MICROBIOLOGIA ninguna bacteria.
Sirve como soporte, no
Definición
Es una ciencia biológica que estudia la
estructura, fisiología, genética y ecología de los
microorganismos (fungi, protistas y moneras).
Se estudia la microbiología para darle una
aplicación socioeconómica.
Utiliza técnicas como:
 Esterilizaciones Permiten el
 Medios de cultivo crecimiento y
aislamiento de
 Análisis molecular los
 Análisis bioquímico microorganismos
Desarrollo histórico
A) Período especulativo (3´a.C. – 1676)
 Se inicia desde los 3-2.5 millones de años
a.C.
 El contacto con los microorganismos se
inicia con las prácticas agrícolas y los
procesamientos empíricos de los
alimentos.
 Los primeros en aplicar directamente a
los microorganismos fueron los sumerios,
babilonios y egipcios.
 Girolamo Fracastoro, en el año 1546,
sugiere que microorganismos invisibles
eran causantes de enfermedades.
 Robert Hooke, en el año 1664, describe
observaciones microscópicas de hongos.
 Antonie Van Leewenhoek, en octubre de
1676, publica su primer artículo sobre
observaciones microscópicas de
bacterias. A estos microorganismos los
llamó “animálculos”.
B) Período de las observación (1676 – 1867)
 Tuvieron que pasar 200 años para que la
microbiología se tome en cuenta ya que
imperaba la teoría de la generación
espontánea.
 Francesco Redi (1626 – 1698)
Lázaro Spallanzani (1729 – 1799)
John Tyndall (1820 – 1893)
Louis Pasteur (1822 – 1895)
Estaban en contra de la teoría de la
generación espontánea.
C) Período de los cultivos (1867 – 1910 apr.)
 Robert Koch (1843 – 1910), fue
fundamental en el desarrollo de la
microbiología con el establecimiento de
técnicas de aislamiento y medios de
cultivo sólidos.
Utilizó el agar como medio sólido de
cultivo. El agar es un polisacárido
complejo que no es degradado por
como nutriente.
 Richard Petri, sugirió el uso de placas de
vidrio para los medios de cultivo.
 Las mejores técnicas y medios
permitieron el aislamiento e
identificación de microorganismos.
 En 1876, Koch demostró que un
microorganismo era el agente causante de
enfermedades. Hizo estudios con ántrax.
 En el año 1883, Christian Gram,
desarrolló empíricamente el método de
tinción diferencial para bacterias que
permite hacer una diferenciación básica
(Gram + y Gram -).
Método de tinción diferencial para
bacterias:
I etapa: se utiliza un colorante primario
básico llamado “cristal violeta” por 30´.
II etapa: se coloca un mordiente
(sustancia que incrementa la afinidad del
colorante con la bacteria), el lugol.
III etapa: se aplica un decolorante
(mezcla de alcohol – cetona).
IV etapa: se aplica un contrastante, la
safranina.
Gram (+) son aquellas capaces de retener
el colorante primario al final de la tinción
de Gram.
Gram (-) son aquellas incapaces de
retener el colorante primario al final de la
tinción de Gram.
 A este período también se le conoce como
el de los “cazadores de microbios”.
 Aún sin el conocimiento de los procesos
inmunológicos, Pasteur desarrolló
vacunas contra el ántrax, contra el cólera
de las aves, contra la erisipela porcina y
contra la rabia. Descubrió la técnica de
atenuación de virulencia que se emplea en
la fabricación de vacunas.
D) Período de la fisiología microbiana (1910
– 1940)
 Se pudo estudiar la fisiología y el
metabolismo de las bacterias.
 Fue iniciado por Pasteur con sus estudios
de cepas en la fabricación de vinos.
 Winogradski (1856 – 1956) y Beijenrick
(1851 – 1931), relacionaron el
metabolismo microbiano con las
transformaciones biogeoquímicas del
suelo. Desarrollaron técnicas de cultivo
por enriquecimiento.
 Kluyver y Van Niel, estudiaron el
metabolismo bacteriano y la fotosíntesis
bacteriana respectivamente.
  A finales del siglo XIX con el  Actualmente se producen de forma
conocimiento de la fisiología, se pudo industrial varias proteínas humanas,
producir económicamente a los vegetales y animales usando varios
microorganismos. microorganismos.
 En la Primera Guerra Mundial, Chain  Se manipula genéticamente a los
Weizmann, salvó a los aliados de la microorganismos para que mejoren el
escasez de explosivos. Produjo a gran aroma de los vinos, para que detecten
escala acetona a partir de la fermentación minas antipersonales (tabaco), para que
de granos amiláceos con Clostridium produzcan licopeno (tomate), para que
acetobutylicum. produzcan vacunas comestibles (contra el
 En 1923, se puso en funcionamiento la sarampión), arroz dorado que produce
primera planta mundial de ácido cítrico betacaroteno, árboles que descontaminan
por la empresa Pfizer que usaba la los suelos (fitoremediación).
fermentación de sacarosa por Aspergillus
Níger. CELULA PROCARIOTA: BACTERIAS
 En 1928, Alexander Fleming, descubre el
carácter antibiótico del Penicillium Características generales de los procariotas
notatum contra la bacteria Staphylococos  Son los más simples de todos los
aureus. organismos vivientes conocidos.
 Howard Florey y Ernst Chain, en plena  Constituyen el reino Monera (Whitacker,
Segunda Guerra Mundial, produjeron 1969).
masivamente la penicilina.  Carecen de envoltura nuclear, plastidios ni
 También se conoce como el período de la mitocondrias.
microbiología industrial.
E) Período de la genética microbiana (1941
– 1970)
 En 1941, Beadle y Tatum, probaron la
relación entre los genes y las enzimas al
encontrar mutantes auxotróficos.
 En 1944, Aveny, Mc Leod y Mc Carty,
probaron que el DNA era la molécula
hereditaria y que las bacterias podían
transferir genes a través de la  Lynn Margwlis, dice que todas las algas son
transformación genética. protistas.
 En 1946, Lederberg y Tatum,  Sistema de clasificación basado en
demostraron que algunas bacterias dominios:
pueden transferir genes con contacto
célula-célula.
 En 1952, Watson, Crack y Wilkings,
propusieron el modelo estructural del
DNA.
 En este período se inicia la utilización de
los nuevos conceptos de la genética de
microorganismos con el mejoramiento de
las características culturales (cultivos) e
incremento de las características
metabólicas de los microorganismos.  Son unicelulares, solitarios/coloniales.
F) Período de la biotecnología microbiana  Nutrición: osmotrófica, quimiosintética,
(1970 – actualidad) fotoorganótrofa, fotolitótrofa.
 En el año 1973, se publicó un artículo en  Reproducción: asexual por fusión binaria
el que se expresaba que era posible Parasexual
introducir y expresar genes foráneos en Protosexual
bacterias. Ejemplo: el gen de la  Son inmóviles o móviles por flagelos.
somatostatina (interviene en la regulación
de la glucemia) se introdujo en E. coli. La
insulina es producida por bacterias.
 Constituyen individuos aploides.
Morfología
 Varían en forma y tamaño:
Más pequeños: 100-200 nm = 0.1-0.2 u
Más grandes: 70 u
Ejemplos:
Oscilatoria → 8*50 u
Bacillus megatherium → 1.5*4 u
Escherichia coli → 1*3 u
Streptococcus pneumonial → 0.8 u de D
Epulopiscium fishelsoni → 50*600 u (más
grande que un paramecio)
 Según su forma:
Esféricas → cocos
Alargadas → bacilos
Espiral → espirilos
Marcadamente espiraladas → espiroquetas
Alargadas con una curvatura → vibriones
Ovoides → cocobacilo
 Según sus agrupaciones:
Cocos asociados en pares → diplococos
Ejemplo: Neisseria sp
Cocos asociados en cadenas →
estreptococos
Ejemplo: Streptococcus sp
Cocos asociados en racimos →
estafilococos
Ejemplo: Staphylococcus sp
Cocos asociados en cuatro → tétradas
Ejemplo: Micrococcus sp
Cocos asociados en cubo → sarcinas
Ejemplo: sarcina sp
Bacilos asociados en cadena →
estreptobacilos
Ejemplo: Bacillus megatherium sp
La importancia de ser pequeños
Determina varias de sus propiedades biológicas.
Ejemplo: la velocidad de entrada de nutrientes
y salida de sustancias de desecho es
inversamente proporcional al tamaño celular.
Esto afecta de manera directa al crecimiento y
al metabolismo.
Esto se debe a que las velocidades de transporte
son parcialmente dependientes de la superficie
de membrana disponible, y en relación al
tamaño celular, las células pequeñas tienen
mayor superficie relativa disponible que las
células grandes.
Por lo tanto, las células con menor radio poseen
una relación superficie-volumen más ventajosa
por lo que llevan a cabo los intercambios de
nutrientes con el medio en condiciones
ventajosas.
Los procariotas alcanzan mayor población que
los eucariotas.
Estructura celular
A) Citoplasma: Es una solución acuosa de
sales, azúcares, aminoácidos, vitaminas,
coenzimas y otras moléculas.
Visto al microscopio tiene naturales
granular, debido a que se encuentran gran
cantidad de ribosomas.
a) Ribosomas: Son partículas formadas por
proteínas y RNA. Participa activamente
en la síntesis de proteína, su tamaño es de
14-15 nm.
En los procariotas, los ribosomas son 70s.
El “s” representa el coeficiente de
sedimentación (Svedberg).
b) Nucleoide: Es una zona condensada en
el citoplasma. Está formado
aproximadamente por 60% de DNA, 30%
de RNA y una pequeña cantidad de
proteína.
El DNA de las bacterias es único y
circular.
El DNA de las bacterias está asociado a
proteínas.
c) Plásmidos: Son moléculas circulares de
DNA autoreplicativas e independientes
del cromosoma bacteriano. No se
requiere para el crecimiento y
reproducción de la célula.
Le va a conferir características
específicas.
d) Inclusiones: Son gránulos de material
orgánico e inorgánico que
 frecuentemente son visibles al
microscopio óptico.
 Inclusiones orgánicas: tenemos al
glucógeno y poli-beta-hidroxibutirato
(son principales reservorios de fuentes
carbonadas que van a producir energía
para procesos anabólicos).
 Inclusiones inorgánicas: gránulos de
polifosfatos o metacromáticos (son
cúmulos de fósforo para la producción)
y gránulos de sulfuro (son fuentes de
azufre elemental)
B) Sistemas internos de membrana
a) Mesosomas: Son invaginaciones de la
membrana plasmática que tienen forma
de vesículas o túmulos o lamelas. Se les
involucra en la formación de nueva pared
en la división celular y en la replicación
cromosómica. También se le asocia en las
funciones de secreción de enzimas.
b) Vacuolas de gas: Está rodeada por una
envoltura proteica carente de lípidos
permeable a los gases e impermeable al
agua. Otorga capacidad de flotar y regular
la profundidad en ambientes acuáticos.
C) Membrana celular o citoplasmática: Es una
capa delgada que mide entre 4-5 nm de
grosor que envuelve completamente a la
célula y es de vital importancia para el
mantenimiento de su integridad. Además,
es una barrera altamente selectiva que
capacita a la célula para concentrar
metabolitos específicos y excretar
materiales de desecho.
El movimiento de intercambio de los
fosfolípidos de la membrana se llama flip-
flop. El fosfolípido es una molécula
antipática.
Algunas membranas presentan colesterol.
Este se inserta entre los fosfolípidos y su
función es darle rigidez a la membrana
celular. Sólo está presente en células
eucariotas.
Los micoplasmas no tienen pared celular,
por lo tanto, si tienen colesterol.
Una de las diferencias más significativas
entre las membranas de los procariotas y
eucariotas es que estos últimos poseen
esteroles. Los esteroles están ausentes en
las membranas de casi todos los
procariotas.
Las membranas de los procariotas tienen
hopanoides, son agentes reforzantes de las
membranas.
Las membranas celulares cuyos
fosfolípidos son ricos en ácidos grasos
saturados tienden a ser más rígidos.
Las membranas celulares cuyos
fosfolípidos son ricos en ácidos grasos
insaturados tienden a ser menos densos,
aceitosos y fluidos.
Las bacterias que viven en altas
temperaturas tienen membrana con ácidos
grasos saturados.
Las bacterias que viven en bajas
temperaturas tienen membrana con ácidos
grasos insaturados.
Transporte a través de membrana
Dos tipos de proteínas:
A) Proteínas Carrier (transportadoras): Se unen
a un soluto específico a ser transportado y
sufre un cambio conformacional para
transferir el soluto a través de la membrana.
Pueden ser:
 Uniportadoras: capaces de pasar
sustancias de un lado de la membrana al
otro.
 Simportadoras: transportan dos
sustancias en la misma dirección.
