LABORATORIO DE ANALISIS DE ORINA Y COLESTEROL TOTAL.

LABORATORY OF URINE ANALYSIS.

Arellano Cabeza A, Barrios Anillo M, Pallares Bonolis M, Villa Matute E.

Estudiantes De Bioquímica, Programa De medicina, Facultad Ciencias De La Salud, Universidad Del

Magdalena Carrera 32 No. 22 – 08. Apartado Postal 2-1-21630. Santa Marta D.T.C.H., Colombia.

RESUMEN
En el presente informe de laboratorio explicaremos como se realizó la practica en el laboratorio,
en la que los temas principales fueron: Determinación de colesterol total, en la que conocimos los
fundamentos de determinación de colesterol total en sangre por medio enzimático del colesterol
oxidasa, manejamos los valores de referencia para el colesterol total en sangre y su utilidad
diagnostica, determinamos la concentración de colesterol total en muestra problema,
interpretamos los resultados obtenidos, investigamos las posibles interferencias de la prueba, que
pueden generar resultados erróneos. Luego realizamos un análisis bioquímico de la orina en
donde conocimos el procedimiento correcto para a toma de muestra de la orina, identificamos las
características físicas y químicas de la orina y su relación con el estado de salud y de enfermedad y
mientras realizábamos estos procedimientos potencializábamos nuestra destreza en el manejo de
los materiales empleados en la cromatografía de intercambio iónico y la espectrofotometría
aplicando las normas de bioseguridad para el manejo de muestras de sangre y reactivos químicos.

PALABRAS CLAVES: Colesterol, enzimas, orina, diagnostico.

ABSTRACT
In the present laboratory report we will explain how the practice was carried out in the
laboratory, in which the main topics were: Determination of total cholesterol, in which we knew
the fundamentals of determination of total cholesterol in blood by enzymatic cholesterol
oxidase, we managed the reference values for the total cholesterol in blood and its diagnostic
utility, we determine the total cholesterol concentration in the test sample, we interpret the
obtained results, we investigate the possible interferences of the test, which can generate
erroneous results. Then we performed a biochemical analysis of the urine where we knew the
correct procedure for taking urine sample, we identified the physical and chemical
characteristics of the urine and its relation to the state of health and disease and while
performing these procedures we potentialized our Dexterity in the handling of the materials
used in ion exchange chromatography and spectrophotometry, applying the biosafety
regulations for the handling of blood samples and chemical reagents.

KEY WORDS: Cholesterol, enzymes, urine, diagnosis.

INTRODUCCIÓN.
Determinacion de coleterol total

Análisis de colesterol o análisis de colesterol total es un análisis de sangre que da una medida
aproximada de todo el colesterol y triglicéridos en el suero. El colesterol es un lípido complejo
derivado del fenantreno que se encuentra en todas partes del cuerpo, en la dieta humana y la
biosíntesis, la cual curre en el hígado a partir de la acetil CoA. El cuerpo necesita un poco de
colesterol para funcionar adecuadamente; pero demasiado colesterol puede obstruir las arterias y
llevar a cardiopatía. Una parte del colesterol se considera “buena” y otra se considera “mala”. Se
necesitan exámenes de sangre diferentes para medir cada tipo de colesterol individualmente. El
colesterol es absorbido parcialmente por el intestino delgado en forma de quilomicrones.

El contenido aproximado de colesterol en cada familia de lipoproteínas es (en % por unidad de

peso): 1% en los quilomicrones, 18% en las VLDL, 50% en las LDL y 23% en las HDL. Dado que cada
familia posee distinta actividad biológica, el significado clínico de un aumento de colesterol depende
de la o las lipoproteínas que se encuentran en exceso.Por otra parte, los mecanismos reguladores
de los niveles plasmáticos de lipoproteínas son muy complejos y pueden ser afectados por múltiples
factores (genéticos, ambientales, fisiológicos o patológicos), siendo posible encontrar valores de
colesterol total cercanos al rango normal acompañados de alteraciones en las fracciones
lipoproteicas.

