a) Nombre de laboratorio: Laboratorio de Análisis Instrumental

b) Nombre del alumno: Francisco Javier Lozano Hernández

c) Fecha: 16/08/2019 Martes 13:00-15:00

d) Nombre del tema: CROMATOGRAFIA DE GASES I

e) OBJETIVOS:

 Integra los elementos estructurales de un cromatógrafo de gases.

 Calcula los parámetros cromatográficos a partir de la información experimental
proporcionada.
 Interpreta los resultados obtenidos y selecciona las condiciones experimentales para el
análisis de una muestra.

INTRODUCCIÓN:
La cromatografía de gases es una técnica utilizada para separar los diferentes
compuestos volátiles de una muestra. La muestra se volatilizara y se inyecta en la cabeza
de una columna cromatografía (fase estacionaria). La elución se produce por el flujo de
una fase móvil de un gas inerte, el cual no interacciona con las moléculas de la muestra;
su única función es la de transportar el analito a través de la columna. En cromatografía
de gases se usan dos tipos de columnas, las empaquetadas, o de relleno y las tubulares
abiertas, o capilares. Entre los detectores más usados se encuentra el detector FID
(ionización de llama) y el detector TCT (conductividad térmica).

PROCEDIMIENTO:
Disponible en laboratorio.

f) Resumen de la Investigación Teórica:

1. Fundamento de la cromatografía y su clasificación con respecto a la fase móvil y a la
estacionaria.
La cromatografía abarca un conjunto importante y diverso de métodos, que permite separar
componentes estrechamente relacionados en mezclas complejas. En todas las separaciones
cromatográficas, la muestra se desplaza con una fase móvil. Esta fase móvil se hace pasar a
través de una fase estacionaria con la que es inmiscible, y que se fija en una columna o una
superficie sólida. Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria
se mueven lentamente con el flujo de la fase móvil. Los componentes que se unen débilmente a
la fase estacionaria, se mueven con rapidez.
Clasificación Método Fase estacionaria Tipo de equilibrio
general especifico
Cromatografía Gas-liquido Liquido adsorbido o unido Distribución entre un
de gases (GC) a un solido gas y un líquido.
(fase móvil: Gas-fase unida Especies orgánicas Distribución ente el
gas) químicamente enlazadas a una superficie líquido y la superficie
solida enlazada
Gas-solido Solido Adsorción
Cromatografía Liquido- Liquido adsorbido sobre un Distribución entre
de líquidos Liquido, o solido líquidos inmiscibles
(LC) (fase reparto
móvil: liquida) Liquido-fase Especies orgánicas Distribución entre el
unida enlazadas a una superficie líquido y la superficie
químicamente solida enlazada
Liquido-solido, Solido Adsorción
o adsorción
Intercambio de Resina de intercambio Intercambio iónico
iones iónico
Exclusión por Liquido en los intersticios Distribución – exclusión
tamaño de un sólido polimérico
Cromatografía Especies orgánicas Distribución entre el
de fluidos enlazadas a una superficie fluido supercrítico y la
supercríticos solida superficie enlazada.
(CFS; fase
móvil: fluido
supercrítico)

2. a) Clasifica las columnas cromatográficas.

 Empacadas
 Se fabrican con tubos de vidrio o de metal
 Miden de 2 a 3 m de largo y su diámetro interior de 2 a 4 mm.
 Consisten en un envolvente en forma de cilindro que tiene en su interior un plato
de soporte para el material de empaque, un dispositivo de distribución de líquido,
con un diseño tal que proporcione una irrigación eficaz al empaque.
 Capilares o tubulares abiertas
 WCOT (de pared recubierta): Son simplemente tubos capilares donde la pared
interna se ha recubierto con una finísima capa de fase estacionaria.
 SCOT (de soporte recubierto): Tienen un su parte interna una fina capa de
material adsorbente donde se adhiere la fase estacionaria.
b) Menciona por lo menos cinco características para las columnas
cromatográficas
 Tienen una longitud que va de 1 a más de 100m, dependiendo del tipo de columna.
  Necesitan tener una gran cantidad de platos/metro para tener una buena
eficiencia.
 Suelen ser veloces para separar la mezcla.
 Tienen un tamaño de partícula específico, no sirven si trabajan fuera de sus
parámetros.
 Cuentan con un detector que mide la presencia de solutos/componentes de la
muestra que abandonan el sistema, el selector puede ser desde muy general, a
muy específico.