 Antiportadoras: transporta una sustancia
en un sentido y la otra en sentido opuesto.
B) Channel proteins (proteínas canal): Forman
poros llenos de agua que se extienden a
través de la bicapa lipídica. Estos poros
permiten el paso de iones inorgánicos de
tamaño apropiado y de carga.
Membrana de arquebacterias
A diferencia de lo que sucede en bacteria y
escaria, en los que los enlaces éster se da entre
el glicerol y los ácidos grasos, en las
arquebacterias los lípidos poseen enlaces éter
que es la responsable de la unión entre el
glicerol y las cadenas laterales hidrofóbicas.
Carecen de ácidos grasos, tienen cadenas
laterales compuestas de unidades repetitivas de
una molécula hidrocarbonada como el isopreno.
Tiene diéteres, tetraéteres en lugar de
fosfolípidos.
En las moléculas de tetraéteres, las cadenas
laterales de fentanil de cada molécula de
glicerol se unen covalentemente entre sí, esto da
como consecuencia la formación de una
monocapa lipídica en lugar de una bicapa
lipídica. Las monocapas son más estables y
resistentes a la disgregación. Este tipo de
membrana es habitual entre las arquebacterias
hipertermofílicas.
Translocación de grupos
 Requiere de energía y es común en
bacterias.
 Se modifica químicamente al compuesto
que se transporta en su paso a través de la
membrana celular. Ejemplo: glucosa,
fructosa, manosa, N-acetilglucosamina y
beta-glucósidos. Son fosforilados y
desfosforilados por un sistema de
fosfotransferasas.
 El sistema fosfotransferasa de E. coli está
formado por 24 proteínas de las cuales 4 son
esenciales para el transporte de un
determinado azúcar.
 La proteínas que conforman el sistema
fosfotransferasa, se fosforilan y  No todas las bacterias poseen DAP. Esta se
desfosforilan alternadamente hasta que una
proteína transmembranal de transporte
llamada enzima IIc recibe el grupo fosfato
y fosforila al azúcar llevando a cabo su
transporte. El enlace fosfato de alta energía
es cedido por un intermediario metabólico
crucial, el fosfoenolpiruvato.
Mecanismo de captación de glucosa
Sistema Transporte activo
fosfotransferasa
E .coli P. aeruginosa
B. subtilis Azotobacter sp
C. pasteurianum Micrococcus sp
Staphylococcus sp Mycobacterium sp
Pared celular
 La gran mayoría de bacterias presenta pared
celular ya que estas resisten una alta presión
de turgencia (2 atm).
 Es responsable de la forma de la célula.
 El peptidoglucano es la responsable de la
rigidez en la pared celular. Está formada por
dos azúcares derivados llamados N-
acetilglucosamina y N-acetilmurámico.
Además, está conformadopor L-alanina, D-
glutámico, L-lisina, D-alanina (tetrapéptido
de glucano). En algunos casos la L-lisina se
cambia por ácido diaminopimélico.
 El enlace beta-1,4es atacado por una
lisozima, matando a la bacteria.
 La pared se hace fuerte por el
entrecruzamiento entre las partes
peptídicas.
 En Gram negativas, el entrecruzamiento se
da mediante enlaces peptídicos directos del
grupo amino del diaminopimélico y el
grupo carboxílico de la D-alanina terminal.
 En Gram positivos, se da mediante el enlace
de varios aminoácidos cuyo número y tipo
depende de las diferentes bacterias.
Ejemplo: en Staphylococcus aureus, el
puente está formado por cinco glicinas
conectadas por enlaces peptídicos
(pentaglicina).
Densidad del peptidoglucano
 Solo existe peptidoglucano en bacteria.
Nunca se ha encontrado en paredes de
archaea ni en eubacteria el azúcar N-
acetilmurámico ni el ácido diamino.
encuentra en todas las Gram (-) y en algunas
Gram (+). En cambio, la mayor parte de
cocos Gram (+) poseen lisina en lugar de
DAP.
 Otra característica poco común de la pared
celular es la presencia de aminoácidos de
configuración D: D-glutámico y D-alanina.
Ácidos teicoicos
 Son polisacáridos ácidos que se encuentran
unidos a la pared celular de las bacterias
Gram (+). Es un polímero formado por
unidades repetidas de la estructura del
ribitol. El ribitol es un azúcar al que se unen
otros azúcares como al D-glucosa y D-
alanina.
 Confiere una carga negativa neta a la
superficie de la bacteria Gram (+).
Pseudopéptidoglucano
 Está formado por N-acetilglucosamina N-
acetiltaloaminurónico.
 Tienen un enlace beta-1,3 insensible a la
lisozima.
 Las archaeas metanógenas se componen de
polisacáridos, glicoproteínas o proteínas.
 Las metanosarcinas están formadas por
paredes gruesas de polisacáridos a base de
glucosa, ácido glucurónico, galactosamina
y acetato.
Membrana externa de Gram (-)
 Además del peptidoglucano, poseen una
membrana externa compuesta por
lipopolisacácaridos. Esta capa externa es
 una segunda bicapalipídica que contiene
polisacáridos y proteínas (LPS).
 Composición química del LPS: La
estructura del polisacárido consta de dos
partes: el núcleo polisacárido y el
polisacárido O.
 Para Salmonela, el núcleo polisacárido está
compuesto por los siguientes azúcares:
cetodosoxioctonato (KDO), heptosa,
glucosa, galactosa y N-acetilglucosamina.
El polisacárido O está unido al núcleo
polisacárido y está formado por: galactosa,
glucosa, ramnosa, manosa, abecuosa,
colitosa, paratosa, etc.
 La parte lipídica (lípido A) del
lipopolisacárido no es un glicerolípido sino
que los ácidos grasos se unen a un
disacárido compuesto de glucosalina
fosfato por un enlace ésteramina.
 La membrana LPS tiene una capacidad
tóxica para los animales. Ejemplo: Las
Gram (+) como la Salmonela, E. coli son
tóxicos por esta capa.
Porinas y zona periplásmica
 La membrana externa de las bacterias Gram
(-) son relativamente permeables a
pequeñas moléculas, porque presenta una
proteínas externas llamadas porinas.
 Las porinas actúan como canales de entrada
y salida de sustancias hidrofílicas de bajo
peso molecular.
 Porinas inespecíficas: forman canales
llenos de agua a través de los cuales pasan
cualquier tipo de sustancias pequeñas.
 Porinas específicas: contienen un sitio de
unión específico para una o más sustancias.
 Están formados por cuatro cadenas
polipeptídicas. Forman un agujero de 1 nm
de diámetro.
 Entre la membrana externa y la membrana
citoplasmática existe una zona llamada
periplasma. En E. coli en periplasma mide
entre 12-15 nm. En esta zona se encuentran
enzimas hidrolíticas, proteínas de unión
(para transporte de sustratos),
quimiorreceptores.
Síntesis de la pared celular
 Para que una bacteria se divida tiene que
haber producido pared celular nueva.
 Una antilisina produce pequeños agujeros
en la pared celular, luego se incorpora un
peptidoglucano.
 Biosíntesis del peptidoglucano: participan
dos moléculas transportadoras: difosfato de
uridina (UDP) y bactoprenol (transportador
lipídico). El bactoprenol es un alcohol
isoprenoide que tiene 55 carbonos.
Mediante un enlace fosfodiéster se une el
ácido N-acetilmurámico al que después se
une un pentapéptido y después se une la N-
acetilglucosamina.
La función del bactoprenol es generar
intermediarios suficientemente
hidrofóbicos para permitir el paso a través
de la membrana altamente hidrofóbica. El
bactoprenol inserta el pentapéptido
disacárido en el esqueleto del glucano y
regresa al interior para recoger otro
precursor del peptidoglucano.
 El paso final en la síntesis de la pared
celular es la unión de enlaces peptídicos
entre las cadenas paralelas de glucanos.
 El entrecruzamiento de las cadenas de beta-
glucanos se llama transpeptidación. La
penicilina inhibe la transpeptidación.
 El entrecruzamiento es directo entre el
grupo amino del DAP y el grpo carboxílico
de la D-alanina (en Gram negativas).
 Al comienzo existen dos grupos D-alanina
en el extremo del peptidoglucano precursor
que durante la reacción de transpeptidación
un grupo D-alanina se separa por hidrólisis,
esa ruptura sirbe para activar la D-alanina
sub terminal favoreciendo su reacción con
el DAP. Esta reacción se lleva a cabo en el
exterioir de la membrana citoplasmática
donde no existe energía disponible.
 En Staphylococcus aureus la
transpeptidación se da a través de un puente
de pentaglicina.
 El penicilium inhibe la transpeptidación en
Staphylococcus auerus.
CELULA EUCARIOTA: HONGOS
Características generales de las células
eucariotas
 Tienen un núcleo individualizado con
membrana nuclear doble y porosa.
 Tiene cromosomas formados por DNA
lineales y asociados a proteínas histonas.
 Sus ribosomas tienen un coeficiente de
sedimentación de 80s.
 Tiene citoplasma compartimentalizado por
un sistema de endomembranas que dan
lugar a un número de organelos con
funciones particulares y específicas.
 Los hongos constituyen un reino aparte.
Características fungi
 Son organótrofos de nutrición osmotrófica.
Están excluidos los organismos que hacen
fotosíntesis o quimiosíntesis. También
están excluidos los organismos que tienen
nutrición endocitócica.
 Son organismos filamentosos o unicelulares
sin movimiento propio.
 En ningún momento de su vida presentan
cilios o flagelos. Tampoco se ha encontrado
otro movimiento como reptación o
deslizamiento.
 Tienen reproducción sexual y asexual.
 La reproducción asexual se da a través de la
esporulación, a través de la fragmentación
de estructuras celulares, a través de la
gemación.
 Son organismos cuya célula siempre tiene
pared celular en cuya composición existe
quitina pero nunca celulosa.
 Antiguamente se consideraban como
hongos a los grupos llamados mixomicetos,
oomicetos y chitridiomicetos.
 Los mixomicetos, parte de su ciclo de vida
tiene forma de ameba sin pared celular.
Tiene movimiento pseudopodialy nutrición
endocitócica. Durante su reproducción
sexual forman células con paredes que
presentan celulosa.
 Los oomicetos tienen pared celular con
celulosa. Tienen flagelos.
 Chitridiomicetos presentan esporas
flageladas. Si se considera dentro del reino
fungi.
La hifa y el micelio
 Los hongos filamentosos forman
estructuras tubulares y ramificadas
llamadas hifas. Al conjunto de hifas se le
llama micelio.
Las hifas son estructuras alargadas y
continuas (aseptadas), otras son
interrumpidas por septos (septadas).
 De todos los hongos los zigomicetos tiene
hifas aseptadas.
 Las hifas se originan a partir de una espora,
de fragmentos de hifas o de otras estructuras
reproductivas mediante extensión o
crecimiento apical.
 La hifa constituye la unidad fisiológica y
morfogenética (en hongos filamentosos).
Realiza todas las actividades metabólicas y
nutricionales que sustentan el crecimiento
de todos los organismos (hifa vegetativa).
Diferenciaciones nutricionales
A) Anillos constructores: Son de especies que
atrapan nemátodos y se nutren de ellos.
Estan formados por tres células
osmosensibles.
B) Nudos adhesivos: su función es la de atrapar
nemátodos. Están cubiertas con un material
adhesivo.
C) Redes adhesivas: Son ramificaciones de
una hifa que se unen formando varios
orificios revestidos de material adhesivo.
D) Apresorium: Son dilataciones de la pared
fuertemente unidas a la superficie del
sustrato (plata o animal) a partir de los
cuales proyectan hifas invasivas
(intracelular).
E) Haustorio: Son hifas que se proyectan y
ramifican en el interior de la célula de la
planta hospedera y que permite nutrirse al
hongo a partir de los componentes
citoplasmáticos.
F) Rizoide: Se fija en el sustrato y absorbe
nutrientes.
Diferenciaciones de resistencia
Se forman frente a condiciones ambientales
adversas. Forman estructuras de conservación.
A) Clamidospora: Son células intercalares o
terminales que engrosan su pared
individualizándose. Resisten condiciones
ambientales extremas.
B) Rizomorfos: Son cordones gruesos
constituidos por hifas paralelas que pierden
su individualidad y se cubren de una corteza
gruesa y dura.
C) Esclerotes: Son estructuras globulares
muchas veces macroscópicas formado por
hifas que constituyen un pseudotejido.
Están revestidos de una corteza gruesa y
dura. Presentan un alto contenido de
melanina.
Diferenciaciones reproductivas
Las hifas vegetativas dan lugar a estructuras
reproductivas sexuales y asexuales.
Asexuales: Esporangióforos (zigomicetos) y
Conidióforo. Estas estructuras sobresalen del
sustrato en el cual el hongo está creciendo.
Ejemplo: rhizopus sp