Analisis bioquiomico de la orina

La orina es el producto de excreción del riñón y el líquido orgánico por el que se excretan la mayoría
de los metabolitos hidrosolubles del organismo. El proceso de formación de orina comienza con la
ultrafiltración de la sangre a nivel del glomérulo renal, continúa en el sistema tubular renal donde
se realizan procesos de secreción y reabsorción de agua y solutos y culmina con la excreción. A
través de este proceso, los riñones conservan en equilibrio el volumen, composición y estado ácido-
base de los líquidos corporales, que además están sujetos al ingreso dietético de solutos (incluyendo
fármacos y tóxicos) y agua y a la velocidad y tipo de transformación metabólica de glúcidos, lípidos,
aminoácidos y ácidos nucleicos tanto endógenos como exógenos. La obtención de una orina dentro
de parámetros normales implica un correcto funcionamiento del riñón y una relación equilibrada
entre este órgano y los distintos órganos de la economía.

Una simple muestra de orina puede ayudarnos, una vez analizada, a diagnosticar enfermedades
autoinmunes, del riñón, sistémicas como la diabetes o infecciones urinarias.

COLOR Y APARIENCIA FÍSICA

Cómo se ve la orina a simple vista:

• ¿Es clara o turbia?

• ¿Pálida, amarilla oscura o de otro color?

APARIENCIA MICROSCÓPICA

La muestra de orina se examina bajo un microscopio para:

• Revisar si hay células, cristales urinarios, cilindros urinarios, moco y otras sustancias

• Identificar cualquier tipo de bacterias u otros gérmenes

APARIENCIA QUÍMICA (química urinaria)

• Se usa una tira especial (tira reactiva) para buscar diversas sustancias en la muestra de orina.
La tira reactiva contiene pequeñas almohadillas de químicos que cambian de color cuando entran
en contacto con las sustancias que interesa analizar.

2. MATERIALES Y REACTIVOS.

3.PROCEDIMIENTO.
Análisis microscópico, físico y bioquímico de la orina

Primer paso:

En un envase limpio se recolecto la orina

Figura 1. Muestra de orina.

Segundo paso:

Se le hace un análisis físico a la orina.

Se coloca la orina en un recipiente de vidrio transparente, limpio y seco. Y se determinó el aspecto,

el color y el olor dirigiendo el vapor de la orina hacia la nariz con ayuda de la mano.

Figura 2. Orina en una celda

 Tercer paso:

Se realizó un análisis químico a la orina.

Se sumerge la tirilla reactiva para uroanálisis en la muestra de la orina, y se procede a retirar

rápidamente, con el cuidado de no tomar las áreas reactivas, se elimina e exceso de orina y se da
paso a comparar con la referencia que trae el envase de las tirillas.

Figura 3. Referencia multistik 10 SG.

Cuarto paso:

Se realizó un análisis microscópico.

Donde se colocó una gota de orina en el portaobjetos y se analizó por medio del microscopio que
tipo de células había o si tenía cristales.

DETERMINACION DE COLESTEROL TOTAL

TUBO
REACTIVOS
BLANCO PATRON MUESTRA

- - 10
 Se prepararon patrón y blanco para cada
MUESTRA uL
serie de determinaciones de acuerdo a la tabla
- - anterior.
PATRON uL 10

REACTIVO 10ml
ENCIMATICO 10ml 10ml
uL
Imagen 1. Preparación de patrón.

Tomada por Ena Villa.

Imagen 2. Preparación de blanco

Tomada por Ena Villa.

 Se mezcló el contenido y se dejó reposar por 15 minutos.

 Se recogió la muestra y se metió en la centrifugadora durante 11 minutos.

Imagen 4. Centrifugación de la muestra

Tomada por Alyi Arellano

  Luego se procedió a medir el valor de la absorbancia en la muestra, en el blanco y en el
blanco.

Imagen 5. Lectura de absorbancia.

Tomada por Ena Villa

 Se analizó el color del patrón y la muestra donde para un rango normal ambos deberían
tenerlo similar.

Imagen 6: comparación de color entre la muestra y el patrón.

Tomada por: Ena Villa.

 Por último se calculó la concentración plasmática de colesterol:

Valor de absorbancia:

Blanco: 0.00

Muestra: 0.248

Patrón: 0.322

Colesterol=200x (absorbancia de la muestra/absorbancia estándar)

4.RESULTADOS.

