AISLAMIENTO, DESCRIPCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE HONGOS
Angie Juliana Blanco Matajira – ajblancom_1@uqvirtual.edu.co – Andrea Sierra Isaza
asierrai@uqvirtual.edu.co - Luz Andrea Aranda - laarandaa@uqvirtual.edu.co
Universidad del Quindío, Microbiología, Biología.
RESUMEN:
En la práctica de laboratorio se
observaron diferentes especies de hongos,
se seleccionó uno en específico para su
respectivo aislamiento e identificación por
medio de técnicas como la tinción con azul
de lactofenol con el fin de clasificarlo en
un género específico.
INTRODUCCIÓN:
Los hongos representan un numeroso
grupo de organismos que se distribuyen en
la naturaleza, ayudan a la descomposición
de la materia orgánica y participan en
algunos ciclos biológicos.
Los hongos fueron clasificados dentro del
reino plantae esto porque son organismos
inmóviles, que presentan estructuras que
se asientan firmemente sobre un sustrato
en el que desarrollan su ciclo de vida, sin
embargo, en los estudios moleculares se ha
observado que estos hongos están más
próximos al reino animalia.
Los hongos filamentosos son
microorganismos eucariotas, aerobios
facultativos los cuales se reproducen de
manera natural por medio de esporas,
sexual o asexualmente (Vargas y
Villamizar, 2005). Los hongos tienen
como característica la carencia de
clorofila, por tanto no pueden realizar
fotosíntesis y deben nutrirse a partir de
materia orgánica ya elaborada (Arenas,
1993). Así mismo, tienen una pared celular
formada por quitina el cual es un
compuesto (polisacárido) fuertemente
rígido. Por lo anterior, este tipo de
microorganismos deben absorber los
nutrientes simples y solubles, al contrario
de fagocitar los alimentos.
Los hongos pueden desarrollar su ciclo de
vida como parásitos los cuales necesitan
materia orgánica viva, contrario a esto
puede ser saprofitos que pueden
desarrollarse en materia orgánica inerte o
en descomposición.
La estructura fúngica consta de un
complejo llamado talo o micelio, que a su
vez está constituido por múltiples
filamentos o hifas, este micelio se divide
en dos: micelio vegetativo (las hifas crecen
solo en él ápice) y micelio aéreo (crecen en
la superficie del medio hacia el aire, ahí se
encuentre la parte reproductora del
hongo). La mayor parte de estos hongos
son inmóviles no obstante algunos pueden
tener células reproductoras móviles
(Arenas, 1993).
Las esporas son cuerpos resistentes que
forman los hongos en estado latente o de
reposo, que se producen de dos maneras
diferentes sexual y asexualmente
(Moreno, 2000). El objetivo de esta
práctica es observar, reconocer e
identificar las estructuras morfológicas de
un hongo por medio de aislamiento y
tinción de este con el fin de clasificarlo
según la nomenclatura internacional de
micología.
METODOLOGÍA
Para la realización del medio de cultivo, se
utilizó un agar sólido nutritivo de cultivos
mixtos previamente preparado por el
auxiliar de microbiología, luego se expuso
durante 10 minutos en el baño de mujeres
del 3 piso de la Universidad del Quindío a
la 1:25 pm (Fig. 1)
Fig. 1 Medio de cultivo expuesto en el
baño de mujeres de la Universidad del
Quindío.
Se selló la caja de Petri con cinta de
enmascarar y se guardó en una incubadora
especial durante ocho días a temperatura
ambiente y se realizó la observación y
descripción morfológica de las colonias de
hongos formadas utilizando un
estereoscopio. Seguidamente se realizó el
aislamiento del hongo en un microcultivo,
donde en una caja de Petri con un papel
filtro húmedo, se colocaron 2 palillos de
forma vertical y sobre estos, un cuadro de
2x2 de Agar nutritivo previamente
preparado (Fig 2 y 3).
Fig. 2 Microcultivo elaborado para el
aislamiento del hongo a estudiar
Con el asa bacteriológica previamente
flameada se tomó parte del micelio del
hongo elegido para estudiar, y se sembró
en 5 puntos del agar, seguidamente se puso
un cubreobjeto sobre el agar ya sembrado
y se dejó en una nevera a temperatura
ambiente durante 8 días. En este lapso de
tiempo se humedecido el cultivo para
evitar que el hongo muriera. (Fig. 3)
Fig. 3 Aislamiento del hongo a estudiar
Tinción de Lactofenol
Esta tinción se utiliza para ver de forma
clara las estructuras fúngicas ya que tiene
una afinidad a la coloración de micelio. Se
inició el proceso de tinción agregando una
gota de azul de lactofenol en un
portaobjetos seco, luego se tomó el
cubreobjetos que estaba sobre el micelio
del hongo a estudiar con unas pinzas y se
puso sobre la gota de azul de lactofenol,
seguidamente se retiró el exceso de
colorante con un hisopo (Fig. 4)
Fig. 4 Tinción con lactofenol del hongo a
estudiar

