Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
TRACTO URINARIO
TRACTO RESPIRATORIO
MICROORGANISMO GRAM AGAR ADICIONALES
Streptococcus Cocos gram + se Agar sangre alfa se Catalasa –
penumoniae presenta en forma incuba en c02 Oxidasa –
diplococo hemolítico El hábitat natural de
Agar chocolate neumococo es
formando colonias la nasofaringe NEUMOMNIA
discoidales, grises,
opalescentes,
delicadas, de bordes
lisos o arrugados,
Streptoccocus Coco gram + en cadena Agar sangre las Catalasa -
pyogenes semi largas colonias son habita en la garganta
estreptococo beta- conformadas de 4 pequeñas color y en la piel de
hemolítico del grupo A a 10 blanco crema con portadores sanos y se
bacterias POSEE un área de beta- transmite de persona
CAPSULA hemólisis a persona por vía
alrededor de la respiratoria
colonia produce (estreptolisina S y
O FARINGITIS
Staphyloccous aureus Cocos gram + Colonias en forma de COAGULASA +
gotas de rocio Beta CATALASA +
hemolisis En los humanos, causa
una
amplia variedad de
enfermedades infecciosas
y
su principal impacto es
ocasionado por las cepas
de S. aureus, que son
sumamente resistentes
a la meticilina (MRSA)
Haemphylus influenzae cocobacilos Gram- AGAR CHOCOLATE Las Catalasa +
negativo colonias de H. Oxidadsa +
influenzaeaparecen Haemophilus influenzae
como colonias causa infecciones en los niños
convexas, lisas, y a veces en los adultos con
pálidas, grises o un trastorno pulmonar
transparentes. crónico o el sistema
inmunitario debilitado.
CAUSA Meningitis
Epiglotitis (infección del
tejido que cubre la entrada
de la laringe)
APARATO DIGESTIVO
Campylobacter
Los Campylobacter constituyen una de las causas bacterianas más comunes de gastroenteritis en todo el mundo, y su infección es frecuente en
niños de menos de dos años. Esta puede provocar diarrea (a veces hemorrágica), cólicos, vómitos y fiebre. Estas bacterias suelen transmitirse
por los alimentos, por la ingestión de carne cruda o poco cocinada(en especial carne de ave de corral) o de leche contaminada.
Clostridium difficile
La infección por Clostridium difficile es la causa de hasta un 25 % de los casos de diarrea asociada con antibióticos, generalmente contraída en
hospitales o centros de atención sanitaria3. Los ancianos y los pacientes inmunodeficientes son los grupos de más riesgo. La reciente aparición
de cepas muy toxigénicas y resistentes de C. difficile ha dado lugar a un aumento de la frecuencia y la gravedad de los brotes, así como a un
incremento de la morbilidad y la mortalidad.
Escherichia coli
Escherichia coli, a menudo denominada E. coli, es la causa principal de la diarrea del viajero y una de las causas más importantes de enfermedad
diarreica en el mundo en vías de desarrollo, sobre todo entre los niños. Las personas suelen contraer E. coli por ingestión de agua contaminada
con heces humanas o animales.
Escherichia coli O157:H7 es un tipo de bacteria E. coli productora de la toxina tipo Shiga, que causa infecciones gastrointestinales con síntomas
que incluyen la diarrea hemorrágica y los vómitos. Aunque generalmente se resuelve a los pocos días, a veces (5 %-10 %4 de las infecciones)
puede dar lugar a un síndrome urémico hemolítico (SUH), que puede provocar insuficiencia renal si no se trata.
Helicobacter pylori
Helicobacter pylori, denominada H. pylori, causa gastritis y se ha asociado con el desarrollo de úlceras gástricas y duodenales. Puede causar
dolor estomacal o náuseas, pero en muchos casos no tiene síntomas. Las personas infectadas tienen un riesgo del 10 % al 20 % de desarrollar
úlceras pépticas a lo largo de su vida y un riesgo del 1 % al 2 % de cáncer de estómago5.
Rotavirus
El rotavirus es la causa más frecuente de diarrea en niños pequeños y lactantes y es responsable de los casos más graves. Existe una vacuna
contra el rotavirus, pero en todo el planeta causa más de medio millón de muertes al año de niños menores de cinco años.6 La mayor parte de
estas se producen en países emergentes.
