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Uso de medios de cultivo antibióticos

Prueba de cilindro Prueb.tur.


Culitivo
medio
ANTIBIOTICO Cepa de prueba Cultivo de Capa Capa de Cepa de Cultivo
semillas prueba medio
base semilla
Ampomicina Micrococcus luteus Medio Medio Medio - -
ATCC 14452 No1 No 7 No 1
Anfotericina B Saccharomyces cerevisiae Medio Medio Medio - -
ATCC 9763 No 13 No 12 No 12
Ampicilina Micrococcus luteus Medio Medio Medio - -
ATCC 9341 No1 No 11 No 11
Bacitracin Micr.Lut.ATCC 10210 Medio Medio Medio Staph Medio
Micr.Lut.ATCC 7468 D No 1 No 2 No1 aureus No 3
ATCC 10537
Carbomicina Micrococcus luteus Medio Medio Medio - -
ATCC 9341 No 3 No 11 No 11
Cloranfenicol Micrococcus luteus Medio Medio Medio - -
ATCC 9341 No3 No 1 No1
Cefalotina Staphilococcus luteus Medio Medio Medio - -
ATCC 6538 P No 1 No 2 No 1
Colistina Bordetella bronchiseptica Medio Medio Medio - -
ATCC 4617 No9 No 9 No 10
Eritromicina Micrococcus luteus Medio Medio Medio - -
ATCC 9341 No 3 No 11 No 11
Gentamicina Bac. subtilis Medio Medio Medio - -
(refobacina merck) ATCC 6633 No1 No 5 No 5
kenamicina Staph aureus Medio Medio Medio Staph aureus Medio
ATCC5538 P No 3
ATCC 6538 P No 1 No 11 No 11
Neomicina Staph aureus Medio Medio Medio - -
ATCC 6548 P No 1 No 11 No 11
Novabipcina Staph epidermidis Medio Medio Medio - -
ATCC 12228 No1 No 2 No 1
Oleandomicina Staph epidermidis Medio Medio Medio - -
ATCC 12228 No 1 No11 No 11
Paramomycin Staph epidermidis Medio Medio Medio Kiebsiella Medio
ATCC 12228 No 1 No 11 No 11 pneumoniae No 3
ATCC 10031
Polimicina B Bordetella bronchiseptica Medio Medio Medio - -
ATCC 4617 No 3 No 9 No 10
Penicilina, Staph aureus Medio Medio Medio Klebsiela Medio
oxacilina,meticilina, ATCC 6538 P No 3 No 2 No 1 pneumoniae No 3
nafcilina ATCC 10031
Estreptomicina, Bac. subtilis Medio Medio Medio Staph Medio
dihidroestrepto ATCC6633 No 1 No 5 No 5 aureus No3
micina ATCC 6538 P
Tetraciclina,oxitetraci Bac. cereus Medio Medio Medio - -
clina, clortetraciclina ATCC 11778 No 1 No 3 No 4
viomicina Bac. subtilis Medio Medio Medio - -
ATCC 66 33 No 1 No 5 No 5
ADITIVOS
Merck cat No producto Tamaño de MANUFACTURA PRODUCTO
paquete Colección cultivos de tipo americano Pruebas de semilla
1 083442,1000 D(*) glucosa
monohidratada 1 kg 12301parklawn drive Rockville Meryland
20852 EE.UU
1 01614,1000 Agar.Agar 1 kg USP estándares de referencia 4630 Antibioticos
purificado
montgomery Estándares
Manganeso(II) sulfato
1 05963 0100 monohidratado
100g Avenida Bethesda MD 20014, USA
8 221870 500 Interpolación * 80 500 ml Schleicher &schull Gmbh discos de papel

