Cátedra: Microbiología General

Universidad nacional Daniel Alcides Carrión

Facultad de ciencias agropecuarias
E.F.P.ING.IND.ALIMENTARIAS

COLORACIÓN DE LA CÁPSULA, GLICOCALIX O

ENVOLTURA MUCOIDE

PRÁCTICA NO. 06

CATEDRA: MICROBIOLOGIA GENERAL

CATEDRATICO:
Blgo. IBAÑEZ OJEDA Julio

ALUMNOS
RUBIN TORRES Jerson David

SEMESTRE:
V

LA MERCED - CHANCHAMAYO
2018

Mg. Blgo. Julio IBÁÑEZ OJEDA E-mail: jibanezo@hotmail.com

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I. INTRODUCCION

La cápsula bacteriana es la capa con borde definido formada por una serie de polímeros
orgánicos que en las bacterias se deposita en el exterior de su pared celular.
Generalmente contiene glicoproteínas y un gran número de polisacáridos diferentes,
incluyendo polialcoholes y aminoazúcares.
La cápsula es una capa rígida organizada en matriz impermeable que excluye colorantes
como la tinta china. En cambio, la capa de material extracelular que se deforma con
facilidad, es incapaz de excluir partículas y no tiene un límite definido, se denomina
capa mucosa o glucocalix. Ambas se pueden detectar con métodos como la tinción
negativa o la tinción de Burri.
La cápsula le sirve a las bacterias de cubierta protectora resistiendo la fagocitosis.
También se utiliza como depósito de alimentos y como lugar de eliminación de
sustancias de desecho. Protege de la desecación, ya que contiene una gran cantidad de
agua disponible en condiciones adversas. Además, evita el ataque de los bacteriófagos y
permite la adhesión de la bacteria a las células animales del hospedador, Cazorla López
(2014).
Algunas bacterias se encuentran rodeadas de una capa de apariencia mucoide, en elexter
ior de la envoltura celular. Estas estructuras usualmente consisten de polisacáridos;
sinembargo, en ciertos bacilos, están compuestas de polipéptidos (por ejemplo, el
ácidopoliglutámico) segregados por la bacteria. Cuándo se ven más definidas y rígidas,
se describencomo la cápsula. Cuando se observan menos definidas, se describen como
glucocalix (películaviscosa).Las cápsulas tienen diferentes funciones, dependiendo de la
especie bacteriana y elambiente en que se encuentre. Puede servirles
como protección ante la desecación y radiación. La protege del ataque de
virus bacterianos y del efecto de metales pesados que lesean tóxicos, Pertierra Mendez
(2018).

II. OBJETIVOS

2.1. OBJETIVO GENERAL

 Ejecutar, tinción especial para cápsula: usando el método de Nigrosina o

Tinción Negativa siguiendo el protocolo establecido, para luego observarlos
al microscopio óptico a inmersión.

2.2. OBJETIVO ESPECIFICO

 Reconocer, a través del microscopio óptico la estructura capsular (glicocalix)

presente en el género Klebsiella obtenido a partir de muestras biológicas de
agua de desagüe.


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III. MATERIALES Y METODOS

3.1. MATERIALES

 Muestra: agua del desagüe.

 Frascos de vidrio
 Asa de Koll
 Mechero
 Laminas portaobjeto y cubreobjeto
 Cubeta de tinción
 Agua destilada
 Colorante: Verde de Malaquita al 5% y safranina (colorante de contraste),
cristal violeta al 1%, Maneval B, fucsina básica al 0,15%, azul de metileno de
Loeffler o safranina, Wright o tinta china pelikan R.
 Solución buffer de Sörensen
 Solución de sulfato de cobre
 Solución de rojo de Congo
 Microscopio óptico.

3.2. METODOS

Método de Nigrosina o Tinción Negativa

 Mezclar una gota de suspensión del germen capsulado en una gota de

Nigrosina al 10% sobre una lámina portaobjeto durante 1 minuto.
 Hacer una extensión empleando otra lámina.
 Sacar y fijar al calor de una llama de mechero.
 Contra colorear con azul de metileno de Loeffler o safranina.
 Lavar con agua destilada.
 Sacar al calor de una llama de mechero.
 Observar al microscopio óptico con objetivo de inmersión. Resultado La
cápsula aparece transparente bajo un fondo negro y el cuerpo bacteriano
aparece de color azul o rojizo.

