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# 30 revista de ingeniería
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RESUMEN ABSTRACT
Este resumen pretende dar una visión global de los This summary intends to give a global view of the
aportes de la Universidad de los Andes en el tratamien- Universidad de los Andes contributions related to the
to de aguas y suelos con la presencia de compuestos de water and soil treatment in the presence of recalcitrant
difícil degradación o tiempo de vida media prolongado, or long half-life aquatic pollutants such as drugs
tales como fármacos (Ciclofosfamida), lodos aceitosos (Cyclophosphamide), oil sludge and petroleum (Toluene,
y derivados de la industria del petróleo (Tolueno, Xi- Xylene and Phenol), textile, chemical (Bisphenol A,
leno, Fenol) derivados de la industria textil, química y AMBI) and pesticides (Glyphosate, Isoproturon, and
pesticidas (Bisphenol A, AMBI, Glifosato, Isoproturon y Metobromuron) industry derived products based on
Metobromuron), usando tecnologías ya sea basadas en biological (bioremediation and bioadsortion) and
procesos biológicos (biorremediación y bioadsorción) o advanced oxidation (Photo-Fenton) approaches.
de oxidación avanzada (foto-Fenton).
102 INTRODUCCIÓN ción que pueden afectar el medio ambiente, incluso
La contaminación ambiental de ecosistemas que com- en bajas concentraciones. A menudo están presentes
prometen suelo, agua y aire son causados directa o en el medio acuático en concentraciones muy bajas
indirectamente por los grandes centros urbanos. El (µg/l, ng/L) en comparación con otros contaminan-
derrame de petróleo, los pasivos ambientales gene- tes (mg/L). La presencia de micro-contaminantes en
rados durante la operación de extracción del mismo, el medio acuático en su forma inicial o metaboliza-
la presencia de micro-contaminantes, tales como fár- da porta el doble problema de la cuantificación de
macos, y compuestos derivados de la industria, tales su toxicidad y las posibles formas de su eliminación.
como tintas, son unos pocos ejemplos del amplio Hoy, esta preocupación no está sujeta a ninguna le-
espectro, no solo en cantidad sino también en esca- gislación ni en Colombia ni en cualquier otro lugar
la del tipo de contaminantes que Colombia necesita del mundo; incluso algunos países desarrollados están
enfrentar en la próxima década. La Universidad de empezando a mostrar interés (Ejemplo: la misión de
los Andes, consciente de la problemática, ha prestado la Agencia Francesa de Seguridad Sanitaria de Medio
atención a las dificultades que se avecinan tratando de Ambiente y trabajos en curso sobre el cáncer, AFS-
salir del paradigma del uso de sistemas convenciona- SET). Los micro-contaminantes abarcan una gran
les de tratamiento de efluentes de alta carga orgánica familia de compuestos químicos ampliamente utiliza-
(aguas residuales domésticas) para proponer tecnolo- dos en las ciudades (hospitales, hogares, industria) ta-
gías que sean útiles en el tratamiento de compuestos les como detergentes, productos de limpieza, aditivos
recalcitrantes, los cuales pueden presentar menores para plásticos, hidrocarburos, plaguicidas, herbicidas,
emisiones pero cuyo el impacto ambiental puede ser cosméticos, perfumes, medicamentos, hormonas y
igual o mayor que las fuentes de contaminación tí- sus metabolitos. Una atención especial es prestada a
picas. Estas tecnologías están basadas en aproxima- los compuestos farmacéuticos dada su especificidad:
ciones biológicas (biorremediación o bioadsorción) o éstos son puestos en el mercado después de una rigu-
físicoquímicas (procesos de oxidación avanzada). El rosa selección y se comercializan los compuestos bio-
propósito de este resumen es el de describir de ma- lógicamente más activos. Para algunos medicamentos,
nera breve el trabajo de la Universidad de los Andes los niveles de consumo por país no superan unos po-
relacionado con el tratamiento de micro-contaminan- cos cientos de kilogramos, para otros, sin embargo
tes, hidrocarburos, metales pesados y derivados de ascienden a cientos o miles de toneladas [1].