Crecimiento del micelio
El crecimiento de las hifas se da por extensión
apical, debido a la síntesis y descomposición de
los componentes de la pared celular.
Este crecimiento proporciona una gran
capacidad de penetración en el sustrato
(estructuras sólidas como el suelo).
Sustrato sólido: Cuando una espora o un
fragmento de hifa se coloca en un sustrato
sólido se produce la germinación de un tubo
germinal y luego de un tiempo se observa que
el micelio se dispone de una manera circular
(colonia).
Medio líquido:
 Sin agitación: el crecimiento es tal cual como
en un medio sólido.
 Con agitación: sep puede encontrar dos tipos
de comportamiento de crecimiento. En un
caso se da un crecimiento micelar amorfo o en
malla. Otros hongos tienen un crecimiento en
esferas (pellets).
Dimorfismo
Varios hongos presentan la capacidad de
cambiar de forma según las condiciones
ambientales imperantes. A esta característica se
le denomina dimorfismo.
Especies filamentosas dimórficas pueden
cambiar a una forma unicelular. Ejemplo:
levadura → levaduriforme (unicelular).
Especies levaduriformes pueden cambiar a una
forma filamentosa.
Las bases moleculares de este dimorfismo no es
muy conocido, solo se conocen las causas
medioambientales que la inducen.
Para que Mucor sp cambie de filamentoso a
levaduriforme, siempre se requiere de una
hexosa fermentable para el crecimiento
levaduriforme. La anaerobiosis generalmente
favorece el crecimiento de levaduras. La
aerobiosis induce el crecimiento micelar.
En otro género de hongos es la presión parcial
de oxígeno/CO2 la que determina el cambio de
forma.
Las hifas de Mucor sp tienen una mayor
proporción de quitina y quitosanos, mientras
que la levadura contiene más mananos y
proteínas.
Estructura celular
A) Vacuolas: Son reservas de grasas,
proteínas, aminoácidos y carbohidratos.
B) Mitocondria: Genera energía en la célula
mediante el ciclo de Krebs. Ocurren
reacciones biosintéticas (sintetiza arginina).
C) Cuerpos de Golgi (Dictiosomas): Síntesis
de polisacáridos, incorporación de fracción
sacárida de glicoproteínas.
D) Lisosomas: Almacén de enzimas
digestivas, degrada sustancias de desecho
de la célula.
E) Microcuerpos: Tenemos dentro a los
glioxisomas y peroxisomas, que esté
presente en los hongos.
F) Microtúbulos: Formados por tubulina como
proteína que se disponen a lo largo de la
hifa, estos microtúbulos conducen las
corrientes citoplasmáticas hacia el ápice.
También participa en la división celular
orientando la dirección de cromosomas.
G) Microfilamentos y microfibrillas:
Formados por actina, miosina y proteínas
relacionadas. Junto con los microtúbulos
participan en la migración de túmulos
mediante la formación.
Las microfibrillas se encuentran en mayor
proporción en el núcleo de las hifas.
H) Retículo endoplasmático: Tenemos
R.E.rugoso y R.E.liso. Con funciones
similares al de otras células eucariotas,
participa en el transporte celular.
I) Cuerpos vesiculares: Estos están
relacionados funcionalmente a la extensión
aplical y a la formación de la pared.
Estos cuerpos vesiculares pueden ser
macrovesículas y microvesículas (se
derivan de dictiosomas y contiene formas
zimógenas de la quitina sintetasa).
Las microvesículas pueden ser estados
morfológicos de los quitosomas.
J) Lomasomas: Son vesículas membranosas
localizadas entre la pared y la membrana
plasmática. Participa en la formación de
material de la pared y particularmente sobre
el engrosamiento secundario de la hifa.
K) Cuerpos de Woronia: Relacionados a los
microcuerpos de los cuales se originan.
Participan en la oclusión de los poros septos
y juega un papel importante en la protección
de las hifas cuando estas se rompen.
Pared celular
Tiene una composición diferente al de los
hongos y vegetales.
Confiere forma a la célula.
Es una estructura altamente dinámica y está
sujeta a cambios y modificaciones en los
diferentes estados de crecimiento.
Composición:
 Principalmente está formado por
polisacáridos (homopolisacáridos y
heteropolisacáridos).
 Algunos hongos presentan proteínas en
grandes cantidades, unidas a polisacáridos
(glicoproteínas).
 Lípidos y melaninas son componentes
menores.
 De acuerdo a su función los polisacáridos se
dividen en dos grupos:
a) Polisacáridos estructurales: Formados
por homopolisacáridos (homopolímero)
insolubles en agua. Son altamente
cristalinos. Ejemplo: quitina, glucano-R
b) Polisacáridos de la matriz: Son amorfos
o ligeramente cristalinos, y generalmente
son solubles en agua.
Compuestos macromoleculares de las paredes
de los hongos
A) Compuestos misceláneos:
Quitosanos: Homopolímero  -1,4 de la D-
glucosamina, polímeros de D-
galactosamina, proteínas, melaninas y
lípidos.
B) Compuestos de matriz:
 -glucanos: Homopolímeros  -1,3 de
glucosa (glucanos).
Glucanos:  -1,3 y  -1,4
Glicoproteínas: Proteínas unidas a manona
y a otros polisacáridos.
C) Elementos de estructura:
Quitina: Homopolímero  -1,4 de N-
acetilglucosamina.
 -glucanos: Homopolímeros  -1,3
formado por D-glucosa con enlaces  -1,3
y  -1,6 (glucano-R).
Levaduras (hemiascomicetos y B) Biosíntesis de glucano: La síntesis de
hemibasidiomicetos)
 Su pared consiste principalmente de  -1,3
glucanos con enlaces espaciados  -1,6. las
ramificaciones disminuyen la cristalinidad
de la molécula.
 La quitina está presente solo en zonas de
separación entre células madre e hija.
Filamentosos
Todos tiene quitina (altamente cristalina, por lo
tanto, insoluble en agua) junto con glucano  -
1,3 como principales componentes
estructurales.
Polisacáridos de la matriz
 Levadura: formados por complejos de
mananos y proteínas (forman
manoproteínas).
 Hongos filamentosos: formados por
glucanos  -1,3 con ramificaciones  -1,4
son solubles en agua.
 Zigomicetos: tienen quitosanos.
Biosíntesis de la pared
 El crecimiento de la hifa se produce
apicalmente debido a que la biosíntesis de
la pared y la membrana plasmática que
presentan está creciendo.
 El componente estructural más importante
en la pared celular de hongos es la quitina
que se forma con la N-acetilglucosamina.
 La quitina sintetaza une las N-
acetilglucosamina y forma la quitina.
 La polimerización se produce en interfase
membrana plasmática-periplasma.
 La quitina sintetaza se produce como
zimógeno en el R.E.rugoso y luego se
transporta a los dictiosomas, saliendo luego
contenida en las macrovesículas a partir de
las cuales se producen las quitosomas
(microvesículas) que se concentran en el
ápice formando el cuerpo apical.
 Las microvesículas o quitosomas se
fusionan con la membrana plasmática
donde la quitina sintetaza se activa
mediante proteólisis parcial.
Biosíntesis
A) Biosíntesis de quitina
glu cos a  6  P  fructosa  6  P  glu cos a min a  6  P
 N  aceti lg lu cos a min a  P  UTP
N  aceti lg lu cos a min a  ( N  aceti lg lu cos a min a)n
 ( N  aceti lg lu cos a min a)n  1
glucano implica la activación de  -glucosa
o  -glucosa en UDP-glucosa. Luego se
polimeriza por  -1,3 glucano sintetaza o
por la  -1,4 sintetaza.
UDP  glu cos a  ( glusa min a)n  UDP
C) Biosíntesis de manano
Reproducción asexual
Durante el ciclo de vida de los hongos el estado
genético de preponderancia es haploide. En este
estado algunos se reproducen por
esporogénesis.
A) Esporogénesis: Una hifa se diferencia en
esporangióforo a partir del cual se forma un
saco llamado esporangio
B) Conidiogénesis: el conidióforo da lugar a
conidiosporas libres, los cuales pueden ser
unicelulares o multicelulares.
C) Gemación: La levadura se reproduce
asexualmente por gemación.
D) Fisión: Implica la formación de dos células
mediante la formación de un septo, dando
lugar a las estructuras artrosporas.
Reproducción sexual
Ocurre en un período corto en el ciclo de vida
de los hongos. Implica participación de gametos
(hifas haploides).
A) Plasmogamia: Fusión de gametos para dar
lugar a una célula heterocarionte
B) Cariogamia: Fusión de núcleos haploides
para dar lugar a una estructura diploide.
C) Meiosis: Se produce la recombinación y da
lugar a núcleos haploides.
D) Segregación: De dos núcleos haploides
obtenidos.
Para que ocurra la reproducción sexual, implica
participación de sustancias que posibilitan la
reproducción como es la feromona (de hifas
opuestas).
En la reproducción sexual se habla de especies
heterotálicos (las estructuras sexuales
provienen de dos individuos diferentes) y
homotálicos (las estructuras sexuales se
encuentran en el mismo individuo).
Clasificación de hongos
La clasificación de los hongos se realiza
principalmente por el tipo de estructura sexual
(división), por las variaciones de las estructuras
sexuales y por el tipo de reproducción asexual
(especies). Además se toma en cuenta la
composición de la pared celular, características
moleculares especiales y el contenido de
guanina-citocina y secuencia de DNA.
El reino fungi incluye cuatro divisiones:
Zygomycota, Ascomycota, Basidiomycota,
Chitridiomycota, Deuteromycota (artificial o
fungi imperfecti porque no se le conoce alguna
reproducción sexual).
A) Zygomycota: Grupo de hongos cuya forma
de reproducción sexual es por fusión
completa de gametangios dando lugar a
zygosporas. La reproducción asexual es
mediante esporangiosporas. Tiene hifas
aseptadas y algunas especies son
dimórficas. Son exclusivamente terrestres y
algunos son parásitos de animales y plantas.
Otros tienen usos en biotecnología
industrial.
Ejemplos: Rhizopus sp, Mucor sp, Absidia
sp
B) Ascomycota: Presentan un micelio formado
por hifas septadas. La reproducción asexual
es por conidiosporas, por yemas, por
artrosporas. Su reproducción sexual se
realiza por la formación de esporas dentro
de una estructura de forma de bolsa o saco
llamados ascas.
Ejemplos: Talloromyces sp, Eurotium sp,
Saccharomyces sp, Neurospora
C) Basidiomycota: Presentan especies
miceliares y algunas unicelulares. Se
reproducen asexualmente por
conidiosporas, por yemas. Su reproducción
sexual es por basidiosporas que se producen
sobre estructuras llamadas basidias.
Ejemplos: Agaricus bisporus
(champiñones), Amanita muscaria (hongos
venenos)
Patógenos: royas (Uredinales), tizones
(Ustilaginales) y destructores de madera
(Phomes).
Simbiontes: ectomicorrizas (B. aletus)
Comestibles: champiñones
D) Chytridiomycota: Existe una considerable
variación en la morfología y ecología de
este grupo. Algunos son de agua, algunos
marinos, algunos son parásitos de plantas y
de dípteros, mientras que otros viven en
plantas muertas y partes de insectos.
Algunos son unicelulares y otros producen
micelio con hifas cenocíticas. Presentan
gametos flagelados. Dos ejemplos de
importancia: Synchitrium endobioticum,
Alcomyces (produce la sarna de la papa).
NUTRICION
Nutrientes
Son productos químicos exteriores a partir de
los cuales se forma o se construye una célula.
Estos nutrientes son tomados por la célula y
transformados en constituyentes celulares
(anabolismo).
El anabolismo es un proceso por el que una
célula se construye a partir de nutrientes simples
tomados del medio exterior, requiere energía.
Esa energía se obtiene también de su entorno (la
luz y componentes químicos).
Esta oxidación de compuestos químicos se
denomina catabolismo (ruptura de moléculas
orgánicas grandes en constituyentes más
simples, libera energía).
Tipos nutricionales
A los microorganismos se los agrupa en clases
metabólicas, dependiendo de la fuente de
energía que utilicen. “Trofo” significa
alimentarse.
A los microorganismos también se los puede
agrupar en clases nutricionales de acuerdo a
cómo satisfacen sus requerimientos de energía,
H+/e- y carbono.