1 054590500 Caldo CASO 500 g 37586 dassel, FRG No 2528


Control de calidad de Cat. No 1-05272.0500
antibioticos Agar No 1 crecimiento Zonas con inhibicion
Cepas de prueba
Micrococcus luteus ATCCC Bueno Cepatolina,cloranfenicol y
9341 penicilina /meticilina
Staphylococcus aureus Bueno
atcc6538 p
Bacillus subtilis ATCC 6633 Bueno
Staphylococcus epidermis Bueno
ATCC 12228
Bacillus cereus ATCC 11778 bueno
Control de calidad de Cat. No 1.05270 0.5
antibioticos Agar No 2
cepas de prueba Crecimiento
Micrococcus luteus ATCC Bueno
10240
Staphylococcus aureus ATCC Bueno
6538p
Staphylococcus epidermis Bueno
ATCC 1228
Control de calidad de Cat. No 1.05271 0.500
antibioticos Agar No 5 Zonas con inhibición
Cepas de prueba Crecimiento
Bacillus subtiliS BGA Bueno Gentamicina,esteptomicina
Control de calidad de Cat. No1.05269.0500
antibioticos Agar No 11
Cepas de prueba Crecimiento Zonas con inhibición
Micrococcus luteus ATCC Bueno Ampicilina
9341
Staphylococcusaureus ATCC Bueno Kanamicina, neomicina
6538 p
Staphylococcus epidermis Bueno Oleandomicina , paramomicina
atcc
12228
Control de calidad de Cat. No 1.10672 .0500
antibioticos Agar No 12 Zonas con inhibición
Cepas de prueba Crecimiento
Saccharomyces cerevisiae Bueno Anfotericina
ATCC 9763
Control de calidad del caldo Cat No 1.05273.0500
antibiótico No 3
Cepas de prueba Crecimiento Pruebas de dilución en serie
Micrococcus luteus ATCC Bueno -
Staphylococcus aureus ATCC Bueno Kenamicina
Kiebsiella pneumoniae Bueno Esteromicina
Prueba de sensibilidad diagnostica de Agar (Agar en Agar el análisis de sensibilidad a sulfonamidas
D.S.T.) antibióticas para el “comité de expertos en antibioticos”
este medio de cultivo también se puede emplear.
Para probar la sensibilidad de los microorganismos a
antibioticos y sulfonamidas usando el método de difusión
Para probar microrganismo exigentes como neumococo, Métodos para la determinación de la sensibilidad
listeria neiseria, erysipelothrix, etc., ANSORG en (1975) cuantitativa y cualitativa han sido desarrollados por
y SOOGARD en (1978) demostraron que podría usarse ERICSON Y SHERRIS (1971) en nombre de la OMS y el
con éxito para detectar sustancias antibacterianas en la (DIN 58940) (instituto alemán de estandarización)
orina el tejido renal y la leche.

Modo de acción 0.01adenina 0.01 guanina 0.01 uracilo 0.01 xantita 0.01
Agar –Agar 12.0
La composición del medio de cultivo proporciona
condiciones de crecimiento favorables. El Preparación
almacenamiento intermedio del medio impide que los
Suspender el autoclave de 40g/litro (15 min a 121°C)
cambios de ph interfieran con la difusión. Las zonas de
verter las placas ph 7.2 = 0.2 a 25° C
inhibición están claramente definidas. Los antibioticos o
sulfonamidas no son inhibidos o antagonizados por Procedimiento experimental y evaluación
ninguno de los constituyentes del medio.
Realizar la prueba de sensibilidad como se indica en los
Composición típica (g/litro) métodos estándares. Las zonas de inhibición se pueden ver
claramente y sus diámetros se evalúan cualitativamente y
Peptona 20.0 D(*) glucosa 2,0 cloruro de sodio 3.0 fosfato
cuantitativamente en el caso de la evaluación cuantitativa,
di hidratado de hidrogeno 2.0 acetato de sodio
las zonas se miden y registran.

