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MANUAL DE PRÁCTICAS
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M. en C. Emilio Clarke Crespo
Coordinador de la Academia de Biología
Comité editorial
3
INDICE
i
PRÁCTICA No. 1 EL CICLO CELULAR, MITOSIS Y MEIOSIS
Introducción
Las células a lo largo de su vida pasan por varias fases que en conjunto constituyen
el ciclo celular. El estado habitual de una célula es con su cromatina
descondensada, con genes en actividad y con una actividad fisiológica más o menos
intensa. Esta situación corresponde al periodo de interfase.
En los organismos que presentan reproducción sexual, las células que van a dar
origen a los gametos, sufren un tipo de división reduccional. Se originan cuatro
células en las que se ha reducido a la mitad el número de cromosomas
y además en virtud del entrecruzamiento y la recombinación genética que se
produce, las células formadas no son idénticas a la célula original. Este tipo de
división es la meiosis.
Objetivos
Materiales
http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2BCH/B4_INFORMACIO
N/T406_MITOSIS/INDICE.htm
2. Ahora que ya conoces las fases del ciclo celular podrás resolver estos
ejercicios:
Esta figura representa el ciclo celular. Nombra las etapas numeradas sabiendo que
“a” es la citocinesis.
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3.- Abre la siguiente página y podrás estudiar la mitosis.
http://www.johnkyrk.com/mitosis.esp.html
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5.- Cuantos cromosomas tienen las dos células hijas que se forman? Con cuantas
cromátidas cada cromosoma?
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7.- ¿En qué momento del ciclo celular los cromosomas se duplican y cada uno de
ellos da lugar a la cromátida hermana?. Como ocurre esto?
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9.- La célula madre ¿es diploide o haploide? ¿Y las células hijas que resultan al
final?
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http://www.ucm.es/info/genetica/AVG/practicas/practicas.htm
13. Señala con el cursor los nombres de las fases podrás ver fotografías y
la descripción de los procesos. Escribe una característica típica de cada fase.
• Interfase:
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• Profase:
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• Metafase:
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• Anafase:
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• Telofase:
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14. Cuando termines haz clic en siguiente, en la parte inferior aparece Revisión
Mitosis vegetal. Escribe qué ocurre tras la telofase de la mitosis animal y vegetal.
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15. Selecciona Siguiente para volver al menú principal. Sitúa el cursor
sobre Pregunta 1. Escribe aquí las respuestas correctas:
Fase:
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Fase:
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Fase:
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19. Selecciona Las otras fases de la meiosis y observa las fotos y explicaciones.
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20. Dando a siguiente vuelves a llegar al menú principal. Sitúa el cursor sobre
Pregunta 1 de meiosis. Escribe aquí la respuesta correcta:
Fase:
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Fase:
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Fase:
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Fase:
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24. Selecciona Pregunta 5. Escribe las respuestas:
Fase:
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRÁCTICA Nº 2 ESPERMATOGENESIS EN MAMIFEROS
Introducción
En casi todos los vertebrados el aparato reproductor está formado por las gónadas y
por un grupo de conductos y glándulas que en conjunto constituyen el tracto
reproductor masculino. Los órganos sexuales internos están compuestos por
los testículos y sus sistemas de conductos y glándulas accesorias. La
gónada genera los gametos que son transportados a lo largo del tracto
reproductor. En el momento de la eyaculación las glándulas anexas vierten
los productos de su secreción, los cuales, junto con los
espermatozoides, constituyen el semen. La mayor parte de los componentes de
estas estructuras se originan a partir del mesodermo intermedio.
Los túbulos descansan en la parte apical del testículo, la red testicular, la cual a su
vez converge en el epidídimo, que se continúa con el conducto deferente,
conducto eyaculador y uretra, y es en ellos donde ocurre la espermatogénesis. El
epitelio del túbulo es estratificado, formado por células de Sertoli,
espermatogonias, espermatocitos en diferentes etapas del proceso meiótico,
espermátidas y espermatozoides. Por lo general, a lo largo del túbulo varían los
estadíos de meiosis y espermiogénesis.
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estadio espermatogénico mientras que en humano pueden presentarse varios
estadios.
Objetivos
Materiales
Procedimiento
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Resultados
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Cuestionario
1.- Explicar la citología de las células de Sertoli, poniendo especial atención a los
núcleos de las especies de mamíferos estudiadas en prácticas. ¿Son todos
iguales? ¿Qué les caracteriza y que les diferencia?
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2.- ¿Qué diferencias hay entre las espermátidas en distintos estados de maduración
que se ven en los cortes de testículo? ¿Y entre las distintas especies estudiadas en
prácticas?