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IV. RESULTADO Y DISCUSIONES

4.1. RESULTADOS

 En la muestra de agua de desagüe que contiene bacterias se llevó a una

lámina y se hizo la coloración Con el objetivo 100 X se observó las bacterias
lo que es bacilos y cocos pero cubierto a su contorno por una capa y por una
line recubierta, lo cual identificamos que son bacterias capsuladas, fue una
experiencia muy buena lo que observe atravez del microscopio.

4.2. DISCUSIONES

 SEGÚN MERINO L. Por fuera de la pared, algunas bacterias presentan

una capa de polisacáridos o de proteínas que puede ser gruesa o delgada,
rígida o flexible, que es una cubierta continua formada por un gel
hidrofílico. Cuando la estructura es firme y tiene bordes definidos, se habla
de cápsula. Esta está organizada en una matriz muy compacta que excluye
las partículas como las de tinta china. Cuando la estructura es amorfa y de
bordes poco definidos e irregulares se habla de glicocálix o matriz
exopolisacárida; en este caso no excluiría a las partículas y sería más difícil
de ver. Aunque la mayoría de las cápsulas son polisacáridas, existen algunas
que son polipeptídicas como las de Bacillus anthracis. La cápsula es un
determinante de patogenicidad para la bacteria ya que le da resistencia a la
fagocitosis y a la lisis intracelular y le permite la adherencia a las mucosas
del huésped.

 EN LA PRACTICA, Se observó como una pared celular pero este

estaba cubierta de una capsula que tenía bordes definidos y estas capsulas
tenían una forma definida y se observaba cubriendo alrededor de los bacilos
y cocos.

V. CONCLUSIONES

 Se ejecutó, la tinción especial para cápsula: usando el método de Nigrosina o

Tinción Negativa siguiendo el protocolo establecido, y se observó en el
microscopio óptico a inmersión.

 Se reconoció, a través del microscopio óptico la estructura capsular (glicocalix)

presente en el género Klebsiella obtenido a partir de muestras biológicas de agua
de desagüe.

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VI. BIBLIOGRAFIA

 MERINO L. Discusión, [en línea], Lima, Perú 2016, [fecha de acceso 19 de

Junio del 2018].
URL disponible en:
http://ecaths1.s3.amazonaws.com/catmicromed/APUNTE%20Morfologia%20b
acteriana.pdf

 JHON B. Respuesta del cuestionario uno, [en línea], Lima, Perú 2017, [fecha
de acceso 18 de Junio del 2018].
URL disponible en:
https://muyfitness.com/lista-de-bacterias-encapsuladas_13136346/

 CAZORLA L. Respuesta del cuestionario dos y cuatro, [en línea], Lima, Perú
2014, [fecha de acceso 18 de Junio del 2018].
URL disponible en:
http://www.encuentros.uma.es/encuentros34/virul34.html

 PERTIERRA M. Respuesta del cuestionario tres, [en línea], Lima, Perú

2018, [fecha de acceso 18 de Junio del 2018].
URL disponible en:
https://es.linkedin.com/pulse/la-c%C3%A1psula-bacteriana-david-
garc%C3%ADa-pertierra-m%C3%A9ndez

 UPRM. Respuesta del cuestionario cinco, [en línea], Lima, Perú 2006, [fecha
de acceso 19 de Junio del 2018].
URL disponible en:
http://academic.uprm.edu/~lrios/3725/Ejercicio4.pdf

 PATRICIA C. Respuesta del cuestionario seis, [en línea], Bogotá, Colombia

2013, [fecha de acceso 19 de Junio del 2018].
URL disponible en:
http://www.scielo.org.co/pdf/rmv/n25/n25a09.pdf

 IANEZ E. Respuesta del cuestionario siete, [en línea], Lima, Perú 2013, [fecha
de acceso 19 de Junio del 2018].
URL disponible en:
https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/04capsula.htm

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VII. CUESTIONARIO

1. ¿Qué bacterias son formadoras de cápsula? Mencione al menos 5 especies.