Fuente de Tipo Donador H+/e- Tipo Fuente de C Tipo

energía
Luz Fotótrofos Moléculas Litótrofos CO2 Autótrofos
inorgánicas
reducidas
Oxidación de Quimiótrofos Moléculas Organótrofos Moléculas Heterótrofos
compuestos orgánicas orgánicas
químicos reducidas
(productos preformadas
químicos), de otros
oxidación de organismos
compuestos
orgánicos e
inorgánicos

De acuerdo a su fuente primaria de obtención de nutricional más numeroso en

energía, fuente carbonada y H+/e-, a los
microorganismos se los puede considerar en
uno de los cuatro siguientes tipos nutricionales:
A) Fotolitotrófico autótrofo: También
llamados fotoautótrofos. Estos organismos
utilizan como fuente de energía la luz, como
fuente de carbono al CO2 y utilizan como
donador de H+/e- a las moléculas
inorgánicas reducidas. Las algas y
cianobacterias emplean al agua como
donador de electrones, liberando oxígeno.
Las bacterias púrpuras y verdes del azufre
utilizan ácido sulfídrico (H2S), hidrógeno o
azufre elemental como donador de H+/e-.
Estas bacterias no oxidan el agua, por lo
tanto, no liberan oxígeno al ambiente.
B) Fotolitotrófico heterótrofo: Es un grupo
menos abundante. Utilizan como fuente de
energía la luz, como donador de H+/e- a
moléculas inorgánicas y como fuente de
carbono a las moléculas orgánicas.
Ejemplo: bacterias fotosintéticas púrpuras
no sulfúreas. Estas habitan lagos
contaminados y afloramientos naturales de
agua.
C) Quimiolitotrófico autótrofo: Grupo que
oxida compuestos inorgánicos reducidos
como el Fe, H o moléculas de azufre para
obtener energía y electrones para la
biosíntesis. Utilizan el CO2 como fuente de
carbono.
D) Quimioorganotrófico heterótrofo: También
se le llama quimioheterótrofo. Es el grupo
representantes.
Utilizan compuestos orgánicos como fuente
de energía, fuente de carbono y fuente de
H+/e-.
Los representantes de este grupo son la
mayoría de bacterias no fotosintéticas,
hongos, microorganismos patógenos.
Algunas bacterias se les conocen como
mixotróficas. Presentan flexibilidad metabólica
como respuesta a cambios ambientales
marcados.
Ejemplo: muchas bacterias púrpuras no
sulfúreas actúan como fotolitotrófico
heterótrofos en ausencia de oxígeno, pero
oxidan compuestos orgánicos como
quimiótrofos en niveles normales de oxígeno.
Requerimientos nutricionales
Los nutrientes requeridos por los
microorganismos pueden ser divididos en dos
grupos: macronutrientes y micronutrientes.
A) Macronutrientes: Son los que se requieren
en grandes cantidades. Ejemplo: carbono
(necesario para el esqueleto carbonado de
las moléculas orgánicas). Se utiliza en
forma inorgánica como CO2 en organismos
autótrofos.
El nitrógeno es un componente mayoritario
de proteínas y ácidos nucleicos. Se
encuentra en la naturaleza en su forma
orgánica e inorgánica (NH3, NO3, N2).
 El fósforo se encuentra en la naturaleza en
forma de fosfatos. Se utiliza para la síntesis
de ácidos nucleicos y fosfolípidos.
El azufre es un elemento estructural en los
aminoácidos cisteina y metionina. También
está presente en vitaminas como la tiamina,
biotina.
La mayor fuente de azufre celular proviene
de fuentes inorgánicas ya sea bajo la forma
de sulfatos o sulfuros.
El potasio está presente en una gran
diversidad de enzimas como aquellas que
participan en la síntesis de proteínas.
El magnesio estabiliza los ribosomas, las
membranas celulares, los ácidos nucleicos
y se requiere también para la actividad de
muchas enzimas (activador enzimático).
El calcio ayuda a estabilizar la pared celular
bacteriana y juega un papel importante en la
termoresistencia de las endosporas.
El sodio es requerido por algunos
microorganismos. Se debe a la naturaleza
química de su habitad.
El hierro juega un papel importante en la
respiración celular. Forma parte de la
estructura de los citocromos y de las
proteínas que contienen hierro y azufre
implicados en el transporte de electrones.
Muchas bacterias producen agentes que
unen hierro de manera muy específica,
denominadas sideróforos (solubilizan las
sales de Fe, transportándolos al interior de
las células).
Ejemplo: E. coli, Salmonella, entre otras
bacterias entéricas.
B) Micronutrientes: También llamados
elementos traza. Las células los requieren
en pequeñas cantidades. Son metales
muchos de los cuales forman parte de las
enzimas.
Factores de crecimiento
Son compuestos orgánicos que al igual que los
micronutrientes se requieren en pequeñas
cantidades y solo por algunas células.
Tenemos a las vitaminas, aminoácidos,
purinas y pirimidinas.
Los más usados son las vitaminas que forman
parte de las coenzimas. Hablamos de la
tiamina, biotina, piridoxina, cobalamina.
Otros compuestos
CO2: Es considerado un macronutriente ya
que ciertos microorganismos requieren de
mayor presión de CO2 para crecer.
Ejemplo: Neisseria sp, Brucella,
Compylobacter (5-10 % CO2 en la atmósfera)
Oxígeno: También considerado
macronutriente.
Hablamos de los aerobios, los anaerobios
(facultativos, aerotolerantes y estrictos) y
microaerófilos.
Los anaerobios facultativos no requirieren
oxígeno para su crecimiento, pero pueden
crecer bien en su presencia. Ejemplo: E. coli
Los anaerobios aerotolerantes ignoran el
oxígeno y crecen igual en su presencia.
Ejemplo: Streptococcus
Los anaerobios estrictos no toleran el oxígeno
y mueren en su presencia. Ejemplo:
Clostridium sp, bacteroides
Los microaerófilos resultan dañados por la
presencia de oxígeno en la atmósfera. Con 2-
5% de oxígeno pueden vivir.
Hidrógeno:
 Limitados a bacterias litótrofas que utilizan
el H2 como fuente de energía.
 La concentración de H2 es importante en
términos de pH.
 Cada organismo tiene un pH óptimo de
crecimiento: acidófilos (1.1-5.0),
neutrófilos (5.5-8.0) y alcalinófilos (8.5-
11.5).
 Las bacterias son consideradas como
neutrófilas. Mientras que los hongos son
acidófilos.
 Las diferencias de potencial electroquímico
(pH externo y pH interno) es utilizado por
la bacteria para obtener energía bajo la
forma de ATP. Ejemplo: Thiobacillus
ferrooxidans tiene un pH interno de 6 pero
el pH externo en que habita es de
aproximadamente 2.
Requerimientos de agua
La disponibilidad de agua depende de 2
factores:
A) Factor de adsorción: La cantidad de agua
disponible para los microorganismos se ve
influenciada por la absorción a la superficie
de sólidos (efecto mátrico)
B) Factor de solución: Se da por interacción
con moléculas de soluto (efecto osmótico).
El grado de disponibilidad de agua se expresa Tipos:
cuantitativamente como actividad de agua  Psicrófilos:
(Aw). Tº mínima = 0 ºC
pa Tº óptima = 15 ºC
Aw  Tº máxima = 20 ºC
po
Ejemplo: Flavobacterium,
Pa: Presión de vapor de la solución
Pseudomonas sp
Po: Presión del agua pura
 Mesófilos: Presentes en animales de
sangre caliente y en entornos terrestres
La actividad de agua también se estima
y acuáticos, en las latitudes templadas y
midiendo la humedad relativa.
tropicales
HR
Aw  Tº mínima = 15-20 ºC
100 Tº óptima = 20-40 ºC
Tº máxima = 45 ºC
La actividad de agua es inversamente Ejemplo: E. coli, Bacillus,
proporcional a la presión osmótica. Staphylococcus.
 Termófilos: En entornos
Staphylococcus aureus es una bacteria que excepcionalmente fríos o calientes. En
crece en un medio con gran concentración de sal los manantiales calientes se encuentran
(presión osmótica externa = presión osmótica termofílicos extremos, en los conos
interna) → osmotolerante. volcánicos de los mares profundos, en
los géiseres.
Los osmotolerantes son bacterias que crecen en Tº mínima = 45 ºC
un amplio rango de actividad de agua. Tº óptima = 50-65 ºC
Sacharomyces → Aw = 0.6 Tº máxima > 55 ºC
Aspergillus → Aw = 0.8
Bacterias → Aw = 0.58 B) Radiación: Se refiere a aquella fuente de
Halofilos → Aw = 0.7 energía que son transmitidos de un lugar a
otro a través del aire o espacio externo.
Los halófilos están adaptados completamente a Dentro de las radiaciones que tienen interés
condiciones salinas, requieren altos niveles de biológico están: electromagnéticos,
NaCl en su medio para crecer. Ejemplo: ionizantes.
Halobacterium sp (3-6molar) Electromagnéticos: dentro de esta tienen
efecto la UV, la radiación visible, IR.
Requerimientos físicos La UV (10-300nm) tiene una acción letal
A) Temperatura: Conforme aumenta la sobre los microorganismos.
temperatura las reacciones químicas y Radiación visible (380-760nm):
enzimáticas en la célula tienen lugar a beneficioso para organismos vivos que
velocidades más rápidas. constituyen su fuente de energía para la
Más allá de cierta temperatura las proteínas, fotosíntesis.
ácidos nucleicos y otros componentes Radiaciones ionizantes: tienen longitudes
celulares se vuelven sensibles a estas de onda más cortas que la luz visible y
temperaturas elevadas y pueden inactivarse mucho más energía. Ejemplo: rayos X,
en forma irreversible. energía tan grande que causa iotización de
Cada microorganismo tiene una átomos y radicales químicos. Puede causar
temperatura mínima (por debajo del cual no mutación y muerte celular. Efectos: ruptura
tiene lugar la proliferación), temperatura de enlaces puente de hidrógeno, destrucción
óptima (el crecimiento es más rápido) y de estructuras anilladas, polimerización
temperatura máxima (por encima del cual anormal de moléculas, destrucción del
no existe crecimiento). DNA.
La desnaturalización puede ser reversible o
irreversible, dependiendo de las C) Presión: La gran mayoría de
condiciones de la desnaturalización. microorganismos viven a una presión de 1
Las bajas temperaturas congelan las atmósfera.
membranas y afectan el transporte de Los efectos de la alta presión en
nutrientes, transporte de protones, entre microorganismos no tolerantes:
otras cosas que inactivan a la bacteria.  Afecta la síntesis de las proteínas.
  Afecta la actividad enzimática.
 Afecta el transporte de membrana.
En las profundidades del mar la presión
llega a 1100 atmósferas.
Microorganismos barotolerantes: Crecen a
presiones por encima de lo normal mas no
en extremas. Pueden crecer y adaptarse a
ese medio.
Microorganismos barofílicos: Crecen
rápidamente en presiones de entre 500-600
atmósferas. Ejemplo: bacterias que crecen
en los intestinos de invertebrados que viven
en mares profundos.