DETERMINACIÓN FÍSICA

Presenta un aspecto limpio, sin

ASPECTO presencia de moco, de eritrocitos,
de grasa y de células epiteliales
bacterias.
En el En el estado no
COLOR estado patológico presenta
AMARILLO patológico colorantes, alimentos,
puede y otros.
llegar a
presenta
bilirrubina

OLOR Presenta el olor característico de la

orina

El aspecto físico que presenta la orina es gracias a la ausencia de moco, de bacterias, de eritrocitos
o de grasa; el color amarillo se da gracias a que la orina está muy hidratada y cuando su color
tiende a cambiar para ponerse amarillo más fuerte es por la presencia de bilirrubina o la
deshidratación, también se encuentran alimentos como los espárragos o antibiótico como el
metronidazol que causan un aumento en el tinte amarillo de la orina. El olor natural de la orina
esta gracias a un estado saludable del paciente, la mayoría de los cambios en el olor en la
orina no son una señal de enfermedad y desaparecen con el tiempo. Algunos alimentos y
medicamentos, entre ellos las vitaminas, pueden afectar el olor de la orina. Por ejemplo,
comer espárragos causa un olor de orina característico.

El olor fétido de la orina puede deberse a bacterias. El olor dulce de la orina puede ser una
señal de diabetes no controlada o una enfermedad rara del metabolismo. La enfermedad
hepática y ciertos trastornos metabólicos pueden causar un olor de la Toda la glucosa que
es filtrada en los riñones es reabsorbida hacia la sangre por los túbulos renales. De este
modo, lo normal es no presentar evidencia de glucosa en la orina.
 DETERMINACION BIOQUIMICA

GLUCOSA Normal

PROTEINA +1(30)

BILIRRUBINA Negativo
UROBILINOGENE +1(2)
PH 6
DENSIDAD GRAVEDAD 1.025
ESPECIFICA
SANGRE Negativo

CUERPOS CETONICOS Negativo

NITRITOS Negativo
LEUCOCITOS 25ml/dl

La presencia de glucosa en la orina es un fuerte indicio de que los niveles sanguíneos están
altos. En este caso se encuentra normal.

Mientras el pH de la sangre suele estar en torno de 7,4, el pH de la orina varía entre 5,5 y
7,0, o sea, mucho más ácida, para lo que nos lleva a decir que en nuestra prueba el pH de
la orina salió entre su rango normal.

Los cuerpos cetónicos son productos de la metabolización de grasas. Normalmente no

están presentes en la orina. Su detección por medio del dipstick puede indicar diabetes
mellitus mal controlado o ayuno prolongado, lo cual es ausente gracias a que en la prueba
dio negativo la aparición de éstos.

La orina es rica en nitratos. La presencia de bacterias en la orina transforma esos nitratos

en nitritos. Por lo tanto, la cinta con nitritos positivos es una señal indirecta de la
presencia de bacterias. Por lo que al relacionarlo con la prueba no presenta bacterias
debido a la ausencia de nitratos.

Urobilinogeno y hemoglobina también normalmente ausente en la orina, pueden indicar

enfermedad hepática (hígado) o hemólisis (destrucción anormal de los hematíes). La
bilirrubina sólo suele aparecer en la orina cuando sus niveles sanguíneos sobrepasan 1,5
mg/d, teniendo en cuenta que los niveles sanguíneos en esta prueba son normales, por no
presentar color rojizo la orina no hay presencia de estas enfermedades.

La proteína no está presente en la orina cuando se lleva a cabo una muestra rutinaria con
tira reactiva. Esto se debe a que supuestamente el riñón conserva moléculas grandes
como proteínas, en la sangre y solamente filtra pequeñas impurezas. Incluso si las
pequeñas cantidades de proteínas pasan, normalmente son reabsorbidas por el cuerpo y
utilizadas como fuente de energía.

Algunas proteínas aparecen en la orina si los niveles sanguíneos se elevan, incluso cuando
el riñón está funcionando apropiadamente.

Si el riñón está enfermo, las proteínas aparecerán en la orina incluso si los niveles
sanguíneos son normales.

Debido a que hay presencia de proteína en la orina y los niveles de sangre son ausentes,
esto puede ser debido al mal funcionamiento del riñón.

La presencia de leucocitos en la orina suele indicar que hay alguna inflamación en la vías
urinarias. En general, sugiere infección urinaria, pero puede estar presente en varias otras
situaciones, como traumas, uso de sustancias irritantes o cualquier otra inflamación no
causada por un agente infeccioso. Podemos simplificar y decir que leucocitos en la orina
significan pus en la orina orina a moho.