Control de calidad

Prueba de cepa Crecimiento Zonas con inhibicion


Escherichia coli ATCC 25922 Bueno Ampicilina
Staphylococcus aureus ATCC Bueno Tetraciclina,trimetoprim -
25923 sulfametoxazol, gentacimina
polimicina B
Pseudomonas aerruginosa ATCC Bueno Gentamicina
2785 3
Enterococcus faecalis ATCC Bueno Trimethoprim- sulfametaxazol
33186
Multiuso con interpolación propuesto por Evans y Suspender 59.5 g/litro llenar el recipiente adecuado,
neven (1951) y deibel, Evans y neve (1957) para contar autoclaves (15min a 121° C) no se sobrecalienta PH 6.7
y cultivar bacterias de acido láctico heterofermentativas , – 0.2 a 25° C el medio preparado es claro y la frente.
incluido el lactobacilo. Especie leutonostoc lactococcus
Procedimiento experimetal y evaluación
lactis y otros microrganismos que requieren una alta
concentración de tiamina en productos cárnicos , Cuando se realicen recuentos bacterianos, diluya el
alimentos enlatados, jugos de frutas y otros productos material de la muestra e inocular del Agar APT
alimenticios. El medio cumple con las recomendaciones mediasnte el vertido de la placa de incubación : 2 dias a
de la asociación americana de salud publica (1992) 35° C aerobicamente con el fin de identificar las bacterias
del acido láctico que produce una coloración verde
Modo de acción
inocular con las colonias sospechosas. Despues de
El medio contiene una rica base de nutriente con aditivos incubar durante 24 horas a 32° C , transfiera una muestra
de interpolación tiamina y varios elementos esenciales de cultivo que se ha desarrollado sobre la superficie
que proporcionan condiciones de crecimiento optimas cortada de una salchicha ahumada lugar de papel de
para las bacterias mencionadas el medio de cultivo no filtro (húmedo camara) incubar durante 18 a 24 horas a
es selectivo. Las bacterias acompañantes por lo tanto , 32 ° C y ver si hay una coloración verde. Una muestra de
también crecen muy bien la salchicha que no ha sido inoculada sirve como control
a fin de excluir otrás bacterias formadoras de pigmentos
Componente típico (g/ litro)
( por ejemplo pseudomonas ) una tambien se debe realizar
peptona caseína 12.5 extracto de levadura 7.5 D(*) una prueba bacteriologica , confirmatoria (por ejemplo
glucosa 10.0 cloruro de sodio 5.0 interpolación 80 0.2 ,barras grampositivas, prueba de catalace negativo,
sulfato de magnesio 0.8 cloruro de manganeso 0.8 sulfato prueba de nitratasa negativa, prueba de peroxidasa
de hierro (II)0.04 di cloruro de tiamina 0.001 Agar –Agar positiva, producción de acetoina apartir de glucosa
13.5 producción de amoniaco a partir de arginina.

Preparación

Cepas de prueba crecimiento

Lactobacilos acidophilus ATCC 4356 Bueno / muy bueno


Lactobacilos casel ATCC 393 Bueno / muy bueno
Lactobacilos fermentum ATCC 9338 Bueno / muy bueno
Lactobacilos lactarum ATCC 14917 Bueno / muy bueno
Lactobacilos viridescens ATCC 12706 Bueno / muy bueno
Leuconostoc mesenteroides ATCC 9135 Bueno / muy bueno
Lactococcus lactis spp. Lactis ATCC 19435 Bueno / muy Bueno
Arginina brillante – caldo de peptona de glucosa Proceso experimental y evaluación
verde (medio ABGP)
Método del filtro de membrana
Enriquecimiento de agua para cloro dañado pseudomonas
100ml de muestra de agua se filtra atraves de un filtro
aeruginosa en la prueba de agua de la piscina de acuerdo
de membrana y luego se sumerge en 15 – 20 ml de caldo
con athingwater comisión de “umweltbundesant”
de arginina
(autoridad de Alemania para el entorno)
Enriquecimiento directo
Modo de acción
Suspender 100ml de muestra de agua en 100 ml de
La rica base de nutrientes del medio permite las
incubación de caldo de arginina de doble vigor 48 horas
mejores condiciones de crecimiento. El gremio brillante
aeróbicamente a 35°C .
inhibe la flora Gram positiva que lo acompaña, la entrada
de gremio brillante no tiene un efecto toxico sobre las Un cambio de color para violeta es una indicación de la
pseudomonas eruginosa. presencia de pseudomonas aeroginosas
Un cambio de color de gris a verde de azul a violeta para racha de confirmación en arsenales selectivos por
indica la presencia de aeruginosa el sistema indicador se ejemplo métodos para agregar a DIN 384111 parte 8
basa en el fuerte alcalización de arginina en presencia
de PS aeruginosa. En combinación con azul de bromo Aditivos
timol y confirmo que el color cambia a azul violeta Merrck cat. No Producto
tamaño de paquete
Preparación DEV ENDO Agar 500g
1.10684.0500
Suspender 35 .5 g en 1litro de agua demin, dispensar en MacCONKEY Agar 500g
1.15465.0500
tubos de ensayo y autoclave (15 min a 121°C ) PH 7.0 +-
0.2 a 25° C. 1.10989.0500 Pseudomonas Agar F. base
500g
PARA AGUA AMBIENTAL SOLO MUESTRAS 1.10988.0500 Pseudomonas Agar P
500g
Para la inhibición de la flora que acompaña, recomienda 1.09029.0100 Nebler’s reagent
agregar 1 ml de solución de acido nadilixico ( 5mg de 100 ml
1.06219.0005 Ácido nalidixic
acido nadilixico disuelto en 1 ml de agua de desminado )
5g
al medio a una temperatura de 45 – 50 ° C homogenizar
agitando suavemente

