, sabor, la forma y la posición
de frutos como características agronómicas y comerciales más importantes ya
que dichos genotipos no quedan ocultos por los alelos dominantes. Este hecho

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 tiene gran repercusión tanto en el campo de la mejora vegetal, como en el de la
biotecnología.
Estas poblaciones presentan mayor variación genética aditiva y una ausencia de
varianza genética debida a la dominancia, si se las compara con poblaciones
segregantes, es decir, que se eliminan las complejidades del estado heterocigoto,
simplificándose enormemente dicho estado. De esta manera con el análisis
genético pueden distinguirse las mutaciones recesivas de forma inmediata.
Haciendo que el proceso de selección sobre una población de haploides
resultantes más eficiente.

3.2. CULTIVO DE ANTERAS.

Según Ivett, B. (2008). Mediante esta técnica, las anteras inmaduras que
contienen polen en una etapa específica de desarrollo se colocan en medio
donde el polen inmaduro se divide para formar embriones o callo. Trasferido
estos a medios de regeneración, se forman plantas. En la mayoría de los casos
se producen plantas haploides estériles, pero en algunas especies ocurre una
duplicación espontanea de los cromosomas en las etapas de desarrollo del callo
y de regeneración de la planta.
Guha y Maheshwari (1964). Descubrieron el cultivo de anteras se ha
extendido a más de 150 especies; sin embargo, los intentos de integrar esta
técnica con el mejoramiento practico se limitan a unos poquísimos cultivos
económicamente importantes como es el arroz, cebada, trigo, papa, tabaco,
colza oleaginosa y maíz.
Las limitaciones técnicas que afecta a muchas especies, como la renuencia a
la regeneración de planta y los bajos rendimientos de las plantas haploides han
ocasionado el lento desarrollo del mejoramiento genético mediante el cultivo
de anteras. En consecuencia, las condiciones que llevan a la haploidia en las
plantas cultivadas importantes necesitan desarrollarse y mejorar.

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 3.3. MÉTODOS PARA LA OBTENCIÓN DE PLANTAS HAPLOIDES.
Según Clement, C. (2001). Existen diversos métodos para la obtención de
plantas haploides, los cuales se describen en la figura 1, que también muestra
los diferentes tipos celulares que pueden experimentar del desarrollo
embriogénico en plantas superiores.

Figura 1. Métodos de producción de plantas haploides.

Las plantas haploides aparecen con muy baja frecuencia en la naturaleza de
forma espontánea. Dicha frecuencia es en la mayoría de los casos demasiado
baja para ser utilizadas en programas de mejora.
3.3.1. MÉTODOS UTILIZADOS EN LA OBTENCIÓN DE PLANTAS
HAPLOIDES PARA SU APLICACIÓN EN PROGRAMAS DE
MEJORA: Menciona Clement, C. (2001).
a) LA PARTENOGÉNESIS:
Consiste en la formación de un embrión sin la intervención de los gametos
masculinos. La partenogénesis puede ser inducida in vitro mediante la
polinización con granos de polen triploides, o mediante la polinización con
granos de polen irradiado o inactivo por tratamiento físico o químico.

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 La partenogénesis in vitro ha proporcionado un método práctico para la
obtención de plantas haploides de Solanum tuberosum, Beta vulgaris, cucumis
sativos y Alliun cepa con frecuencia relativa alta.
 La ventaja:
De esta técnica es la buena estabilidad genética de las plantas haploides
obtenidas, junto con la ausencia de plantas albinas.
En la Beta vulgaris hay una gran influencia del genotipo sobre la
partenogénesis haploide, en la mayoría de las especies los rendimientos son
muy bajos. Además la diploidizacion de los haploides inducidos es todavía
ineficiente. Por último, esta técnica está restringida solamente a la producción
de haploides no pudiéndose aplicar en la transformación de plantas.
El camino para conseguir plantas haploides vía eliminación cromosómica está
basado en el cruzamiento de dos especies distintas. Tras la fertilización y
durante la embriogénesis temprana uno de los cromosomas paternos es
eliminado, esta técnica es muy desarrollada en especies como Holdeum
vulgare, Zea mays.
En el caso de la cebada las plantas haploides se obtuvieron mediante la
polinización de plantas de Hordeum vulgare con Hordeum bullbusum, un
pariente silvestre que puede propagarse vegetativamente. En las primeras
divisiones del cigoto hibrido tras la fecundación, los cromosomas de Hordeum
bullbusum son eliminados obteniéndose un embrión haploide con cromosomas
de Hordeum vulgare únicamente. Las semillas obtenidas a partir de estos
embriones no tienen endospermo normal, por lo que los embriones haploides
son puestos en cultivo suplementado con hormonas para regenerar plantas
haploides. Las plantas haploides regenerados con este método son finalmente
con colchicina para la obtención de plantas haploides.
b) LA GINOGENESIS
Consiste en la formación de embriones que contienen solamente los
cromosomas maternos, debido a que no hay una fusión de los núcleos de los
gametos masculinos y femeninos. La ginogenesis in vitro se puede llevar a
cabo mediante el cultivo de sacos embrionarios, ovarios no polinizados o bien
mediante el cultivo de óvulos aislados.
Este método ha sido utilizado para la inducción de haploides en especies como
en Allium cepa, Beta vulgaris y en algunas especies arbóreas. En la actualidad