la industria textil, con el objetivo de aumentar la red El riesgo potencial asociado a la presencia de produc-
de trabajo tanto institucional como nacional e inter- tos farmacéuticos a concentraciones bajas en medios
nacional. Es de esperarse que en cualquier resumen acuáticos es actualmente un tema de debate. Hasta
queden esfuerzos sin nombrar; por tanto, los autores el momento, no existen reportes sobre el estudio in
piden disculpas por omitirlos y dejan claro que el acto situ que permitan evaluar objetivamente el rol de la
no es intencional. presencia de medicamentos sobre perturbación de
organismos o de comunidades, salvo en el caso de
hormonas esteroides en medio acuático; sin embargo,
LA PROBLEMÁTICA DE LOS MICRO- no se puede excluir, sobre la base de conocimientos
CONTAMINANTES actuales, que a largo término, la presencia continua
Recientemente, se presta una atención creciente a la de moléculas farmacéuticas en los ecosistemas acuá-
presencia de micro-contaminantes en el medio acuáti- ticos y terrestres no sean una fuente de peligro [1]: la
co y en las plantas de tratamiento de aguas residuales. exposición crónica a estos compuestos puede afectar
Los micro-contaminantes son un tipo de contamina- una variedad de organismos en diferentes estados de
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desarrollo, para los cuales no se conoce ninguna ac- bajas concentraciones que causan alteraciones en la 103
ción farmacológica. biodegradación.
La presencia de compuestos farmacéuticos en diver- Sin embargo, la remoción no es total, por lo que un
sas matrices acuáticas ha sido reportada en varios tratamiento terciario es necesario si se precisa una
estudios [2, 3, 4, 5]. La mayoría de los tratamientos completa eliminación de la toxicidad de compuestos
biológicos de aguas residuales no son capaces de eli- citostáticos.
minar efectivamente estos compuestos farmacológi-
camente activos [6]. Esto, sumado a una deficiente
eliminación de medicamentos caducados, contribu- DESARROLLOS EN PROCESOS DE
ye a la contaminación de los ambientes acuáticos de BIORREMEDIACIÓN
agua dulce con productos farmacéuticos [5]. Por otra
BIORREMEDIACIÓN DE COMPUESTOS DERIVADOS
parte, el hecho de que estas moléculas están conti-
DEL PETRÓLEO
nuamente vertidas en el medio acuático les confiere
En 1989 tras el derrame petrolero del buque Exon
una aparente persistencia incluyendo aquéllos con
Valdes en Alaska, la biorremediación de suelos y
una vida media corta [4, 5]. La eliminación de estos
aguas contaminadas con pasivos y activos ambienta-
compuestos, en particular para el tratamiento de agua
les ha tenido como eje fundamental el conocimiento y
potable, es difícil y costosa. Por lo tanto, es necesario
utilización de la diversidad de microorganismos, tanto
considerar otras formas de tratamiento más eficaces
de bacterias como de hongos, para bioprospectarlos
para eliminarlos [2].
como candidatos en tecnologías limpias y amigables
En la actualidad, varios estudios son llevados a cabo con los diferentes ecosistemas donde ellos se encuen-
para analizar y optimizar la eliminación de produc- tran. [9].
tos farmacéuticos por biorreactores con membra-
Es así como en Colombia, en los diferentes pisos tér-
na (BRM). Un BRM resulta del acoplamiento entre
micos (desde zonas de los Llanos Orientales, pasando
el tratamiento biológico y una separación líquido/
por la Orinoquía, por la zona sur y por la costa Atlán-
sólido a través de una membrana. Los BRM suelen
tica), el Centro de Investigaciones Microbiológicas-
operar a altas edades de lodos y altas concentracio-
CIMIC, particularmente el grupo de Microbiología
nes de biomasa, lo que permite la intensificación de
Ambiental y Bioprospección (MAB) ha aislado du-
los procesos biológicos y así favorecer la eliminación
rante más de 15 años microorganismos de ambientes
de los contaminantes con características específicas,
contaminados con niveles mayores de 400.000 ppm
tales como su baja bio-degradabilidad y baja concen-
de hidrocarburos totales petróleo (TPH´s) en lodos
tración. La aplicación de tecnología de BRM para eva-
aceitosos provenientes de la industria petrolera [9,
luar su potencial de degradación de un medicamento
10,11].