Términos usados para describir las relaciones del O2 con los microorganismos.

Grupo Ambiente Efecto O2

Aerobio Anaerobio
Aerobio obligado Crecimiento No hay crecimiento Requerido (utilizado
para la respiración)
Microaerófilo No hay crecimiento Requerido pero a
niveles debajo de 0.2
atmósferas
Anaerobio obligado Crecimiento si el nivel Crecimiento Tóxico
(estricto) no es demasiado alto
Anaerobio facultativo Crecimiento Crecimiento Crecimiento pero
utilizado cuando está
disponible
Anaerobio Crecimiento Crecimiento No requerido y no
aerotolerante utilizado

METABOLISMO Celulasa (endogluconasa, exogluconasa y  -

gluconidasa)
Definición Oxidación
Conjunto de reacciones químicas que tiene Es la perdida del electrón en una sustancia.
lugar en la célula. Las reacciones químicas son
posibles ya que están presentes las enzimas. Reducción
Conjunto de todas las reacciones enzimáticas Químicamente se define como la ganancia de un
que tienen lugar en la célula. electrón o electrones.

Enzima Transportadores de electrones

La mayoría son proteínas que actúan en
moléculas específicas. Disminuyen la energía
de activación de las reacciones químicas.
Algunas enzimas necesitan además un cofactor
para su activación.
Es un biocatalizador de naturaleza proteica.
Las ribozimas son enzimas pero no son de
naturaleza proteica.
Características
 Disminuyen la energía de activación y
aumentan la velocidad de reacción.
celulosa  NaOH  H 2 SO4 121
ºC glu cos a
*2 h
celulosa  celulasa  glu cos a
 Son específicas.
almidón  amilasa  maltosas  dextrinas  glu cosEsas una vía bioquímica común para la
H 2O2  catalasa  H 2O  O2 
 Especificidad absoluta de sustrato.
 Especificidad relativa de sustrato.
NAD+: nicotinamida adenin dinucleótido
NADP+: nicotinamida adenin dinucleótido
fosfato
Estas coenzimas siempre transfieren dos átomos
de hidrogeno al próximo transportador de la
cadena. Tal transferencia se conoce como
deshidrogenación.
S + E + NAD+→ Soxidado + E + NADH+H
Cofactor
Ion metálico: Fe, Mg (catalasa-Fe)
Molécula orgánica o coenzima (hidrogenasas)
Degradación de carbohidratos
Sistema de Embden-Meyerhoff-Parnos
degradación de la glucosa (glucólisis).
La glucólisis se divide en tres etapas.
ETAPA I: Sucede una serie de arreglos
preparatorios en donde no existe reacciones de
oxido-reducción. No hay liberación de energía
y se forman dos moléculas de gliceraldehido-3- Succinil-CoA → anillos porfirínicos de
fosfato a partir de una molécula de glucosa. citocromos y clorofilas.
ETAPA II: Si ocurre una reacción de oxido- Oxalacetato → fosfoenolpiruvato.
reducción se producen enlaces de alta energía Acetil-CoA → síntesis de ácidos grasos.
en forma de ATP a la vez que se originan dos
moléculas de piruvato. Por lo tanto, el ciclo de Krebs juega dos papeles
ETAPA III: Tiene lugar un segunda reacción de importantes: bioenergética y biosintética.
oxido-reducción así como productos de
fermentación (etanol y CO2; acido láctico). Glucosa
↓
Glucosa Piruvato
↓ ↓
Glucosa-6-P
↓ Acetil-CoA
Fructosa-6-P ↓
↓
Fructosa-1,6-bisfosfato
Oxalacetato
↓
Gliceraldehido-3-P Citrato
↓
1,3-difosfoglicerato Malato
↓
3-fosfoglicerato
↓ Isocitrato
Fosfoenolpiruvato Fumarato
↓
Piruvato
↓ -cetoglutarato
Acetaldehído + CO2
↓ Succinato
Etanol NAD+
Respiración aeróbica ↓
Proceso por el que un compuesto se oxida Flavoproteinas
utilizando al O2 como aceptor final de ↓
electrones. CoCl
C6H12O6+6O2 → 6CO2+6H2O+ATP+686Kcal ↓
Citocromo b
En las células eucariotas la glucólisis se realiza ↓
en el citoplasma, el ciclo de Krebs y la cadena Citocromo c
transportadora de electrones de realizan en las ↓
mitocondrias. Citocromo a
En las células procariotas la glucólisis, el ciclo ↓
de Krebs y la cadena de transporte de electrones 1/2O2 + 2H2 → H2O
se realiza en las invaginaciones de la membrana
interna de las bacterias. Producción de ATP en respiración celular
Producción neta glucólisis → 2 ATP
Ciclo de Krebs Oxidación de dos gliceraldehido-3-P → 6 ATP
El piruvato es completamente oxidado hasta Oxidación por NAD+
CO2. El piruvato es descarboxilado  dos ácidos piruvicos
produciéndose NADH+H y acetil-CoA. El
 dos isocitratos → 24 ATP
grupo acetilo del acetil-CoA se combina con el
 dos  -cetoglutaratos
oxalacetato dando origen al citrato.
 dos malatos
Biosíntesis y ciclo de Krebs Oxidación por FAD+
Además de jugar un papel central en las  dos succinatos → 4 ATP
reacciones catabólicas el ciclo de Krebs es Conversión de dos  -cetoglutaratos a dos
importante para la célula por las reacciones succinatos → 2 ATP
biosintéticas. Así el  -cetoglutarato y
oxalacetato son precursores de varios Fuerza protón motora (teoría quimiosmótica de
aminoácidos. Mitchell)
El resultado neto es la generación de un  Bacillus subtilis
gradiente de pH y un potencial electroquímico a  E. coli
través de la membrana con la parte interna  Leuconostoc mesenteroides
cargada negativamente y la parte externa  Streptococcus faecalis
cargada positivamente.
Esta gradiente causa un estado energético de la Glucosa
membrana y esta energía puede ser utilizada por ↓
la célula. Glucosa-6-P
Esta energía puede usarse en el desarrollo de un ↓
trabajo como el transporte de iones o en el 6-fosfogluconato
movimiento flagelar o puede utilizarse para ↓
formar enlaces de alta energía en forma de ATP. Ribulosa-5-P

ATP sintetasa o ATP-asa Ribosa-5-P Xilulosa-5-P

Enzima conformada por una cabeza F1 y una
cola F0. Este complejo multiproteico insertado ↓
en la membrana produce ATP.
Trabajando unidireccionalmente, la ATP-asa Gliceraldehido-3-P Sedoheptulosa-7-P
cataliza la formación de ATP al permitir la
entrada controlada de protones a través de la ↓
membrana energetizada (fosforilación
oxidativa). Fructosa-6-P Eritrosa-4-P

Respiración anaeróbica ↓
Los aceptores de electrones pueden ser nitratos
(NO3-), ión férrico (Fe+3), sulfatos (SO4-2) y Fructosa-6-P Gliceraldehido-3-P
carbonatos (CO3-2).
Bacterias como las Pseudomonas y Bacillus
pueden usar el NO3- como aceptor final de Vía de Entner Doudoroff (EDP)
electrones, reduciéndolo a NO2- o a oxido La vía EDP es otra vía para la oxidación de
nitroso (N2O). glucosa a piruvato. Por cada molécula de
Otras bacterias como Desulfovibrio usan glucosa se producen dos moléculas de NADPH
sulfatos como aceptor final de electrones para para usarlo en reacciones biosintéticas.
formar acido sulfhídrico sulfuro de hidrogeno Las bacterias que presentan la vía EDP pueden
(H2S). metabolizar sin glucólisis ni la vía pentosa
Otras bacterias utilizan carbonatos como fosfato.
aceptor final de electrones para producir Las únicas bacterias que presentan la vía EDP
metano. son las del genero Rhizobium y Pseudomona.
Existen otros microorganismos escasos que Esta vía solo ocurre en procariotas.
utilizan compuestos orgánicos como aceptores
finales de electrones, como el ácido fumárico. Glucosa
↓
Alternativas de la glucólisis Glucosa-6-P
La glucosa es oxidada a acido fosfoglucónico o ↓
6-fosfogluconato como paso previo a la ruptura 6-fosfogluconato
de la molécula. ↓
2-ceto-3-desoxi-6-fosfogluconato
Vía de la pentosa fosfato ↓
Esta ruta opera simultáneamente con la ↓ ↓
glucólisis. Produce pentosas intermediarias Piruvato Gliceraldehido-3-P
importantes que actúan como precursores para ↓ ↓
la síntesis de ácidos nucleicos y ciertos Lactato o etanol Piruvato + ATP + NADH
aminoácidos. Es un medio importante para la
producción de NADPH que se utilizan en las (1) glucoquinasa
reacciones biosintéticas (ácidos grasos, (2) glucosa-6-P-deshidrogenasa
colesterol). (3) deshidrasa
Bacterias que utilizan esta vía: (4) 2-ceto-3-desoxi-6-fosfogluconato aldolasa