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 la ginogenesis es la técnica menos empleada debido a su baja eficiencia,
aunque al poder obtener plantas haploides con especies que no responden a
tratamientos más eficientes, hace que este método tenga todavía alguna
aplicación.
c) CULTIVO DE ANTERAS.
Esta técnica es utilizada en plantas superiores, se pueden obtener plantas
haploides mediante el cultivo de anteras o de microsporas aisladas en medios
nutritivos en los que se estimulan la división celular de las microsporas y
posteriormente la regeneración de la planta aprovechando la totipotencia de
las células vegetales. Hoy en día la embriogénesis a partir de microsporas
aisladas es de entre los métodos descritos el más rápido y el de aplicación en
mayor número de especies para la regeneración de plantas haploides.
3.4. LA EMBRIOGÉNESIS DEL POLEN Y LA DUPLICACIÓN DE
CROMOSOMAS EN PLANTAS HAPLOIDES COMO CAMINO
RÁPIDO HACIA LA HOMOCIGOSIS.
De la torre, C. (1985). Afirma que la obtención de plantas haploides
completamente homocigotas en una sola generación, a través de cultivo de
anteras es el medio más empleado en nuestros días. El fenómeno de la
embriogénesis de microsporas fue descubierto por Guha en 1964, quienes
obtuvieron embriones, la aplicación de cultivo de anteras y microsporas ha sido
documentada en más de 200 especies de angiospermas. Si la duplicación
cromosómica ocurre en alguna etapa durante la embriogénesis, las plantas
regeneradas a partir de microsporas son completamente homocigotas, siendo
individuos homocigotos fértiles. El conseguir la homocigosis en una sola
generación ayuda a reducir el número de ciclos de autopolinización o retro
cruzamiento que sería necesario en los sistemas convencionales de mejora para
obtener líneas puras o isogenicas.

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 Figura 2. Ventaja del uso de haploides en la mejora: esquema comparativo de
la obtención de homocigosis en dos alelos mediante embriogénesis de polen y
autofecundación.
La embriogénesis de polen in vitro permite la producción de plantas
homocigotas y además es un excelente sistema para estudios genéticos y de
mutagenesis.
En las plantas autogamas y aplicando los métodos convencionales de mejora la
homocigosis se logra únicamente a partir de seis a ocho generaciones de
autofecundación, mientras que con una técnica de producción de haploides
seguida de duplicación cromosómica, es posible llegar a homocigosis completa
en una generación solamente. En las plantas alogamas, la producción de
homocigotas resulta de gran importancia. Al trabajar con especies de
polinización cruzada se favorece de forma natural la heterocigosidad y de ser
posible la autofecundación, la obtención de homocigotas se ve dificultada por
la endogamia.