Control de calidad

Cepa de pruebas crecimiento Cambio de color a violeta


Pseudomonas aeroginosa ATCC 27853 Bien /muy bien +
Pseudomonas aeroginosa ATCC 9027 Bien / muy bien +
Pseudomonas stutzeri ATCC 17832 Ninguna
Aeromonas hidrophyla ATCC 7966 Bien / muy bien +
Enterococcus faecallis ATCC 19433 Ninguna
Escherichia coli ATCC 25922 Bien / muy bien +/-
Utilizando como prueba preliminar para enterococos y Preparación
tambien para el enriquecimiento selectivo
Suspender 35g o 70 g /litro de dispensación en
Ver también bromocresol-caldo de azida purpura recipientes adecuados autoclave (15 min a 121° c no sobre
calentar
Modo de acción
Ph 7.2 +- 0.2 a 25° C
La concentración de sodio presente en este medio inhibe
en gran medida el crecimiento de la flora microbiana El caldo preparado es claro y de color marron amarillento
Gram negativa acompañante, al tiempo que evita los
Proceso experimental y evaluación
enterococos
Se puede agregar pequeños volúmenes de muestra (hasta
El uso de la azida sódica como un inhibidor selectivo
1ml) al caldo de concentración normal .los volúmenes
para bacterias gram negativas se informo en los estudios
mas grandes (10 ml o mas )se deben diluir con un
de EDWARDS (1933- 1938) y HARTMAN (1936) sobre
volumen aqual de doble fuerza .
el aislamiento de estraglactias MALLMAN (1940)y
SNYDER Y LISHTEIN(1940)mostraron que la azida Si el caldo se vuelve turbio debido al crecimiento
sódica tambien puede usarse para el aislamiento de microbiano, es probable que estén presentes los
enterococos del agua enterococos. El cultivo debe luego inocularse en
bromocresol , caldo de azula puras si este caldo no lo es
La presencia de enterococos(enterococccus faecalis S
convertirse en enterococos turbios no están presentes.
durans S bovi Y equinus) sirve como indicador de
contaminación fecal, especialmente cuando esto ocurrio Aditivos
hace mucho tiempo y las bacterias coliformes menos
resistente , incluida E coli puede estar ya muerto cuando Merck cat. No producto Tamaño de
el análisis se lleva a cabo. paquete
1.03032.05000 Bromocresol – 500g
Composición típica (g/litre) caldo de azida
purpura
Peptona de la caseína 15.0 extracto de carne 4.5 d (*)
glucosa cloruro de sodio 7,5 azida de sodio 0.2

