UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD de MEDICINA
Escuela Académico Profesional de Tecnología Médica

CURSO

MEDICINA TRANSFUSIONAL Y BANCO DE SANGRE

HORARIO DE PRÁCTICAS:

DÍA: LUNES HORA: 10am - 1pm

FECHA de EJECUCIÓN de la PRÁCTICA : 19-08-19

FECHA de ENTREGA de INFORME DE PRÁCTICA : 26-08-19

INFORME DE PRÁCTICA

Pràctica Nº1

ESTANDARIZACIÓN DEL TRABAJO DE INMUNOHEMATOLOGÍA

MESA 2

INTEGRANTES

CARBAJAL CURO, VICTOR ALCIDES

 MARTINEZ MACAZANA ANGELY MARGARITA

PEREZ RONDONIL,LIZBETH

TIPARRA CRISOSTOMO ANA PAULA

LIMA - PERÚ
2019

1. OBJETIVOS

-Realizar la lectura e interpretación de las reacciones antígeno-anticuerpo que se

realizarán en placa y en tubo.

-Realizar las diluciones correspondientes y determinar la concentración óptima de la

muestra para la estandarización del procedimiento.

2. INTRODUCCIÓN

Los laboratorios de inmunohematología están encargados de la evaluación de la sangre del

donante para cumplir los requerimientos transfusionales de los pacientes, por lo cual debe
estandarizar el trabajo en este servicio, el riesgo de la administración de sangre al paciente
son las reacciones hemolíticas postransfusionales, consideradas como la primera causa de
los principales eventos prevenibles de morbilidad y mortalidad asociadas a la transfusión.
Por ello, los métodos comúnmente ensayados para la búsqueda de anticuerpos
antieritrocitarios son la aglutinación en tubo, en columnas de gel, aglutinación en placa y/o
adherencia de glóbulos rojos en fase sólida. De todos estos métodos, se desarrolló dos los
cuales son los métodos de aglutinación en placa y tubo. El metodo para determinacion en
placa se ha dejado de usar en los laboratorios debido a la baja sensibilidad de la prueba
pero aún es usada durante campañas de donación de sangre, debido a la facilidad y rapidez
de la prueba. Algunos estudios han hallado que la aglutinación en tubo es la mejor opción
para la identificación de anticuerpos porque es capaz de detectar a la mayoría de los
anticuerpos clínicamente significativos, en comparación de otros métodos.