contra el cáncer, ha sido estudiada por el profesor
Luis Delgado del Grupo de Diseño de Productos y El potencial de biodegradación de los diferentes
Procesos (GDPP) [7, 8]. La molécula objetivo elegida compuestos de hidrocarburos del petróleo como to-
durante este estudio, la ciclofosfamida (CP), se utiliza lueno, xileno, fenol, naftaleno, diesel, gasolina entre
principalmente en los tratamientos del cáncer y tie- otros [12], ha sido determinado por técnicas cualita-
ne propiedades genotóxicas de cualquier organismo tivas y cuantitativas utilizando técnicas como presión
individual o de vida [2]. La eliminación de la CP y de selección con sustrato limitante y cromatografía
de su metabolito 4-ceto-CP ha sido de un 80% para de gases. Todos los trabajos se han complementado
ambos compuestos. El estudio permitió demostrar la con herramientas moleculares, de tal forma que la
viabilidad de los BRM para tratar contaminaciones a determinación por PCR de los genes responsables
104 de las rutas catabólicas [13] y determinación de pro- mayores de 200 mM de arsenato de sodio y proteínas
teínas implicadas en el proceso de degradación [14], asociadas a la pared y características asociadas a la
han llevado a la identificación de un grupo relevante membrana en los grupos de bacterias pertenecientes a
de microorganismos como Pseudomonas, Acinetobacter, los géneros Bacillus y Pseudomonas [20, 21]. Por lo tan-
Ralstonia, Bacillus, y Chrysobacterium , entre los más di- to, la gran diversidad de microorganismos descrita en
versos en términos de riqueza y abundancia. De tal términos de riqueza, abundancia y versatilidad meta-
forma que la base de datos robusta de genes caracte- bólica muestran el potencial que tenemos en Colom-
rizados, rutas metabólicas expresadas bajo sustratos bia para implementar procesos de biorremediación
específicos, ha sido la base fundamental para biopros- de compuestos aromáticos-alifáticos-poliaromáticos
pectarlos en primera instancia en pruebas piloto, de y de metales pesados, desarrollando así una práctica
campo y, posteriormente, en zonas de tratamiento amigable con el ecosistema, sin necesidad de introdu-
tanto intensivo como extensivo [15].Hoy por hoy, cir especies foráneas o emplear otras técnicas que ac-
tres aislamientos del grupo Pseudomonas de la región tualmente se debaten como la desorción térmica que
de Tame, Arauca, son empleados continuamente en aumentaría la concentración de CO 2 y, por ende, el
biorremediación de lodos aceitosos y un consorcio de efecto invernadero y el calentamiento global.
10 bacterias pertenecientes a los grupos de Bacillus,
Flavobacterium, Acinetobacter y Pseudomonas son bioau-
mentados y estimulados para tratamientos continuos
de lodos aceitosos provenientes de crudo con grado
°API pesado-medio y liviano (°API 12 hasta °API 35)
en la región del Casanare [16, 17, 18]. Con estas dos
metodologías, la bioremediación ha sido exitosa en
un plazo de 45 días y una disminución del contami- A
nante de 400.000 ppm a límites inferiores a la norma
colombiana (menos de 10.000 ppm).
