INCIDENCIA DEL PRETRATAMIENTO DE RESIDUOS SÓLIDOS EN LA FLORA

MICROBIANA DE REACTORES ANAEROBIOS

Autores: Matilde López Torres*, Pilar M. Villa Gómez**, SilvioJ Montalvo***, Rigoberto
Escobedo*

* Centro Nacional de Investigaciones Científicas(CNIC), Departamento de Estudios sobre

Contaminación Ambiental (DECA), Ave. 25 y 158, Cubanacán, Playa, Ciudad de la
Habana, Cuba. e mail: mati@biocnic.cneuro.edu.cu
** Instituto Cubano de Investigaciones de los Derivados de la Caña de Azúcar (ICIDCA).
*** Instituto Superior Politécnico Jose Antonio Echevarria (ISPJAE)

INTRODUCCIÓN

Dentro de los residuos sólidos de mayor disponibilidad en Cuba se encuentra la cachaza,

subproducto obtenido durante el proceso de fabricación de azúcar de caña, en la etapa de
clarificación y filtración del jugo de caña.

La cachaza tiene un contenido elevado de materia orgánica, principalmente lignocelulósica,

caracterizada por su relativa baja biodegradabilidad. El tratamiento de los residuos sólidos
puede llevarse a cabo de forma satisfactoria si se logra intensificar la etapa limitante en la
anaerobiosis, que en estos casos resulta ser la etapa hidrolítica.

Una de las formas para acelerar la velocidad de reacción de la etapa limitante ha sido el
empleo de tratamientos previos, ya bien sean físicos, químicos o biológicos (López y col.,
1998).

La incidencia de los pretratamientos físicos y químicos sobre la flora microbiana presente en

los digestores anaerobios constituye el objetivo principal del presente trabajo.

METODOLOGÍA EMPLEADA

Para comenzar el estudio el residual de cachaza fue expuesto a las diferentes alternativas de
pretratamiento:
Hidrólisis térmica: Se lleva a cabo durante 3 hora, en recipientes de 150 mL de capacidad,
provistos de agitación, en estrictas condiciones anaerobias y en un baño termostatado a
75oC.
Hidrólisis química: Se realiza con la adición de Ca(OH)2 en concentraciones de 80 meq/L
durante 6 hora, a temperatura ambiente, en recipientes de 1 L de capacidad, con agitación y
en condiciones anaerobias (López y col., 1998).

Concluida la etapa inicial de hidrólisis se procedió al tratamiento anaerobio de cada uno de

los residuos, tomando como control residual de cachaza sin pretratar.
Tratamiento de los residuos
La digestión anaerobia se llevó a cabo en forma discontinua en reactores de vidrio de 1 L de
capacidad, a temperatura controlada (30 oC), y provisto de agitación magnética a 500 rpm.
La fuente de inóculo, común para cada digestor fue procedente de un digestor anaerobio
completamente mezclado a escala de laboratorio, que había operado con cachaza durante
un año. Se utilizaron 250 mL de inóculo.
El metano producido como resultado del proceso de biometanización fue cuantificado.

Análisis microbiológicos
Se realizaron determinaciones de actividades hidrolítica, acidogénica y metanogénica. Para
esto se emplearon viales de 100 mL de capacidad operando en régimen estático (sin
agitación). En estos ensayos no se añadió nutrientes para restringir el crecimiento microbiano
durante el experimento y así evitar, un valor de actividad superior al real, según la
metodología seguida por Soto y colaboradores en 1993.
Para el cálculo de la actividad metanogénica específica (AME) se utilizó la siguiente
expresión:
AME =
(dVCH 4 dt * 24 ) = gDQO CH 4 gSSV .d
FC *V * SSV
donde
El factor de conversión (FC) mL CH4/g DQOeliminado, medido en función de la temperatura del
biogás fue de 405.
dV CH4 /dt: Velocidad de producción de CH4. Valor de la pendiente en el período de tiempo que
se observa la máxima velocidad. (mL/h)
V: Volumen efectivo de líquido en el vial, 0,1. (L)

Los materiales utilizados para la determinación de las actividades hidrolítica y acidogénica

fueron los mismos que para la AME, solo que para el seguimiento del sustrato los viales
estaban provistos de un septum a través del cual se retiraban las muestras para análisis.

La evaluación del lodo fue realizada en dos etapas durante la fase estacionaria de operación
de los digestores.

Para la cuantificación de los grupos tróficos se siguió la técnica del Número Más Probable
(NMP) según los Métodos Normalizadas, 1995, empleándose diferentes medios (Gabre,
1988), en dependencia del grupo trófico.

Las determinaciones analíticas se realizaron siguiendo las recomendaciones de los métodos

normalizados para aguas y aguas residuales (1 995).

RESULTADOS

La actividad metanogénica del lodo empleado para la arrancada de los reactores es

comparable con los valores reportados en la literatura para lodos procedentes de digestores
anaerobios (Noyola y Bustamante, 1992), de 0.02 - 0.20 g DQOCH4/g SSV·d.
La mayor velocidad de producción de CH4 se encontró en el reactor que recibía residual
pretratado químicamente. En orden decreciente de AME le siguieron el pretratado
térmicamente y el de la cachaza sin pretratar. Los valores de AME fueron de 0,13; 0,23 y
0,18 g DQO/g SSV.d, para los lodos sin pretratar, pretratado químico y térmico,
respectivamente. En todos los casos se obtuvo una buena actividad de los lodos, superando
el criterio de baja actividad reportado por Colleran en 1992 y Noyola en 1994 en digestores
de este tipo de 0,1g DQOCH4/g·SSV·d

La mayor actividad obtenida en el lodo retenido en el digestor de cachaza hidrolizada

químicamente, es consecuencia de la solubilización del material orgánico complejo. Este
resultado verifica la dificultad de los microorganismos anaerobios en metabolizar el residuo
sin pretratar, limitando la velocidad de degradación, la etapa de hidrólisis del material
orgánico complejo.

