Extracción casera de ADN

Home DNA extraction

Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &

Universidad de Córdoba, Facultad de Ciencias Básicas, Departamento de Biología,

*camilo2319998@gmail.com

Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &. 2018. Extracción casera de ADN.

RESUMEN
Durante la práctica de extracción casera de ADN realizada en las instalaciones del laboratorio
de biología molecular en la Universidad de Córdoba, se tuvo como objetivo principal
observar e identificar los diferentes materiales que hacen posible esta extracción y reconocer
todas las etapas para una buena extracción de ADN casera en tejido vegetal al analizar la
función que cada uno de estos cumple en el procedimiento.
PALABRAS CLAVES: extracción, ADN, tejido vegetal.

ABSTRACT

During the practice of home DNA extraction performed in the facilities of the laboratory of
molecular biology at the University of Cordoba 's main objective it is to observe and identify
the different materials that make possible the extraction and recognize all stages for good
DNA extraction home in plant tissue to analyze the role each of these plays in the process.

KEYWORDS: extraction, DNA, plant tissue.

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Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &. 2018. Extracción casera de ADN.
 INTRODUCCIÓN
En los organismos vivos, el ADN se
presenta como una doble cadena de
nucleótidos, en la que las dos hebras están
unidas entre sí por unas conexiones
denominadas puentes de hidrógeno. Las
secuencias de ADN que constituyen la
unidad fundamental, física y funcional de
la herencia se denominan genes. Cada gen
contiene una parte que se transcribe a ARN
y otra que se encarga de definir cuándo y
dónde deben expresarse. La información
contenida en los genes (genética) se
emplea para generar ARN y proteínas, que
son los componentes básicos de las
células, los "ladrillos" que se utilizan para
la construcción de los orgánulos celulares,
entre otras funciones. Dentro de las
células, el ADN está organizado en
estructuras llamadas cromosomas que,
durante el ciclo celular, se duplican antes
de que la célula se divida. Los organismos
eucariotas (por ejemplo, animales, plantas,
y hongos) almacenan la inmensa mayoría
de su ADN dentro del núcleo celular y una
mínima parte en los elementos celulares
llamados mitocondrias, y en los plastos, en
caso de tenerlos; los organismos
procariotas (bacterias y arqueas) lo
almacenan en el citoplasma de la célula, y,
por último, los virus ADN lo hacen en el
interior de la cápside de naturaleza
proteica.
El ADN es la abreviatura del ácido
desoxirribonucleico (en inglés, DNA).
Que constituye el material genético de los
organismos. Es el componente químico
primario de los cromosomas y el material
del cual que los genes están formados, se
puede extraer con sofisticados equipos y
también es posible realizar una extracción
de ADN de forma totalmente casera y sin
Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &. 2018. Extracción casera de ADN.
contraindicaciones. La extracción de ADN
de una muestra celular se basa en el hecho
de que los iones salinos son atraídos hacia
las cargas negativas del ADN, permitiendo
su disolución y posterior extracción de la
célula. Se empieza por lisar (romper) las
células mediante un detergente,
vaciándose su contenido molecular en una
disolución tampón en la que se disuelve el
ADN. En ese momento, el tampón
contiene ADN y todo un surtido de restos
moleculares: ARN, carbohidratos,
proteínas y otras sustancias en menor
proporción. Muchos estudios de Biología
Molecular comienzan con la extracción de
ácidos nucleicos. Utilizando sencillas
técnicas para poder extraer el ADN de un
producto natural y así observar la
estructura fibrilar del ADN.
DISEÑO DE METODOLOGÍA
ÁREA DE ESTUDIO: la práctica de
extracción casera de ADN fue realizada en
el laboratorio de biología molecular de la
Universidad de Córdoba – Montería, cuyas
coordenadas geográficas son 8°47'32"
latitud Norte, y 75°51'43" longitud oeste.
(Fig.1).
Fuente: Google Earth,2017
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Figura. 1 localización del sitio de la Imagen 2. Alcohol, detergente líquido,
práctica. jugo de piña, sal, agua, espinaca, vasos,
licuadora, colador y un tubo de ensayo.
MÉTODOS: para llevar a cabo esta
práctica fue necesario que el docente RESULTADOS
encargado explicara el procedimiento a
seguir, teniendo en cuenta lo anterior se  LICUADO DE ESPINACA
necesitaron los siguientes materiales MAS SAL.
alcohol, detergente líquido, jugo de piña,
sal, agua, espinaca, vasos, licuadora,
colador y un tubo de ensayo (imagen. 2) ,
se tomó un beaker y se le agrego 200 ml de
agua, seguidamente se añadieron hojas de
espinaca picadas y una pizca de sal,
después se llevó a la licuadora y se procesó
durante 15 segundos, al terminar de licuar,
la mezcla se vertió en un colador casero y
se colocó en un Beacker. Finalizado este
proceso, se adiciono 1/6mL de detergente
líquido a la solución obtenida. Se dejo
reposar la mezcla durante 10 minutos
luego se pasó la mezcla a un tubo de
ensayo, se agregó jugo de piña y agito
suavemente. Por último, se adiciono Figura 3. Licuado de espinaca más sal.
alcohol a la solución y se Observó la
interfaz, finalmente se extrajeron los
Al procesar con la Licuadora las hojas de
fragmentos de ADN suspendidos y se
espinaca con los 200 ml de agua y la pizca
almacenaron en un tubo eppendorf para su
de sal; se obtiene una solución con una
debida refrigeración.
tonalidad verde fuerte. La sal evita la
unión de las proteínas al ADN.