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRÁCTICA Nº 3 ESPERMATOGENESIS EN ORTOPTEROS
Introducción
Objetivos
Materiales
Ortopteros
Estuche de disección
Procedimiento
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seminífero en cortes de testículo de saltamontes fijado con Bouin e incluido en
parafina.
Con un trozo de papel elimina el exceso por los laterales y, con cuidado de no
moverlo, se realiza el aplastado presionando fuertemente con el dedo pulgar
sobre una superficie plana.
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Las secciones de testículo se observarán en el microscopio determinando
la disposición de los túbulos seminíferos en el conjunto, así como las zonas apicales
y basales de los túbulos.
Resultados
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Cuestionario
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3.- Dibuja los núcleos de espermátidas de saltamontes en distintas etapas de
maduración, observadas en la práctica.
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5.- Dibujar y rotular un túbulo seminífero completo de saltamontes
indicando las diferencias entre los extremos proximal y distal.
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7.- A partir de un corte de testículo de saltamontes, dibujar un cisto en el
que estén presentes espermátidas tanto normales como aberrantes. ¿Por
qué eres capaz de determinar que no son normales?
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRÁCTICA Nº 4 OVOGÉNESIS EN ORTÓPTEROS
Introducción
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Objetivos
Materiales
Ejemplares de Ortopteros
Estuche de disección
Procedimiento
Resultados
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Cuestionario
1. ¿Cuántos tipos de ovariolas existen cuales son las diferencias que hay entre ellas?
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRÁCTICA Nº 5 OVOGÉNESIS EN ANFIBIOS
Introducción
Al igual que en invertebrados, el ovario de anfibios está diseñado para producir los
gametos femeninos que se caracterizarán esencialmente por la acumulación
de vitelo, fundamental para las primeras etapas del desarrollo. Los ovarios de
anfibios son, estructuras pares de forma lobulada, en cuyo interior se localizan los
folículos en distintos grados de maduración. Los folículos más tempranos se sitúan
en la periferia del ovario, siendo de menor tamaño y con una cantidad pequeña de
vitelo acumulado.
Otra característica típica de los folículos de anfibios es que, a medida que el oocito
madura, en su núcleo se produce un fenómeno denominado amplificación génica,
en el cual se transcriben masivamente los cistrones ribosomales, por lo que se
pueden observar gran cantidad de nucleolos extracromosómicos dispersos por el
núcleo.
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El proceso de ovogénesis en anfibios dura aproximadamente unos tres años, siendo
el último periodo en el que se produce el aumento más significativo de
tamaño de los huevos, los cuales llegan a tener hasta unos 2-3 mm de
diámetro en el momento de la puesta. Estos huevos son de tipo heterolecito y
presentan una pigmentación diferencial característica que define los polos .
Además de los folículos, en su estructura histológica el ovario presenta un
fino epitelio que lo recubre, además de numerosos vasos sanguíneos de distinto
tamaño en su estroma.
Objetivos
Que el alumno se familiarice con las estructuras que forman parte y participan en el
proceso de ovogénesis.
Materiales
Procedimiento
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Resultados
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Cuestionario
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2.- ¿Como diferencias a simple vista la ampolla del istmo en el oviducto?
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRÁCTICA Nº 6 FOLICULOGÉNESIS EN MAMÍFEROS
Introducción
Los ovarios son estructuras pares y ovaladas. Consta de la corteza, que rodea a
la médula, el límite entre estas estructuras no está definido. En la corteza se
localizan los folículos de diferentes tamaños en función de la fase de
desarrollo. La médula está formada básicamente por tejido conjuntivo laxo y por
una masa de vasos sanguíneos.
A medida que en los folículos madura pasa de ser plana a cúbica, por
proliferación mitótica éstos adquieren nuevas capas de células foliculares:
folículos primarios . La capa folicular externa descansa sobre la membrana basal y
a ella se adhieren células del conjuntivo que forman las tecas foliculares. La zona
pelúcida, se sitúa entre el ovocito y la capa de células foliculares.
El tamaño del ovocito aumenta de tamaño, los folículos aumentan mucho más y
comienzan a aparecer cavidades entre las células foliculares que se llenan de
líquido folicular. Las cavidades tienden a fusionarse formando el antro folicular.
Estos folículos son llamados folículos secundarios o antrales.
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Objetivos
Materiales
Procedimiento
Resultados
Compara los úteros de rata y hámster, menciona las diferencias entre ellos.
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Cuestionario
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2.- Realizar un esquema de un útero de rata, indicando claramente las
diferentes capas que presenta.
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRACTICA Nº 7 FECUNDACIÓN EN EQUINODERMOS
Introducción
Bloqueo de la polispermia para evitar que un mismo óvulo sea fecundado por más
de un espermatozoide.