Salmonella y Shigella
La salmonelosis y la shigelosis son enfermedades gastrointestinales transmitidas por los alimentos. Las bacterias Salmonella son comunes y se
encuentran en carnes crudas, carne de aves de corral, pescado y marisco y huevos, así como en leche y productos lácteos. Entre los síntomas
agudos de la infección por Salmonella están las náuseas, vómitos, cólicos, diarrea, fiebre y dolor de cabeza. Las bacterias Shigella suelen
encontrarse en aguas contaminadas con heces humanas. Los síntomas de la shigelosis (disentería bacilar) incluyen dolor abdominal, dolor cólico,
diarrea, fiebre, vómitos y sangre, pus o moco en las heces.
Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus es la causa más frecuente de intoxicación alimentaria. Ésta se caracteriza por un comienzo repentino/violento, fuertes
náuseas, dolor cólico, vómitos y diarrea, y suele durar de 1 a 2 días. Este patógeno oportunista puede encontrarse en humanos (piel, heridas
infectadas, nariz y garganta) y se ha relacionado con una amplia variedad de alimentos, incluidos carne y productos cárnicos, carne de ave de
corral y ovoproductos, ensaladas, productos de panadería y productos lácteos.
Yersinia enterocolitica
La Yersinia enterocolitica, denominada Y. enterocolitica, es una causa relativamente poco frecuente de diarrea y dolor abdominal. La mayoría de
las veces la infección se adquiere por ingestión de alimentos contaminados, en especial productos porcinos crudos o poco cocinados, así como
helado y leche. Entre los síntomas habituales están la fiebre, el dolor abdominal y la diarrea, que a menudo es hemorrágica.
APARATO REPRODUCTOR
VAGINOSIS VAGINITIS
La vaginosis bacteriana (a veces, llamada La vaginitis se produce cuando la vulva o la vagina se
simplemente “VB”) es una infección bacteriana que inflaman o se irritan. Esto ocurre cuando hay una
ocurre cuando se pierde el equilibrio entre los alteración del equilibrio químico normal en la vagina o
diferentes tipos de bacterias saludables que están en si tienes una reacción a productos irritantes
la vagina y estas proliferan. Suele ser causada por Muchos factores pueden provocar vaginitis (y, a veces, existe más de
una bacteria llamada Gardnerella vaginalis, que es el 1 causa). Entre ellos, se incluyen los siguientes:
tipo de bacteria más común en la vagina. Cualquier
Infecciones vaginales comunes como las detalladas a continuación:
factor que modifique el pH de la vagina, como las
Infecciones por levaduras
duchas vaginales o el uso de desodorantes vaginales Vaginosis bacteriana
y otros productos irritantes, puede interferir en los Tricomoniasis
niveles de las bacterias y generar una infección Falta de estrógeno (vaginitis atrófica):
GARNERELLA VAGINALIS CANDIDA ALBICANS
TUBERCULOSIS
CAUSADA POR LA MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS que se transmite por vía aérea. La tuberculosis generalmente afecta a los pulmones,
aunque también puede afectar a otras partes del cuerpo, como el cerebro, los riñones o la columna vertebral. Sólo transmiten la infección las
personas que padecen tuberculosis pulmonar.