Y se observó en el microscopio en 40x
(Fig. 5) y 100x (Fig.6)
Fig. 5 Observación en 40x del hongo a
estudiar con tinción de lactofenol
Fig. 6 Observación en 100x del hongo a
estudiar con tinción de lactofenol
Resultados y discusión
La morfología tanto macroscópica como
microscópica de los hongos fueron las
primeras características utilizadas para
identificar el género del hongo. Según
Alexopoulos et. al, 1996, la temperatura
es uno de los factores a tener en cuenta ya
que esta influye en el crecimiento , la
germinación de esporas, reproducción y
en general , todas las actividades del
organismo. Sabemos que los organismos
se pueden clasificar como psicrofilicos,
mesofilicos, o termofilicos. Los
psicrofilicos tienen un minimo de
temperatura de crecimiento menor a los
0° grados y máxima menor a los 20°
grados siendo la optima en un rango de -
0°-17°C. Los mesofilos, la mayoría de los
hongos tienen una temperatura minima de
0°C y máxima menor a 50°C y
finalmente los termófilos poseen una
minima de 20°C y máxima mayor a los
50°C (Kendrick, 2000). La mayoría de los
hongos crecen a un rango de temperatura
entre 25°C a 30°C (Kavanagh, 2005).
Además de esto, el pH también es
fundamental para el desarrollo de los
hongos , a un pH alto se ve afectada la
solubilidad de los metales y a pH bajo se
afectan los sistemas enzimáticos , el
ingreso de vitaminas esenciales y acidos
organicos y la toma de minerales
(Cochrane, 1963) El ph optimo por lo
general en hongos es entre 4 y 6
(Kavanagh, 2005). En la observación de
los hongos formados en el medio de
cultivo expuesto en el baño de mujeres
durante 10 minutos a una temperatura
promedio de 26°C (Fig. 7)
 El haber crecido en este medio
nutritivo nos indica que no es un
A1 hongo exigente en cuanto a
nutrientes, al parecer posee un
A2 crecimiento muy acelerado,
teniendo en cuenta que estaba en
condiciones óptimas de
A3 temperatura, a la hora de aislar el
hongo, este crecio de forma
A4
acelerada en un lapso de 24 hrs,
sin embargo estas afirmaciones no
son suficientes para deducir el
A5 genero del hongo. Las
características físicas del hongo
nos puede dar una pista, al ser de
Fig. 7 Colonias de hongos formadas esta textura algodonosa , podría
en el medio nutritivo expuesto tratarse del genero Mucor

Se obtuvieron mas de 20 colonias

diferentes de hongos, algunos
contaminados por otros , por lo tanto se
descartaron para el estudio. Los hongos
A1 y A2 se determinaron como hongos
filamentosos de coloración clara y
micelio aéreo, los hongos como A5 y A5
se determinaron como hongos
contaminados por otras colonias cercanas,
por su apariencia física, al parecer
podrían tratarse de hongos del genero
Cladosporium por la tonalidad oscura y la
morfología de la colonia . El hongo A2
fue el elegido para el estudio, es un hongo
filamentoso, de color blanco con partes de
color amarillo muy claro (Fig. 8)

Fig. 8 Hongo elegido para el aislamiento