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Objetivos
Materiales
Erizo
KCL
Agua de mar
Recipiente de vidrio.
Vidrios de reloj
Procedimiento
Obtención de gametos
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Fecundación
Colocar sobre un porta excavado una gota de agua con ovocitos (1 gota de
suspensión + 5 ml de agua).
Desarrollo
6-12 h. Blástula
24 h. Gástrula
48 h. Larva Pluteus.
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Resultados
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Cuestionario
1.- Dibujar todas las fases del desarrollo embrionario del erizo de mar vistas en
prácticas, desde el óvulo sin fecundar hasta el estadio de larva Pluteus.
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRACTICA Nº 8 ANALISIS SEMINAL
Introducción
Un análisis seminal completo nos informa sobre las propiedades del semen en su
conjunto, tanto de la producción de espermatozoides como de la función de las
glándulas sexuales accesorias.
Sin embargo se han diseñado otras cámaras como la de Makler para determinar la
concentración de espermatozoides. La ventaja de las nuevas cámaras sobre la
cámara de Neubauer es que estas utilizan las muestras sin diluir, aumentando la
precisión del procedimiento y la reproducibilidad de los resultados.
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Objetivo
Materiales
Muestra de semen.
Pipeta.
Guantes.
Lentes de seguridad.
Microscopio.
Portaobjetos y cubreobjetos.
Tinción: azul de metileno.
Procedimiento
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Resultados
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Cuestionario.
1. ¿La muestra que examinaste cumplía con los niveles estándar normales? A que
atribuyes tus resultados, justifica
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2. ¿Qué factores pueden influir para que la muestra no esté con condicione óptimas?
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Normazoospermia.____________________________________________________
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Hipospermia._________________________________________________________
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Hiperspermia.________________________________________________________
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Aspermia.___________________________________________________________
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Azoospermia.________________________________________________________
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Piospermia.__________________________________________________________
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Criptozoospermia._____________________________________________________
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Hematozoospermia.___________________________________________________
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Polizoospermia._______________________________________________________
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Oligozoospermia._____________________________________________________
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Astenozoospermia.____________________________________________________
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Teratozoospermia.____________________________________________________
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRÁCTICA Nº 9 CITOLOGIA Y CICLO ESTRAL DE RATA
Introducción
La pared vaginal sufre cambios cíclicos que corresponden con los cambios del ciclo
del endometrio. Estos cambios se hallan bajo la influencia de las hormonas ováricas.
Las fases del ciclo estral pueden identificarse a través de las células descamadas
obtenidas de la vagina.
Proliferación
Se han creado varios índices para describir las células que se observan en frotis
vaginales:
Aunque los cambios inducidos en las células vaginales son continuos, las células en
un frotis pueden ser clasificadas en cinco tipos principales:
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Células basales
Células parabasales
Células superficiales
Objetivos
1. Identificar las características citológicas del epitelio vaginal en cada etapa del
ciclo estral.
Materiales
Procedimiento
En una rata, realizar un frotis vaginal diario durante 5 días, de la manera siguiente:
53
Dejar las laminillas por 5 minutos en hematoxilina, dar otros dos baños de alcohol al
80 %. Introducir por 10 minutos en OC6, después dos baños en alcohol al 80%
Dejar las laminillas 10 minutos en EA50, después en alcohol al 80%, 96%, y dos
baños mas de alcohol absoluto.
Esperar a que sequen las laminillas, para luego montar en resina sintética
Por último colocar en la plancha para esperar a que seque para después ya poder
observar la muestra en el microscopio.
Tinción de Papanicolaou
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Bibliografía
Resultados
Metaestro
Diestro
Proestro
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Cuestionario
1. ¿En qué etapa del periodo estral se tiene una mayor concentración de estrógenos?
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2.- ¿Por qué las hembras de estas especies se “ciclan” al mismo tiempo cuando
comparten el mismo espacio físico? ¿En qué otras especies ocurre este fenómeno?
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3.- ¿Cuál es el objetivo del examen de Papanicolaou y con qué frecuencia debe
realizarse? Explica en qué consiste esta prueba en las mujeres. ¿Cuál es la prueba
equivalente en los hombres y cada cuándo debe realizarse?
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRÁCTICA Nº 10 DESARROLLO EMBRIONARIO DEL POLLO
Introducción
Del ovario izquierdo se desprenden las yemas. Estas durante su paso a lo largo
del oviducto adquieren la clara o albúmina y por último la cáscara, el huevo se forma
a lo largo del oviducto. La fecundación se produce en la parte superior del oviducto,
se necesita la participación del gallo entre 36 y 24 horas antes de poner el huevo.