3. Para los métodos de cromatografía de gases:

a) ¿Cómo se selecciona una columna?
Tomando en cuenta que tipo de soporte es mejor (solido o liquido), el rango de temperaturas de
trabajo, la viscosidad de la fase dentro de ese rango y su capacidad para interaccionar con
diferentes solutos.
b) Describe el proceso de medición de los diferentes tipos de muestras: solidas,
liquidas y gaseosas.
Para muestras solidas se necesita disolver la muestra para poder ser inyectada, donde entrara
en contacto con un gas inerte a altas temperaturas, por tanto, atravesara la columna donde se
separarán los componentes, los cuales saldrán en diferentes tiempos y serán medidos por alguna
propiedad.
Para muestras tanto liquidas como gaseosas se inyectan tal cual, el proceso que sigue es el
mismo.
c) ¿Cómo se selecciona un detector?
Se selecciona dependiendo de:

 El número de especies contenidas en el analito.

 La sensibilidad deseada en la muestra.
 La estabilidad del compuesto a medir.
 El tiempo de respuesta.
 La deriva de señal.
 Límite de detección.
 Intervalo de linealidad.

4. La temperatura de la columna, el flujo del gas de arrastre, el volumen de muestra y la

naturaleza de la fase estacionaria, son algunos de los factores en las separaciones por
cromatografía de gases; explica la influencia de cada uno de ellos.

 Temperatura de columna: Al aumentarla disminuirá la eficiencia, pues se afecta el coef.

de reparto. Además, la temperatura del puerto debe ser aproximadamente 50°C mayor
que la temperatura de ebullición del componente menos volátil.
 Flujo de gas de arrastre: Debería llevar velocidades altas.
  Volumen de muestra: Dependiendo del tipo de columna y fase usada, puede tener que
ser un volumen extremadamente chico, tanto asi, que es necesario usar instrumentos
especiales para su manejo.
 Naturaleza de la fase estacionaria: Puede afectar si reacciona con los compuestos a
separar, debería ser termoestable y tener baja viscosidad. Es ideal si permite trabajar en
rangos amplios de temperatura. Las fuerzas intermoleculares entre la fase estacionaria y
el soluto son las que permiten separarlos.

5. ¿Qué es un cromatograma, como se elabora y que información analítica proporciona?

Es la señal captada por el detector correspondiente a la concentración del soluto registrado en
función del tiempo (o del volumen de fase móvil añadido). Con esto se obtienen una serie de
picos. La posición de los picos en el eje del tiempo puede servir para identificar los
componentes de la muestra; las áreas bajo los picos proporcionan una medida cuantitativa de
la cantidad de cada componente.

g) Define los siguientes parámetros cromatográficos, y expresa la ecuación para su

cálculo a partir de un cromatograma.
1. Tiempo de retención y tiempo muerto.
Tiempo muerto (tM): Tiempo necesario para que una especie no retenida por la columna alcance
el detector.
Tiempo de retención (tR): Tiempo transcurrido desde la inyección de la muestra hasta que el pico
de concentración del analito alcanza el detector.
2. Tiempo de retención corregido.
Tiempo que pasa un componente en la fase estacionaria (tR =tR- tM)
3. Factor de capacidad (factor de retención).
Cantidad de soluto en equilibrio en las fases liquida y gaseosa. Es la velocidad a la que migran
𝒕𝑹 −𝒕𝑴
los solutos en las columnas. 𝒌′𝑨 =
𝒕𝑴