Control de calidad

Cepas de prueba crecimiento

Enterococcus faecalis ATCC 11700 Bueno /muy bueno


Enterococcus faecalis ATCC 19433 Bueno / muy bueno
Enterococcus hirae ATCC 8043 Bueno / muy bueno
Streptococcus bovis DSM 20065 Justa / muy bueno
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Ninguna / pobre
Escherichia coli ATCC 25922 Niguna / obre
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Niguna / pobre
Microrganismos Enriquecimiento aislamiento Diferenciación de cultivos
aeromonas  GSP Agar  GSP Agar
Anaerobicos generales  Caldo de hígado  Anaeróbico de Agar
 Caldo de tioglicolato acc de BREWER
 Medio de tioglicolato  Agar de sangre
(enriquecido) anaeróbico acc de
Acc a CDC (base) CDC 8BASE)
 Medio de tioglicolato fluido.  Agar clostridial
 Tioglicolato fluido de medio G reforzado
 Medio anaeróbico de TVLS  Medio de clostridial
 Caldo de carne cocida reforzado
 Agar de hígado de
carne
 Agar Columbia
 DCA Agar acc. a
weenk
Bacilos  Agar cereus selectivo  Agar cereus selectivo
según MOSSEL
 Dectrosa agar de
caseína – peptona
Brucella Caldo de triptosa  Agar de brucelosis  Agar de brucelosis
 Agar de triptosa  Agar de triptosa
campylobacter  Agar selectivo para  Agar selectivo para
campilobacter campilobacter
candida  Agar candida selectivo  agar extracto de arroz
según NICKERSON
 Agar dectrosa
SABOURAUD-2%
 Agar para hongos
básicos según
KIMMIG
 agar biggy
clostridium  Caldo clostridial  Agar clostridial  Agar sulfito de hierro
diferencialreforzado y de reforzado
(drmc)  Agar SPS
 Caldo de hígado  Agar TSN
 Caldo de tioglicolato  Agar TSC
 Medio de fluido de
tioglicolato
 Medio de fluido de tioglicolato  Agar DCA acc de
G WEENK
Clsotridium  Caldo de tyrobutiricom
hidrobutiricum
Organismos coliforme  Caldo brillante  Agar BROLAC  Agar ENDO
incl Ecol  Caldo brillante de fluorocult  Agar BROLACIN  Agae DEV ENDO
 Calde de EC  Agar azul de lactosa  Agar VRB
 Caldo de glutamato DEV de china  Agar mac CONKEY
 Caldo de peptona glucosa de
 Agar VRB  Agar fluorocult ECD
DEV
 Caldo lactosa de peptona
 Agar lactosa de
dexicolate
 Caldo de lactosa de peptona acc
de EIJKMAN  Agar GASSNER
 Agar LL
organismo conform  Caldo de sulfato de  Agar LEVINE EMB  Agar fluorocultVRB
Incl. E coli lauril  Agar ENDO C  Agar fluorocult mac
 Clado de mac  Agar DEV ENDO CONKEY
CONKEY  Agar fluorocult EDD  Agar M –ENDO LES
 clado DE MOSSEL
 Agar MF-C
(caldo ee)  Agar Mac CONKEY
 Caldo deFiltro de  Agar tergitol 7
membrana ENDO  Agar XLD
 Fluorocult DEV  Agar cromocult -
caliform
Corynebacterium  Agar selectivo  Agar selectivo
corinebacterium corynectobacterium
Dermatophytes  Caldo de extracto  agar selectivo  Agar selectivo
de malta demathopytes(DTM dermathophytes (DTM)
 Caldo de dectrosa )acc de TAPLIN acc de TAPLIN
SABOURAUD-2%  Agar de hongos básicos  Agr básico para hongos
 valor de caldo acc de KIMMIG acc de KIMMIG
 Agar para hongos  Agar básico para hongos
selectiovos patogénicos selectivo patogénico
 Media SABUORAUD  Media SABOURUAND
 Agar CZAPEK-DOX  AgarCZAPEK- DOX
Ecoli0157:H7  Agar Fluorocult E coli
0157 H7
Enterococci  caldo azide de dextrosa  agar esculina  agar esculina
 bromocresol – caldo  agar selectivo de flitro de  agar selectivode fltro de
azida purpura membran enterococcus
acc de SLANETZ y membrana enterococcus
BARTLEY acc de SLANETZ
 agar CATC  agar CATC
 agar base estreptococcu  agar base
KF
 agar BROLACIN strephtococcus KF
 agar selectivo de base de  agar selectivo filtro de
filtro de membrana membrana
enterococcus acc de
bacteroocccus acc de
SLANETZ y bartley
 agar azida kanamicina SLANETZ Y
esculina BARTLEY
 agar enterococcu  agar azide kanamicina
cromocult esculina
Lactobacilos  caldO MRS  agar APT
 agar naranja SERUM
 agar ROGOSA
 agar acido sorbico
 agar MRS
Legronella  Agar básico legionella  Medio selectivo de
CYE legionela deGVPC
 Legionela pack combi  Agar comp legionela
Leutonostoco  Agr APT
 Agar naranja
Microorganismo lipolytic  Agar tributirim Agar tributyrin
listeria  Caldo en riquecido con  Agar de triptosa  Agar listerina palcam acc
listeria  Agar de listeria PALCAM de VANETTE
 Caldo en riquecido con DE VAN NETTE  Agar selectivo de oxford
listeria acc de FDA/ IDF -FIL
 Agar selectivo de Oxford
 Caldo enriquecido con
listeria (LEB)acc de FDA
listeria
 Caldo de triptosa
 Caldo L-PALCAM
 Caldo de UVM
 Caldo FRASER
Ver bacterias de la tuberculosis
Micoplasma  Agar columbia
Neiseria  Caldo de triptosa  Agar THAYER –  Agar THAYER –
MARTIN MARTIN
 Agar MUELLER-
HINTON
 Agar mueller –hinton acc
de NCCLS
 Agar triptosa
Proteolites  Agar de calcio caseinato  Agar de caseinato de
acc de FRAZZIER Y calcio accc de FRAZIER
RUPP Y RUPP
 Gelatina de nutriente
 Agar de gelatina DEV
 Gelatina nutriente DEV
Pseudomonas  Mabase de caldo de  Agar BROLACIN  Agar GSP
malaquita verde  Agar GSP  Agar BROLACIN
 Caldo de arginina acc de  Agar B KING  Agar PSEUDOMONA F
SCHUBERT  Agar F pseudomonas  Agar pseudomona P
 Agar XLD
 Agar centremide
salmonella  Caldo de MOSSEL(EE-  Agar bismuto de sulfito  Agar bismuto de sulfito
caldo) acc de WILSON –BLAIR acc de WILSON BLAIR
 Caldo de M  Agar BPL  Agar LIFSON
 Caldo PREUSS  Agar BPLS  Agar manitol plateado
 Caldo enriquesido con  Agar BPLS(USP9  Agar salmonell acc
salmonella acc de  Agar modificado BPLS  De ONOZ
RAPPAPORT  Agar de lactosa  Agar XLD
 Caldo SBM bromocresol de purpura  Agar ENDO
 Caldo de selenite y cistina  Agar BROLAC  Agar entérica HEKTOEN
 Caldo enriquesido con  Agar BROLACIN
selenite accc de LIFSON  Agar LEIFSON
 caldo de tetrtionate acc de  Agar DCLS
MULLLER –  Agar DHL ACC de
KAUFFMANN SHASAKI
 Caldo TBG  Agar LL
 Agua de peptona  Agar ENDO
(tamponada)  Agar enteric de
 Caldo enriquecido con KEKTOEN
salmonela acc  Agar mac CONKEY
RAPPAPORT Y  Agar salmonella acc de
VASSILIADIS ONOZ
 Caldo salmosisty  Agar manitol pril
 Caldo de lactosa  Agar SS
 Agar VRB
salmonella  Agar XLD  Agar RAMBACH
 Agar REAMBACH
 Medio MSRV
 Agar XLT4
Estaphylococci  Azure agar giaku  Agar BAIR PARKER
 Agar gjak  Agar CHABMAN
 Agar gjak No 2  Agar fenol rojo de
 Agar baird- Parker manitol salt
 Agar BROLACIN  Agar BOUGEL –
 Agar CHAPMAN JOHNSON
 Agar KRANEP
 Agar fenol rojo manitol
 Agar BOGEL –
JOHNSON