Fermentación alcohólica
La realizan tanto levaduras como bacterias.
En levaduras las cepas más comunes son de
Saccharomyces cerevisiae, Kluyveromyces
fragilis.
En condiciones aeróbicas y con grandes
concentraciones de sustratos (azúcares
fermentables) produce biomasa y no alcohol. En
condiciones anaeróbicas se produce menos
biomasa y el piruvato producido durante el
catabolismo es procesado por la piruvato
descarboxilasa a acetaldehído y CO2.
Glucosa
↓ forman como consecuencia de la degradación
Piruvato
↓ ácido-mixta y 2,3-butanodiol.
Acetaldehído + CO2
↓ ácidos en cantidades considerables (ácido
Etanol
Glucosa ------------- 2 piruvatos
Etanol -------------2 acetaldehídos
(1) piruvato descarboxilasa
(2) alcohol deshidrogenasa
Esta ruta metabólica es seguida por las
levaduras y por una única bacteria, Sarcina
ventriculi.
La bacteria Zymomona mobilis también produce
etanol, pero no por esta ruta. Esta bacteria
descompone la glucosa a través de la vía 2-ceto-
3-desoxi-6-fosfogluconato (KDPG).
Fermentación láctica
Las bacterias del ácido láctico son gram
positivas, son inmóviles y no forman esporas.
Estas bacterias no tienen porfidinas ni
citocromos, por lo tanto no realizan
fosforilación oxidativa. Obtienen su energía por
fosforilación a nivel de sustrato.
Todas estas bacterias crecen anaeróbicamente
pero también pueden comportarse como un
anaerobio aerotolerante.
Obtienen su energía a través del metabolismo de
los azúcares, por lo que están restringidos a un
hábitat rico en azúcares.
Existe un grupo de bacterias homofermentativas
que tienen un solo producto de fermentación, el
ácido láctico. Mientras que otro grupo de
bacterias heterofermentativas tiene además
otros productos como el etanol y el CO2.
Esta diferencia en la fermentación está dada por
la presencia o ausencia de la enzima aldolasa.
Los heterofermentativos carecen de la enzima
aldolasa, en cambio oxidan la glucosa-6-P a 6-
fosfogluconato que luego descarboxila para
producir pentosa fosfato. Estos a su vez se
rompen en triosa fosfato y acetil fosfato
mediante la enzima fosfocetolasa. Finalmente,
la triosa fosfato es convertida en lactato y el
acetil fosfato da origen al etanol.
Los homofermentadores producen 2 moles de
ATP y producen doble biomasa.
Fermentación ácido-mixta y fermentación 2,3-
butanodiol
Una manera de clasificar a las enterobacterias
es viendo los productos de fermentación que
anaeróbica de la glucosa. Se conocen dos rutas:
En la fermentación ácido-mixta se forman tres
acético, ácido láctico y ácido succínico).
Además se forma etanol, CO2 e hidrógeno, pero
no se forma butanodiol.
En la fermentación del 2,3-butanodiol se
forman cantidades menores de ácido y los
principales productos son el butanodiol, etanol,
CO2 e hidrógeno.
Otra diferencia, en la fermentación ácido-mixta
se forma igual cantidad de CO2 e hidrógeno,
mientras que en la fermentación 2,3-butanodiol
se produce más CO2 que hidrógeno.
Bacterias ácido-mixtas: E. coli, Salmonella,
Enterobacter cerratia.
Fermentación butírica
Los clostridios carecen de citocromos y de un
mecanismo de fosforilación oxidativa, por lo
tanto obtienen su ATP por fosforilación a nivel
de sustrato. Obtiene como producto principal
ácido butírico y algunos producen también
acetona y butanol.
La glucosa se convierte en piruvato siguiendo la
ruta glucolítica y el piruvato se separa en
acetilCoA, CO2 e hidrógeno. Luego este acetil
CoA se reduce a productos de fermentación
usando el NADH formado en la glucólisis.
Las proporciones de los diferentes productos
dependen de la duración y condiciones de
fermentación. En las primeras fases de la
fermentación los productos dominantes son los
ácidos butírico y acético. Al bajar el pH del
medio cesa la síntesis de ácido y empieza a
acumularse acetona y butanol (neutros).
Si se mantiene el pH alcalino con CO3Ca se
forman muy pocos productos neutros y la
fermentación producirá tres partes de ácido
butírico y dos partes de ácido acético.
Clostridium butiricum produce ácido acético, culturales (referido al cultivo) y a condiciones
ácido butírico, CO2 y H2. nutricionales (tasa carbono:nitrógeno).
Clostridium acetobutylicum produce más Los factores internos: capacidad metabólica.
acetona y butanol. Ejemplo: tiempo de generación para E. coli
Clostridium butylicum produce isopropanol a respecto a la temperatura
partir de acetona. Tº tg (min)
20 ºC 60
Fermentación de aminoácidos 30 ºC 29.7
Otro grupo de clostridios obtienen su energía 37 ºC 17.21
fermentando aminoácidos. 40 ºC 17
Algunas cepas no fermentan un único 45 ºC 30.34
aminoácido, sino pares de aminoácidos. En este 50 ºC No hay duplicación
caso un aminoácido funciona como donador de
e- y es oxidado mientras que el otro funciona Microorganismo tg
aceptor de e- y es reducido. A este tipo de Enterobacterias 15-30’
reacción acoplada se le conoce como reacción E. coli 17.21’
de Stickland. Ejemplo: Clostridium sporogenes
Nitrosomonas 5-10 horas
cataboliza una mezcla de glicina y alanina. Los
Bacterias lixicantes 2-7 días
productos de esa fermentación son NH3, CO2 y
un ácido carboxílico.
Crecimiento exponencial
Es el patrón de crecimiento de la población
CRECIMIENTO
microbiana en el cual el número de células se
duplica por cada unidad de tiempo.
La bacteria es considerada una maquinaria
El número de células se incrementa por un
biosintética que es capaz de duplicarse a si
factor constante por cada unidad de tiempo.
misma.

Crecimiento
Medida del crecimiento microbiano
Es el incremento ordenando de todos los
Se mide por el cambio sucesivo en el número de
constituyentes y estructura celular.
células o por el peso de la masa de la célula. Hay
varios métodos para contar las células o estimar
Crecimiento individual
su biomasa.
También llamado crecimiento celular es un
incremento en el tamaño y peso, y es
Recuento de células
usualmente un preludio a la división celular.
A) Conteo de células al microscopio: Se
emplea un dispositivo graduado con 25
Crecimiento poblacional
cuadrados de área y volumen conocido.
Se refiere al incremento en el número de células
Tenemos la cámara de Petroff Hausser,
como una consecuencia del crecimiento y
cámara de Neubauer, hemocitrómetro.
división celular.
Limitaciones: Es muy tedioso, no es
práctico para un gran número de muestras,
Tasa de crecimiento
no es muy sensible, se necesitan al menos
Es el cambio del número de células o masa por
106 bacterias para que sean observadas, no
unidad de tiempo. También llamado velocidad
distingue células vivas de muertas.
de crecimiento.
B) Conteo de células viables: Una célula viable
es definida como una célula que es capaz de
Generación
dividirse y formar una colonia en el medio
Es el intervalo para la formación de dos células
de cultivo. La técnica más utilizada es el
provenientes de una.
conteo en placas.
Tiempo de generación (tg)  Técnica por diseminación en placa o
Tiempo que tarda una población en duplicarse. siembra por extensión.
Varía ampliamente en los microorganismos.  Técnica por vaciado en placa o siembra
El tiempo de generación se ve afectado por por vertido en placa.
factores externos e internos.
Los factores externos: condiciones ambientales Medida de la masa celular
(pH, Aw, Tº, O2, CO2, luz y humedad) o
A) Peso seco: Se determina el peso seco de una
alícuota de la población separada por
centrifugación.
B) Turbidimetría: Se mide la turbidez en
unidades de absorbancia o transmitancia.
Otras técnicas:
Métodos Fundamento
Recuento en celda Conteo directo del Nº de células. Requiere células individuales y un medio
Recuento en placa Conteo del número de colonias. Requiere células individuales. Influencia de
Nifelometría Dispersión de la luz.
NMP Estadístico
Volumen Centrifugación
empacado
Físicos y químicos Variados, indirectos.
Balance de masa Conservación de la masa.
Ciclo del crecimiento poblacional
El crecimiento microbiano en el tiempo
describe una típica curva de crecimiento que
puede ser dividida en fases distinguibles. Son
fases características cuando se cultiva un
microorganismo por lotes (en un sistema
cerrado)
A) Fase de latencia (fase lag): Es una fase de
preparación y adaptación al medio. Su
duración depende del medio de cultivo y
estado fisiológico de la célula.
B) Fase de crecimiento exponencial (fase log):
Es el tipo de crecimiento de una población
donde el número de células se duplica cada
cierto tiempo. Una célula se divide para
formar dos células, cada una de las cuales
también se divide para formar dos células
más y así sucesivamente.
La mayor parte de los microorganismos
unicelulares crecen exponencialmente. La
velocidad exponencial varía mucho de un
microorganismo a otro. Ejemplo:
Salmonella Typhi crece con un tg de 20-30’
Mycobacterium tuberculosis con 1 o 2
duplicaciones / día
C) Fase estacionaria: El exponencial se detiene
porque los nutrientes indispensables se
agotan. No hay incremento o disminución
en el número de células o masa. Hay
limitación de nutrientes y acumulación de
sustancias tóxicas. Los microorganismos
son fisiológicamente activos y viables. Por
lo tanto, en un sistema cerrado no se pueden
llevar a cabo indefinidamente el
crecimiento exponencial.
Para esto se prepara una curva estándar para
cada microorganismo.
Observaciones
limpio.
las condiciones de incubación.
Requiere cultivo homogéneo y traslúcido.
Requiere células individuales y un medio
limpio.
Poco preciso.
Cambios en viscosidad, pH, análisis de
compuestos celulares.
Gran cantidad de datos analíticos.
D) Fase de muerte: Si la incubación continúa
después que una población alcanza la fase
estacionaria, las células pueden seguir vivas
y continuar metabolizando pero lo más
probable es que mueran. Si esto último
sucede, la población se encuentra en la fase
de muerte.
Si hacemos un conteo al microscopio este
permanece constante pero la viabilidad
disminuye porque la muerte se acompaña
de lisis celular lo que da a lugar la
disminución de la viabilidad.
E) Fase de crecimiento críptico: Unas células
de la población crecen y otras mueren,
equilibrándose los dos procesos no hay
incremento ni disminución en la cantidad de
células.
Efecto de la concentración de nutrientes en el
crecimiento microbiano
La concentración de nutrientes en un medio
determinado puede afectar a:
 La velocidad de crecimiento.
 Rendimiento del crecimiento de un
microorganismo.
[ ] nutrientes Velocidad de crecimiento
Muy bajas Se reduce
Moderadas y altas Máxima
Muy altas No se modifica
La dependencia de la tasa de crecimiento con la
concentración de nutrientes fue descrita por J.
Monod en 1950 y recuerda la cinética
enzimática establecida por la ecuación de
Michaelis & Menten.
 max[ S ]

