Introducción

Experimento
Resultados y discusión
Contribuciones
Agradecimientos

Aplicaciones de las micorrizas amigables con

el medio ambiente

A. Pérez1,∗ , R. Nolasco1 , R. Maravilla1 , W. Abarca1 , V.

Domı́nguez1 , B. Dreyer2 y C. Rudamas1,∗
1
Laboratorio de Espectroscopia Óptica, Escuela de Fı́sica, Facultad de Ciencias Naturales y Matemática,
Universidad de El Salvador, Ciudad Universitaria, Final de Av. Mártires y Héroes del 30 julio, San Salvador,
El Salvador, América Central.
2
Centro de Investigación y Desarrollo en Salud, Universidad de El Salvador, Ciudad Universitaria, Final de
Av. Mártires y Héroes del 30 julio, San Salvador, El Salvador, América Central.
∗
e-mails: edwin.perez2@ues.edu.sv,
Conferencia Alumni ”Conservación y Cambio Climático” carlos.rudamas@ues.edu.sv
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Experimento
Resultados y discusión
Contribuciones
Agradecimientos

Contenido

1 Introducción

2 Experimento
Preparación de muestras
Técnicas experimentales

3 Resultados y discusión
Luminiscencia en esporas
Fotoluminiscencia de glomalina

4 Contribuciones

5 Agradecimientos

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Experimento
Resultados y discusión
Contribuciones
Agradecimientos

Contenido

1 Introducción

2 Experimento
Preparación de muestras
Técnicas experimentales

3 Resultados y discusión
Luminiscencia en esporas
Fotoluminiscencia de glomalina

4 Contribuciones

5 Agradecimientos

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Introducción
En El Salvador existen muchos problemas ambientales.
Algunos problemas ambientales de El Salvador
Contaminación del aire.
Contaminación del agua.
Contaminación del suelo.
40 municipios amenazados por desertificación.
CESTA, www.cesta-foe.org.sv [Consulta 9 de diciembre 2012].

Agotamiento de los nutrientes de suelo.

Posible contribución.
Aumentar niveles de micorrización en plantas.
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Experimento
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Introducción

Beneficio de las micorrizas.

Biofertilizantes.
B. Bago et al. New Phytol. 139, 375(1998).

Bioprotectores.
K. Hammond-Kosack y J. Parker. Current Opinion in Biotechnology 14, 177(2003).

J. Pozo y C. Azcón-Aguilar. Current Opinion in Plant Biology 10, 393(2007).

Biorremediadores.
V. Göhre y U. Paszkowski. Planta 223, 1115(2006).

B. Dreyer, El Salvador Ciencia y Tecnologı́a 12, 15 (2007).

A. Morte et al., Feria de Calidad Ambiental y Ecoeficiencia, (2004).

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Introducción
La palabra micorriza significa hongo-raı́z (mycos-rhizos) y se
usa para definir la asociación simbiótica formada entre algunos
hongos y las raı́ces de las plantas.
S. E. Smith y D.J. Read, Third Ed., pp 787, Academic Press, New York (2008).

Tipos de micorrizas

Ectendomicorriza.
Arbutoide.
Arbusculares.
Monotropoide.
Ectomicorriza.
Ericoide.
Orquidiodes.

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Experimento
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Introducción
Micorrizas arbusculares

Figura 1: 1, espora; 2, apresorio; 3, coil; 4, arbúsculo; 5, vesı́cula; 6, componentes de la pared celular del hongo; 7,
Interfaz de la pared celular del hongo con la pared celular vegetal. Figura modificada de Alejandra Hernández.
Basado en J. Pontón, Rev. Iberoam. Micol. 25, 78 (2008). S. Purin y M. Rillig, Soil Biol. Biochem. 40, 1000(2008).
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Experimento
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Introducción
Fotoluminiscencia
R. N. Ames et al. Can. J.
Microbiol. 28, 351(1982)
Jabaji-Hare et al. Can. J. Bot.
62, 2665(1984)
N. Séjalon-Delmas et al.
Mycologia 90, 921 (1998)
Vierheilig et al. Can. J. Bot.
79, 231(2001)
B. Dreyer et al. Mycol. Res.
110, 887 (2006)
Figura 2: Imagen tomada con microscopio de A. Pérez. Lic. Tesis, UES, 2013
epifluorescencia. Escala 100µm. Figura tomada de B.
Dreyer et al. Mycol. Res. 110, 887(2006)
R. Nolasco.Lic.Tesis, UES, 2015
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Experimento
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Introducción

Detección de MA
Métodos invasivos.
Tinciones
Método no invasivo.
Espectroscopia óptica
Medir niveles de micorrización.