Cuando el factor de retención para una especie es mucho menor que la unidad, la elusión tiene
lugar tan rápidamente que es difícil determinar con exactitud los tiempos de retención. Cuando
el factor de retención es de orden 20 a 30 o mayor, los tiempos de elución son excesivamente
largos. Idealmente las separaciones se realizan a unas condiciones en las que los factores de
retención para las especies oscilan entre 2 y 10.
4. Número de platos teóricos.
Numero de regiones de la columna donde el analito está en equilibrio entre la fase móvil y la
2
𝑡′
estacionaria. 𝑁 = 16 (𝑊𝑟 ) 𝑊 = 𝑎𝑛𝑐ℎ𝑜 𝑑𝑒 𝑏𝑎𝑠𝑒 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑖𝑐𝑜.

Una columna será más eficiente mientras mayor sea el número de platos teóricos que tenga.
 5. Altura equivalente de cada plato teórico
Utilizado como medida cuantitativa de la eficiencia de una columna cromatográfica.
𝐿
𝐻=𝑁 𝐿 = 𝑙𝑜𝑛𝑔. 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑢𝑚𝑛𝑎

6. Selectividad o retención relativa

Relación del tiempo en que 2 compuestos permanecen en la fase estacionaria.
′
𝑡𝑟(𝐵)
∝= ′ (𝐵) = 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑐𝑖𝑒 𝑚𝑎𝑠 𝑟𝑒𝑡𝑒𝑛𝑖𝑑𝑎 (𝐴) = 𝑒𝑠𝑝𝑒𝑐𝑖𝑒 𝑚𝑒𝑛𝑜𝑠 𝑟𝑒𝑡𝑒𝑛𝑖𝑑𝑎
𝑡𝑟(𝐴)

7. Factor de asimetría (T o As).

Es la anchura de pico al 10% de la altura del mismo pico, dividido entre la anchura media frontal.

h)
1. Fundamento y diagrama descriptivo de un cromatógrafo de gases.
En cromatografía de gases, la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna
cromatografica, La elución se produce por el flujo de una fase móvil de un gas inerte. A diferencia
de la mayoría de otros tipos de cromatografía, la fase móvil no interacciona con la moléculas del
analito; su única función es la de transportar el analito a través de la columna. Existen dos tipos
de cromatografía de gases: la cromatografía gas-sólido y la cromatografía gas-líquido, siendo
esta última la que se utiliza más ampliamente.
Partes de un cromatógrafo de gases

 Gas portador: Es inerte y no interactúa con la muestra, por lo que su función es transportar
la muestra. El helio, el argón, nitrógeno e hidrogeno son los gases más utilizados.
 Regulador de presión: Miden la presión de entrada y salida del gas.
 Rotámetro: Regulador de flujo a través de la columna.
 Puerto de inyección: El inyector se trata de una cámara situada a la entrada de la columna
y calentada independientemente de esta.
 Sistema de detección: Sirve para detectar la aparición de los picos de los analitos al final
de la columna y para identificarlos.
 2. Fundamento y diagrama descriptivo de un detector de conductividad térmica.

Su fundamento se basa en el principio de que un cuerpo caliente perderá calor a una

velocidad que depende de la composición del gas que lo rodea. Así, la velocidad de
pérdida de calor puede usarse como una medida de la composición del gas. El filamento
calentado puede transferir calor al bloque metálico mediante conducción constante,
cuando las moléculas del gas chocan con él. Las conductividades térmicas de los gases
empleados como fase móvil son alrededor de 6 a 10 veces mayores que la mayoría de
los compuestos orgánicos. Por tanto, incluso pequeñas cantidades de materia orgánica
(analitos) ocasionan una disminución relativamente grande de la conductividad térmica
del efluente de la columna, lo cual da como resultado un marcado aumento de la
temperatura del filamento, causando el correspondiente incremento en la resistencia
eléctrica, el cual se mide mediante un circuito con el puente de Wheatstone.

Bibliografía:

Desconocido. (2018). Cromatografía de gases. 06 02 2019, de Sitio web:

http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/croma

Skoog, D.A. 2001. Principios de análisis instrumental. CENGAGE Learning:México.