Por otra parte, los valores de actividad acidogénica específica e hidrolítica fueron
comparables a los obtenidos por Soto y col. (1993), quienes partieron de lodos procedentes
de reactores que tratan residuos complejos.

El transcurso del proceso de digestión en continuo permitió detectar la influencia que sobre el
lodo ejercen los diferentes residuos. Al cabo de los 40 días de operación estable de los
digestores, la actividad de los lodos de cachaza y químico se mantuvo en 0,13 y 0,23 g
DQOCH4/g·SSV·d respectivamente, observándose una tendencia a la disminución de la
actividad del lodo térmico a valores de 0,096 g DQO CH4 /g·SSV·d. Esto puede deberse a
fenómenos de limitación en la transferencia de masa microorganismo-sustrato, sobre todo, la
difusión interna a través de la capa de microorganismos que conforma el flóculo.

Simultáneamente a los ensayos de actividad se procedió a la cuantificación de la biomasa a

través del recuento de distintos grupos tróficos. El conteo de los diferentes grupos de
microorganismos al cabo de los 30 días de operación de los digestores se muestra en la
siguiente tabla.

Cuantificación de grupos microbianos en los lodos objetos de estudio

.
Tipo de lodo en los digestores
Grupos tróficos de
microorganismos Cachaza Químico Térmico
(cel./mL) (cel./mL) (cel./mL)
Glucolíticos 12 x10 8 12 x108 12 x108
5 5
Sulfato reductores 12 x10 12 x10 10 x105
5 7
Metanogénicos 6 x10 12 x10 6 x106

El efecto de la solubilización térmica, al parecer favorable para el proceso de digestión, hizo

descender al cabo de los 40 días de operación el número de microorganismos en el digestor.
Este efecto es atribuido fundamentalmente a la tendencia en la formación de flóculos durante
la hidrólisis térmica, lo que trajo como consecuencia la limitación en la transferencia de masa
microorganismo-sustrato, sobre todo, la difusión interna a través de la capa de
microorganismos que conforma el flóculo. Esta consecuencia trae aparejado la interferencia
en la multiplicación de las células, viéndose este efecto marcado durante el tratamiento en
continuo del residual, para períodos prolongados, durante la etapa estacionaria de operación
del digestor

El número de bacterias totales en los digestores cachaza (control) y químico se mantuvo en

el orden de 10 8 cel./mL, encontrándose en el digestor térmico valores de 103 cel./mL. La AME
en este último reactor fue la más baja.

Una segunda hipótesis a formular de este fenómeno está relacionada con la presencia de
bacterias sulfato reductoras (BSR). La escasa o nula existencia de sulfatos en el residual de
cachaza significa que la única alternativa de competencia entre ambas bacterias podría estar
dada por la elevada afinidad de las bacterias sulfato – reductoras por el H2 (Soubes, 1994).
No obstante, se pudo afirmar que no hubo inhibición ya que bajo las condiciones de estudio
se encontró una mayor población de bacterias metanogénicas en los lodos, que hace menos
competente a las sulfobacterias por el H2 ,

Se observó como complemento de esta hipótesis que no hubo inhibición de las bacterias
metanogénicas por las condiciones de pretratamiento esta blecidas, teniendo en cuenta que
se alcanzaron resultados muy parecidos en los conteos microbianos cuando se usó
indistintamente el medio sintético específico para el crecimiento de metanogénicas y las
distintas cachaza como medio. De este modo se descarta la posible toxicidad de los
diferentes grupos por la presencia de productos intermediarios desnaturalizados.

A partir de los resultados obtenidos se evaluó la relación entre la AME y el conteo de

microorganismos empleando diferentes modelos alternativos. La relación entre ambos
parámetro puede ser explicada a través de los modelos raíz cuadrada de X y el modelo
lineal.

Se comprobó que existe una relación estadísticamente significativa entre las variables con un
nivel de confianza del 95 %, en donde la variable seleccionada (AME), explica con más de un
96 % la variabilidad en el NMP, pudiéndose usar esta correlación para estimar la biomasa en
estudios en digestores anaerobios, lo que está en correspondencia con lo planteado acerca
de la utilidad de este ensayo como indicador de la calidad del lodo en los diferentes
reactores.

Teniendo en cuenta que la medida de la actividad metanogénica es una consecuencia

directa de la población microbiana metanogénica presente en un lodo, se consideró el
modelo lineal como el modelo que describe la relación entre el conteo de microorganismos
metanogénicos y su actividad específica, siendo la expresión simplificada del modelo de
acuerdo al nivel de significación de los coeficientes la siguiente.
 Log NMP = 36.1878 AME

CONCLUSIONES.

1. Se demostró la incidencia negativa del pretratamiento físico a 75 ºC como paso previo

al proceso de digestión de residuos sólidos.
2. Se reveló fehacientemente mediante los aspectos microbiológicos analizados que el
pretratamiento químico suministra a la digestión posterior un mejor sustrato a
biodegradar.
3. La fuerte correlación entre la AME y el NMP permite contar con una herramienta para
la estimación de la biomasa en sistemas tan complejos como los residuos sólidos o
semisólidos donde resulta extremadamente difícil, en el orden práctico, cuantificar la
biomasa.

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