 LICUADO DE ESPINACA,
SAL Y DETERGENTE
LIQUIDO

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Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &. 2018. Extracción casera de ADN.
 Figura 5. licuado de espinaca, sal,
detergente líquido y extracto de piña.
Figura 4. Licuado de espinaca, sal y
detergente líquido. cuando se traspasó la solución al tubo de
ensayo y se le adiciono el jugo de piña esta
al adicionarle el detergente a la solución, adquirió una tonalidad más baja debido a
esta ayudo a que las grasas que conforman que el jugo de piña actúa como las enzimas
la estructura de la membrana encargadas de separar las proteínas
citoplasmática y nuclear se disolvieran Los contenidas en la célula para poder obtener
jabones utilizados como lava platos el ADN que es el material genético
emulsionan los lípidos de las membranas requerido.
celulares y las rompen.
 LICUADO DE ESPINACA,
 LICUADO DE ESPINACA, SAL, DETERGENTE
SAL, DETERGENTE LÍQUIDO, EXTRACTO DE
LÍQUIDO Y EXTRACTO DE PIÑA Y ALCOHOL.
PIÑA.

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Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &. 2018. Extracción casera de ADN.

Figura 6. licuado de espinaca, sal,
detergente líquido, extracto de piña y
alcohol.
Como paso final se le añadió alcohol a la
solución para que ayudara a aislar el ADN,
y separarlo de otros componentes
celulares. Como se sabe el ADN es soluble
en agua e insoluble en alcohol, por tal
razón se forma la Interfase; donde se
suspendieron las fibrillas de ADN,
resultado de la extracción.
 FRAGMENTOS DE ADN
Figura 7. Fragmentos de ADN.
Los fragmentos de ADN fueron sacados
con ayuda de una pipeta pasteur y
Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &. 2018. Extracción casera de ADN.
posteriormente almacenado en un tubo
eppendorf para su análisis.
PREGUNTAS DE CONSULTA
1. ¿Cuál es la función de cada uno
de los materiales en el procedimiento de
la extracción casera de ADN?
R// los materiales utilizados en este
procedimiento cumplen una función muy
importante ya que sin ellos no se llevaría a
cabo nuestra excelente extracción entre
estas tenemos:
 ¿Para qué sirve la pizca de sal
que ponemos en la mezcla?
La sal en disolución actúa disminuyendo
la solubilidad de las proteínas, lo que hace
que precipiten y se separen más fácilmente
del ADN.
 ¿Para qué utilizamos el
detergente?
El detergente utilizado en el experimento
tiene como función destruir las membranas
celulares del tejido vivo que estamos
utilizando; el detergente disuelve las
grasas, que es el componente principal de
la membrana plasmática y nuclear de las
células (es el mismo principio por el que el
gel limpia la grasa de nuestra piel). Al
romperse las membranas celulares se
permite la salida del ADN al exterior. La
licuadora ayuda en la rotura de estas
células.
 ¿Para qué se añaden enzimas o
zumo de piña?
Las enzimas son unas sustancias que
atacan a las proteínas de las células, lo que
permite romperlas y separarlas del ADN,
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que es el material que buscamos. Si no  En la extracción de ADN
disponemos de enzimas, podemos utilizar casera, se utilizó la Sal para
zumo de piña (el cual contiene bromelina, disolver las proteínas y
sustancia que degrada las proteínas). separarlas del ADN.
Igualmente, el detergente
cumplió la función de
 ¿Para qué se utiliza el alcohol? destruir las membranas
plasmática y nuclear; para
El ADN es una molécula muy larga y la salida del ADN al
tiende agruparse. De ahí la facilidad para exterior. Y por último el
retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer jugo de piña, que actuó en
que precipite en alcohol. El ADN es la destrucción de las
soluble en agua, pero cuando se encuentra proteínas que atacan el
en alcohol precipita en la Interfase entre el ADN, jugo el papel de
alcohol y el agua. Además de permitirnos enzima.
ver el ADN, el alcohol separa el ADN de  En este procedimiento se
otros componentes celulares, los cuales tomó al alcohol, como
son dejados en la solución acuosa. agente precipitante; ya que
gracias a él se da la
Interfase y en ella quedan
2. Compare el procedimiento y el suspendidos los fragmentos
protocolo entre una extracción casera de ADN para su posterior
de ADN y una realizada con un kit extracción y análisis.
comercial.

Extracción de ADN con kit comercial
(Método SaltingOut).
 Para la destrucción de las
membranas nucleares se utilizó un
buffer que contiene la proteinasa K
(Tris-HCl, PH: 8.3, Tween 20,
Nonidet P40, Proteinasa K), la cual
destruye las membranas nucleares,
liberando a la solución los ácidos
nucleicos.
 Para la precipitación de los ácidos
nucleicos, se utiliza el acetato de
sodio (AcONa), ya que el ADN en
altas concentraciones; puede
precipitarse más adición de alcohol
etílico.
CONCLUSIÓN
El ácido desoxirribonucleico ADN
es la molécula esencial en la vida
de los organismos, pues posee la
información genética de estos, es
el componente primario de los
cromosomas, durante este
experimento se pudo observar
y comprobar las características
del ADN y su función, así como
se pudo observar la extracción
de esta molécula a partir de
tejido vegetal y analizar la
función de los demás
materiales que hacen posible
este procedimiento.

Extracción Casera de ADN.

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Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &. 2018. Extracción casera de ADN.
 BIBLIOGRAFIA

 Brusés, B. L., Lucero, H., Aguirre,

M. V., & GORODNER, J. (2000).
Comparación de técnicas de
extracción de DNA para la
detección de Trypanosomacruzi
mediante la técnica de PCR.
Comunicaciones científicas y
tecnológicas

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Almario, C*; Mercado, J; Ortega, L &. 2018. Extracción casera de ADN.