Guia de Biologia 2018-II v.2

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA PROFESIONAL QUIMICA
MANUAL DE PRACTICAS
L A B O R A T O R I O DE
BIOLOGÍA
CH 061
SEMESTRE ACADEMICO 2018-II
BIOL. PILAR GARCÍA AVELINO

Jefe de Prácticas
Manual de Prácticas: Laboratorio de Biología, elaborado por Pilar García Avelino 2018-II

ESCUELA PROFESIONAL DE QUÍMICA
BIOLOGÍA (CH 061)
Cronograma de Practicas de Laboratorio de BIOLOGÍA
SEMANA ACTIVIDAD FECHA

Inicio de clases
1° 20, 22 de agosto
Presentación del CURSO (Teoría y Práctica)
2° Laboratorio 1: Reconocimiento de Biomoléculas 28, 29 de agosto
3° Practica calificada 1: Laboratorio 1 + Articulo 1* 04, 05 de setiembre
4° Laboratorio 2: Extracción de ADN 11,12 de setiembre
5| Práctica calificada 2: Laboratorio 2 + Articulo 2* 18, 19 de setiembre
6° Laboratorio 3: Determinación de grupo sanguíneo 25, 26 de setiembre
7° Práctica calificada 3: Laboratorio 3 + Articulo 3* 02, 03 de octubre
SEMANA DE EXÁMENES PARCIALES

8° ** confirmar fecha
09 al 12 de octubre
9° 16, 17 de octubre
10° EXPOCIENCIA 23, 24 de octubre
Laboratorio 4: Presentación del análisis de un artículo

11° 30, 31 de octubre
científico
12° Practica calificada 4: Exposición del articulo 06, 07 de noviembre
13° 13, 14 de noviembre
SEMANA EXAMENES FINALES

03 al 07 de diciembre
SEMANA EXAMENES SUSTITUTORIOS
17 al 21 de diciembre
* Entregado por el profesor de prácticas.

** Indicado por el profesor de teoría.
*** Los preinformes se entregaran en la fecha de realización de los laboratorios correspondientes, al
ingresar
Prof. Pilar García Avelino
Lima, 20 de agosto del 2018.

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PRESENTACION DEL MANUAL DE PRÁCTICAS
El propósito del Laboratorio es familiarizar al estudiante con la metodología de trabajo de la

biología, proporcionarle un ambiente donde tenga oportunidad de encontrarse con sustancias e
instrumentos que le motive a experimentar.
Considerando al laboratorio como un lugar donde el trabajo en equipo se facilita, da lugar a un

proceso de constante integración, comunicación, investigación, construcción de ideas, surgimiento
de nuevas preguntas, donde las actividades experimentales propician la reorganización de
conocimientos y facilitan el alcanzar un aprendizaje significativo.
Para logra tales fines, se propone esta guía que, como material de apoyo didáctico, reforzara el
proceso constante de enseñanza aprendizaje, requiriendo la participación y guía del profesor.
Material necesario para trabajar por alumno:
Individualmente: un mandil, gafas de seguridad, guantes, plumón marcador, toalla, cuaderno de

apuntes.
Por equipo: El que se indique para cada práctica.
INSTRUCCIONES GENERALES.
1. Busca conceptos, antecedentes previos a la realización de las prácticas.
2. Construye la hipótesis de trabajo, antes de solicitar su material.
3. Lee cuidadosamente los experimentos antes de ejecutarlos.
4. Recurre a tus libros de texto y/o consulta para aclarar dudas después de realizadas las
practicas, o consulta al profesor responsable.
5. Al efectuar cada uno de los pasos del desarrollo experimental, observa minuciosamente y
anota los cambios ocurridos.
6. Al concluir el desarrollo experimental, resuelve el cuestionario para su futura revisión.
7. Elabora tus conclusiones.
PRECAUCIONES PARA EL DESARROLLO DE CADA EXPERIMENTO
Las medidas oportunas y la compresión de las prácticas a seguir, hará del laboratorio un
lugar seguro como cualquier ambiente de clases.
Para ello deberán tenerse en cuenta, en forma general las siguientes precauciones:
1. Observa donde dejas el material caliente, cerciorándote que este frio antes de tomarlo
con la mano.
2. Cuando calientes un tubo de ensayo, no lo apuntes hacia ti o hacia tus compañeros, pude
proyectarse su contenido.
3. Si cae sobre ti o en tu ropa un material corrosivo, lávate inmediatamente con abundante
agua, e infórmalo al profesor del curso.
4. Nunca pruebes una sustancia.
5. Al detectar el olor de un líquido, no coloques la cara sobre la boca del recipiente, con tu
mano abanica hacia ti el aroma.
6. Antes de usar un reactivo lee dos veces la etiqueta de su contenido.
7. Los tubos de ensayo no pueden calentar ser por el fondo sino por las paredes, para evitar
su expulsión del contenido.
8. No arrojes cuerpos sólidos en los lavaderos, no viertas directamente los ácidos.
9. Rotula tu material de trabajo, así te será fácil identificarlos.
10. Cuando trabajes con el mechero mantén tu cabello recogido.
11. Nunca emplear papel para encender el mechero.
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BIOLOGÍA (CH 061)
PRESENTACION DEL INFORME
INDICAR el grupo de laboratorio al que pertenecen: A1, A2, B1, B2
I. Resumen (1 p)
¿Qué teorías lo sustentan? En relación al desarrollo de los experimentos.
II. Objetivos específicos (2 p)

Tema central de estudio para cada experimento desarrollado
III. Observaciones experimentales, datos y resultados (para c/experimento) (3 p)

Durante el desarrollo del experimento:
Qué se observó? Qué datos hubieron? ¿Cuáles fueron los resultados?¿Qué reacciones
se dieron?
Se indican los resultados tal y como se dieron durante la investigación. Se debe describir
los pasos ejecutados durante la experimentación
Se pueden presentar los datos en tablas, gráficas, o figuras, debidamente numeradas
IV. Discusión de las observaciones experimentales, datos y resultados (2 p)