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dida a alcanos y aromáticos simples, y deja intactos producir enzimas como lacasa y peroxidasa [25, 26], 105
compuestos más complejos y que permanecen como lo que pone de presente la importancia de estudiar a
contaminantes en el ambiente [23]. Recientemente se fondo estos organismos, especialmente teniendo en
ha propuesto el uso de hongos que, con sus exten- cuenta que las capacidades enzimáticas de los hongos
sas capacidades metabólicas, puedan realizar la de- son aplicables no sólo a la degradación de contami-
gradación de las fracciones recalcitrantes y pesadas nantes sino también de residuos lignocelulósicos (de
del petróleo y de lodos aceitosos [24]. El Grupo de interés en producción de biocombustibles de segunda
Microbiología Ambiental y Bioprospección (MAB) de generación).
la Universidad de los Andes adelanta investigaciones
que permitan aprovechar la diversidad microbiana USO DE ENZIMAS PARA DEGRADACIÓN DE
SUBPRODUCTOS INDUSTRIALES
nativa colombiana para realizar procesos de bioreme-
diación más completa, al usar inóculos combinados y En la línea de Biorremediación, el GDPP ha evaluado
secuenciales de bacterias y hongos aislados de cada la producción de la enzima lacasa mediante el cultivo
localidad. El MAB completa ya 20 años de experien- del hongo Trametes pubescens, hongo de la putrefacción
cia en bioremediación con bacterias pero hace poco blanca. La lacasa es una enzima oxidoreductasa pro-
se inició la exploración de la diversidad de hongos na- ducida por muchos organismos, que se ha encontrado
tivos presentes en estos ambientes. Los datos prelimi- en plantas, bacterias, insectos y hongos [27]. Actual-
nares obtenidos por el grupo, con la participación de mente se emplea en la industria alimenticia, papelera y
estudiantes de pregrado y maestría del Departamento textil, se usa también en nanobiotecnología, bioreme-
de Ciencias Biológicas, son promisorios en diversi- diación, síntesis química y cosmética. Esta enzima se
dad y utilidad. A partir de tres zonas localizadas en el caracteriza por tener un centro catalítico conservado
Casanare contaminadas con lodos de producción de en todos los organismos, compuesto por cuatro áto-
petróleo, se logró obtener un número considerable de mos de cobre que le confieren color azul, propiedad
aislamientos de hongos que presentaban crecimiento que la hace perteneciente a la familia de las cupropro-
activo en el suelo contaminado [25]. El microorganis- teínas azules. En la reacción que cataliza, se produce
mo más frecuente fue identificado como Aspergillus agua a partir de oxígeno molecular y la oxidación de
terreus, seguido por Paecilomyces spp. Las evaluaciones un sustrato reducido. La especificidad de esta enzima
preliminares realizadas mostraron que la bioaumen- en general es baja y puede utilizar muchos sustratos
tación de hongos nativos en sistemas microcosmos como fuente de electrones. Se ha reportado actividad
mejoró la remoción de hidrocarburos aromáticos y sobre orto- y para- difenoles, amino-fenoles, poli-fe-
asfalténicos; partiendo de valores iniciales cercanos noles, poli-aminas, lignina y algunos iones inorgánicos
a 35.000 ppm, los hidrocarburos aromáticos dismi- [28]. Una ventaja particular de la lacasa, observada du-
nuyeron a 20.000 ppm en 31 días de tratamiento, rante el estudio del mecanismo de acción de la enzima
mientras que en los microcosmos controles (no bio- es que, a pesar de tener un potencial redox inferior
aumentados) los valores de concentración de aromá- a algunas sustancias, puede modificarlas mediante el
ticos presentaron mayor variación, detectándose has- uso moléculas que actúan como transportadoras de
ta 28.000 ppm. Más interesante fue la disminución electrones. Este mecanismo permite la degradación
de hidrocarburos asfalténicos, que disminuyeron de de compuestos no fenólicos con un potencial redox
20.000 ppm a cerca de 11.000 ppm, mientras que en superior al de la enzima. De esta manera, se amplía el
los controles no biaumentados los valores mínimos rango de sustratos sobre los que puede actuar y per-
fueron de 15.000 ppm [25]. También se ha obteni- mite ser aplicada en más actividades como oxidación
do evidencia de la capacidad de estos hongos para de contaminantes orgánicos, desarrollo de biosenso-
res y celdas de biocombustible [28].
