Trabajo practico de Biología

Mitosis en meristemas vegetal

Unidad Educativa Palora

Temática parcial : Biología Celular

Morona Santiago _Palora (Ecuador)

Alumnos: Miguel Castro

Docente: Lic. Gavilanes

2018

Contactos del autor: canchezcas@gmail.com

Objetivos:

 El objetivo de esta práctica es observar e interpretar figuras de distintas fases de la

mitosis en células vegetales. Como la cebolla roja, y tener una idea clara de co
 Hacer una preparación microscópica de células meristemáticas de la raíz de cebolla
 Uso del microscopio optico para investigar la estructura de la raiz de cebolla
raiyando las fasees de la mitosis para tejidos de origen vegetal

Marco teórico:

La mitosis: es el mecanismo responsable del crecimiento de la regeneración y del

reemplazo celular en un organismo multicelular individual de cualquier tipo, ya se
reproduzca el organismo por métodos sexuales o asexuales.

Los tejidos del ápice de la raíz de cebolla: son muy convenientes para estudiar la mitosis. Si
se tiñen con un colorante apropiado, tales tejidos pueden mostrar los cromosomas en las
células en proceso de división.

Acido clorhídrico: es una disolución acuosa del gas cloruro de hidrogeno (HCI). Es muy
corrosivo y acido. Se emplea comúnmente como reactivo químico y se trata de un acido
fuerte que se disocia completamente en disolución acuosa.

Orceína acética: es una sustancia que se ocupa para teñir y ver las distintas fases de los
cromosomas en división para fines se utiliza la técnica de orceína acética.

La mitosis es un proceso continuo, que convencionalmente se divide en cuatro etapas:

Profase (pro: primero, antes). Los cromosomas se visualizan como largos filamentos
dobles, que se van acortando y engrosando. Cada uno está formado por un par de
cromátidas que permanecen unidas sólo a nivel del centrómero. En esta etapa los
cromosomas pasan de la forma laxa de trabajo a la forma compacta de transporte. La
envoltura nuclear se fracciona en una serie de cisternas que ya no se distinguen del RE, de
manera que se vuelve invisible con el microscopio óptico. También los nucleolos
desaparecen, se dispersan en el citoplasma en forma de ribosomas.

Metafase (meta: después, entre). Aparece el huso mitótico o acromático, formado por
haces de microtúbulos; los cromosomas se unen a algunos microtúbulos a través de una
estructura proteica laminar situada a cada lado del centrómero, denominada cinetocoro.
También hay microtúbulos polares, más largos, que se solapan en la región ecuatorial de la
célula. Los cromosomas muestran el máximo acortamiento y condensación, y son
desplazados por los microtúbulos hasta que todos los centrómeros quedan en el plano
ecuatorial. Al final de la metafase se produce la autoduplicación del ADN del centrómero, y
en consecuencia su división.

Anafase (ana: arriba, ascendente). Se separan los centrómeros hijos, y las cromátidas, que
ahora se convierten en cromosomas hijos. Cada juego de cromosomas hijos migra hacia un
polo de la célula. El huso mitótico es la estructura que lleva a cabo la distribución de los
cromosomas hijos en los dos núcleos hijos. El movimiento se realiza gracias a la actividad de
los microtúbulos cromosómicos, que se van acortando en el extremo unido al
cinetocoro. Los microtúbulos polares se deslizan en sentido contrario, distanciando los dos
grupos de cromosomas hijos

Hay drogas específicas que influyen experimentalmente en la formación y descomposición

de los microtúbulos. La colquicina o colchicina es un alcaloide extraído de Colchicum
autumnale que inhibe la polimerización de moléculas de tubulina. Cuando se aplica a células
en división, impide la formación de los microtúbulos, por lo tanto, no se forma el huso
mitótico, y la consecuencia es que se duplica el número de cromosomas de la célula.

Telofase (telos: fin). Comienza cuando los cromosomas hijos llegan a los polos de la
célula. Los cromosomas hijos se alargan, pierden condensación, la envoltura nuclear se
forma nuevamente a partir del RE rugoso y se forma el nucleolo a partir de la región
organizadora del nucleolo de los cromosomas SAT.
Citocinesis es la división del citoplasma, ocurre luego que se ha dividido el núcleo en dos
núcleos hijos durante la mitosis. En las plantas superiores, durante la telofase tardía,
aparece en el ecuador de la célula, una estructura llamada fragmoplasto.

Está constituida por dos sets de microtúbulos con polaridad opuesta que superponen sus
extremos en el plano de división. Se forma a medida que el huso acromático desaparece.
Entre los microtúbulos aparecen numerosos dictiosomas, que se unen formando una gran
cisterna. En su interior se encuentran los polisacáridos necesarios para la formación de la
laminilla media y de la fase amorfa de la pared primaria (

La membrana de los dictiosomas unidos entre sí se transforma en membrana plasmática.

Túbulos del retículo endoplasmático se disponen en la placa celular en formación,
perpendicularmente con respecto a ella. A medida que se forma la pared primaria, quedan
mangas citoplasmáticas alrededor de los túbulos del retículo endoplasmático, rodeadas por la
membrana plasmática: constituyen los plasmodesmos primarios.

Los microtúbulos juegan un papel importante, al determinar la orientación y disposición de

las microfibrillas de celulosa que constituyen la fase fibrilar de la pared primaria. Las
microfibrillas son sintetizadas por las rosetas de celulosa-sintasas ubicadas en la
membrana plasmática. La formación del tabique progresa en forma centrífuga hasta
alcanzar la periferia, exactamente en el lugar donde se formó la banda preprofásica
GENOMA

El juego de cromosomas diferentes que incluye el surtido completo de genes necesarios

para caracterizar una especie determinada se llama genoma y se representa con la letra x.
El genoma puede estar representado 2 ó más veces en el complemento cromosómico de una
especie. Así en una especie diploide, la célula somática presenta 2 genomas, es decir
que 2n=2x. Los gametos presentan un solo genoma, son haploides, es decir que n=x. Los
gametos se forman después de la meiosis, división celular en la cual una célula madre
origina 4 células hijas con el número cromosómico reducido a la mitad. Además esas
células hijas son diferentes a la célula madre y también diferentes entre sí.
POLIPLOIDÍA

Hay organismos o células cuyos núcleos presentan más de dos genomas, y estas células u
organismos se denominan poliploides. El grado de ploidía puede variar, así hay organismos
triploides (3x), tetraploides (4x), hexaploides (6x), etc. Por ejemplo: Triticum aestivum, es
un hexaploide. La causa de este fenómeno son las perturbaciones de la división nuclear, que
pueden producirse naturalmente por altas temperaturas, radiaciones, y experimentalmente
con ciertas drogas como la colchicina. Las células poliploides son frecuentemente mayores,
y en consecuencia también lo son las plantas, frutos, etc. Esto tiene importancia comercial y
por eso se utilizan mucho las plantas poliploides en agricultura.

Materiales:

 Microscopio
 Porta y cubre-objetos 
 Vidrio de reloj
 Pinzas finas

 Cuchilla de afeitar
 Tiras de papel de filtro
 Orceína acética clorhídrica
 un bulbo de cebolla
 Pinzas de madera
 Mechero
Procedimiento:
1. Con una tijera se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud sea
de unos 2 a 3 mim, ya que es en esta zona de la raíz donde se encuentran las células en
división.

2. Enjuague los ápices de cebolla (fijados) en agua destilada por 30 segundos.

3. Coloque las raíces en un plato Petri que contenga unos 3mL de HCl 1% por 7-8 min.
(esto se hace para romper la pared celular).

4. Mientras transcurre el tiempo anterior, corte y conserve la porción del ápice de raíz
que posea un tejido blanquecino (casi 2-3 mm del extremo de la raíz) y deseche el resto.

5. Transferir los ápices a agua destilada y dejarlos allí 30 segundos (enjuague).

6. Coloque el tejido sobre un portaobjetos e inmediatamente agregue dos gotas de aceto-

orceína sobre éste.

7. Coloque un cubreobjetos sobre el tejido y caliente la muestra suavemente por 1

minuto, por medio de toques intermitentes sobre la superficie de un plato de calentamiento
o "hot plate" (durante este tiempo vigile que el tejido permanece humedecido con el
colorante, no permita que hierva ni que se seque; agregue más colorante si es necesario).
Esta etapa es opcional (el calentamiento intensifica la tinción).

8. Coloque un trozo de papel toalla sobre el cubreobjetos; presione fuerte y

cuidadosamente por medio de un borrador de lápiz (esta técnica se llama "extendido por
aplastamiento" o "squach”). Recuerde que mientras esté más aplastado, las células se
separarán más unas de las otras y se encontrarán en el mismo plano, distinguiéndose mejor
las distintas etapas de mitosis.

9. Después del aplastamiento, si es necesario, levante el cubreobjetos con la ayuda de

una aguja de disección y agregue una gota adicional de aceto-orceína; coloque nuevamente
el cubreobjetos sobre la muestra.
10. Observe al microscopio (primero con el objetivo 10x localice el área adecuada, luego
pase a 40x para observar con detalles).
11. Encuentre las cuatro etapas de la mitosis, además observe la apariencia de las células
que se encuentran en interface (aquellas que no están en mitosis). Realiza un conteo de
campo.

Resultados
Al poner la parte inferior de una cebolla sobre la boca de un recipiente durante unos días se
pudo observar que da la parte en contacto con el agua crecieron unas raíces de color blanco,
delgadas y largas.
Al calentar 4mm de raíces de cebolla con diez gotas de orceína acética y una gota de acido
clorhídrico 1N e un vidrio de reloj durante 5 minutos se pudo observar que la mezcla de las
dos sustancias hizo una mezcla naranja oscura y antes de que esta sustancia se evaporara se
pusieron los pedazos de raíces en un microscopio se pudo observar que las raíces se
pusieron de color naranja grisáceo con ancas negras.
Observación en el microscopio
La preparación presenta el aspecto de una dispersión de células por todo el campo que
abarca el microscopio. Se observarán células en distintas fases o estados de división celular.
Con esta técnica de tinción se ven los cromosomas impregnados por la orceína en color
morado. El aspecto reticulado, así como el mayor tamaño de algunos núcleos, corresponde

a las células que se encontraban en los procesos iniciales de la división mitósica.

Análisis de resultados
En este proceso todos los cromosomas están correctamente anclados a los microtubos del
huso y alineados en la placa metafásica, la célula procede a entrar en anafse.
Entonces tienen lugar dos sucesores. Primer. Las proteínas que mantenían unidas ambas
cromátidas hermanas (las cohesionas), son cortadas, lo que permite la separación de las
cromátidas. Estas cromátidas hermanas, que ahora son cromosomas hermanos diferentes
son separados por los microtubos anclados a sus microtubos al desensamblarse dirigiéndose
hacia los centrosomas respectivos.
Conclusion
Al realizar la practica pudimos observar en las raicillas de la cebolla una de las fases de
mitosis , esta era la anafase.
En las tres muestras que preparamos observamos la misma fase:la anafse, los cromosomas
se dividan y se iban a los polos.
En la anafase los microtúbulos no asociados a cinetocoros se alargan empujando a los
centrosomas( y