¿Se obtuvieron los resultados correctos según la teoría? ¿Si, no? ¿Qué sucedió?
Es la etapa que encadena los resultados obtenidos por la investigación. Se relaciona,
interpreta y discute los resultados.
Se pone a prueba la capacidad analítica y de autocrítica del investigador.
La discusión pone el toque personal al trabajo.
V. Conclusiones (2 p)
¿Qué significan los resultados?
Las conclusiones están relacionadas con los objetivos.
Es el análisis del cumplimiento de cada uno de los objetivos de la práctica
VI. Cuestionario (1.5 p)

Preguntas relacionadas al tema
VII. Referencias (0.5 p)

Estas deben estar vinculadas a sus discusiones, de haberse empleado en el resumen
indicarlo.
Ejemplo de referencia
Paper:
Autor(es). Año. Título. Revista. Paginas.
Ivanov, V., Chu, J., 2008. Applications of microorganisms to geotechnical engineering for
bioclogging and biocementation of soil in situ. Rev Environ Sci Biotechnol 7, 139–153.
doi:10.1007/s11157-007-9126-3
Libro:
Autor(es). Año. Libro. Editorial, Edición. Páginas
4

BIOLOGÍA (CH 061)
GUIA DE LABORATORIO Nº 1
RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
INTRODUCCIÓN
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de moléculas orgánicas en gran cantidad:
carbohidratos, lípidos, proteínas y nucleótidos. Todas estas moléculas contienen carbono,
hidrógeno y oxígeno. Además, las proteínas contienen nitrógeno y azufre, y los nucleótidos, así
como algunos lípidos, contienen nitrógeno y fósforo.
Se ha dicho que es suficiente reconocer cerca de 30 moléculas para tener un conocimiento que
permita trabajar con la bioquímica de las células. Dos de esas moléculas son los azúcares glucosa
y ribosa; otra, un lípido; otras veinte, los aminoácidos biológicamente importantes; y cinco las
bases nitrogenadas, moléculas que contienen nitrógeno y son constituyentes claves de los
nucleótidos.
En esencia, la química de los organismos vivos es la química de los compuestos que contienen
carbono, es decir, los compuestos orgánicos.
El carbono es singularmente adecuado para este papel central, por el hecho de que es el átomo
más liviano capaz de formar múltiples enlaces covalentes. A raíz de esta capacidad, el carbono
puede combinarse con otros átomos de carbono y con átomos distintos para formar una gran
variedad de cadenas fuertes y estables y de compuestos con forma de anillo. Las moléculas
orgánicas derivan sus configuraciones tridimensionales primordialmente de sus esqueletos de
carbono. Sin embargo, muchas de sus propiedades específicas dependen de grupos funcionales.
Una característica general de todos los compuestos orgánicos es que liberan energía cuando se
oxidan. Entre los tipos principales de moléculas orgánicas importantes en los sistemas vivos están
los carbohidratos, los lípidos, las proteínas y los nucleótidos.
OBJETIVOS
 Determinar cualitativamente los azucares reductores.

 Hidrolizar la sacarosa.
 Reconocer la presencia de almidón.
 Reconocer cualitativamente las proteínas.
 Demostrar la solubilidad de los lípidos.
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, mechero, placas petri, vasos de precipitado, gradillas, pipetas graduadas,
propipetas, pinzas de madera, piceta, almidón.
Reactivo de Fehling, solución de azucares, solución de almidón, acetona, cloroformo, sulfato de
cobre, hidróxido de sodio
Por grupo: un huevo, 5 ml leche, 1 papa (elementos crudos)
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IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES (I)

FUNDAMENTO
Los monosacáridos (figura 1) y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que deben
al grupo carbonilo que tienen en su molécula. Este carácter reductor puede ponerse de manifiesto
por medio de una reacción redox, llevada a cabo entre ellos y el sulfato de cobre (II). Tras la
reacción con el glúcido reductor se forma óxido de cobre (I) de color rojo. De este modo el cambio
de color indica que se ha producido la reacción y que el glúcido presente es reductor.
Figura N°1. Algunos monosacáridos
Reacción de Fehling:
Es una reacción cualitativa que sirve para determinar la presencia de un azúcar reductor que no
sea sacarosa (carece de carbono anomérico y no es azúcar reductor).
El reactivo de Fehling presenta sulfato de cobre, carbonato de sodio, citrato de sodio, y agua. En
la reacción para determinar a los azucares reductores los agentes estabilizantes de la reacción
son el carbonato y citrato, el sulfato de cobre es el reactante específicamente el Cu que va a
reaccionar con los grupos químicos de aldehídos y cetonas. Que en reacciones de óxido reducción
el Cu se convierte en CuO dando un color rojo ladrillo que precipitará posteriormente, como lo
expresa la siguiente reacción (figura 2):
Figura N°2. Reacción de Fehling
PROCEDIMIENTO
- Rotular 4 tubos de ensayo, adicionar el azúcar correspondiente.

- Adicionar los reactivos en el orden señalado
- Mezclar por inversión el reactivo con cada uno de sus componentes
- Someter a la acción del calor hasta ebullición
- La reacción será positiva si en la muestra se forma un precipitado color rojo ladrillo (CH2O),
y será negativa si se queda azul o cambia a un tono de azul-verdoso.
6
Tabla N°1. Azucares reductores
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
1 2 3 4
1. Solución de glucosa 1% 1 ml
2. Solución de fructuosa 1% 1ml
3. Solución de lactosa 1% 1 ml
4. Solución de sacarosa 1% 1 ml
Reactivo de Fehling A 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
mezclar
Reactivo de Fehling B 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
mezclar
Calor por ebullición Baño maría 1 minuto
será negativa, si la hidrolisis no se ha realizado correctamente, apareciendo una coloración
verde en el tubo de ensayo.
ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS

(De las distintas muestras)
7
HIDROLISIS DE LA SACAROSA (II)