RECOLECCION DE LA MUESTRA
3. La mejor muestra es la primera expectoración de la mañana. Las muestras una vez obtenidas, bien cerrado el frasco y bien identificadas, se
transportan al laboratorio lo mas rápidamente posible. Si va a transcurrir más de una hora entre la expectoración y la recepción en el laboratorio
deberá permanecer en frío (5-8ºC) y no a temperatura ambiente. Se desaconseja la práctica de recomendar al paciente que guarde 3 esputos y
los lleve a la vez al laboratorio ya que es muy probable que se contaminen los cultivos y no sean útiles ni para descartar ni para confirmar el
diagnóstico. Se deben extremar las medidas en la identificación de las muestras para que no se produzcan errores en el diagnóstico
microbiológico
TINCIONES
Tienen por objeto, poder visualizar en el microscopio la presencia o no de BAAR (BACILOS ACIDO ALCOHOL RESISTENTES Bacilos Ácido Alcohol
Resistentes (BAAR): bacilos que contienen en su pared celular ácidos micólicos, péptidos y glicolípidos capaces de retener la fucsina, posterior a
la decoloración con alcohol ácido en las muestras
La tinción de Ziehl-Neelsen: Utiliza fucsina y fenol junto con el calentamiento de las preparaciones. Las micobacterias se tiñen de rojo, colorante
que perdura pese a la posterior decoloración con una mezcla de alcohol-clorhídrico, sobre un fondo azul o verde, según se utilice como
colorante de contraste el azul de metileno o el verde malaquita. Exige la observación con el objetivo de inmersión (1.000 aumentos), por lo que,
debido a que en muchas preparaciones la presencia de bacilos puede ser escasa, es necesario un mínimo de 10 minutos de observación antes de
valorar el examen como negativo
Entre los medicamentos aprobados, los fármacos de primera línea contra la tuberculosis, que componen los principales esquemas posológicos
de tratamiento, incluyen los siguientes:
Isoniazida (INH)
Rifampina (RIF)
Etambutol (EMB)
Pirazinamida (PZA)
HEMOCULTIVOS
Bacteriemia: simplemente implica la presencia de bacterias en la sangre, independientemente de su magnitud, persistencia o respuesta que
provoca en el huésped. Se encuentran tres patrones diferentes: 1) transitoria, la que ocurre luego de la manipulación de tejidos infectados
(abscesos, forúnculos, celulitis), instrumentación sobre superficies mucosas infectadas (extracción dentaria, cistoscopia, cateterización ureteral,
aborto aspirativo) y cirugía de sitios contaminados; 2) intermitente, debida a abscesos intraabdominales o viscerales no drenados, osteomielitis,
artritis, meningitis, neumonia; 3) continua, es la característica principal de la endocarditis bacteriana y otras infecciones endovasculares.
También se observa en las primeras semanas de la fiebre tifoidea y brucelosis. Otro patrón se observa en pacientes que están recibiendo
antibióticos por vía sistémica, para los cuales el microorganismo infectante es sensible (“breakthough” bacteriemia): cuando ocurre en etapas
tempranas de la terapéutica se debe generalmente a concentraciones inadecuadas del antibiótico, y cuando ocurre más tardíamente se debe
habitualmente a inadecuado drenaje del foco infeccioso o deterioro de las defensas del huésped. • Síndrome de respuesta inflamatoria
sistémica (SIRS): es un síndrome que se define por la presencia de por lo menos dos de las siguientes manifestaciones: 1) fiebre mayor a 38ºC o
hipotermia menor a 36ºC; 2) frecuencia cardíaca mayor a 90 cpm; 3) frecuencia respiratoria mayor a 20 rpm, o pCO2 menor a 32 mm de Hg;
leucocitosis mayor a 12.000 o menor a 4.000/mm3 ; o más de 10% de formas inmaduras. Este síndrome pude obedecer a causas infecciosas o no
infecciosas (traumas, quemaduras, etc.). • Sepsis: es un SIRS que responde a una infección; por lo tanto, SIRS es una entidad amplia que incluye
a la sepsis. Los pacientes con sepsis reúnen los cuatro criterios de SIRS; esta forma de identificar clínicamente a los pacientes con sepsis es
bastante sensible, sin embargo es muy poco específica. La comprobación de bacteriemia en un paciente con SIRS sella el diagnóstico de sepsis.
1992 y 1993 en Estados Unidos son: S. aureus, E. coli, Staphylococcus coagulasa negativos, K.
El grupo HACEK incluye microorganismos gramnegativos de baja virulencia que causan principalmente endocarditis.
Las especies de Haemophilus (H. parainfluenza, H. aphrophilus, y H. paraphrophilus), que pueden causar infecciones respiratorias o, con menor
frecuencia, endocarditis
Aggregatibacter (antes Actinobacillus) actinomycetemcomitans, que suele aparecer junto con A. israelii en las actinomicosis
Cardiobacterium hominis
Eikenella corrodens, que suele asociarse con infecciones de heridas por mordeduras humanas, endocarditis (a menudo en consumidores de
drogas IV), abscesos cerebrales y viscerales, osteomielitis, infecciones respiratorias (entre ellas empiemas), infecciones uterinas relacionadas con
dispositivos intrauterinos e infecciones mixtas de los tejidos blandos
Kingella kingae
NOTA: En los últimos años se ha descrito a nivel mundial un aumento de la incidencia de infecciones de piel y partes blandas producidas por S.
