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7.1. DEFINICIÓN
Este fenómeno fue descrito por primera vez por Hirst en 1941, quien observo en un embrión de pollo la aglutinación de
glóbulos rojos en un vaso sanguíneo roto, mientras realizaba pases de virus de influenza en el líquido alantoideo.
Hirst reconoció la importancia de este hallazgo y describió la hemoaglutinación como un método para ensayo de virus.
Se denomina aglutinación a la interacción in vitro de un antígeno particulado ( por lo general células) con su anticuerpo
específico.
Hemoaglutinación es la propiedad que tienen ciertos virus para unir y aglutinar eritrocitos de mamíferos y aves, debido a las
proteínas que poseen en su capa externa Esta hemoaglutinación inducida por virus puede usarse para facilitar la identificación
de un virus desconocido.
7.2. VIRUS HEMOAGLUTINANTES
Son microorganismos hemoaglutinantes los ortomixovirus y paramixovirus, alfavirus, flavivirus y bunyavirus, así como algunos
adenovirus, reovirus, parvovirus, y coronavirus.
Familia Género o especie Eritrocitos
Adenoviridae La mayoría de las especies Mono y/o rata, 37°C
Poxviridae Ortopoxvirus Pollo, 37°C
Parvoviridae La mayoría de las especies Cobayo, hámster, cerdo,
humano, mono, 4°C.
Togaviridae Alfavirus Ganso, paloma, pollito; pH y
Flaviviridae Flavivirus temperaturas críticos.
Orthomyxoviridae Influenza A Pollito, humano, cobayo, 4°C.
Paramyxoviridae Parainfluenza Pollito, humano, cobayo, 4°C.
Enfermedad de Newcastle
Coronaviridae Varias especies Rata, ratón, pollito.
Bunyaviridae Varias especies Ganso; pH crítico.
Rhabdoviridae Rabia Ganso, 4°C.
Reoviridae Reovirus Humano
Rotavirus
Otros virus que sabemos que causan hemaglutinación son papovavirus, adenovirus, poxvirus, togavirus , reovirus, coronavirus,
enterovirus, y rhabdovirus. La hemaglutinina en estos virus es una parte integral del virión, pero en poxvirus es separable del
virión intacto.
7.3. MECANISMO DE HEMOAGLUTINACIÓN Y HEMOADSORCIÓN.
La actividad enzimàtica de las proteínas virales (hemaglutininas) produce hemaglutinaciòn en la cual los eritrocitos se unen por
medio de puentes. Se ha demostrado que el glóbulo rojo contiene cerca de 300 sitios en los cuales se puede adsorber un virus.
Muchos virus contienen proteínas en su capa externa que los capacitan para aglutinar glóbulos rojos de varias especies. En
influenza y algunos paramixovirus, la hemaglutinación de la superficie, que es una glucoproteína, se fija al glóbulo rojo que
posee receptores complementarios.
Elusión es la liberación del virus. El virus produce elusión sobre el glóbulo rojo a 37° C debido a la destrucción del ácido
neuramínico en sus receptores por la neurominidasa del virión, El virus eluido puede aglutinar un glóbulo rojo fresco, pero éste,
una vez eluido ya no puede ser aglutinado por la misma especie de virus, debido a la pérdida de sus receptores. Sin embargo
el glóbulo rojo eludido puede ser aglutinado por el virus de la influenza y algunos paramixovirus. Sobre esta base, estos virus
han sido dispuestos o incluidos en una serie llamada el “gradiente de receptor”. Las enzimas destructoras de receptor
producidas por Vibrio cholerae y otras bacterias impiden la aglutinación de glóbulos rojos susceptibles por mixovirus.
HEMOADSORCIÓN.
Es un fenómeno que sucede al aplicar glóbulos rojos a una capa de células en un cultivo previamente infectado con un virus
hemoaglutinante.
La hemadsorción se debe a la presencia de hemaglutinina específica del virus de la membrana plasmática de las células
infectadas, en la cual tiene lugar la adsorción de los glóbulos rojos. Los cultivos de células infectados con algunos virus
hemaglutinantes pueden adsorber glóbulos rojos en la superficie celular. Algunos virus productores de hemaglutinación, como
adenovirus, no causan hemadsorción, pero el virus de la fiebre porcina africana, agente no hemaglutinante produce
hemadsorción del glóbulo rojo porcino.
