AISLAMIENTO DE ACTINOMICETOS

METODOS DE MUESTREO Y COLECCIÓN

1. Asepcia
2. Representatividad
3. Rotulación
4. Mantención a 4ºC(en exámen no inmediato)

PARÁMETROS ECOLOGICOS Y MEDIOS

1. Tº, pH, [iónica], Eh, [substrato]: en campo y laboratorio

2. Modificación del medio: según ecosistema
- agregado de extracto natural: en aislamiento inicial
- uso de agar con substrato complejo o pobre: ejemplo quitina
- incorporación de antifúngicos: nistatina, cicloheximida
3. secado de placas x 3 días: evita bacterias
4. tiempo de incubación: 4-20 días: son lentos excepto termofílicos.

AISLAMIENTO NO SELECTIVO DESDE EL SUELO

1. pretratamiento del suelo

2. uso de medio selectivo
Ejemplo:
- mezcla de suelo y agua
- calentamiento a 50-55ºC x 1 h
- uso del medio CYC con antibióticos (ug/mL): cycloheximida (50),
novobiocina (25)
- incubación a 50-55ºC x 1 día
- crecimiento de Thermoactinomyces

AISLAMIENTO DESDE PLANTAS Y MATERIAL DE PLANTAS

1. Toma aséptica de partes de plantas

2. Secado (2-7 días)
3. Sembrado en medio con agar con extracto de planta (1-5mL): Por
introducción, rodamiento o estrías, uso de su diluyente previo agitado
en buffer fosfato o extracto de planta diluído 1/4 y de diluciones
menores.

AISLAMIENTO DESDE AGUAS

Centrifugación (6000g) o filtración (filtro: poro 0,54um).

1. Diluciones
2. Plaqueo.

SUBCULTIVO Y PURIFICACION

1. transplante de colonias a agares de mantenimiento y de réplica para

selección.