aureus meticilinresistente adquiridas en la comunidad (SAMR-C), especialmente en la población pediátrica(. A diferencia de SAMR nosocomial,
SAMR-C es sensible a ciertos antibióticos no b-lactámicos, como macrólidos, clindamicina, cotrimoxazol, fluoroquinolonas y tetraciclinas
AGAR CHOCOLATE : Este medio está compuesto por una base de agar rico en nutrientes y sangre calentada. La hemólisis de los glóbulos rojos
proporcionan al medio factor X (hemina) y factor V (NAD), necesarios para el crecimiento de algunos microorganismos, como el género
Haemophilus. También es muy útil para el aislamiento de Neisserias sp. es un medio de cultivo sólido, enriquecido, no selectivo
y no diferencial. Es utilizado principalmente para el aislamiento de microorganismos exigentes desde el punto
de vista nutricional, aunque en él pueden crecer cualquier tipo de bacterias. Es por ello que su utilidad
aumenta especialmente en el sembrado de muestras que normalmente son estériles, como LCR y líquido
articular. Aunque también se incluye dentro de los medios escogidos para siembras de muestras
polimicrobianas, pero en estos casos es necesario la adición de antibióticos que inhiban la flora concomitante.
AGAR SANGRE: Es utilizado para la recuperación y crecimiento de una gran variedad de microorganismos
provenientes de muestras clínicas o para subcultivos. El agar sangre es un medio enriquecido porque lleva
como aditivo principal 5 -10% de sangre sobre una base de agar. Ambos compuestos contienen muchos
nutrientes y esta propiedad permite que en él puedan crecer la mayoría de las bacterias cultivables. Así
mismo, el agar sangre es un medio diferencial, ya que permite distinguir 3 tipos de bacterias: los beta-
hemolíticos, alfa –hemolíticos y gamma-hemolíticos.
Los beta-hemolíticos son aquellos que tienen la capacidad de lisar o romper completamente los glóbulos rojos,
formando un halo claro alrededor de las colonias, por tanto producen hemólisis ß ó ß –hemólisis y los
microorganismos son llamados ß-hemolíticos.
Los alfa-hemolíticos son los que realizan una hemólisis parcial, donde la hemoglobina es oxidada a
metahemoglobina, generándose una coloración verdosa alrededor de las colonias. A este fenómeno se le
conoce como hemólisis α ó α –hemólisis y a las bacterias se les clasifica como α – hemolíticos.
Por último, están las bacterias denominadas gamma-hemolíticas o no hemolíticas. Estas crecen sobre el agar
sin generar cambios sobre el mismo, efecto conocido como γ –hemólisis, y los microorganismo son γ –
hemolíticos.
AGAR MCCONKEY : Por último, están las bacterias denominadas gamma-hemolíticas o no hemolíticas. Estas crecen
sobre el agar sin generar cambios sobre el mismo, efecto conocido como γ –hemólisis, y los microorganismo
son γ –hemolíticos. En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el
hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte
de la flora Gram positiva. El agar es el agente solidificante. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce
un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos no
fermentadores de lactosa producen colonias incolora
AGAR XLD: agar Xilosa Lisina Desoxicolato es un medio de cultivo sólido selectivo y diferencial
para el aislamiento de enteropatógenos. Poder nutritivo
El agar XLD cuenta con el extracto de levadura, que sirve como fuente de nutrientes a los microorganismos
que se desarrollan en este agar. Además, la presencia de carbohidratos (xilosa, sacarosa y lactosa)
proporcionan energía a las bacterias que pueden fermentarlas.
Como sustancia inhibidora presenta desoxicolato sódico; este impide el crecimiento de las bacterias Gram
positivas, dándole el carácter selectivo al medio.
-Poder diferencial
Como ya se ha mencionado, el agar XLD contiene xilosa; este carbohidrato es fermentado por todas las
bacterias que crecen en este medio a excepción del género Shigella.
Esta es una de las características que le brinda su carácter diferencial, ya que las colonias de Shigella se
distinguen del resto por desarrollar colonias rojas, mientras que las demás bacterias producen colonias de
color amarillo.
El género Salmonella también fermenta la xilosa, generando inicialmente colonias amarillas. Sin embargo, tras
agotar al carbohidrato xilosa, ataca a la lisina por su enzima lisina descarboxilasa. La descarboxilación de la
lisina genera álcalis que hacen virar el color de la colonia y al medio circundante a rojo original.
Este comportamiento solo es realizado por Salmonella, ya que los coliformes que descarboxilan la lisina no
logran alcalinizar el medio. Esto es debido a que los coliformes también fermentan la lactosa y la sacarosa
presente; por tanto, la producción de ácidos es muy alta, quedando la colonia amarilla en estas bacterias.