Ks  [ S ]
Ks: Es la medida de la facilidad de consumo, es
decir, que tan metabolizable es un nutriente. Es
un valor que siempre se bajo.
Para alcanzar el  max → [S] > 10 Ks
Cultivo en lote (Batch, discontinuo)
Es el crecimiento de microorganismos en un
volumen fijo de nutrientes que continuamente
es alterado hasta su agotamiento por el
crecimiento. Se realiza sin intercambio de
materia con los alrededores.
Ventajas: Su simpleza, tanto de equipo como de
operación.
Desventajas: Falta de control sobre diversos
parámetros de cultivo. Las células se
desarrollan en un estado fisiológico poco
definido y cambiante.
Cultivo continuo
Es un sistema de flujo de volumen constante al
que se le agrega continuamente medio y del cual
sale un dispositivo que permite la eliminación
constante del medio excedente.
Este sistema se encuentra en equilibrio:
 El número de células.
Permanecen
 Estado nutritivo. constantes
Sistema se encuentra en un estado estable.
El dispositivo más frecuente para cultivo
continuo es el llamado quimiostato.
Quimiostato
Es el dispositivo comúnmente usado para
cultivo continuo.
Su diseño y manejo permite:
 El control de la densidad de la población.
 La tasa de crecimiento del cultivo.
Consiste en un tanque agitado que opera con dos
elementos de control:
A) La tasa de flujo.
B) La concentración de un nutriente limitante.
Los demás nutrientes en el medio se encuentran
en exceso y junto al nutriente limitante son
aportados al tanque continuamente desde un
reservorio, al mismo tiempo que se saca del
recipiente en exceso de organismos y del medio.
En el quimiostato, la tasa de crecimiento se
controla por:
 La tasa de flujo o la tasa de dilución
(velocidad a la que se bombea el medio en
el tiempo) mientras que la densidad de la
población está controlada.
 La concentración del nutriente limitante.
Si la tasa de dilución se incrementa y la
concentración de nutrientes es constante, la
densidad de la población es constante y la tasa
de crecimiento se elevará. El nutriente limitante
será completamente usado en estas condiciones.
Si la tasa de dilución se eleva muy alta, los
microorganismos pueden ser removidos en su
totalidad fuera del recipiente antes de que se
produzcan dado que la velocidad de flujo
superaría a la velocidad de crecimiento.
Cuando el sistema está en equilibrio, el número
de células (densidad de la población) y el estado
nutricional permanecen constantes, a esto se le
conoce como “estado estable” o “estado
sostenido”.
Fermentador continuo tipo tanque agitado
La fermentación continua permite un alto nivel
de productividad en términos de transformación
por unidad de tiempo y por unidad de volumen.
No obstante su difusión está restringida a un
grupo reducido de aplicaciones debido a los
siguientes obstáculos:
 Dificultad para mantener asepsia por largo
tiempo.
 Cambios genéticos de la cepa.
 Baja velocidad del bioproceso.
Ejemplos de aplicación: Tratamiento de
efluentes, producción de levaduras de
panadería, proteína unicelular, etanol, cerveza,
vino, ácido acético, selección de inóculos, etc.
Suposiciones generales:
 Mezcla perfecta.
 Flujo de entrada y salida iguales (F1=F0=F)
 Volumen de líquido en el biorreactor
(dv/dt=0)
 Temperatura, pH, velocidad de
transferencia de oxígeno, etc. constantes.

Control del crecimiento de microorganismos
Esterilización
Es el proceso de destrucción de toda forma de
vida microbiana en un objeto o material.
Desinfección
Es el proceso de destrucción de patógenos
vegetativos pero no necesariamente de
endosporas.
Un desinfectante es un químico aplicado a un
objeto que tiende a reducir el crecimiento
microbiano, pero no esteriliza.
Antisepsis
Desinfección química de la piel, mucosas u otro
tejido vivo, es una forma específica de
desinfección.
Microbicida o germicida
Es un agente químico que mata microbios pero
no necesariamente sus estructuras de
resistencia.
Bacteriostasis
El crecimiento microbiano y su multiplicación
se inhiben sin causar su muerte. Ejemplo:
refrigeración, colorantes.
Asepsis
Es la ausencia de microorganismos de un objeto
o área. Las técnicas de asepsia se diseñan para
prevenir la entrada de patógenos. Ejemplo:
filtración de aire.
Sanitización
Es la reducción de patógenos para asegurar los
niveles de salud pública en utensilios de comida
mediante limpieza mecánica o uso de químicos.
Agentes antimicrobianos
Agentes físicos:
A) Calor: Produce desnaturalización de
enzimas, proteínas, ácidos nucleicos, etc.
 Por calor húmedo: Con vapor a través
del autoclavado.
 Por calor seco: Flameo directo,
incineración, aire caliente.
 Pasteurización: Tratamiento con calor a
72 ºC / 15 segundos para eliminar
patógenos en leche, cremas y bebidas
alcohólicas, luego se baja la
temperatura bruscamente.
B) Filtración: Utiliza una membrana que
retiene microorganismos.
C) Baja Tº: Por refrigeración. El
congelamiento (-50 - -95 ºC) es efectivo
para evitar el desarrollo de
microorganismos. Con la liofilización el
agua se elimina por presión a baja
temperatura, es el método más efectivo para
conservar cultivos bacterianos por largo
tiempo.
D) Desecación.
E) Presión osmótica.
Agentes químicos:
A) Fenol y derivados fenólicos: Produce
ruptura de membranas celulares,
desnaturaliza proteínas y enzimas. Actúa
como desinfectante y antiséptico.
Los derivados fenólicos se utilizan en
superficies variadas como piel y mucosas.
Ejemplo: hexaclorofeno
B) Halógenos: Actúan como agentes oxidantes
que alteran los componentes celulares.
Ejemplo: yodo, cloro.
El yodo inhibe la función proteica y es un
agente oxidante poderoso. Se usa como
antiséptico en forma de tintura de yodo o
alcohol yodado.
El cloro forma ácido hipocloroso y actúa
como agente oxidante. Básicamente para
desinfección de utensilios y agua.
C) Alcoholes: Tienen efecto bactericida y
fungicida en exposición prolongada. No son
efectivos contra endosporas. Ejemplo:
etanol, alcohol isopropílico.
D) Metales pesados: Desnaturalizan enzimas,
precipitan enzimas. Actúan como
microbicidas o antisépticos. Ejemplo:
nitrato de plata (NO3Ag), mercurio, cromo.
Agentes surfactantes:
A) Jabones y detergentes: Tienen efecto
mecánico removiendo microorganismos.
Algunos tienen agentes químicos como
triclorocorban.
B) Ácidos orgánicos: Actúan como inhibidores
metabólicos. Su acción no está relacionada
con su acidez sino que actúan como
análogos estructurales de compuestos
metabólicos. Ejemplo: ácido propiónico.
C) Aldehídos: Produce inactivación proteica,
son efectivos bactericidas. Ejemplo:
formaldehído, glutaraldehído.
Agentes oxidantes:
Alteran componentes celulares. Se usan sobre
superficies contaminadas. Ejemplo: ozono en
vez de cloro, H2O2.
Agentes quimioterapéuticos:
Son agentes que se pueden usar en el interior del
cuerpo controlando las enfermedades
infecciosas. Debe cumplir con una toxicidad
selectiva. Tenemos a:
A) Análogos a los factores de crecimiento: Son  El genoma bacteriano consta de una sola
estructuralmente similares a los factores de molécula circular de DNA, en cambio, el
crecimiento. Ejemplo: sulfas. genoma eucariota consta de varios
La sulfanilamida actúa como un análogo segmentos lineales de DNA que se
para el ácido amino-benzoico (parte de la encuentran en cromosomas individuales en
vitamina ácido fólico). el núcleo celular.
B) Antibióticos:  La transcripción y traducción es simultánea
a) Inhibición de la síntesis de en procariotas mientras que en eucariotas la
peptidoglucano. transcipción y traducción están separados
1. Antibióticos beta-lactámico en el espacio y en el tiempo.
naturales y semisintéticos  Los genes de los eucariotas se encuentran
(penicilina). fragmentados. Existen regiones no
2. Vancomicina. codificantes (intrones) que separan
3. Bacitracina. regiones codificantes (exones).
b) Alteración de la membrana
citoplasmática. E1 I1 E2 I2 E3
1. Polimixina. ↓
2. Anfotericina. E1 I1 E2 I2 E3
3. Nistolina. ↓
4. Imidazoles. E1 E2 E3
c) Inhibición de la síntesis proteica.
d) Interferencia con la síntesis de ADN.
 El RNAm de los procariotas es
policistrónico mientras que el RNAm de los
eucariotas es monocitrónico.

Tipos de DNA
GENETICA MOLECULAR
DNA B  con torción a la derecha
MICROBIANA
DNA Z  con torción a la izquierda
El DNA se ha desnaturalizado cuando la doble
Concepto
hebra se separa a 80 °C, luego se puede
Ciencia que estudia los mecanismos por los
renaturalizar.
cuales los caracteres pasan de un organismo a
otro.
DNA superenrollado
Es el estado en el que el DNA se repliega sobre
Características de los seres vivos
sí mismo.
 Transformación de la energía. Superenrollamiento (-): Se enrolla en dirección
 La reproducción. opuesta a la doble hebra.
 Flujo de la información genética. Superenrollamiento (+): Se enrolla en la misma
dirección de la doble hebra.
Gen La enzima que provoca el superenrollamiento
Segmento de ácido nucleico (DNA o RNA) es la topoisomerasa II.
cuya cadena de nucleótidos tiene la información La enzima que elimina el superenrollamiento es
necesaria para la síntesis de cadenas la potoisomerasa I.
polipeptídicas. El superenrollamiento afecta la expresión de los
genes. Ciertos genes son transcriptos más
Dogma central de la biología molecular activamente cuando el DNA está sobre
DNA transcripc
 
ión
 RNAm    
traducción
 polipéptid o enrollado en tanto que la transcripción de otros
Retrovirus: genes es inducida por un sobre enrollamiento
DNA   RNA  polipéptid o
transcriptasa
execivo.
inversa

RNA  RNAm  polipéptid o Palíndromo

La secuencia de bases es simétrica respecto a un
eje imaginario.
Estructura de los genes en procariotas y
eucariotas
ATC GAT
TAG CTA