FUNDAMENTO
La sacarosa (figura 3) es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que carece
de poder reductor y la reacción con el licor de Fehling es negativa, como ha quedado demostrado
en el anterior experimento. Sin embargo la presencia de HCl y el calor, la sacarosa se hidroliza,
es decir incorpora una moléculas de agua y se descompone en los monosacáridos que la forman:
glucosa y fructuosa, que sí son reductores (figura 4).
Figura N° 3. Sacarosa
Figura N° 4. Disacáridos: (a) reductor, (b) no reductor
PROCEDIMIENTO
- Mezclar por inversión el reactivo con cada uno de sus componentes, ver la tabla 3.
- Someter a la acción del calor hasta ebullición
Tabla N°2. Componentes de la hidrolisis de la sacarosa
Muestra
COMPONENTES
sacarosa
Solución de sacarosa 0.5% 2 ml
Ácido clorhídrico HCl 1M 1 ml
Calentar por baño maría 1´ ó 5’
Enfriar
Hidróxido de sodio NaOH 1M 1 ml
Reactivo de Fehling A 1 ml
Reactivo de Fehling B 1 ml
baño maría
Calor por ebullición
1 minuto
será negativa, si la hidrólisis no se ha realizado correctamente, apareciendo una coloración
verde en el tubo de ensayo.

8
RECONOCIMIENTO DE POLISACARIDOS: ALMIDÓN (III)

FUNDAMENTO
El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina.

Esta prueba usa como reactivo el lugol, se basa en la especificidad del almidón cuando está
presente en solución, la cual da un color azul en presencia del Yodo. El lugol presenta: yoduro de
potasio y yodo, más agua (solución de Lugol). El yodo de la solución tiene afinidad por los enlaces
α 1-4 y α 1-6 de la moléculas de almidón, esta interacción del yodo por dichos enlaces producen
el cambio de coloración no por una reacción química sino por una reacción de adsorción o fijación
de iodo en la superficie de la molécula de amilosa, lo cual solo ocurre en frio (a temperatura
ambiente) La amilosa en disolución coloidal y en presencia de iodo se colorea de azul toma color
azul, la amilopectina da una coloración rojo violácea.
Figura N° 5. Fragmento de la molécula del almidón (amilopectina)
En el círculo un monómero de glucosa.
PROCEDIMIENTO
- Colocar los componentes indicados en la tabla 4, adicionar el reactivo de lugol y observar

los primeros cambios de coloración.
Tabla N° 3. Reconocimiento del almidón
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
1 2 3
Solución de almidón 2% 1 ml
Papa rallada 1 gr
Albúmina 1 ml
Reactivo de Lugol 5 gotas 5 gotas 5 gotas
- Mezclar por inversión y anotar los resultados, será positivo si se torna azul, violáceo.
- Las muestras positivas a la prueba deberán ser calentadas suavemente, sin que
llegue a hervir, hasta que pierda el color (30 segundos).
- Enfriar el tubo de ensayo en agua fría, observar como al minuto reaparece el color azul.
//… ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS
9
RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS (IV)

FUNDAMENTO
Las proteínas son macromoléculas formadas por la unión de muchos aminoácidos (figura 6) por
enlace peptídico (estructura primaria). Además pueden darse uniones por enlaces débiles de
distinta naturaleza que hacen que la proteína adquiera una conformación tridimensional
característica (estructura terciaria) ver la figura 7. Las variaciones de pH, temperatura o
concentración salina pueden destruir esos enlaces débiles de manera que la proteína pierde su
conformación y se dice que se desnaturaliza.
Figura N°6. Unidad de la proteína:

aminoácido
Figura N°7. Estructura de las proteínas
Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales
que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70°C o
al ser tratadas con soluciones salinas, acidas, alcoholes, etc.
Una de las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven para su identificación,
cabe resaltar la reacción de Biuret (figura 8). Esta reacción los producen los péptidos y las
proteínas, pero no los aminoácidos, ello se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que
se destruye al liberarse los aminoácidos
Reacción de Biuret (figura 8)
Se debe a los componentes que presenta: el hidróxido de sodio y sulfato de cobre (II); el cual el
agente denaturante de las proteínas es el hidróxido y el reactante es el sulfato de cobre. Las
proteínas después de ser denaturadas facilitan la interacción del Cu con los pares de electrones
sin compartir del grupo amino del péptido mediante enlaces de coordinación con la formación de
un complejo coloreado púrpura – violáceo, cuya intensidad depende de la concentración de
proteínas.
10
Figura N°8. Complejo de cobre formado en la reacción de Biuret
PROCEDIMIENTO
- Rotular tres tubos de ensayo, en el primero agregar 2 ml de albúmina (huevo), en el

segundo tubo 2 ml de leche, y en el tercero 2 ml de la solución de almidón.
- Añadir 0.5 ml de hidróxido de sodio (NaOH) al 5%, y 0.5ml de sulfato de cobre (Cu2SO4)
al 1% a cada tubo.
Tabla N°4. Ensayos de proteínas
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
1 2 3
Caseína (lácteo) 1 ml
Albúmina (huevo) 1 ml
Sol. almidón 1 ml
NaOH 5% 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

Rvo. Biuret:
0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml
Cu2SO4 1%
- Observe la formación del color violeta en los tubos que presentan proteínas, siendo Biuret
(+), de no haber un cambio de color será Biuret (-).
11
SOLUBILIDAD DE LOS LÍPIDOS (V)
FUNDAMENTO
Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso que es transitoria, pues al dejarlo
en reposo desaparece por la reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su menor
densidad se sitúa sobre el agua. Las grasas son solubles en disolventes orgánicos.
En este experimento el reconocimiento de lípidos será por la prueba de solubilidad, identificando

el comportamiento de las moléculas de aceite con el agua, las cuales no se homogenizan, debido
a que estas presentan características diferenciales, mientras que el agua es polar, el aceite es no
polar, esto hace que microscópicamente se note que el aceite forme micelas en solución acuosa.
Donde las colas hidrofóbicas de las moléculas de aceite se “esconden” del agua adoptando la
forma de micelas.
PROCEDIMIENTO
Tabla 9. Reconocimientos de lípidos por solubilidad
TUBO DE ENSAYO
COMPONENTES
1 2 3
Aceite 1 ml 1 ml 1 ml
Agregar por las paredes del tubo cada componente:
Agua destilada 2 ml
Cloroformo 2 ml
Acetona 2 ml
- Rotular los tubos y en cada uno de ellos adicionar 1 ml de aceite