Producción de H2S
El agar XLD también permite detectar a las especies de Salmonella productoras de H2S; para ello cuenta con la
fuente de sulfuro representado por el tiosulfato de sodio y un revelador de la reacción que es el citrato férrico
de amonio.
Este último reacciona con el H2S (gas incoloro) y forma un precipitado negro visible insoluble de sulfato de
hierro. En este sentido, las características de las colonias de salmonella serán rojas con un centro negro.
Cabe destacar que para que se dé la reacción de formación de H2S, se necesita un pH alcalino. Es por ello que
otras enterobacterias que forman H2S no pueden hacerlo o lo hacen pobremente en este medio, pues la alta
acidez que producen al fermentar los carbohidratos presentes inhiben o dificultan la reacción.
Finalmente, el cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico; el agar es el agente solidificante y el rojo de
fenol detecta los cambios de pH, haciendo virar el color de las colonias y del medio.
AGAR SS : En el medio de cultivo la pluripeptona y el extracto de carne aportan los nutrientes para el desarrollo microbiano. Las sales biliares y el
verde brillante inhiben el desarrollo de una amplia variedad de bacterias Gram positivas, de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor
del Proteus spp. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable. El tiosulfato de sodio permite la formación de SH2 que se evidencia por la
formación de sulfuro de hierro. El rojo neutro es el indicador de pH y el agar es el agente solidificante. Los pocos microorganismos
fermentadores de lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obteniéndose colonias rosadas o
rojas sobre un fondo rojizo. Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa, crecen adecuadamente en el medio de
cultivo, y producen colonias transparentes. La producción de ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la
formación de sulfuro de hierro. Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito Caldo
AGAR EMB: El medio de cultivo combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el
aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. Es nutritivo por la presencia de peptona que favorece el
desarrollo microbiano. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo,
está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre una amplia variedad de bacterias Gram
positivas. El agar es el agente solidificante. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico. Las
cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. También,
pueden crecer especies de Candida y se observan como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el desarrollo de
clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter
spp. y otras bacterias oxidativas se observan como colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de
acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus membranas. En este medio se obtiene además, un
buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella
AGAR CHROMOGENICO :
AGAR THAYER MARTIN: El agar Thayer Martin es un medio sólido altamente nutritivo y selectivo para el
aislamiento de Neisseria meningitidis y Neisseria gonorrhoeae Las dificultades que presenta la recuperación de Neisseria
gonorrhoeae y Neisseria meningitidis de los materiales clínicos se debe a las exigencias nutricionales de estos microorganismos y además si no
están presentes como flora única puede predominar el desarrollo de los microorganismos acompañantes por sobre el crecimiento de Neisserias.
Este medio de cultivo es ampliamente nutritivo por la presencia de Agar Base GC, hemoglobina y el suplemento de enriquecimiento Britalex . Es
selectivo para la recuperación de Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidis por la presencia de suplemento V.C.N.T. (REF B0360521)
constituído por vancomicina, colistina, nistatina y trimetoprima que inhibe el desarrollo de microorganismos Gram positivos y Gram negativos
(aún el swarming de Proteus spp.), y candidas. No tiene efecto inhibitorio en el desarrollo de Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidis
AGAR CETRIMIDE : es un medio de cultivo sólido selectivo, diseñado para el aislamiento de Pseudomonas
aeruginosa. El agar cetrimida se fundamenta en la capacidad que tiene el medio para favorecer el crecimiento
de P. aeruginosa, estimular la producción de sus pigmentos y a su vez inhibir el crecimiento de otros
microorganismos.Estas propiedades se deben a la función que cumplen cada uno de sus componentes. La
peptona de gelatina presente sirve como fuente de nitrógeno, vitaminas y minerales. El glicerol o glicerina
funciona como fuente de carbono. Por su parte, la cetrimida (bromuro de cetil trimetil amonio) es la sustancia
que inhibe el crecimiento de otras bacterias diferentes a P. aeruginosa, incluyendo otras especies
pertenecientes al mismo género.
La inhibición se produce porque la cetramida actúa como un detergente catiónico, logrando desestabilizar
la membrana plasmática de la mayoría de las bacterias, a excepción de P. aeruginosa y algunas otras que
logran sobrevivir.