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 3.5. FACTORES QUE PERJUDICAN EL CULTIVO DE ANTERAS.
De la torre, C. (1985). Menciona los siguientes factores como:
3.5.1. GENOTIPO DE LAS PLANTAS DONANTES.
El genotipo es quizás el factor más importante que afecta el cultivo de
anteras; la variabilidad en la respuesta al cultivo de anteras se ha hallado
entre especies y dentro de ellas y se ha demostrado el genético de esta
respuesta. Dicha capacidad para el cultivo de anteras es particularmente
evidente en cultivares de arroz de los tipos japónica e indica, de los
cuales el primero es más sensible que el ultimo.
Además de la capacidad genotípica para el cultivo de anteras se han
determinado en la cebada y en el trigo rasgos heredados
independientemente respecto a componentes específicos de la
androgénesis, como la inducción de callo y la regeneración de plantitas.
3.5.2. FISIOLOGÍA DE LAS PLANTAS DONANTES.
El fotoperiodo, la intensidad de la luz, la temperatura y la nutrición mineral
de las plantas donantes influye en el rendimiento de los embriones
procedentes de microesporas y de las plantitas. La ocurrencia de dos
granos de polen morfológicamente diferenciados en las anteras maduras,
un fenómeno hallado originalmente en el tabaco y confirmado luego en el
trigo, la cebada y el arroz; se ha relacionado con la formación in vitro de
plantas haploide a partir de polen inmaduro. Atendiendo a este
dimorfismo del polen, solo el polen que carece de la mayoría de sus
elementos estructurales, que da tensión suave, uy que es pequeño, será
idóneo para iniciar una ruta de desarrollo embriogénico. Se cree que la
frecuencia de dichos granos de polen está predeterminadas, antes del
cultivo in vitro, es decir al comienzo de la floración por el estado de
desarrollo de las plantas donantes. Después de la inducción, el desarrollo
y la maduración de los granos de polen pueden ser afectados por el
genotipo y las condiciones del cultivo. Por consiguiente, el control de las
condiciones de crecimiento de las plantas donantes como el estrés de N
otros estreses nutricionales y ambientales o los tratamientos que conducen
a la suavidad y a la esterilidad; pueden modificar la respuesta de genotipos
recalcitrantes.

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 3.6. PRODUCCIÓN DE PLANTAS HAPLOIDES A PARTIR DE
CULTIVOS DE ANTERAS APLICADOS AL FITOMEJORAMIENTO.
Rodríguez, G. (1978). Afirma que el potencial que posee el cultivo de anteras
surge de la constitución genética de las células del polen. Las células del polen
de los híbridos F1 contienen la dotación genética de las plantas paternas y las
recombinaciones esperadas según las proporciones mendelianas. Estas células
son haploides y permiten por ello al mejorador seleccionar eficazmente los
recombinantes deseables; además una vez duplicadas esas células, se establecen
rápidamente líneas homocigotas. Alcanzar rápidamente la homocigosidad
constituye una de las aplicaciones más importantes del cultivo de anteras en el
desarrollo de variedades nuevas porque, gracias al tiempo, el espacio y los
costos necesarios para desarrollar las líneas verdaderamente mejoradas”
disminuirán considerablemente. Las líneas homocigóticas R2 manifestaran la
variabilidad inherente a la generación F2 añadiendo una ventaja: cada individuo
habrá fijado su genotipo y no sufrirá segregación adicional.
Dado que en los haploides no hay dominancia es decir el fenotipo equivale al
genotipo. La eficiencia de la selección aumenta cuando el mejoramiento se vale
del cultivo de anteras. Si se consideran por ejemplo: Tres genes dominantes, 1/8
de la población de haploides duplicados se seleccionaría fenotípicamente y cada
individuo daría origen a plantas verdaderamente mejoradas no se necesitaría
entonces una evaluación adicional respecto a este carácter. Sin embargo será
necesario cultivar familias F3 partiendo de la población F2 para separar las
plantas verdaderamente mejoradas 1/6 de los individuos segregantes.
En cultivos de polinización cruzada, altamente heterocigotos la haploidia es el
camino para producir rápidamente líneas homocigotas verdaderas que podrían
utilizarse para la producción de cultivares híbridos F1, este uso de la haploidía
puede dar excelentes resultados en plantas sexualmente propagadas, como el
maíz y asexualmente propagadas como la yuca.
3.7. VARIEDADES OBTENIDAS MEDIANTE LA PRODUCCIÓN DE
PLANTAS HAPLOIDES DESDE CULTIVOS DE ANTERAS.
Según Rodríguez, G. (1978). Indica antes, la producción rápida de planta
homocigótica diploide es la aplicación más importante del cultivo de anteras al
Fito mejoramiento. Este cultivo será, por tanto, más útil en aquellas especies
que tengan ciclos de crecimiento largo o para aquellas condiciones en que los

