PRACTICA No.

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

INTRODUCCIÓN

La cromatografía en capa fina, que comenzó a usarse hacia 1950, es muy simple,
barata, sensible y eficiente. Es especialmente útil cuando se quiere determinar el
número de componentes de una mezcla o identificar los compuestos existentes en una
mezcla. En la cromatografía de capa fina, un adsorbente está depositado formando
una delgada capa sobre una placa de vidrio, papel de aluminio u otros materiales, por
la que ascienden, arrastradas por un disolvente (eluyente), una o más sustancias que
se pretenden separar o identificar. Los compuestos que avanzan a lo largo de la placa
se ven atraídos por fuerzas intermoleculares sobre la superficie del adsorbente,
interaccionando el disolvente con ambos. Esta interacción competitiva establece las
velocidades relativas con que ascienden por la capa de adsorbente, el frente de
disolvente y un determinado compuesto. La polaridad del disolvente influye así mismo
en la velocidad de ascensión del soluto a lo largo de la capa de adsorbente. A mayor
polaridad del disolvente, mayor grado de ascensión del soluto por la placa. Bajo unas
determinadas condiciones experimentales, un compuesto dado puede recorrer una
cierta distancia a lo largo de la placa. Se denomina RF a la relación existente entre la
distancia recorrida por el compuesto y la recorrida por el disolvente en el mismo
tiempo: RF= (distancia recorrida por el compuesto) / (distancia recorrida por el
disolvente). La cromatografía en capa fina es un caso de cromatografía de adsorción o
reparto en la que los componentes de una mezcla se separan por diferencia de
solubilidad entre dos sistemas disolventes. El parámetro experimental asociado a la
técnica es el Rf (coeficiente de reparto), relacionado con la solubilidad relativa de un
compuesto entre la fase estacionaria y fase móvil, y que depende de su estructura
química y su hidrosolubilidad/liposolubilidad.
La cromatografía incluye una amplia gama de técnicas, que se pueden clasificar
atendiendo al fundamento físico-químico en el que se basa la separación
(cromatografía de adsorción, de reparto, de cambio iónico, de filtración molecular,
hidrofóbica y de afinidad), o al material sobre el que se lleva a cabo (cromatografía en
papel, capa fina, en columna y de gases).

1. PROBLEMA
Los compuestos orgánicos pueden ser separados e identificados mediante las
técnicas de cromatografía en capa fina, cromatografía en columna y cromatografía en
papel.
Determine el tipo de cromatografía a utilizar para la separación y aislamiento de
pigmentos vegetales.

2. OBJETIVOS

 Realizar una cromatografía en capa fina de una muestra vegetal.

 Calcular los valores de Rf. de las sustancias separadas, correlacionarlo a la
selección adecuada del eluyente y deducir la relación que existe entre la
polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.
 Utilizar los valores de Rf como criterio en la identificación de los componentes
de una muestra.

3. MATERIALES y REACTIVOS

Mortero con pistilo.

Embudo con papel de filtro.
Tubo de ensayo en gradilla.

1
 Placa cromatografía en sálica gel
Cámaras cromatografías
Cámara de ultravioleta y yodo
Capilares
3 vasos de precipitados
1 vidrios de reloj
Etanol.

Sistema de Elución

tolueno-metanol (9:1)
Hexano- acetona 7:3
Butanol:ácido acético-agua (50:25:25)
Hexano: Acetato de etilo 85:15
Éter: Acetato de etilo 7:3
Cloroformo: metanol 95:5

4. PROCEDIMIENTO

Tome la muestra de extracción y disuelva en 2 mL de etanol.

Una vez obtenidas las placas, marcamos a lápiz una línea a 1 cm de la base. Sobre
esa línea marcamos 2 puntos, donde se depositaran con un capilar pequeñas
cantidades de las muestras. Deje secar e introduzca la placa perpendicularmente en la
cámara que contiene el solvente, tape nuevamente la cámara y deje que el solvente
ascienda hasta el límite superior.
Revelar y establecer los valore de Rf obtenidos Para cada uno de los eluyentes

5. ACTIVIDADES POST-LABORATORIO

1. Investigue las estructuras de los diferentes pigmentos extraídos

2. Explique de que depende la miscibilidad de los pigmentos con el eluyentes y determine
el orden de elución de los componentes de la mezcla (caroteno, clorofila a, clorofila b y
xantofila).
3. ¿Por qué empleamos esos solventes para extraer los pigmentos?
4. ¿Qué pigmentos son los más abundantes?

7. BIBLIOGRAFIA

Durst, H D. Y Gokel, G. W.: Química Orgánica Experimental. Reverté. Barcelona,

1985.
Domínguez, X. A. Y Domínguez, G. S.: Química Orgánica Experimental .Limusa.
México, 1982.
Torres De Young Stella. Introducción A La Cromatografía. Colección Universitaria-
Ciencias-1994
Aubal Aquilino. Texto Guía De Laboratorio De Química Orgánica. Ciencia Y Tecnologia.
Editorial Universidad De Antioquia.
Ballesteros, P Y Otros; Curso Experimental De Química Orgánica; Uned,1989.
Brewster, Rq Y Otros; Curso De Química Orgánica Experimental; Ed. Alhambra, 1978