Por otra parte, contiene cloruro de magnesio y sulfato de potasio. Estos compuestos estimulan la expresión
fenotípica relacionada con la capacidad de Pseudomonas aeruginosa de producir diversos pigmentos, entre
ellos: piocianina, pioverdina, piorrubina, piomelanina y fluoresceína. Finalmente, contiene agar-agar, que le da
la consistencia sólida.
AGAR TCBS: Fundamento Preparado según la fórmula desarrollada por Kobayashi, es el medio de cultivo nutritivo selectivo y diferencial más
adecuado para el aislamiento de las especies de Vibrio. El extracto de levadura, la peptona de carne y la tripteína aportan los nutrientes para el
desarrollo microbiano. La bilis de buey, el citrato de sodio y el pH alcalino inhiben el desarrollo de flora acompañante, favoreciendo el
crecimiento de Vibrio spp. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y debido a su alta concentración también contribuye a la
selectividad del medio. La sacarosa es el hidrato de carbono fermentable y el azul de bromotimol y azul de timol son los indicadores de pH que
en un ambiente alcalino le otorgan al medio de cultivo el color verdeazulado y viran al color amarillo en medio ácido (por utilización de la
sacarosa). El tiosulfato de sodio es la fuente de azufre y junto con el citrato ferrico permiten la detección de la producción de ácido sulfhídrico
por formación de un compuesto color negro. El agar es el agente solidificante
INDOL : El indol es un compuesto que se genera mediante la desaminación reductiva del triptófano y esta reacción es llevada a cabo por algunas
bacterias que poseen las enzimas denominadas en su conjunto triptofanasas.Para detectar la producción de indol se utiliza el medio Caldo
triptófano y la lectura de la prueba se realiza con el reactivo de Kovacs (alcohol isoamilo, p-dimetilaminobenzaldehído y ácido
clorhídrico concentrado) con el que el indol producido reacciona generando una coloración rosa intensa.
CS : Fundamento Se determina la utilización del citrato como única fuente de carbono y energía. La prueba
emplea un medio definido (Koser) con citrato como única fuente carbonada (se detecta turbidez).
Alternativamente se utiliza el medio de Simmons: utiliza un medio sólido con citrato sódico y un indicador
ácido-base (azul de bromotimol). En este caso se detecta la alcalinización del medio por el consumo del citrato.
b. Materiales y reactivos: El medio de cultivo, es el mismo que en la prueba del rojo de metilo. Reactivos :alfa-naftol
UREA : El medio tiene como indicador de la producción de acidez o alcalinidad el Rojo Fenol. Los microorganismos que poseen actividad ureasa ,
actúan sobre la urea presente en el medio, formando Amoniaco y Dióxido de Carbono, el Amoniaco alcaliniza el medio y el indicador hace que el
medio vire de anaranjado-amarillo a rosa fuerte. Los miroorganismos que no descomponen la Urea y fermentan la Glucosa, pueden virar el
medio a ácido y aparecer el medio con un color amarillo o incluso no alterarlo al ser pequeña la presencia de este azúcar. La incorporación de
sistema de tamponamiento , permite la detección de gérmenes que metabolizan rápidamente la urea ( de 4 a 6 horas) así como los que
hidrolizan la Urea lentamente como el Citrobacter, Klebsiella, Yersinia y Bordetella.
OXIDASA: Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema
citocromooxidasa que activa la oxidación del citocromo que es reducido por el oxígeno molecular que produce agua o peróxido de hidrógeno
según la especie bacteriana. El oxígeno actúa por tanto como aceptor final de electrones en la cadena transportadora de electrones. Por lo
general, el sistema citocromooxidasa sólo se encuentra en los organismos aerobios, algunos anaerobios facultativos y, excepcionalmente, en
algún microaerófilo, pero los anaerobios estrictos carecen de actividad oxidasa.Se investiga la presencia del enzima citocromo-oxidasa en la
bacteria en estudio
CATALASA La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en
agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva.
PROCEDIMIENTO: se coloca una gota de H202 sobre una lamina mas la colonia si hace burbujas es catalasa +
COAGULASA Es una enzima producida por un determinado microorganismo capaz de coagular el plasma sanguíneo. Su aplicación clínica más im
Prueba de la coagulasa
Al poner en contacto el microorganismo problema con plasma, si el microorganismo posee la enzima coagulasa, el plasma coagulaportante es la
ayuda a la diferenciación del Staphylococcus Aureusde otros Staphylococcus.