- Luego por las paredes de cada tubo adicionar: 2ml de agua para el primer tubo, 2ml de
cloroformo para el segundo tubo y cloroformo para el tercer tubo
- NO HOMOGENIZAR! Hacer la primera observación.
- Mezclar por inversión cada tubo, dejar en reposo por 5 minutos
- Anotar las observaciones respectivas.
ANOTR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS
12

SECCIÓN
BIOLOGÍA (CH 061)
INFORME DEL LABORATORIO Nº 1
RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
Nombre del alumno Informe Desempeño Nota

(Apellidos, Nombre) (20 p) (-) (20)
1 Resumen (1p)
13
2 Objetivos específicos (5p)
1.
2.
3.
4.
5.
14
3 Datos y observaciones experimentales (2.5 p)

Experimento N° 1: Identificación de Azucares Reductores
Tabla N°1. Resultados de azucares reductores
GLÚCIDO fructuosa glucosa lactosa sacarosa
Reductor
Importante: Es necesario indicar la formación de precipitado y la cantidad con un signo (+++).
15
Experimento N° 2: Hidrólisis de la sacarosa
Tabla N°2. Resultado de la hidrólisis de la sacarosa
Muestra SI NO
Hidroliza
16
Experimento N° 3: Reconocimiento de polisacáridos: Almidón
Tabla N°3. Resultado de reconocimiento del almidón
Muestra papa almidón huevo
¿Almidones?
Importante: Es necesario indicar la intensidad del color con un signo (+++).
17
Experimento N° 4: Reconocimiento de Proteínas
Tabla N°4. Ensayos de proteínas
Muestra albúmina caseína almidón
Proteínas
Importante: Es necesario indicar la intensidad del color con un signo (+++).
18
Experimento N° 5: Solubilidad de los Lípidos
Tabla N°5. Resultados de la solubilidad de los lípidos
Aceite Aceite Aceite

Muestra
+ agua destilada + acetona + cloroformo
¿Soluble?
19
4. Discusión de observaciones, datos y resultados (5 p)

(Adicionar otra hoja de ser necesario)
20
5. Conclusiones (5 p)
1.
2.
3.
4.
5.
6. Cuestionario y referencias
a. ¿Qué azúcares son reductores?
b. En el experimento 2: reconocimiento del almidón, al trabajar con el lugol ¿Por qué se da el
cambio de coloración después de sometido al calor? Fundamente su respuesta.
c. ¿Cuáles son los factores que afectan la naturaleza de las proteínas?
21
Cuestionario (1.5 p)
22

BIOLOGÍA (CH 061)
ANEXO 1
PREPARACION DE REACTIVOS
LABORATORIO: RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS
a. Soluciones de azucares ó glúcidos al 1%

Glucosa, maltosa, lactosa, fructuosa, galactosa, sacarosa, almidón.
Se pesa 1 gramo de un glúcido y se disuelve en 100 ml de agua destilada, agitando hasta
disolverse por completo.
Se vierte en un frasco limpio y se rotula, indicando la fecha de preparación.
Así para cada uno de ellos.
Para el caso del almidón, debe emplearse agua destilada caliente y agitación constante
b. Solución de almidón al 2%
Se pesa 2 gramos de almidón y se disuelve en 100 ml de agua destilada caliente y en
agitación constante.
c. Hidróxido de sodio al 5%
Se pesa 5 gramos de NaOH y se disuelve en 100 ml de agua destilada.
d. Reactivo de Fehling
Solución A: solución al 3% de sulfato cúprico cristalizado
Pesar 30 g de sulfato cúprico Cu2SO4 y aforar en un litro con agua destilada
Solución B: solución al 15% de sal de Rochelle (tartrato de sodio y potasio) en solución
acuosa al 5% de hidróxido de sodio NaOH.
Preparar un litro de hidróxido de sodio al 5% (50 grs en 1 L) y adicionarle
150 g de tartrato de sodio y potasio
e. Solución de lugol: yodo/yoduro de potasio

Adicionar 2 g de yoduro de potasio y1 g de yodo a 80 ml de agua destilada, agitar hasta
solubilizar los reactivos Aforar 100ml de agua.
f. Reactivo de Biuret
Solución A: 17.3 g de sulfato de cobre Cu2SO4 en 100 de agua destilada caliente
Solución B: 17.3 g de citrato sódico Na2CO3y 100 g de bicarbonato de sodio anhidro
NaHCO3 en 800 ml de agua destilada caliente.
Se mezclan ambas soluciones, se enrazan a un litro y se ponen en un matraz cubierto para
evitar la acción de la luz. El reactivo se guarda en un frasco color ámbar.
23
UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA SECCION

BIOLOGÍA (CH 061)
PREINFORME DEL LABORATORIO Nº 2
EXTRACCION DE ADN DEL EPITELIO MUCOSO BUCAL
Nombre del Alumno Calificación
Fecha
Recuerde que el PREINFORME debe de entregarlo de manera individual, el día de realización del laboratorio,
escrita a mano, se presenta en hojas A4 bond, Nota máxima de 4 puntos
1. Realice el DIAGRAMA DE FLUJO de los experimentos a desarrollar PROCEDIMIENTO, realice

un esquema de trabajo de cada experimento.
Es el plan ordenado de la forma en que se realizó la práctica para lograr el objetivo de la misma.
(2 puntos)
Ejemplo:
A
Se indica el proceso (…Se adiciona… se separa)
2. Cuestionario:
- ¿Qué es código genético?
- ¿Cuántos genes tiene el hombre?
- Presente un diagrama de flujo de la extracción de ADN en una de las siguientes
muestras: en cabellos, sangre, tejido óseo,
- ¿Cómo se puede preservar el ADN después de haberlo extraído?
3. Bibliografía: cite correctamente la bibliografía consultada
24