106 la cáscara de café y la tusa obtenida de la Palma de
Aceite para la producción de la enzima. Los resulta-
dos obtenidos hasta el momento muestran el aserrín
y la cáscara de soya como una alternativa para la pro-
ducción de la lacasa, al lograr actividades enzimáticas
hasta de 750 U mL-1 (Figura 2). Adicionalmente se ha
evaluado la degradación de compuestos clorofenóli-
cos mediante el acople del proceso biológico con pro-
cesos de oxidación avanzada empleando TiO 2/UV.
Las lacasas son producidas como múltiples isoen- La legislación actual y las acciones ambientales en el
zimas [29]. Esta enzima se produce principalmente mundo ponen de manifiesto un énfasis mayor en la
como metabolito secundario y de forma extracelular eliminación de componentes orgánicos no deseados
en la fase estacionaria de su crecimiento tras el agota- en el aire y en al agua. Sin embargo, las tecnologías
miento de nutrientes esenciales para el hongo, como utilizadas actualmente en las empresas que producen
la glucosa. Wong y Yu [30] encontró experimental- este tipo de desechos establecen unas condiciones de
mente una relación entre el agotamiento de glucosa tratamiento que exigen el uso masivo de productos de
y la formación de lacasa en un cultivo del hongo de neutralización, oxidación y aglomeración, por decir
putrefacción blanca T. versicolor, el cual produce pe- algunos, que las hacen poco sostenibles en el media-
queñas cantidades de la enzima durante la fase de no plazo. Esto hace que las empresas no las apliquen
crecimiento en la que el microorganismo dispone constantemente y que muchas de ellas ni siquiera las
de glucosa suficiente. En la medida que la glucosa es implementen, lo cual genera, además del impacto am-
agotada, la producción de lacasa se incrementa a 20 U biental, un problema de tipo ético, al diluir los efluen-
L-1. Una vez el hongo ha llegado a la fase estacionaria tes en agua de proceso, si es acuoso o con las salidas
de su metabolismo y se ha agotado la glucosa, la con- de chimenea, si es gaseoso.
centración de lacasa en el líquido de cultivo alcanza
Los Procesos de Oxidación Avanzada, POA, son me-
las 100 U L-1. La especie T. pubescens presenta un com-
todologías relativamente nuevas, desarrolladas a partir
portamiento similar a T. versicolor en la producción de
del año 1975 [34] y son procedimientos útiles como
lacasa durante las etapas de su metabolismo.
alternativas o complementos a técnicas convenciona-
El empleo de residuos agroindustriales se ha difun- les. Estas tecnologías se basan en métodos catalíticos
dido ampliamente como fuente de carbono para el químicos, foto químicos o electroquímicos que invo-
crecimiento del hongo y la producción de la enzima. lucran la generación de especies transitorias de gran
Así, se han reportado estudios empleando cáscara de poder oxidante, principalmente hidroxilos (OH•) que
mandarina y banano, entre otros [31, 32, 33]. Dentro poseen un efecto muy alto en la oxidación de la ma-
de los diferentes estudios realizados con la lacasa en teria orgánica [35].
la línea de Bioprocesos en la Universidad de Los An-
En Colombia, hasta el momento, se han hecho pocos
des, se han evaluado residuos de la industria maderera
estudios que tengan en cuenta efluentes reales para la
y agroindustriales como el aserrín, la cáscara de soya,
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degradación por oxidación avanzada; dichos estudios, una adición continua y estequiométrica de hierro y 107
se enfocan principalmente en: evaluación de la degra- peróxido, lo que deriva en altas concentraciones de
dación de los compuestos, estudio cinético, desarrollo hierro que son muy complejas de remover, así este
de soportes para catalizadores, diseño de reactores, compuesto no represente un problema ambiental.
entre otros. Dentro de las investigaciones realizadas Éste y otros factores asociados a la operación, hacen
están la degradación fotocatalítica y el proceso foto- que este proceso sea costoso, en comparación a un
Fenton ya que ambas permiten realizar transforma- sistema de tratamiento secundario (biológico) [40].
ciones en contaminantes tóxicos poco susceptibles a
En el caso de la fotocatálisis, se ha demostrado que
la oxidación para la posterior formación de productos
los costos de operación y equipos para la degrada-
inorgánicos [35]. Se ha comprobado que la degrada-
ción fotocatalítica, resultan ser menores comparados
ción fotocatalítica es efectiva y viable para la destruc-
con los tratamientos térmicos y de adsorción [41].