 Agar azide gjak  Agar gjak


 Agar gjak  Agar gjiakNo 2
 Agar Columbia  Agar electio beta
 Agar de base selectivo estreptococo acc de
para treptococcus LIEVER - MEISTER I
agalactia TKT BRAVENI
 Agar electivo beta
estreptococus acc de
LIEVER- MEISTERY
BRAVENI
 Agar selectivo de
estreptococos
 AGAR M17acc de
TERZAGHI
Tubercy bacilli Base media TB acc de  Base media TB
LOWENSTEIN- JENSEN
Vibrio  Agar TCBS
 Agar BCLS
Yeasts  Agar básico de hongos acc
de KIMMIG
 Agar electivo candida acc
de NICKERSON
 Agar extracto de malta
 Agar OYI
 Agar dextrosa de papa
 Agar dextrosa
SABOURAUD2%
 Media sabouraud
 Agar de trabajo
 Agar de nutrientes WL
 Agar YGC
 agar
yersinia  Agar selectivo de
yersina
 agar selectivo de
yersina accc de
SCHIEMANN
Modo de Accion Los platos son claros y verde claro

El medio contiene una serie de agentes terapéuticos ( Preparación experimental y evaluación


tioglicolato formaldehydesasulfoxylate, cystene) que
Inocular el medio del cultivo utilizando el método de
aseguran anaeróbico adecuado (QUASTEL Y
vertido en placa para identificación de microrganismos
STEPHENSON 1926 aubertin al 1928) sirve como un
formadores de esporas. Añadir a material de muestra a
redox azul de metileno. Indicador , su decoloración indica
una temperatura 80-100|c incubación, incube hasta 48
anaerobiosis
horas a 35 ° c a una atmosfera anaeróbica en condiciones
Composición típica (g/litre) óptimas (por ejemplo, anaerocult a anaerocult mine ).