BIOLOGÍA (CH 061)
EXTRACCIÓN DE ADN DEL EPITELIO MUCOSO BUCAL

INTRODUCCIÓN
El ADN es una cadena de nucleótidos, es un polinucleótido. Esta cadena

está formada por muchas unidades de nucleótidos unidas entre sí, por
un enlace peptídico, y cada nucleótido está formado por un azúcar
(desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser adenina (A), timina
(T), citosina (C) ó guanina (G)) y un grupo fosfato que actúa como la
unión de nucleótidos. Ver la figura 1.
La secuencia del ADN se especifica nombrando sólo la secuencia de sus
bases. La disposición secuencial de estas cuatro bases a lo largo de la
cadena, es decir, el ordenamiento de los nucleótidos, es la que codifica
la información genética. El ADN se presenta como una doble cadena de
nucleótidos, en la que las dos hebras están unidas entre sí por enlaces.
El ADN forma el gen, que es la unidad básica de la herencia.
En esta práctica se emplearan las células de descamación del epitelio
mucoso del interior de la boca, poniendo de manifiesto u estructura
fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, que permite el
empaquetamiento en el núcleo celular de las larguísimas cadenas de
ésta molécula. Figura 1.
Estructura del ADN
En las plantas, los animales y los hongos, el ADN se encuentra mayormente en el núcleo de las
células. Para extraer el ADN de las células vegetales hay que romper la fuerte pared celular
exterior, emulsionar los lípidos de la membrana plasmática y la envoltura nuclear.
La extracción del ADN celular es una etapa clave en muchos procedimientos de biología molecular
y aplicaciones de ingeniería genética. El método varía dependiendo de la célula o tejido desde
donde se necesita extraer el DNA, sin embargo, cualquier protocolo tiene las siguientes etapas
básicas:
Primero las células deben ser homogenizadas, lisadas (rotas) para liberar el núcleo (si está
presente). El núcleo también debe ser roto para liberar el DNA. En este punto el DNA debe ser
protegido de enzimas que podrían degradarlo (nucleasas). Una vez que el DNA es liberado. Debe
ser precipitado con alcohol (etanol) para purificarlo y concentrarlo. Dependiendo de las
aplicaciones posteriores, puede ser necesario someter el DNA a etapas de purificación
adicionales. Usualmente el DNA extraído se analiza mediante electroforesis en geles de agarosa
y/o espectrometría UV.
OBJETIVOS
 Extracción y visualización de ADN de una muestra animal.
25
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, agua mineral, palillo, vasos desechables, pipeta de 10 ml, bagueta, propipeta,
gradilla de madera, tubos eppendorf, NaCl 6%, alcohol de 96° muy frio, alcohol de 70,
detergente/shampu, una probeta.
Por persona: vasos desechables, cucharitas de plástico, agua mineral, alcohol de 96°, alcohol
de 70°, (100ml), muestra biológica: epitelio bucal 
Por grupo: alcohol de 96°, alcohol de 70°, (100ml)
FUNDAMENTO
El ADN se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso y replegado, unido a proteínas para
formar la cromatina. Para extraerlo es necesario homogenizar el tejido y romper las células para
separar el núcleo, al lograrlo se libera el ADN, se debe separar de las proteínas y precipitarlo para
extraerlo de la solución. Se visualizara como un agregado de fibras blanquecinas que se podrán
adherir a una varilla de vidrio.
EXTRACCION DE ADN ANIMAL
PROCEDIMIENTO
 Preparar un tubo de ensayo con alcohol etílico de 96° por cada alumno y poner a enfriar lo
máximo que sea posible (p.e. en baño de agua con hielo, mientras se realizan los pasos
siguientes.
1. Poner un poco de agua en un vaso y enjuagarse la boca enérgicamente durante al menos un

minuto, para arrastrar el mayor número posible de células de descamación de la mucosa bucal
(antes de hacerlo conviene haber tragado la saliva para eliminar la acción de los enzimas
contenidos en ella).
2. Mientras tanto, pondremos una pequeña cantidad de agua destilada (o mineral) en el mismo
vaso, unos 10 ml y añadimos 1 ml de NaCl, 5 gotas de detergente/shampu, removiendo
suavemente para disolver estos componentes evitando la formación de espuma.
3. Expulsar el agua en el vaso de precipitados sobre la solución anterior y remover con la
cucharilla suavemente durante varios minutos para que actúen el NaCl y el detergente,
evitando la formación de espuma.
4. Luego, añadir la solución suavemente al tubo de ensayo que contiene el alcohol muy frio
dejándola resbalar por la pared del tubo inclinado. El filtrado más denso que el alcohol y algo
turbio se deposita en el fondo del tubo. Dejar reposar durante unos 3 minutos sin moverlo.
5. Comprobar la estructura fibrilar del ADN
26

FACULTAD DE CIENCIAS SECCION
BIOLOGÍA (CH 061)
EXTRACCIÓN DE ADN DEL EPITELIO MUCOSO BUCAL
Pre
Nombre del alumno Test Informe Desempeño Nota
informe
(Apellidos, Nombre) (4p) (12 p) (-) (20)
(4 p)
Resumen (1p)
27
1. Objetivos específicos (2p)
2. Datos y observaciones experimentales (2 p)

Experimento: EXTRACCION DE ADN ANIMAL
28
29
6. Cuestionario y referencias (2 p)
a. Explique, cómo se puede determinar la concentración del ADN.
b. ¿Cuál es la importancia de estudiar el ADN en muestras arqueológicas?
Y en la actualidad?
30

SECCION
BIOLOGÍA (CH 061)
PREINFORME DEL LABORATORIO Nº 3
EFECTO DE LA T° Y EL pH EN LA AMILASA SALIVAL
Nombre del Alumno: Calificación