El huevo está protegido por la cáscara muy delgada, pero dura; que permite la
respiración a través de los poros superficiales. Además de esta cáscara porosa, el
huevo contiene dos membranas que están alineadas muy juntas dentro de la
cáscara pero conservan una separación con la cáscara y entre ellas. La membrana
más cercana a la cáscara se la "membrana exterior de la cáscara" y la que está
en contacto con la albúmina se la "membrana interior de la cáscara".
Durante la incubación la cámara de aire situada en el extremo más ancho del
huevo se forma como resultado de la separación de las dos membranas.
Objetivos
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Materiales
Incubadoras.
Huevos fértiles incubados entre 2 y 5 días.
Lupas.
Recipientes apropiados para la práctica.
Pinzas.
Embriones conservados.
Microscopios.
Papel mayordomo.
Bolsas para deshechos.
Equipo para limpieza de los materiales utilizados.
Procedimiento
6. Con su otra mano y con un par de tijeras afiladas, corte las membranas
extraembrionarias alrededor del embrión. No suelte nunca al embrión
porque puede hundirse en la yema.
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8. Si su embrión es demasiado joven para tener un cuello identificable, la
mejor manera de quitarlo está en usar una corona circular de papel de
filtro. Corte un disco de papel, dentro del disco corte un agujero, un poco
más grande que el embrión.
9. Colocar esta corona circular de papel encima del embrión para que el mismo
sobresalga por el orificio y el papel de filtro se adhiere a la región
extraembrionaria.
10. Mediante unas tijeras realizar una pequeña incisión en el borde del papel de
filtro. Agarrar bien papel y membranas con las pinzas y con las tijeras terminar
de cortar las membranas extraembrionarias alrededor del filtro.
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Resultados
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Cuestionario
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2.- ¿Describe y menciona cuanto tiempo dura la formación del huevo en la gallina?
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRACTICA Nº 11 TINCIÓN DE ESQUELETO EMBRIÓN DE POLLO
Introducción
Esta técnica consiste en la coloración del tejido óseo del embrión de pollo. Para
poder visualizar este tejido, una vez teñido, sin la necesidad de aparatos especiales,
se lleva a cabo la transparentación de los tejidos blandos. Este tipo de técnicas se
utilizan de manera rutinaria en los laboratorios farmacéuticos, para estudiar el efecto
de los nuevos fármacos sobre el desarrollo embrionario.
Objetivo
Materiales
Incubadoras.
Lupas.
Pinzas.
Embriones conservados.
Microscopios.
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Procedimiento
Na2HPO4·2H2O ---------------- 40 g
NaH2PO4·H2O ------------------ 7,1 g
NaCl ----------------------------- 202,5 g
H2O destilada ---------------- 261
Se extraen todas las vísceras del embrión, vaciando las dos cavidades por completo
(tórax y abdomen). Lo volvemos a lavar en PBS y lo introducimos en una solución de
alcohol etílico al 70%, aquí estará un mínimo de 10 días (solución fijadora).
4. A los 10 días se lavan los embriones en agua corriente a poca presión y se pasan
a una solución de hidróxido potásico al 1% durante 1 día (solución
permeabilizadora).
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Composición para 1000 ml de solución:
Glicerol ------------------ 40 ml
Alcohol etílico 70 % ----- 40 ml
Alcohol bencílico -------- 20 ml
7. Los embriones se almacenan en una solución de glicerol / alcohol etílico al 70%,
en una proporción 1:1 (solución conservadora).
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Resultados
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Cuestionario
1.- ¿Cuál es la función de Hidróxido de Potasio en el tejido óseo del embrión, explica
el proceso en el tejido?
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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PRACTICA Nº 12 EXTRUCTURAS EXTRAEMBRIONARIAS Y
PLACENTA
Introducción
Las células del trofoblasto están implicadas en la fijación e implantación del embrión
y en la posterior formación del corion y de la placenta. La masa celular interna será
la encargada de formar al individuo y además participará en la formación de ciertas
estructuras extraembrionarias (amnios, saco vitelino y alantoides).
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Desde finales del 4º mes al término de la gestación la placenta conserva su
estructura general. La placenta, por lo tanto, es un órgano maternofetal que presenta
dos componentes:
4.- Saco vitelino (con componente mesodérmico del saco vitelino y endodérmico
visceral),
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Objetivos
Procedimiento
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Resultados
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Cuestionario
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3.- Describe cuales son y en qué consisten los componentes fetales y maternos de la
placenta.
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5.- En qué consisten, como se forman y para qué sirven los cotiledones placentarios
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6.- Como se llama la barrera entre la sangre materna y fetal y en qué consiste el
mecanismo de selectividad de paso a través de ella
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Conclusiones
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Bibliografía consultada
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