DETERMINACION MICROSCOPICA.

Figura 1. Célula de transición

Célula que cambia de forma dependiendo de si se extiende el tejido. Las células transicionales
pueden extenderse sin romperse
 Figura 2. Cilindro graso

Pueden estar compuestos de glóbulos blancos, glóbulos rojos, células renales o sustancias como
proteína o grasa.

Figura 3. Célula pavimentosa o escamosa.

las células de la escala, llamado de células escamosas. El epitelio puede poseer una sola capa de
estas células, en cuyo caso se conoce como epitelio escamoso simple, o puede poseer múltiples
capas, se refirió a continuación, como epitelio escamoso estratificado. Ambos tipos realizan
diferentes funciones, que van desde el intercambio de nutrientes a la protección
Figura 4. Célula eritrocito

Son células que transportan oxígeno a todas las partes del cuerpo. Son el tipo más común de
células sanguíneas.

Figura 5: No relacionamos esto con ninguna caracteristicas

No se presentaron cristales en la orina.
DETERMINACION DE COLESTEROL TOTAL

RESULTADOS

1. Completar la tabla:

REACTIVO ABSRIBANCIA

MUESTRA 0.248

PATRON O.322

2. El resultado de colesterol fue de 154.03, se encuentra en su rango normal, no presenta

hipercolesterolemia ni hipocolesterolemia.
 −𝟎.𝟐𝟒𝟖
Colesterol= 𝟐𝟎𝟎𝐱 𝟎.𝟑𝟐𝟐
= 𝟏𝟓𝟒. 𝟎𝟑𝒎𝒈/𝒅𝒍

5. DISCUSIÓN

El examen de orina es usado como método diagnóstico. Se trata de un examen indoloro y de

simple recolección, lo cual lo torna mucho menos penoso, para los pacientes, que los análisis de
sangre, los cuales sólo pueden ser recogidos a través de la punzada en la vena con una aguja.(1) En
esta ocasión presenciamos la aparición de leucocitos en la orina, dando un resultado positivo que
esto demuestra que hay una infección y la presencia de los glóbulos blancos de manera alta,
significa que están luchando contra una infección donde hemos dialogado con la persona y nos
comentó que padece de uretritis que es una patología muy prevalente en pacientes jóvenes, sobre
todo por cambios de parejas sexuales, la falta de protección es algo que se contagia de manera
sexual. Y tuvo una ligera suma de proteínas en orina, pero no tan significativa como los leucocitos.
(2) En el laboratorio de colesterol, Le hicimos una prueba para medir su colesterol total en sangre
donde no encontramos ninguna alteración ya que presenta valores menores a 200, es decir, se
encuentra en los rangos normales. (3)

6. CONCLUSIÓN
En síntesis, en la anterior experiencia de laboratorio se pudo determinar el colesterol total a una
muestra de sangre tomada a uno de los estudiantes participantes. Se logró, conocer los
fundamentos de la determinación de colesterol total en sangre por el método enzimático del
colesterol oxidasa, además de aprehender a manejar los valores de referencia en sangre y su gran
utilidad en los diagnósticos de patologías. Por otra parte, al realizar la otra parte de la practica la
cual consistía en el análisis bioquímico de la orina fue muy enriquecedor puesto que se
identificaron las características físicas (determinadas con los órganos de los sentidos) tales como
color, aspecto y olor; y químicas estas determinadas con tirillas reactivas para uroanálisis, de las
cuales se podían terminar la presencia de parámetros como glucosa, bilirrubina, cetona, pH,
sangre, proteína, nitritos, entre otras.

En los dos casos, las muestras estaban dentro de lo normal. El resultado de la muestra de
Colesterol estuvo dentro del rango normal y en la determinación bioquímica de la orina, presento
pequeñas alteraciones. De esta experiencia, se puede también resultar que estas pruebas tienen
gran importancia para diagnosticar enfermedades o confirmar sospechas de las mismas.

7.BIBLIOGRAFIA.
1. https://www.mdsaude.com/es/2015/10/analisis-de-orina.html

2. https://demedicina.com/leucocitos-la-orina-positivo-significa/

3. http://colesterol.org.es/nivel-normal