Técnica
Realizar la último observación, si no se ha coagulado previamente, a las 4 horas del inicio de la práctica
BILIS ESCULINA: Objetivo: Separar los estreptococos del grupo D de los demás grupos de estreptococos. Fundamento: Se basa en la capacidad
de los estreptococos del grupo D de crecer en un medio de cultivo que contiene un 40% de bilis y de hidrolizar la esculina a esculetina, la cual se
combina con el citrato ferroso que posee el medio, dando un complejo de color negro. La concentración de bilis es fundamental, ya que existen
estreptococos del grupo Viridans que son capaces de crecer a concentraciones menores de bilis. Procedimiento: Se realiza sembrando en
superficie tubos de agar bilis esculina inclinado. Interpretación de resultados: Una reacción positiva se evidencia como ennegrecimiento del
medio
PRUEBA DE CAMP: Fundamento: Se basa en que los estreptococos del grupo B producen un factor llamado CAMP (factor de monofosfato de
adenina cíclica) que aumenta la zona de hemólisis producida por un estafilococo productor de ßlisina. Procedimiento: Se realiza estriando un
cultivo de estreptococo ß-hemolítico en forma perpendicular a una estría de un estafilococo productor de ß-lisina en agar sangre. Se incuba 18-
24 horas a 37ºC. Interpretación de los resultados: La prueba positiva se evidencia por la presencia de una zona de potenciación de la hemólisis
en forma de puntas de flecha en el lugar donde se contactan las dos estrías
Fundamento
Debido a la composición de la «pared» bacteriana no es fácil teñir diversos microorganismos como el mycobacterium. Por tanto hay que forzarlo
con calor.
Además, al tratarse de una tinción diferencial, es necesario el uso de más de un colorante para poner de manifiesto la afinidad por ciertos
colorantes de determinados microorganismos o estructuras de los mismos. Esta afinidad puede definirse como la «fuerza» con la que queda
retenido el colorante, que no se elimina con ácido-alcohol.
TECNICA
1. Realizar un frotis bacteriano de la cepa de mycobacterium phleiy fijar la extensión con calor.
2. Añadir el primer colorante: Carbofucsina.
3. Se pasa por el mechero varias veces, durante cinco minutos, sin permitir que hierva el colorante.
4. Decantar y lavar con agua destilada el exceso de colorante.
5. Decolorar con alcohol/ácido hasta que la muestra tenga un color rosado.
6. Lavar con agua destilada.
7. Teñir con el colorante azul de metileno durante un minuto.
8. Lavar con agua destilada hasta retirar el exceso de colorante.
9. Secar la extensión al aire.
10. Observar al microscopio óptico y anotar los resultados
Esta tinción pone de manifiesto la afinidad tintorial de la pared, la cual depende de su composición para que el microorganismo sea
considerado gram+ o gram-.
Los microorganismos grampositivos se diferencian de los gramnegativos en que tienen más mureína, una pared celular monoestratificada y
presencia de ácidos teitoicos. Los gram- tienen menos mureína, una pared celular biestratificada y no tienen ácidos teitoicos.
Técnica
Preparar un frotis bacteriano.
Lavar de nuevo con agua destilada para retirar los restos de alcohol/acetona.
Observar al microscopio óptico y finalmente identificar los microorganismos como grampositivos o gramnegativos
Gram - Gram +
PRUEBAS TREPONEMICAS Y NO TREPONEMICAS
BIOQUIMICA CLINICA
CONTROL DE CALIDAD
TOMA DE MUESTRA
ELECTROLITOS
IONES
MOLECULAS PEQUEÑAS
MOLECULAS PEQUEÑAS
PROTEINAS:ENZIMAS
LIPIDOS Y LIPOPROTEINAS
Colesterol total = Colesterol HDL + Colesterol LDL + Colesterol VLDL
HIPOGLICEMIA HIPERGLICEMIA
SINTOMAS La hipoglucemia en el niño y adolescente con diabetes se SINTOMAS
define arbitrariamente como un nivel de glucemia menor de 70
mg/dl. Primero aparecen manifestaciones adrenérgicas (temblor,
palidez, sudoración fría, bostezos ) y después neuroglucopénicas
(conductas extrañas, alucinaciones, obnubilación, coma, convulsiones
PRUEBAS PRUEBAS
INMUNOLOGIA
https://www.corelaboratory.abbott/sal/learningGuide/ADD-00061345-ES-EU%20170091%20ClinChem_Learning_Guide.pdf