Grupo:
Fecha:
Recuerde que el PREINFORME debe de entregarlo de manera individual, el día de realización del laboratorio, se
presenta en hojas A4 bond, que tiene un peso máximo de 4 ptos. sobre la nota del Laboratorio.
1 Realice el DIAGRAMA DE FLUJO del experimento a desarrollar: PROCEDIMIENTO

Es el plan ordenado de la forma en que se realizó la práctica para lograr el objetivo de la
misma. (2 puntos)
Ejemplo:
A
Se indica el proceso (…Se adiciona… se separa)
2 Cuestionario:
a. ¿Qué es la amilasa salival?, ¿Cuál es su función?
b. ¿Cuáles son las propiedades de las enzimas?
3 Bibliografía: cite correctamente la bibliografía consultada
31

BIOLOGÍA (CH 061)
INTRODUCCIÓN
Propiedades del almidón.
El almidón es el polisacárido de reserva más abundante en vegetales y constituye la principal

fuente de nutrición glucídica para la humanidad. Los almidones están constituidos por una mezcla
de dos componentes:
 a-amilosa: cadena lineal de unas 200 unidades de D-glucosa unidas por enlaces α(1-4)
 amilopectina: cadena lineal de D-glucosas unidas por enlaces tipo α (1-4) con numerosas
ramificaciones α (1-6). El polímero contiene unas 1000 unidades de glucosa.
La proporción en que se mezclan la a-amilosa y la amilopectina para formar el almidón depende

de la especie vegetal en que aparece el almidón. La α -amilosa se disuelve fácilmente en agua,
adquiriendo una estructura secundaria característica, de forma helicoidal, en la que cada vuelta
de hélice comprende seis unidades glucosa.
Esta estructura secundaria, en la que los grupos hidroxilo que dan hacia afuera, permite que el
iodo, al penetrar en el interior del helicoide, confiera a la disolución una coloración azul violácea
intensa característica que permite la identificación positiva de trazas de almidón. Como esta
coloración no es resultado de ninguna interacción covalente, el calentamiento origina la
desestabilización del helicoide y la pérdida de color, que se recupera al enfriar lentamente la
disolución. La variación en el pH tiene un efecto análogo.
Fig. 1 Estructura repetitiva de la amilosa.
Hidrólisis del almidón.
El almidón puede hidrolizarse por medios químicos o enzimáticos. La ebullición con ácidos o álcalis
hidroliza aleatoriamente los enlaces glucosídicos entre unidades de glucosa, dando polisacáridos
de longitud intermedia denominados dextrinas, cada vez menores hasta la obtención de unidades
de glucosa individuales.
32
Los compuestos que se obtienen en la hidrólisis del almidón y el color que producen con el iodo
son los siguientes:
Almidón (azul).
Amilodextrinas (violeta).
Eritrodextrinas (rojo).
Acrodextrinas (incoloro*).
Maltosa (incoloro*).
Glucosa (incoloro*).
* Tener en cuenta el ligero color amarillo propio del iodo.
El almidón también puede hidrolizarse enzimáticamente.
Uno de los enzimas que hidrolizan el almidón es la amilasa, que se halla presente en el jugo
pancreático y la saliva. Este enzima ataca al azar los enlaces α(1-4) del interior de la cadena. Así,
rinde finalmente unidades de glucosa libre y maltosa. La amilasa no ataca los enlaces α(1-6),
base de las ramificaciones de la amilopectina.
Estos enlaces pueden ser hidrolizados por otro enzima desramificador. La ptialina o amilasa salival
es una proteína enzimática presente en la saliva. Como todo enzima, la acción que ejerce sobre
su sustrato (almidón) depende de una serie de parámetros: pH, temperatura, concentración de
enzima.
OBJETIVOS
 Demostrar el efecto del pH sobre la actividad enzimática.

 Demostrar el efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática
PROCEDIMIENTO
I. OBTENCIÓN DEL ENZIMA.
1. Tras enjuagar la boca, se mastica un trozo de papel de filtro para estimular la salivación. Los
líquidos segregados se van pasando a un embudo con un filtro humedecido colocado sobre un
tubo de ensayo, hasta recoger la suficiente cantidad de saliva para realizar la práctica.
2. La saliva así obtenida se diluye 1:10 con agua destilada, obteniendo así la preparación de
enzima base.
II. EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD AMILASA SALIVAL.
1. Tomar tres tubos de ensayo y añadir respectivamente:
1 2 3
HCl 0.1 N 2 ml NaOH 0.1 N 2 ml Agua destilada 2 ml
Almidón 2% 2 ml Almidón 2% 2 ml Almidón 2% 2 ml
Saliva diluida 1:10 2 ml Saliva diluida 1:10 2 ml Saliva diluida 1:10 2 ml
2. Agitar bien y medir rápidamente el pH de cada tubo. Para medir el pH, se toma una gota de la
disolución con una varilla limpia y seca y se humedece con ella un trocito de papel indicador de
pH, comparando el color obtenido con el de la escala.
33
Los tres tubos se colocan en un baño de agua termostatizado a 37ºC durante 15minutos,
dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón. Una vez transcurridos los 15 minutos, se
sacan los tubos y se efectúan las pruebas del iodo y de Benedict
Prueba del iodo o del lugol: permite identificar la presencia de almidón que con este reactivo da
un color azul-violeta característico. Tomar 1 ml de muestra de cada uno delos tubos y añadirle
unas gotas de la disolución de iodo iodurada. Si la actividad enzimática de la amilasa no se ve
afectada, catalizará la hidrólisis del almidón y por tanto la prueba del iodo será negativa.
Prueba de Benedict: permite identificar a los azúcares reductores, obtenidos por hidrólisis del
almidón, que con esta prueba dan una coloración rojiza (el almidón no tiene poder reductor).
Tomar 1 ml de muestra de cada uno de los tubos y seguir el protocolo para la reacción de
Benedict en la práctica de azúcares.
III. INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA EN LA VELOCIDAD ENZIMÁTICA.
1. Preparar 8 tubos: cuatro de ellos con 2ml de almidón 2% y los otros cuatro con 2 ml de
saliva diluida 1:10.
2. Colocar dos tubos, uno conteniendo almidón y la otra saliva, a cada una de las cuatro
temperaturas siguientes (marcar cada pareja de tubos según la temperatura a la que se
ensaya):
 en baño de hielo (OºC, si se añade un poco de agua al hielo enfría más;