Peptona de caseína típica 10.0 peptona de harina de soya


5.0, extracto de levadura 5.0 L-cistina 0.4;de (+) glucosa
ADITIVOS
10.0; cloruro de sodio 5.0: tioglicolato de sodio
2.0;formaldeido sulfoxilato sódico 1.0; azufre metileno Merck cat. Producto amañ. Paquet.
0.002; agar –agar 12.6
1.13829.0001 Anaerocult A 1x10
1.01611.0001 Anaerocult A mini 1x25
Preparación 1.13807.0001 Anaerocult P 1x25
1.16387.0001 Anaerobic jar 1ea
Suspenda 51 g/ litro en autoclave (15 min a 121° C) verter 1.07040.0001 Cesta de la palca 1ea
las placas para dar capas gruesas. 1.15112.0001 Anaerotest 1x50
Ph 7.2 = 0.2 a 25°C 1.14226.0001 Anaeroclip 1x25

Control de calidad

CEPAS DE PRUEBA CRECIMIENTO

Clostridium tetani ATCC 19406 feria


Clostridium botulinum Bueno / muy bueno
Clostridium pertringens ATCC10543 Bueno / muy bueno
Clostridium putrificum ATCC 25784 Bueno / muy bueno
Clostridium septicumATCC12464 Bueno /muy bueno
Clostridium novyi 1795 Bueno / muy bueno
Stphylococccus aureus ATCC 25923 Medio /Muy Bueno
Achericia coli ATCC 25922 Bueno /muy bueno
Antibiótico Agar No 1
Cat No ,1.05272.0500
(500g)
Antibiótico Agar No,2
Cat No ,1.05270.0500
(500g)
Antibiótico Agar No, 4
Se puede preparar a partir de antibiótico agar No. 2 y 1 g/litro D (+) glucosa

Antibiótico Agar No, 5


Cat No ,1.05271.0500
(500g)
Antibiótico Agar No, 6
Sepuede preparar con clado de CASO y 0.03 g/litro de sulfato de manganeso

Antibiótico Agar No, 7


Corresponde al antibiótico agar No 2 pero con PH 7.0 = 0.2

Antibiótico Agar No, 8


Corresponde al antibiótico agar No 2 pero con PH 5,6 = 0.2

Antibiótico Agar No, 9


Se puede preparar a partir de caldo CASO 20 g/litro de Agar - Agar

Antibiótico Agar No, 10


Se puede preparar a partir de caldo CASO 12g/litro Agar - Agar y 10 g/litro de interpolación 80

Antibiótico Agar No, 11


Cat No ,1.05269.0500
(500g)
Antibiótico Agar No, 12
Cat No ,1.10672.0500
(500g)
Caldo Antibiótico (medio No. 3)
Cat No ,1.05273.0500
(500g)
SABOURAUD – 2 % Caldo Dextrosa ( medio No. 13)
Cat No ,1.08339.0500
(500g

Para el ensayo microbiológico de antibióticos


en preparaciones farmacéuticas. Fluidos
corporales, preparación de alimentación Estos cultivos cumplen con las
animal y otros materiales según GROVE Y recomendaciones de la farmacopea de los
RANDALL (1995) estados unidos XXII (1995) y el antibiótico
agar de la FDA también corresponde al medio
A de la farmacopea europea II

El material de la muestra puede analizarse por Antibióticos bajo examen y un estándar


métodos de dilución y difusión, el método antibiótico se aplican como manchas (cilindro,
más común es la prueba de difusión en Agar, papel perforado – discos)en las zonas de
que se puede realizar de varias maneras: inhibición de incubación Se desarrollan
perforaciones cilíndricas o pruebas con disco alrededor de sitio de aplicación, No hay
de papel. Se basa en el siguiente principio. crecimiento microbiano, en estas zonas y su
diámetro es una medida del antibiótico bajo
El medio de cultivo se inocula con la cepa de
prueba se determina al comparar el diámetro
prueba correspondiente y se vierte en placas de
de su zona de inhibición con el del estándar de
cantidades definidas del.
antibiótico.