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 cultivos de ciclos cortaron se desarrollen a la tasa de solo un cultivo por año.
Por ejemplo, mediante el cultivo de anteras se puede lograr la homocigocidad
en arroz en 7 u 8 meses, mientras que se requieren de 4 a 6 años para obtenerla
con técnicas tradicionales y en el trigo invernal el uso del cultivo de anteras
ahorra de 3 a4 años en el proceso de su mejoramiento.
El cultivo de anteras de tabaco es el sistema más avanzado para desarrollar
haploides, se ha hecho, no obstante, considerable progreso con algunos cereales
como el trigo, la cebada y el arroz, estos cuatro cultivos se han producido 14
cultivares mejorados por medio del cultivo de anteras y otros cuatro en cuya
genealogía interviene un haploide, es interesante que la gran mayoría de esos
cultivares se hayan producido en china.
Para producir la variedad de trigo FLORIN EN FRANCIA por ejemplo se
emplearon cerca de 50,000 anteras que fueron plaqueadas de un cruzamiento f1
hecho en 1978, de ellas, el 0.13% se regenero como plantas verdes (9
autoploides y 55 haploides). De 41 haploides duplicados inducidos por la
colchicina se seleccionaron 18 líneas R3 en 1980 y después de cuatro años de
pruebas de campo y de pruebas oficiales, se registraron en 1985 dos líneas como
variedades, así pues solo pasaron siete años entre el cruzamiento F1 inicial y el
registro oficial como variedades de estas líneas procedentes del cultivo de
anteras.
Cultivares mejorados mediante el cultivo de anteras.

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 Figura 3. Cultivares con un haploide en su genealogía.

3.8. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS HAPLOIDES.

 Fenotipo = genotipo
 La presencia de un solo set de cromosomas, facilita el aislamiento de
mutaciones, espontaneas o inducidas.
 Diploides isogenicos pueden ser obtenidos por diploidizacion
cromosómica.
 Por mejoramiento convencional y retrocruzas, es posible obtener líneas
puras, pero es un tiempo considerable el que se consume en el proceso,
usando el cultivo de anteras, los haploides pueden ser obtenidos en semanas
y por doblamiento cromosómico gran número de diploides homocigótico
son obtenidos en una sola generación.
 El cultivo de células haploides es también material útil en estudios de la
genética de las células somáticas.
 Los haploides pueden ser utilizados para obtener homocigosis para genes
en casos donde es normalmente difícil lograrlo.
 La renuencia a la regeneración en muchas especies y los bajos rendimientos
de plantas haploides son limitantes técnicas.

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 IV. CONCLUSIONES.

 Las plantas haploides pueden producir con la técnica del cultivo de anteras. La baja
frecuencia de embriogénesis somática de las anteras puede incrementarse mediante
una fase de multiplicación.

 Una vez se consigue la planta haploide, el siguiente paso es duplicar sus cromosomas
para que pase a ser diploide, ya que, por lo general, las plantas haploides suelen ser
muy débiles.

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 V. RECOMENDACIONES

 La obtención de plantas haploides a partir de los distintos métodos de las cuales se

mencionaron es viable gracias al buen proceso de desinfección y cuidado que se tiene
en el momento de realizarla en el laboratorio y en el momento de la siembra.

 El cultivo de meristemos es una técnica útil en la obtención de plantas libres de

contaminantes, y que, además, permite el desarrollo directo del brote, sin formación
de callo asegurando que la inestabilidad genética y la variación somacional se reducen
al mínimo.

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 VI. BIBLIOGRAFÍA.

 Clement, C. (2001). Anther and pollen. From biology to biotechnology. Berlin.

Heidelberg.

 De la torre, C. (1985). Replication time of the genome portions involved in a

G2transition points in meristems. Eur.

 Ivett, B. (2008). Reprogramación del polen y obtención de plantas haploides,

marcadores celulares y expresión de moléculas señalizadores y de estrés.

Universidad complutense de Madrid, facultad de ciencias biológicas,

departamento de biología.

 Rodríguez, G. (1978). Differentation of plastis population during

microsporogenesis and development of the pollen grain in liliaceae.

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