cuidar que los tubos no vuelquen)
 a temperatura ambiente (20ºC)
 en baño a 37ºC
 a ebullición en baño María* (100ºC).
3. Mantener así los tubos durante 15 minutos para que alcancen la temperatura del experimento.
4. Añadir al tubo que contiene el almidón el contenido del tubo que tiene la saliva, agitar bien y
dejar que siga a su temperatura correspondiente. Empezar a contar el tiempo (los tubos deben
mantenerse bien inmersos en los respectivos baños para que la acción de la amilasa tenga
lugar a las temperaturas indicadas).
Transcurridos 0, 2, 4, 6 y 8 minutos coger una muestra de 0,5 ml de cada tubo y ponerla en la

placa de pocillos.
* En el caso del baño María basta con 5 minutos.
5. Añadir a cada muestra unas gotas de reactivo de iodo. Una vez realizada la prueba ANALICE
los distintos cambios de color observados y la razón de estos.
Cuando el almidón está hidrolizado no produce ningún cambio de color a la solución de iodo (punto
acromático). El tiempo necesario para alcanzar tal punto da idea de la actividad de la enzima. La
inversa de dicho tiempo equivale a la velocidad de la reacción enzimática.
34

SECCION
BIOLOGÍA (CH 061)
Pre
Nombre del alumno Informe Desempeño Nota
informe
(Apellidos, Nombre) (16 p) (-) (hasta 20)
(4 p)
1. Resumen (1p)
35
2. Objetivos específicos (2 p)
1.
2.
3. Datos y observaciones experimentales (5 p)

Experimento II: EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD AMILASA SALIVAL
Tabla N°1 Resultados del efecto del pH sobre la actividad
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
pH
Prueba de Lugol
Benedict
36
Experimento II: EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD AMILASA SALIVAL

Tabla N°2 Resultados de la temperatura óptima para la actividad de la enzima
Ambiente:
0º C 37º C 100º C
ºC
0´
1´
2´
4´
6´
8´
37
38
1.
2.
6. Cuestionario (1.5 p)
a. ¿Qué es y qué hace un enzima?
b. ¿Cuáles son las funciones de la enzima trabajada?
c. ¿Cuál es la estructura molecular de la enzima trabajada?
7. Bibliografía (0.5 p)
39

SECCION
BIOLOGÍA (CH 061)
(EVALUCION - N°4)
ANALISIS DEL ARTICULO CIENTIFICO
Un artículo científico es un informe escrito que describe los resultados
originales de una investigación ya realizada. La característica principal de un artículo de
investigación es que siempre debe producir avances en el conocimiento
Deberán buscar 1 artículo científico que cumpla las siguientes condiciones:

1. Pertenecer a alguna revista arbitrada,
2. No ser mayor a 5 años de antigüedad.
3. De preferencia que se en encuentre relacionado con su área de estudio.
(De igual tienen libertad de elección)
La presentación del análisis del artículo: En un folder entregarán la versión impresa del artículo
(éste puede ser impreso en por ambos lados de la hoja) y su respectivo análisis (este último con
las páginas numeradas, márgenes preestablecidos). Tendrá los siguientes ítems:
1. TITULO
2. Justificación del artículo:
¿Por qué realizaron esa investigación?, ¿Cuál es el propósito de la investigación? ¿Qué
buscaban?
3. Objetivos: “que se plantean en el artículo, es la importancia y relevancia de la investigación”
4. Metodología en diagramas de flujo*:
Realizar el proceso secuencial de la metodología.
* Para el caso de las especialidades de Ciencias de la Computación y Matemática es posible
que este sistema no sea apropiado, así que se deja a su criterio de interpretación.
* Para un mejor entendimiento, de ser el caso deberá explicar términos, análisis y procesos
mencionados en el artículo.
5. Análisis e interpretación de los resultados del artículo:
¿Cuáles fueron los resultados del artículo?
¿Cumplieron los objetivos establecidos al inicio de la investigación?
El análisis debe expresarse a través de un lenguaje claro
6. Conclusión del articulo
7. APRECIACION PERSONAL: Indicar
¿Por qué selecciono ese artículo?
¿Cuál es el aporte a la Biología?
¿Existe estudios iguales, cercanos o similares en nuestro país?
40

BIOLOGÍA (CH 061)
EXPOSICIÓN DEL ARTICULO CIENTIFICO

La exposición, es la explicación y desarrollo de ideas de forma secuencial de un tema
seleccionado ante un público. El fin es transmitir con el lenguaje adecuado el análisis realizado.
Tendrán como elemento complementario la presentación de un power point, no mayor a 15

diapositivas. El tiempo de exposición será entre 15-20 minutos.
RÚBRICA DE EVALUACIÓN PARA EXPOSICIÓN ORAL