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Experimento
Preparación de muestras
Resultados y discusión
Técnicas experimentales
Contribuciones
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Contenido

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2 Experimento
Preparación de muestras
Técnicas experimentales

3 Resultados y discusión
Luminiscencia en esporas
Fotoluminiscencia de glomalina

4 Contribuciones

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Preparación de muestras
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Técnicas experimentales
Contribuciones
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Experimento

Muestras
Material recolectado en el campus universitario.
Inóculos proporcionados.

Inóculo Proporcionado por Institución

S. cerradensis Dr. Allen Herre STRI Panamá
G. intraradices
G. mosseae
G. caledonium
Dra. Asunción Morte UM España
G. clarum

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Experimento
Preparación de muestras
Resultados y discusión
Técnicas experimentales
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Preparación de muestras
Extracción de esporas
Protocolo decantación y tamizado húmedo.
J. W. Gerdemann y T. H. Nicolson , Trans. Brit. Mycol. Soc. 46, 235 (1963).

Figura de: C. Aguilar y B. Dreyer, Manual sobre técnicas utilizadas en investigaciones sobre micorrizas, No. 1, 2009.
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Experimento
Preparación de muestras
Resultados y discusión
Técnicas experimentales
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Preparación de muestras

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Preparación de muestras
Resultados y discusión
Técnicas experimentales
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Preparación de muestras

Extracción de glomalina
Protocolo de Wright y Upadhyaya.
Wright, S.F., Upadhyaya, Soil Science 161, 575 (1996).

Protocolo de Driver et al.

D. Driver et al. Soil. Biol. Biochem. 37, 101 (2005)

Extracción de pigmento amarillo

Protocolo de T. Fester et al.
T. Fester et al., Plant Cell. Physiol.43, 256 (2002).

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Preparación de muestras
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Técnicas experimentales
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Técnicas experimentales
Interacción de la radiación con la materia

Figura 3: 1. Luz incidente I0 y λ0 , 2. Fotoluminiscencia λ > λ0 , 3. Luz transmitida I , 4. Dispersión Mie λ0 ≈ D,

5. Dispersión Rayleigh λ0 >> D. D: diámetro de partı́culas. 6. Dispersión Raman.
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Técnicas experimentales
Espectroscopı́a de absorción

Figura 4: Esquema de montaje experimental de absorción. L1 y L2 Lentes, M muestra.

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Preparación de muestras
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Técnicas experimentales
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Técnicas experimentales
Fotoluminiscencia (PL)

Figura 5: Esquema del montaje experimental de fotoluminiscencia.L1 y L2 Lentes, F filtro, M muestra.

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Técnicas experimentales

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Preparación de muestras
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Técnicas experimentales
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Técnicas experimentales
Microfotoluminiscencia (Micro-PL)

Figura 6: Esquema de montaje experimental que se utiliza para las medidas de micro-PL. M Muestra, O Objetivo,
F1 y F2 Filtros, E Dicroico.
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Experimento
Luminiscencia en esporas
Resultados y discusión
Fotoluminiscencia de glomalina
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2 Experimento
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Técnicas experimentales

3 Resultados y discusión
Luminiscencia en esporas
Fotoluminiscencia de glomalina

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Luminiscencia en esporas
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Fotoluminiscencia de glomalina
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Resultados y discusión

Glomus mosseae, Escala ∼ 150 µm. λexc ≈ 435 nm

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Luminiscencia en esporas
Resultados y discusión
Fotoluminiscencia de glomalina
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Resultados y discusión

Figura 7: Fotografı́as de esporas. Escala ∼ 150 µm. Izquierda fotografı́a tomada con microscopio óptico, derecha
fotografı́a tomada con el microscopio de epifluorescencia. Esporas de la especie G. caledonium. λexc ≈ 435 nm

Emisión en hongos MA
Resultado similar a los que obtuvo B. Dreyer et al. 2006.

Posible emisión en el citoplasma.

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Luminiscencia en esporas
Resultados y discusión
Fotoluminiscencia de glomalina
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Resultados y discusión

Figura 8: Fotografı́as de esporas. Escala ∼ 150 µm. Izquierda fotografı́a tomada con microscopio óptico, derecha
fotografı́a tomada con el microscopio de epifluorescencia. Esporas de la especie G. intraradices. λexc ≈ 435 nm

Emisión en hongos MA
Emisión en citoplasma y pared celular.