Son sitios de reconocimiento para las enzimas y
otras proteínas que se unen específicamente con
el DNA.
Cuando se encuentran repeticiones invertidas
muy cercanas se forma una estructura llamada
cruciform.
Enzima de restricción o endonucleasas de
restricción
Causan rupturas de la doble cadena solamente
en secuencias que presentan simetría binaria
alrededor de un punto dado.
Son enzimas que protegen de un DNA viral.
Ejemplo: endonucleasa de restricción de E.coli
5’ GAA TTC 3’
3’ CTT AAG 5’
Elementos genéticos
Es una estructura que contiene material
genético.
El cromosoma: Es un elemento genético
principal.
Propiedades:
 Capacidad para autoreplicarse.
 Propiedades codificadoras genéticas.
Los virus son un elemento genético que tiene
DNA o RNA, controlan su propia replicación y
transferencia de una célula a otra.
Otros elementos genéticos no cromosómicos
son los plásmidos. Son pequeñas moléculas
circulares de DNA que se replican de manera
independiente del genoma bacteriano.
Los plásmidos no causan daño a la célula. Son
comunes en células procariotas y raro en
eucariotas.
Las mitocondrias y cloroplastos son otros
elementos genéticos no cromosómicos que se
encuentran en los eucariotas.
Replicación de DNA
La replicación del DNA es semiconservativa, es
decir, mantienen solo una hebra patrón o molde.
La enzima encargada de la replicación del DNA
es la DNA-polimerasa III.
Se requiere:
 DNA molde.
 Enzima DNA-polimerasa III (5’3’)
 ATP, CTP, GTP, TTP
Cebador o primer: Es un segmento de DNA que
provee un extremo 3’ que es reconocido por un
DNA-polimerasa.
Luego de la replicación se retiran los primers y
sus lugares son tapados por la DNA-polimerasa
I.
La DNA-polimerasa II participa en la
reparación del DNA.
En el DNA eucariota se presentan múltiples
orígenes de replicación llamados burbujas.
Fidelidad de la replicación del DNA
Desde que el espermatozoide fecunda al óvulo,
miles de millones de replicaciones de DNA
ocurrieron.
Corrección de lectura: Se efectúa en
procariotas, eucariotas y en la replicación del
DNA viral. Se da cuando el DNA se está
replicando.
Una DNA-polimerasa III (de actividad 3’5’)
conocida como exonucleasa retira los
nucleótidos mal colocados y lo reemplaza por el
correcto. Estos errores ocurren por la resonancia
que tienen los anillos de los nucleótidos.
MUTACIONES
Mutación
Se refiere al cambio de secuencia de bases de
los ácidos nucleicos que constituyen el genoma
de un organismo.
Mutante
Cepa que experimenta una mutación. Un
mutante difiere de su progenitor en el genotipo.
La cepa salvaje o silvestre es la cepa aislada de
la naturaleza.
Por convención:
(genotipo) El gen his A  his A1, his A2…
mutantes
(fenotipo) His+ His-
Trp+ Trp-
Detección de mutantes nutricionales
Auxótrofo: Es un mutante nutricional que tiene
un requerimiento para un factor de crecimiento
Protótrofo: Cepa parental del cual se originó el
auxótrofo.
Las mutaciones pueden ser espontáneas o
inducidas. La mutación espontánea se puede
presentar como resultado de la radiación natural
la cual altera la estructura de bases en el DNA.
También puede ocurrir durante la replicación
del DNA.
Mutaciones puntuales VIRUS
Son cambios en una sola base. Una adenina
puede ser cambiada por una guanina. Definición
Las consecuencias de las mutaciones puntuales Elemento genético que contiene DNA o RNA
son: que puede alternar entre dos estados distintos:
 Mutaciones silenciosas: intracelular y extracelular. En el estado
UAC (codón de tirosina)  UAU (codón extracelular un virus es una partícula
adicional de tirosina) submicroscópica que contiene ácido nucleico
 Mutaciones contra sentido: rodeado por proteína. En el estado intracelular
UAC  CAC (codón de histidina) tiene lugar la reproducción del virus, se produce
 Mutaciones sin sentido: el genoma y se sintetizan los componentes de la
UAC  UAG (codón de terminación) cubierta del virus.
Cuando un genoma viral entra en la célula y se
Omisiones e inserciones reproduce, se conoce con el nombre de
Las omisiones se deben a la eliminación de infección.
porciones de DNA de un gen por ataque de La célula que un virus infecta y en la cual se
nucleasas. Puede ser tan simple como la puede replicar se conoce con el nombre de
eliminación de una sola base o puede implicar a huésped.
cientos de estos. A los virus se les puede considerar como
La inserción se da cuando se agrega nuevas agentes transmisores de enfermedad y como
bases de DNA de un gen por agentes químicos agentes transmisores de herencia.
o biológicos (virus). Puede implicar a una sola Los virus son más pequeños que las células. Su
base o a cientos de esas. tamaño oscila entre los 0.02  - 0.3  .
Las inserciones y omisiones provocan La unidad común para medir los virus es el
desplazamiento del marco de lectura. nanómetro (nm) que es mil veces más pequeño
Análogos a bases: que una micra y un millón más pequeño que un
 5-bromouracilo centímetro.
 2-aminopurinas Sarampión  200nm
Sustancias que reaccionan con el DNA: Polio  28nm
 Ácido nitroso Mimivirus  más grande que una bacteria
 Hidroxilamina Los virus se les clasificaban según los
Agentes alquilantes: huéspedes que infectan: animal, vegetal,
 Monofuncionales bacterias.
Partícula viral o
Ejemplo: metanosulfonato de etilo virión
 Bifuncionales
Ejemplo: mostaza de nitrógeno
Célula huésped
Colorantes intercalantes: bromuro de etilo
Radiación:
 Ultravioleta
Célula dañada Célula alterada
(enfermedad o genéticamente

 Radiación ionizante muerte) (daño o beneficio)

Virus

Otros (hongos,
Plantas Animales Bacterias protozoarios,
etc.)

DNA RNA DNA DNA RNA

RNA
(cadena simple o (cadena simple, (cadena simple, (cadena simple, (cadena simple,
(cadena simple)
cadena doble) cadena doble, cadena doble) cadena doble) cadena doble)
retrovirus)

Estructura viral El ácido nucleico del virión siempre se localiza

dentro de una partícula rodeada por una cubierta
proteica llamada cápside. La cápside siempre
está formada por moléculas individuales de
proteínas llamadas subunidades o capsómeros.
Virus envueltos
La núcleo-cápside está envuelta en una
membrana que son bicapas lipídicas que
contienen también proteínas específicas del
virus.
Simetría de los virus
La simetría se refiere a la forma en que los
capsómeros se acomodan en la cubierta del
virus.
Virus bastón: Presentan una simetría helicoidal.
Ejemplo: virus del mosaico del tabaco (TMV)
es un virus de RNA en el cual se acomodan
2130 subunidades proteicas alrededor del RNA
y son idénticas. Cada subunidad tiene 158
aminoácidos de longitud.
Los virus que presentan formas esféricas
presentan una simetría icosaédrica. Es la
posición más eficiente de las subunidades
debido a que utiliza el menor número de
unidades para construir la cápsula. Ejemplo:
virus que infectan animales.
Virus complejos: Aquellos que tienen varias
partes diferentes con simetrías diferentes.
Enzimas virales
Muchos virus tienen sus propias polimerasas
del ácido nucleico, estas polimerasas van a
transcribir al RNAm.
Los retrovirus son virus de RNA que tienen una
DNA-polimerasa dependiente del RNA llamada
transcriptasa inversa.
Algunos virus tienen enzimas que les ayudan a
entrar o salir de las células. Ejemplo:
neuraminadasas rompen enlaces glucosídicos
de las glucoproteínas y de los glucolípidos del
tejido conectivo de las células animales
ayudando así a la liberación del virus.
Otros viriones tienen la enzima lisozima que
rompe la pared celular de bacterias.
Características generales de la reproducción
viral
Existen diferentes etapas en la replicación de los
virus.
A) Fijación o adsorción del virión o una célula
huésped sensible.
B) Penetración o inyección del virión o del
ácido nucleico.
C) Primeras etapas de la replicación del ácido
nucleico del virus en el cual la maquinaria
biosintética de la célula huésped se altera
como preludio a la síntesis del ácido
nucleico viral.
D) Replicación del ácido nucleico del virus.
E) Síntesis de las subunidades proteicas
(capsómeros).
F) Ensamblaje del ácido nucleico y de las
subunidades proteicas en nuevas partículas
virales.
G) Liberación de las partículas virales maduras
de las células.
Recombinación
Se han reconocido 2 clases de recombinación
genética:
 Recombinación general: Ocurre en
procariotas y eucariotas. Es el intercambio
genético entre secuencias homólogas de
DNA. El apareamiento de bases homólogas
ocurre en una gran longitud de las dos
moléculas de DNA. Se requiere de
secuencias idénticas o casi idénticas en las
dos moléculas recombinantes.
 Recombinación sitio específico: No se
requiere homología en el DNA, en cambio,
se reconocen secuencias específicas cortas
de nucleótidos. Este reconocimiento de las
secuencias se da por las enzimas de
recombinación. Ejemplo: virus,
bacteriófagos  , transposones.
Eventos moleculares en la recombinación
general
A nivel molecular solo ha sido estudiado en
virus y eucariotas.
En bacterias, la recombinación general implica
la participación de una proteína Rec A (del gen
rec A). Es una proteína helicoidal, se enrolla
alrededor de la hélice de DNA facilitando de
este modo la recombinación de DNA.
Las bacterias que son mutantes en rec A-
muestran niveles marcadamente reducidos de
recombinación general.
Por lo tanto, la recombinación general implica
el apareamiento de las moléculas del DNA en
grandes extensiones.
Mecanismo de la recombinación general
A) Mella (Nick) en una de las hebras
originando un fragmento corto
monocatenario.
B) Unión de la proteína desestabilizante (SSB:
single strand binding) de la hélice a la hebra
monocatenaria. Ayuda a la apertura de la
doble hélice de DNA.
C) Unión de la proteína Rec A al segmento
monocatenario y la sitúa de modo que
ocurra una reasociación o una secuencia
complementaria en el duplex adyacente.
Detección de la recombinación
Para detectar el intercambio físico de segmentos
de DNA, las células resultantes de la
recombinación deben ser fenotípicamente
diferentes de sus parentales. Se utiliza como
cepas receptoras aquellas que tengan
características seleccionables como la
incapacidad para crecer en un medio en el cual
los recombinantes si pueden crecer, para ellos
utilizamos un auxótrofo (mutante nutricional
que requiere un factor de crecimiento).
Mecanismos para el intercambio de la
información genética en procariotas
A) Transformación: Cuando el DNA libre se
introduce a una célula receptora.
B) Transducción: El DNA se transfiere de una
célula a otra a través de un vector (virus).
C) Conjugación: El DNA pasa de una célula a
otra por el contacto de las células.
Transformación genética
Es un proceso por el que el DNA libre es
insertado directamente a una célula receptora
competente. El DNA libre incorporado genera
un cambio genético en la célula receptora.
Solo ciertas cepas denominadas competentes
son transformables.
Competencia: Una célula capaz de adquirir una
molécula de DNA y transformarse se dice que
es competente. Solo ciertas cepas son
competentes. La competencia está gobernada
por proteínas especiales que juegan un papel en
la captación y procesamiento del DNA.
Tienen una proteína de fijación del DNA
asociado a membrana, tiene una autolisina de la
pared celular y varias nucleasas.
Transfección: Es una transformación con la
participación viral en lugar de DNA de otra
bacteria viva.
Métodos mecánicos: Existen métodos para
introducir DNA en una célula. Tenemos:
A) Electroporación: Consiste en utilizar
microelectrodos que causan agujeros en la
membrana celular permitiendo el ingreso de
DNA.
B) Pistola de partículas (shoot gun): Se dispara
con DNA.
Transducción
El DNA es transferido de una célula a otra
mediante la participación de un virus.
Transducción especializada: Se da solo en virus
temperados. Un grupo específico de genes del
hospedero se integra al genoma viral.
Transducción generalizada: Ocurre durante el
ciclo lítico de un fago. Puede transferir
cualquier parte del genoma bacteriano.
Plásmidos
Son elementos genéticos circulares que se
reproducen en forma autónoma y tienen una
existencia extracromosómica. Casi todos los
plásmidos son de hebras bicatenarias o
circulares. Muchos plásmidos se pueden
transferir por medio de la conjugación.
Algunos plásmidos se integran a los
cromosomas bacterianos.
Pueden contener una variedad de genes para la
producción de toxinas.
Pueden contener genes que le confieren a la
bacteria resistencia a los antibióticos, a los
metales pesados.
Algunos plásmidos llevan genes para el
catabolismo para sustancias poco usuales:
compuestos aromáticos plaguicidas.
Además, muchos plásmidos tienen genes que
controlan los procesos de conjugación. Genes
que alteran la superficie de las células para
permitir el contacto entre células, genes que
llevan a cabo la transferencia de DNA de una
célula otra.
Plásmidos conjugativos son los que gobiernan
su propia transferencia.
Clases de plásmidos
A) Plásmidos F: Participan en la transferencia
de DNA de una célula a otra.
B) Plásmidos con factores de transferencia y
de resistencia (factor R): Confiere
resistencia a antibióticos y a varios
inhibidores de crecimiento. Son los más
ampliamente distribuidos y mejor
estudiados.
C) Plásmidos que producen toxinas (factor K):
Plásmido de E. coli que produce una
enterotoxina capaz de matar a individuos
débiles.
D) Bacteriocinas: Son agentes que inhiben o
matan a especies estrechamente
relacionadas. Son de naturaleza proteica.
Ejemplo: colicana es producida por E. coli;
subtilisina.
Conjugación
La conjugación bacteriana o apareamiento es un
proceso de transferencia genética que supone un
contacto de célula a célula. El material genético
transferido puede ser un plásmido o una porción
del cromosoma movilizada por un plásmido.
La célula donadora posee un plásmido
conjugativo o plásmido F.

Mecanismo de transferencia de DNA durante la

conjugación
Una de las cadenas del DNA se deriva de la
célula donadora y la otra es recién sintetizada en
la receptora durante los procesos de
transferencia.