3. RESULTADOS

I. Determinación en placa :
 PRUEBA TESTIGO

Muestra alfa 1 gota

Reactivo 1 1 gota

SSF 1 gota

Lectura POSITIVO NEGATIVO

PRUEBA TESTIGO

Muestra beta 1 gota

Reactivo 1 1 gota

SSF 1 gota

Lectura NEGATIVO NEGATIVO

II. Determinación en tubo

PRUEBA TESTIGO

Muestra alfa 1 gota 1 gota

Reactivo 1 2 gotas

SSF 2 gotas

Centrifugar a 3000 rpm por 15 segundos

LECTURA 4+

PRUEBA TESTIGO

Muestra gamma 1 gota 1 gota

Reactivo 1 2 gotas

SSF 2 gotas
 Centrifugar a 3000 rpm por 15 segundos

LECTURA 2+

PRUEBA TESTIGO

Preparación 1 (5%) 1 gota 1 gota

Reactivo 1 2 gotas

SSF 2 gotas

Centrifugar a 3000 rpm por 15 segundos

LECTURA 1+

PRUEBA TESTIGO

Preparación 2 (1%) 1 gota 1 gota

Reactivo 1 2 gotas

SSF 2 gotas

Centrifugar a 3000 rpm por 15 segundos

LECTURA No se puede determinar

4. DISCUSIÓN

Los antígenos específicos del grupo sanguíneo reaccionan frente a los anticuerpos
específicos dando como resultado una reacción de aglutinación (tipo reacción ag-ac)
la sensibilidad que se obtiene de la prueba en placa es menor que la sensibilidad que
se da prueba en placa, los resultados que obtuvimos en un principio en la prueba en
placa con la muestra α (40%) y el reactivo 1 fueron claramente positivos y lo mismo
se repitió con la prueba en tubo, contrario a ello los resultados con la muestra ४ y el
reactivo 1 la reacción en placa salió negativo mientras que en la prueba de tubo salió
positivo esto debió a que se produce el fenómeno de zona(problemas debido a la
cantidad de antígenos) , de acuerdo a nuestros resultados obtenidos se observa que
la prueba de aglutinación en placa no tiene mucha sensibilidad debido a que no logra
evidenciar antígenos con la muestra Ɣ, es por ello que ya no se usa ;entonces es más
conveniente usar la prueba en tubo y tener un intervalo de concentración en el cual
tanto antígenos y anticuerpos están en la misma cantidad de modo que puedan actuar
y no generar fenómeno de zona.

5. CONCLUSIÓN

Se concluye que el método realizado en tubo es más sensible y tiene menos interferentes
de otras sustancias que pudiesen alterar la reacción ag-ac
La determinación en tubo con la solución de trabajo al 5% demostró tener sensibilidad,
mientras que en la determinación con la solución al 1% los resultados fueron más
inespecíficos.

6. RECOMENDACIONES

Se recomienda realizar el método de aglutinación en tubo por poseer mayor sensibilidad que
el método realizado en lámina
Se recomienda realizar una adecuada estandarización de los tiempos óptimos, así como de
la concentración adecuada de muestra que sea capaz de aglutinar sin dar lugar a errores de
determinación debido a que con la prueba realizada el la solución de trabajo al 1% no hubo
una adecuada reacción.

7. ANEXOS

CUESTIONARIO A

1. ¿Qué volumen tiene una gota de la suspensión de trabajo? .

Una gota de suspensiòn de trabajo contiene aproximadamente 50ul.

2. ¿Qué puede comentar de los resultados obtenidos en placa con la muestra

α y la muestra β?

Ambas muestras fueron enfrentadas al reactivo 1. La muestra alfa mostró aglutinación

frente al reactivo 1, mientras que la muestra beta mostró negatividad. Lo que nos
indica que hay presencia de antígenos en la muestra alfa que reaccionan con los
anticuerpos del reactivo 1, y que estos antígenos no se encuentran en la muestra
beta.

3. ¿Cuál es la concentración de la preparación I, y cuál la de la preparación II?

Concentración de la preparación I = 5 %

Concentración de la preparación II = 1 %

4. ¿Qué puede comentar de los resultados de la determinación en tubo Basal?

En el tubo basal, se observa la formación de un botón en el fondo del tubo, la cual es

persistente a los intentos de resuspensión, mostrando así una positividad de 4+.
Debido a la concentración de la muestra α se observó la formación de un botón “muy
tosco”, ya que para esta prueba se utiliza una concentración de 5 % de la muestra
para una mejor observación de la reacción antígeno-anticuerpo.

5. ¿Qué puede comentar de los resultados obtenidos con la Preparación I,

tanto con la MUESTRA α, así como con la MUESTRA β?

6. ¿Qué puede comentar de los resultados de la determinación con la

preparación II?

7. ¿Qué función cumple la prueba testigo?

Su función es garantizar que en la prueba que se está realizando la aglutinación sea

solo por la reacción entre el reactivo y la muestra en el primer tubo, ya que al contener
sólo solución salina y muestra no debe ocurrir reacción alguna en el tubo testigo.

8. ¿Cuáles serían sus conclusiones?

Se concluye que el método realizado en tubo es más sensible y tiene menos interferentes
de otras sustancias que pudiesen alterar la reacción ag-ac
La determinación en tubo con la solución de trabajo al 5% demostró tener sensibilidad,
mientras que en la determinación con la solución al 1% los resultados fueron más
inespecíficos.
CUESTIONARIO B

1. ¿Qué diferencias encuentra entre las lecturas de los resultados de los tubos
1 y 3?

La reacción resulta para los dos positivos (se forma el botón) con una puntuación de
2 +.

2. ¿Qué pasa cuando al tubo se le aplica movimientos muy bruscos?

La reacción antígeno-anticuerpo se pierde dando un falso negativo o bien reduciendo

el número de cruces de la reacción