Hay glomalina en citoplasma y pared celular de hongos MA, S. Purin y M.

Rillig, 2008.

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Luminiscencia en esporas
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Luminiscencia en esporas
Micro-PL similar
Filtro transmisión
λexc ≈ 435 nm

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Luminiscencia en esporas
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Luminiscencia en esporas
Especies diferentes
PL similar
λexc ≈ 365 nm

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Luminiscencia en esporas
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Fotoluminiscencia de glomalina
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Luminiscencia en esporas
Comparación con Dreyer et al. 2006. λexc ≈ 395 nm.

Fotoluminiscencia Glomus caledonium comparado con Dreyer et al. 2006

Resultados similares a Dreyer et al. 2006.

En diferentes estructuras hay resultados similares.

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Luminiscencia en esporas
Resultados y discusión
Fotoluminiscencia de glomalina
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Fotoluminiscencia de glomalina. λexc ≈ 365 nm

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Luminiscencia en esporas
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Fotoluminiscencia de glomalina
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PL de esporas y glomalina extraı́da de esporas

PL de esporas y glomalina extraı́da de esporas
PL glomalina es similar
PL esporas vs glomalina
λexc ≈ 365 nm

PL glomalina
Desnaturalización. David P. Janos et al. Soil Biol. Biochem. 40, 728(2008).

Ensanchamiento. Mittal y Singh. PLoS ONE. 8, 11(2013).

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PL de esporas
Deconvolución gaussiana. λexc ≈ 365 nm

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PL de glomalina extraı́da de esporas

Deconvolución gaussiana. λexc ≈ 365 nm

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Fotoluminiscencia de glomalina
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PL de glomalina extraı́da de esporas

Deconvolución gaussiana. λexc ≈ 365 nm

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Contribuciones
Artı́culo A. Pérez, A. V-Hernández, B. Dreyer y C. Rudamas, “Propiedades
óptica de hongos micorrı́cicos arbusculares”, Proceeding del XXVIII
CURCCAF 2009, San José, Costa Rica.
Póster A. Pérez, R. Nolasco, R. Maravilla, B. Dreyer y C. Rudamas, “Con-
tribution of the different separations of glomalin extracts to the pho-
toluminescence of arbuscular mycorrhizal (AM) fungi spores”, ICTP-
ICO-MCTP College on Optics and Energy, Tuxtla Gutiérrez, Chiapas,
México from 28 April to 9 May 2014.
Charla A. Pérez, B. Dreyer y C. Rudamas, “Optical properties of arbus-
cular mycorrhrizal fungal structures (AMF)”, First ICO-ICTP-TWAS
Central American Workshop in Lasers, Laser Applications and Laser
Safety Regulations, San José, Costa Rica, from 30 April to 11 May
2012.

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Contribuciones

Charla A. Pérez, R. Henrı́quez, R. Nolasco, B. Dreyer y C. Rudamas,“Comapración

de fotoluminiscencia y micro-fotoluminiscencia en esporas de hongos
micorrı́cicos arbuscualares (MA) de la especie Glomus caledonium”,
III Congreso centroamericano de investigación CADAN:R, La Ceiba
Honduras 14-16 noviembre, 2012.
Charla A. Pérez, B. Dreyer, J-G Ramos y C. Rudamas, ”Micro-fotoluminiscencia
en esporas de hongos micorrı́cicos arbuscualares (MA)”, II Congre-
so centroamericano de investigación CADAN:R, León, Nicaragua 1-3
Diciembre, 2011.
Charla A. Pérez, B. Dreyer y C. Rudamas, “Fotoluminiscencia en esporas de
hongos micorrı́cicos arbuscualares (MA)”, II Simposio de investiga-
ción de la Facultad de Ciencias Naturales y Matemáticas y CADAN:R,
10-11 Diciembre, 2010.

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Agradecimientos

Miembros y los que fueron miembro del grupo de investi-

gación del Dr. Carlos Rudamas.
Grupo de investigación de micorrizas. Dra. Beatriz Dreyer.
Financiamiento parcial del Consejo de Investigaciones Cientı́fi-
cas de la Universidad de El Salvador (CIC-UES). Mediante
los proyetos 05.31, 06.18, 09.19 y 09.20.
Centro de investigaciones y desarrollo en salud (CENSA-
LUD).
Escuela de Fı́sica

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Muchas gracias

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