CONOCIMIENTO Y Muy bueno Bueno Regular Inicial
ORGANIZACIÓN 2.5 1.5 1.0 0a1
Demuestra solvencia y Demuestra confianza Demuestra poco Demuestra falta de
confianza al expresar en sus conocimientos, conocimiento del tema conocimientos del
sus conocimientos, pero falla en algunos y escasa información tema. La información
Conocimiento y presentando la momentos al tratar de relevante. que da es relevante
preparación del tema información más ofrecer la información
precisa y pertinente más precisa.
para el desarrollo del
tema.
Argumenta sus ideas a Argumenta sus ideas a Ofrece ideas personales Expresa ideas
partir de conocimientos partir de conocimientos sobre el tema sin impertinentes respecto
Expresión de un punto válidos sobre el tema válidos sobre el tema establecer ninguna del tema de la
de vista personal elegido, así como el elegido, aunque no relación entre ellas o la exposición.
énfasis en las ideas logra sostenerse en una información ofrecida.
centrales. idea central.
Ofrece una exposición Ofrece una exposición Ofrece una exposición Ofrece una exposición
altamente organizada, organizada de manera desorganizada, sin carente de orden o
respetando los tiempos adecuada, aunque sin respetar el tiempo cuidado por la
establecidos, facilitando terminar en el tiempo establecido y causando organización del tema.
Estructura y orden
la captación de su establecido y dejando confusión en el público.
discurso desde el inicio algunas ideas sueltas
hasta el final de su
intervención.
Muy bueno Bueno Regular Inicial
COMUNICACIÓN
2.5 1.5 1.0 0a1
Establece un Establece cierto Expresa sus ideas de Expresa ideas
permanente contacto contacto con el público manera poco incoherentes, sin
con el público a través mediante la intención comunicativa, así como establecer un mínimo
del dominio de un de mantener un un registro informal y contacto con el público.
Uso formal del
registro lingüístico registro adecuado y un un tono de voz
lenguaje
adecuado, un buen buen tono de voz inadecuado.
tono de voz, el código
gestual y el contacto
visual.
41

BIOLOGÍA (CH 061)
RÚBRICA DE EVALUACIÓN PARA PRESENTACIÓN EN PPT
Muy bueno Bueno Regular Inicial

CATEGORÍA 2.0 1.5 1.0 0a1
Organiza la Mantiene la La presentación La presentación
presentación coherencia aunque está estructurada carece de
Organización de la
siguiendo la falla en alguna pero es estructura y
presentación
estructura del parte de la incoherente (sin coherencia.
artículo. estructura. hilo conductor).
Títulos, textos, Presenta los datos Muestra los datos Presenta datos y No se presenta
encabezado, claros y legibles de tamaño párrafos ilegibles y datos.
párrafos y con tamaños fáciles inadecuado, pero fuera de rango.
contenidos de leer. se comprenden.
Utiliza contraste de Utiliza contraste Utiliza colores muy No utiliza colores ni
colores claros. adecuado. confusos. transición.
Diseño Emplea un diseño y Utiliza imágenes no El diseño y
transición muy claras. transición son poco
consistente. consistentes.
Utiliza imágenes Utiliza imágenes no Las imágenes no No presenta
Imágenes
claras y expresivas. muy claras. son expresivas. imágenes.
Utiliza excelente: Utiliza excelente: Utiliza la gramática, Pésima: gramática,
gramática, gramática y ortografía y ortografía y
Ortografía y
ortografía y ortografía y puntuación puntuación
puntuación
puntuación. puntuación inadecuadas.
deficiente.
42

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

ESCUELA PROFESIONAL QUIMICA

SEMESTRE ACADEMICO 2018-II

BIOL. PILAR GARCÍA AVELINO

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

Cronograma de Practicas de Laboratorio de BIOLOGÍA

SEMANA ACTIVIDAD FECHA

2° Laboratorio 1: Reconocimiento de Biomoléculas 28, 29 de agosto

3° Practica calificada 1: Laboratorio 1 + Articulo 1* 04, 05 de setiembre

4° Laboratorio 2: Extracción de ADN 11,12 de setiembre

5| Práctica calificada 2: Laboratorio 2 + Articulo 2* 18, 19 de setiembre

6° Laboratorio 3: Determinación de grupo sanguíneo 25, 26 de setiembre

7° Práctica calificada 3: Laboratorio 3 + Articulo 3* 02, 03 de octubre

SEMANA DE EXÁMENES PARCIALES

10° EXPOCIENCIA 23, 24 de octubre

Laboratorio 4: Presentación del análisis de un artículo

12° Practica calificada 4: Exposición del articulo 06, 07 de noviembre

13° 13, 14 de noviembre

SEMANA EXAMENES FINALES

* Entregado por el profesor de prácticas.

Prof. Pilar García Avelino

Lima, 20 de agosto del 2018.

PRESENTACION DEL MANUAL DE PRÁCTICAS

El propósito del Laboratorio es familiarizar al estudiante con la metodología de trabajo de la

Considerando al laboratorio como un lugar donde el trabajo en equipo se facilita, da lugar a un

Material necesario para trabajar por alumno:

Individualmente: un mandil, gafas de seguridad, guantes, plumón marcador, toalla, cuaderno de

PRECAUCIONES PARA EL DESARROLLO DE CADA EXPERIMENTO

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

PRESENTACION DEL INFORME

INDICAR el grupo de laboratorio al que pertenecen: A1, A2, B1, B2

II. Objetivos específicos (2 p)

III. Observaciones experimentales, datos y resultados (para c/experimento) (3 p)

IV. Discusión de las observaciones experimentales, datos y resultados (2 p)

VI. Cuestionario (1.5 p)

VII. Referencias (0.5 p)

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA

 Determinar cualitativamente los azucares reductores.

Por grupo: un huevo, 5 ml leche, 1 papa (elementos crudos)

IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES (I)

Figura N°1. Algunos monosacáridos

Figura N°2. Reacción de Fehling

- Rotular 4 tubos de ensayo, adicionar el azúcar correspondiente.

Tabla N°1. Azucares reductores

Calor por ebullición Baño maría 1 minuto

ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS

HIDROLISIS DE LA SACAROSA (II)

Figura N° 4. Disacáridos: (a) reductor, (b) no reductor

Tabla N°2. Componentes de la hidrolisis de la sacarosa

ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS

RECONOCIMIENTO DE POLISACARIDOS: ALMIDÓN (III)

El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la amilopectina.

- Colocar los componentes indicados en la tabla 4, adicionar el reactivo de lugol y observar

Tabla N° 3. Reconocimiento del almidón

RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS (IV)

Figura N°6. Unidad de la proteína:

Figura N°7. Estructura de las proteínas

Reacción de Biuret (figura 8)

Figura N°8. Complejo de cobre formado en la reacción de Biuret

- Rotular tres tubos de ensayo, en el primero agregar 2 ml de albúmina (huevo), en el

Tabla N°4. Ensayos de proteínas

NaOH 5% 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS