DETERMINACIÓN DEL pKa DEL AZUL DE BROMOTIMOL POR

ESPECTROFOTOMETRÍA
Jorge Luis Rosales
Laboratorio de Química Analítica Instrumental – Departamento de Química
Facultad Experimental de Ciencias y Tecnología. Universidad de Carabobo
Profesores: José Jiménez y Daniel Pacheco.
 INTRODUCCIÓN

Las constantes de equilibrio de reacciones químicas en solución se determinan midiendo las

concentraciones en equilibrio de los reactivos y de los productos envueltos en la reacción química.
Existen distintas propiedades físicas que se utilizan para determinar las concentraciones de las
especies en equilibrio. Una propiedad útil para determinar la concentración de las especies
involucradas en una reacción, es la absorción de radiación por sustancias en solución.

La Absorbancia de una especie es característica de cada sustancia y generalmente es una

propiedad que la distingue una de otra. El equilibrio de disociación de un indicador ácido-base se
representa por:

HA + H2O = A- + H3O+

La constante de equilibrio se establece por:

[𝐴 −][ 𝐻3𝑂 +]
𝐾𝑎 =
[𝐻𝐴]

Para esta práctica se prepararon soluciones amortiguadoras con un pH cercano al pKa del
indicador de bromotimol. Con el uso de un ácido y una base fuerte (HCl y NaOH, respectivamente),
se colorean las soluciones amortiguadoras modificando su pH de igual manera. Posteriormente
utilizando el espectrofotómetro se realizó un barrido espectral con la finalidad de identificar las
absorbancias.

METODOLOGÍA

Inicialmente se preparó una solución de azul de bromotimol pesando en un beaker de 50

ml (0,0271 ± 0,0001) g de reactivo, disolviendo en etanol y trasvasando a un balón de (50 ± ) ml.
Finalmente se llevó hasta la línea de aforo con agua destilada.

Para la preparación de la solución amortiguadora con valores de pH alrededor del pKa del
azul de bromotimol, se pesaron en dos beaker de 50 ml, bifosfato de sodio (NaH2PO4) (1,347 ±
0,0001) g y fosfato sódico (Na2HPO4) respectivamente. Ambas se disolvieron en agua destilada y se
trasvasaron a un balón de (250 ± ) ml. Posteriormente a este último balón se agregó 16 ml de la
solución de azul de bromotimol previamente preparada.

Luego, se prepararon 7 patrones en balones de (25 ± ) ml cada uno, agregando 12 ml de la

solución amortiguadora preparada con anterioridad. Seguidamente se rotularon los balones del 1
al 7. Los balones rotulados del 1 al 3, se les agregó HCl 0,1M con la finalidad de ajustar el pH y de
esta manera obtener colores diferentes entre ellos. El balón rotulado 4 que contiene únicamente la
solución amortiguadora se le agregó agua destilada para obtener un pH relativamente neutro y los
balones rotulados del 5 al 7 se les agregó NaOH 0,1 M con la misma finalidad, en este caso ajustando
el pH alcalino y obtener diferentes colores entre ellos.

Finalmente con el uso de espectrofotómetro a diferentes longitudes de onda se realizó un

barrido espectral de las 7 soluciones. De igualmente se obtuvieron las transmitancias y a partir de
ello se determinó su absorbancia.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

El azul de bromotimol es un ácido monoprótico débil en solución, este es levemente soluble

en agua, soluble en alcohol y en soluciones acuosas de bases. La disociación de esta especie la
podemos representar como:

HIn  H+ + In- (1)

Y en términos de equilibrio para la disociación como:

pH = pKa – Log ([HIn] / [In]) (2)

Esta especie se utiliza como indicador de pH. El cambio de color se debe a un cambio
estructural inducido por la protonación o desprotonación de la especie. Los indicadores ácido-base
tienen un intervalo de viraje de unas dos unidades de pH, en la que cambian la disolución en la que
se encuentran de un color a otro, o de una disolución incolora, a una coloreada. Para el caso del azul
de bromotimol se observó que en solución ácida presentó un color amarillo, en solución básica un
color azul y en solución neutra un color verde [1].

Se realizó un barrido espectral a diferentes longitudes de ondas en un rango de 360nm a

700nm (Tabla I).

Al realizar el barrido espectral, se observaron las distintas longitudes de ondas de las

soluciones preparadas (tabla I), con base a estos valores se determinó la absorbancia de cada una
de ellas. de acuerdo a su máximo de absorbancia, ya que estas nos darán la longitud de onda que
proporciona la mayor sensibilidad posible [2]. Como se puede observar en la gráfica I. en los balones
rotulados del 1 al 4 (soluciones ácidas), el balón 3 posee la solución donde su máximo de
absorbancia es a una longitud de onda de 400 nm que corresponde a una absorbancia de 0,4634.
Mientras que en los balones rotulados del 4 al 7 (soluciones alcalinas), el balón 6 presenta un
máximo de absorbancia a una longitud de onda a 600 nm que corresponde a una absorbancia de
0,8508.
Tabla I. Barrido espectral de soluciones amortiguadoras a pH ácidos más el neutro (balones
rotulados del 1 al 4)

Gráfica I. Absorbancia vs Longitud de Onda a pH ácido.

Absorbancia vs Longitud de onda a pH ácido

0.5000

0.4000
ABSORBANCIA

0.3000 pH=1

0.2000 pH=2
pH=3
0.1000
pH=4
0.0000
340 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700
LONGITUDES DE ONDA

Tabla II. Barrido espectral de soluciones amortiguadoras a pH alcalino más el neutro (balones
rotulados del 4 al 7).

Gráfico II. Absorbancia vs Longitud de Onda a pH alcalino

Absorbancia vs Longitud de Onda a pH alcalino

0.9000
0.8000
0.7000
0.6000
0.5000 pH = 4
ABSORBANCIA

0.4000 pH = 5
0.3000 pH = 6
0.2000 pH = 7
0.1000
0.0000
340 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700
LONGITUD DE ONDA
Tabla III. Absorbancias a las longitudes de ondas seleccionadas 400nm y 600nm.
%T %T
Balón pH (400nm) A400 (600nm) A600
1 2,53 43.5 0.36151074 96.1 0.01727661
2 4.82 42 0.37675071 88.7 0.05207638
3 5.86 34.4 0.46344156 78.9 0.102923
4 6.66 46.2 0.33535802 71.8 0.14387556
5 7.51 56.6 0.24718357 24.4 0.61261017
6 9.87 68.2 0.16621563 14.1 0.85078089
7 10.98 67.6 0.1700533 16.6 0.77989191

Gráfica III. Absorbancia vs pH a longitudes de onda de 400nm y 600nm.

Absorbancia vs pH
0.9
0.8
0.7
0.6
Absorbancia

0.5
0.4 A400
0.3 A600
0.2
0.1
0
0 2 4 6 8
pH

Tabla IV. Diferencia de absorbancias a una longitud de onda de 400nm.

Longitud de onda (400nm)
(A – AHIn) = [In- ] (AIn- - A) = [HIn] Log([In- ]/[HIn])
0 -0.191457439 #¡NUM!
0.015239967 -0.206697406 #¡NUM!
0.101930814 -0.293388253 #¡NUM!
-0.026152719 -0.16530472 -0.800768414
-0.114327174 -0.077130265 0.170924647
-0.195295118 0.003837679 #¡NUM!
-0.191457439 0 #¡DIV/0!
 Gráfica IV. Determinación de pKa a una longitud de onda de 400nm.

Log([In- ]/[HIn]) vs pH (400nm)

0.4
0.2
Log([In- ]/[HIn])

0
-0.2 6.60 6.70 6.80 6.90 7.00 7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60

-0.4
-0.6
-0.8
-1
pH

Tabla V. Resultado de pKa obtenido en la gráfica IV.

pKa 7.325
pKa -log(Ka)
Ka 4.73E-08

Tabla VI. Diferencia de Absorbancias a una longitud de onda de 600nm.

Longitud de onda (600nm)
(A – AHIn) = [In- ] (AIn- - A) = [HIn] Log([In- ]/[HIn])
0 0.7626153 #¡NUM!
0.034799768 0.727815532 -1.320444973
0.085646384 0.676968915 -0.897859693
0.126598943 0.636016356 -0.701038203
0.595333561 0.167281738 0.551311833
0.833504275 -0.070888975 #¡NUM!
0.7626153 0 #¡DIV/0!

Gráfica V. Determinación de pKa a una longitud de onda de 600nm.

Log([In- ]/[HIn]) vs ph (600nm)

0.8
0.6 y = 1.4734x - 10.514
R² = 1
0.4
Log([In- ]/[HIn])

0.2
0
6.6 6.7 6.8 6.9 7 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6
-0.2
-0.4
-0.6
-0.8
pH
 Tabla VII. Resultado de pKa obtenido en la gráfica V.

pKa 7.125
pKa -log(Ka)
Ka 7.50E-08

Gráfica VI. Punto isobéstico

Absorbancia vs Longitud de Onda

Punto Isobéstico
0.9000
0.8000
Series5
0.7000
Series6
0.6000
ABSORBANCIA

0.5000 Series7
0.4000 Series8
0.3000 Series1
0.2000
Series2
0.1000
Series3
0.0000
340 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 Series4
LONGITUD DE ONDA