ción del contaminante con el catalizador TiO 2. Los
Sin embargo, ambos procesos pueden utilizarse como
procesos de fotocatálisis heterogénea permiten la
pretratamientos de un tratamiento secundario, lo que
transformación de contaminantes sobre TiO 2 bajo la
disminuiría los costos operativos asociados y permiti-
radiación de luz UV [36]. Teniendo un proceso con
rían que estos compuestos recalcitrantes, sean trans-
luz UV y catalizador simultáneamente, se han alcan-
formados en biodegradables.
zando conversiones de casi el 100% [36].
En los estudios realizados hasta el momento por el
Los pasos iniciales involucrados en la fotocatálisis,
GDPP y el grupo de Procesos de Oxidación Avan-
consisten en la generación de pares electrón-hueco
zada para la Remediación Ambiental (PROXAR), los
por la excitación del catalizador TiO 2 con luz UV-A.
POA han demostrado su efectividad en la degrada-
La absorción de la luz permite que se produzcan tran-
ción de compuestos orgánicos volátiles en fase gas
siciones electrónicas, para así degradar cualquier com-
por fotocatálisis [42, 43], lo cual concuerda con los
puesto orgánico [37] y los huecos formados reaccio-
resultados obtenidos por el grupo de Procesos Indus-
nan para formar radicales hidroxilo (oxidación). Las
triales de la Universidad de Antioquia y el aumento de
moléculas de oxígeno adsorbidas aceptan electrones
la biodegradabilidad en tintas por foto-Fenton [44].
(reducción) previniendo la reducción de la eficiencia
cuántica del proceso [38]. El radical hidroxilo posee Estos estudios están hasta ahora en una etapa preli-
alta efectividad para la oxidación de la materia orgá- minar y uno de los obstáculos encontrados ha sido su
nica, por ser una especie altamente reactiva contribu- escalamiento y evaluación directa, debido principal-
yendo a incrementar la velocidad de oxidación [39]. mente a criterios económicos y de voluntad de traba-
jo por parte de los actores involucrados en la toma de
El proceso foto-Fenton, el primer POA, se basa en
decisiones. Lo anterior se fundamenta en que como
la generación de radicales hidroxilo en presencia de
los procesos tradicionales funcionan en la mayoría de
peróxido de hidrógeno e iones de Fe+2 en condiciones
rangos aplicados, son éstos los que se normalizan y
de pH ácido y temperaturas moderadas. Las ventajas
convalidan sin tener en cuenta las pérdidas económi-
de este método son: el hierro (II) es abundante y no
cas asociadas a este tipo de tratamientos por parte
tóxico, el peróxido de hidrógeno es sencillo de mani-
de los empresarios que los implementan, que derivan
pular y ambientalmente benigno y dada su corta vida
en el no cumplimiento de la reglamentación, las no
media no se forman compuestos clorados ni exis-
conformidades en las certificaciones a que se tenga
ten limitaciones relativas a la transferencia de masa,
lugar o, en el peor de los casos, en la implementación
por tratarse de un sistema homogéneo; por último,
de prácticas poco éticas con el fin de cumplir nor-
el diseño de sistemas de reacción para su aplicación
mativas.
también es sencillo. En contraposición, se requiere
108 El trabajo de PROXAR en el área ambiental se orienta la simplicidad del grafo reactivo (comparado con el
al estudio de sistemas de oxidación avanzada y su aco- proceso biológico), por lo que se pueden alcanzar
ple con tratamientos biológicos para el tratamiento de conversiones más altas, sin embargo, estos procesos
aguas contaminadas con compuestos no-biodegrada- deben usar catalizadores que pueden generar proble-
bles y tóxicos [45]. Se destacan los trabajos realizados mas colaterales: su tratamiento.
sobre los contaminantes de la industria química (de-
gradación de 97% de la concentración inicial de so-
luciones acuosas de Bisphenol A) [46], de la industria REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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