 Fagocitosis
 Bacillus licheniformis
 Estreptococo
 Estafilococo aureus
 Haemophilus influenzae
Fuente: Jhon B. (2017)

2. ¿Por qué la presencia de cápsula en una bacteria aumenta su virulencia?

La invasión bacteriana puede producir una acumulación temporal de amonio que

puede afectar al pH y al metabolismo de la célula. Esto beneficia al patógeno ya
que incrementa la virulencia en el tejido afectado. Se ha asociado la acumulación
de amonio con toxinas (tabtoxina) y con la actividad de enzimas extracelulares
(enzimas pectolíticas), sobre todo por su capacidad de modificar el pH.
Fuente: Cazorla L. (2014)

3. ¿Cómo se origina la síntesis de la cápsula bacteriana?

Muchos procariotas cuando crecen en sus ambientes naturales sintetizan

polímeros orgánicos que se depositan en el exterior de la pared celular formando
una capa viscosa y pegajosa. Cuando la capa está bien organizada y no se
elimina fácilmente se denomina cápsula. Cuando nos encontramos ante una
capa de material difuso, no organizado que se puede eliminar fácilmente, se
habla de capa mucilaginosa o slime.

Fuente: Pertierra M. (2018)

4. Los micoplasmas (PPLO) son formadoras de cápsula?. Si es así que tipo de

polímeros forma?

Los micoplasmas son microorganismos de morfología variada, cuya capacidad

patógena no es bien conocida. Son los microorganismos más pequeños con vida
libre. Están ampliamente extendidos como saprofitos y como parásitos.
Morfológicamente se parecen a bacterias que no tienen pared (formas L). Son
sensibles a antibióticos como eritromicina y tetraciclina, que inhiben la síntesis
proteica.
Fuente: Cazorla L. (2014)

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5. En el método de Método de Anthony-Welch ¿Qué función cumple el sulfato

de cobre?

Es un decolorante y Contratinte- Sulfato de Cobre 20%-se usa para enjuagar el

tinte primario No se enjuaga con agua porque la cápsula es soluble en agua -
función de decolorante El CuSO 4 es absorbido en el material de la cápsula que
ha sido decolorada - función de contratinte. La c ápsula aparece azul clara en un
fondo oscuro.
Fuente: UPRM (2006)

6. ¿qué asociación tienen las lectinas con las cápsulas bacterianas?.

Las funciones de las lectinas son diversas pero en su mayoría son de

reconocimiento, de adhesión de células o sustancias que incluyen síntesis
enzimática, degradación de oligo y polisacáridos, transporte de carbohidratos,
respuesta inmunológica a antígenos carbohidratos y migración de leucocitos a
sitios de inflamación.
Fuente: Patricia C. (2013)

7. Dentro de la propiedad de adherencia que tiene las bacterias capsuladas,

indique Ud. algunos efectos benéficos que aquellas pueden brindar a los
organismos superiores. Fundamente.

 la bacteria se adhiere por la cápsula al sustrato.

 la cápsula supone un aumento de superficie bacteriana, lo que se traduce en
una mejora en la capacidad de absorber nutrientes.
 la bacteria se multiplica, formándose un micro colonia donde los individuos
están más protegido frente a los agentes antibacterianos.
 se forman consorcios con otros microorganismos. Ello permite una “alianza”
o colaboración metabólica entre distintas especies, por la que se produce la
degradación concertada de sustratos insolubles.

Esta propiedad tiene una serie de importantes secuelas económicas:

 corrosión y obstrucción de cañerías.

 formación de placa dental y caries.
 formación de biopelículas en catéteres y prótesis quirúrgicas
 En sistemas “normales” (efectos benéficos): La flora (= microbiota)
autóctona que coloniza los epitelios de los animales superiores está englobada
en glucocálix, estando las bacterias adheridas a la superficie tisular. Es decir,
las cápsulas pueden actuar como adhesinas (moléculas para la adhesión). Otro
ejemplo de ello lo da la microflora autóctona de la simbiosis.
Fuente: Ianez E. (2013).

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