Composición típica (g/litro)


Composición del Medio medio Medio Medio medio Medio Medio Medio medio Medio Medio Medio Medio
cultivo medio(g/l) No 1 No 2 No 3 No 4 No 5 No 6 No7 No8 No9 No10 No11 No12 No 13
merck merck merck merck merck merck merck merck merck merck merck merck merck

Extracto de carne 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 - 1.5 1.5 - - 1.5 2.5 -
Extracto de levadura 3.0 3.0 1.5 3.0 3.0 - 3.0 3.0 - - 3.0 6.0 -
Peptona de caseína 4.0 - - - - 17.0 - - 17.0 17.0 4.0 - -
Peptona de la carne 6.0 6.0 5.0 6.0 6.0 - 6.0 6.0 - - 6.0 10.0 10.0
Peptona de harina de soya - - - - - 3.0 - - 3.0 3.0 - - -
D(+)glucosa 1.0 - 1.0 1.0 - 2.5 - - 2.5 2,5 1.0 10.0 10.0
Cloruro de sodio - - 3.5 - - 5.0 - - 5.0 5.0 - 10.0 -
Hidrogenofosfato de di- - - 3.68 - - 2.5 - - 2.5 2.5 - - -
potasio
Di hidrógeno fosfato de - - 1.32 - - - - - - - - - -
potasio
Agar-Agar 15.0 15.0 - 15.0 15.0 - 18.0 15.0 20.0 12.0 15-0 20.0 -
Polisorbato 80 - - - - - - - - - 10.0 - - -
Sulfato de manganeso - - - - - 0.03 - - - - - - -

Cantidad requerida 30.5 25.5 17.5 26.5 25.5 30.0 25.5 25.5 50.0 52.0 30.5 62.0 31.0
(g/litro)

PH a 25°C
6.5 6.5 7.0 6.5 7.9 7.0 7.0 5.6 7.2 7.2 7.9 5.1 7.1

(=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2) (=0.2)

Preparación
Suspender la cantidad requerida de autoclave del medio
de cultivo (ver tabla)(15 min a121°C )agregar la cepa de
prueba de bacterias de 45-50° C verteer las placas.
Las placas listas para usar son claras y de color marron Se pueden almacenar en el refrigerador a 4°C, pipetear las
amarillento soluciones de antibióticos en los cilindros y luego incubar
a 37°C durante 16 a 24 horas
Procedimiento experimental y evaluación
Evaluación eliminar el cilindro medir el diámetro de las
1. Prueba de cilindrfo zonas de inhibición (es mejor usar un instrumento de
Procedimiento llene las placas de Petri con 14 ml del lectura de zona) Y evaluarlos estadísticamente, dibujar
medio para formar la capa base,después de que esto haya una curva estándar utilizando los valores de las
establecido la superposición con 4 ml de la capa de soluciones estándar y leer las actividades de las
semilla inoculada, coloque el cilindro de acero o de vidrio soluciones de prueba
en el medio del cultivo enfriado en condiciones esteriles:
las placas de prueba listas para usar 2. Prueba perforada
Se perforan orificios del medio de cultivo inoculado y las
soluciones de antibióticos se pipetean en ellos, todos los
demás pasos son análogos a los descritos en la prueba de
cilindro
3. Prueba con disco de papel
El disco de pael con un diámetro de 9 mm esta
impregnado con la solución de antibióticos y se coloca en
el medio del cultivo,el antibiótico tambioen se puede
aplicar al disco
Después de haber sido colocado en las placasmedianas
que continen una única capa de medio con un grsor de 2
mm, se puede utilizar para estas se pueden emplear
varios antibióticos No 2 0 5 dependiendo del ph requerido
todos los demás pasos son analogosa los descritos en la
prueba del cilindro. .evaluación del ultimo tubo que no muestra turbidez
frente al crecimiento microbiano contiene la actividad
4. Prueba de dilución en serie antibiótica en una concentración correspondiente a la
La actividad antibiótica se determina cuantitativamente CIM
utilizando la sensibilidad conocida de una cepa de prueba 5. PRUEBA TURBIDIMETRICA
frente a un antibitico que se expresa numericamentecomo Esta prueba es mas precisa y mas sensible que la prueba
la concentración inhibidora minima.MIC de dilución en
La dilución en serie del procedimiento del antibiótico a Serie
analizar se pipetea en el caldo de antibiótico, que luego se Procedimiento incubar tubos que contengan alícuotas de
inocula con una cantidad definida de la cepa de prueba 1 ml de la solución de antibiótico y alícuotas de 9 ml del
relevante caldo de durante 4 horas a37° C en un baño de agua ,
luego se detiene el crecimiento de las bacterias de prueba
mediante la adicion de 0.5 ml de un diluido formaldeido
sokurion y la turbidez evaluada fotométricamente.
Evaluacion . la concentración de antibióticos se
determina comparando la absorbancia de la solución de
prueba con la de una curva estándar previamente
construida.

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