7.4. INHIBIDORES DE LA HEMOAGLUTINACIÓN.
La inhibición de la hemoaglutinación (IHA) es la unión de anticuerpos a la hemoaglutinina del virus.
Las pruebas de IHA constituyen métodos de diagnóstico e investigación sencillos y útiles en la identificación de virus,
determinación de la relación antigénica de virus aislados, identificación y cuantificación de anticuerpos contra virus.
Caracteristicas:
● Pruebas altamente específicas y sensibles.
● Se pueden adaptar fácilmente a laboratorios de escasa infraestructura por el bajo costo de los reactivos.
● Son simples y rápidas.
Hay dos métodos para realizar la IHA, en uno se realizan diluciones decrecientes de virus y se enfrentan a cantidades
constantes de suero (alfa) y diluciones decrecientes de suero que se enfrentan a cantidades constantes de virus (beta). El
método beta es el más comunmente utilizado
Las pruebas de IHA constituyen métodos de diagnóstico e investigación sencillos y útiles en la:
a. Identificación de virus.
b. Determinación de la relación antigénica entre virus aislados.
c. Identificación y cuantificación de anticuerpos contra virus.
Inhibidores específicos e inespecíficos:
Actúan inhibiendo competitivamente con los anticuerpos la hemaglutinina del virus.
El suero de muchas especies contienen inhibidores inespecíficos o aglutininas inespecíficas que pueden conducir a errores en
los resultados, por los que deben ser destruidos antes de realizar una prueba de IHA, para permitir la determinación del nivel
de anticuerpos específicos en un suero o para la correcta identificación de un virus aislado.
De acuerdo a la naturaleza del receptor de virus el suero puede inactivarse con los siguientes tratamientos: caolín, peryodato,
tripsina, enzima destructora de los receptores (EDR), calor a 56° por 30 min.
La adsorción del suero para eliminar aglutininas inespecíficas en las pruebas de IHA en la cuál se emplean glóbulos rojos de la
misma especie del suero a probar, generalmente no es necesaria.
7.5. USOS DE LA HEMOAGLUTINACIÓN
7.5.1. Investigación virológica.
El diagnóstico de las entidades virales es uno de los mayores retos a los que se enfrenta la medicina actual.
Durante las últimas décadas, el desarrollo progresivo de nuevas y mejores herramientas para evidenciar las causas de tipo
viral, hace posible que estas entidades se puedan descubrir y estudiar no sólo a nivel de laboratorios especializados, sino
también en los comunes. Las pruebas diagnósticas simples, rápidas y poco costosas para la demostración de antígenos han
reemplazado las técnicas tradicionales, largas y dispendiosas y esto ha producido una mayor agilidad en la definición del
diagnóstico.
Una capa delgada difusa de glóbulos rojos en el fondo del receptáculo (capa de microtítulo) o del tubo, indica hemaglutinación
positiva, mientras que una compacta corresponde a hemaglutinación negativa. La dilución más alta de virus que causa
hemaglutinación completa contiene una unidad HA.
1. El diagnostico para la identificación de un virus aislado.
2. Sirve para titular partículas virales activas o inactivas en una suspensión.
3. Permite purificar y concentrar virus.
4. En investigación es de gran importancia biológica en la unión de los virus a células hospedadoras, su liberación y
posibles mecanismos de infección.
5. La prueba en placa permite determinar la presencia de virus hemoaglutinantes en el líquido infectado.
La característica principal de la técnica de hemoaglutinación viral es la rapidez, además del bajo costo de los reactivos y la
simplicidad de su realización, por lo que determina su fácil adaptación al laboratorio de escasa infraestructura.
7.5.2. Investigación epidemiológica.
Para ejercer en forma eficiente el control o erradicación de una enfermedad, es imprescindible realizar el diagnóstico preciso y
oportuno de la misma.
Descubrir anticuerpos es importante para documentar la prevalencia de una infección en individuos y poblaciones.
En México, se instituyeron campañas de control y erradicación de enfermedades de carácter epidémico, las cuales están
normalizadas.
Por ejemplo la NORMA Oficial Mexicana NOM056ZOO1995, Especificaciones técnicas para las pruebas diagnósticas que
realicen los laboratorios de pruebas aprobados en materia zoosanitaria. Explica los procedimientos de laboratorio para la
identificación de virus tales como influenza aviar y enfermedad de Newcastle.