Escherichia coli

 Una de las bacterias más estudiadas

 Son móviles y fermentan la lactosa (90%)
Escherichia coli  Normalmente coloniza el intestino grueso
 Causa muy frecuente de algunas de las
infecciones bacterianas más comunes:
 Infección del tracto urinario
 Bacteremia
 Meningitis neonatal
 Neumonía
 Diarrea en niños y del viajero

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Esquema de coprocultivo Escherichia coli

Muestra de Heces

Medio de Cary y Blair

Agar XLD

Caldo Agar Rojo de fenol

Agar Agar Caldo Agar Mac XLD, HA
Agar Mac peptonado
Sangre Sangre selenito Conkey DC, EMB
Conkey alcalino
Butzler Ampicilina Sorbitol

Agar Agar
TCBS SS Agar Hektoen
enteric
EPEC Vibrio
ETEC
Campylo- Aeromo- cholerae Shigella
EIEC Salmonella EHEC Rojo neutro
EAEC bacter nas V.parahae- Salmonella Azul de bromotimol
ADEC molyticus Fucsina ácida
Agar MacConkey
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1
 E. coli productora de diarrea

 ETEC: toxina LT y ST en niños y diarrea del viajero

Escherichia coli  EPEC: 12 serotipos diferentes
Diarreogénica  EIEC: 8 serotipos
 EHEC: O157:H7 colitis hemorrágica, Síndrome
urémico-hemolítico
 EAggEC: diarrea del viajero
 ADEC: diarrea persistente

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Serotipos Característicos de las

Tipos de E. coli diarreogénica Diferentes Categorías de Escherichia Coli

ETEC EPEC EHEC EAggEC EIEC

Código Tipo de
Genético Modelo diarrea O6:H16  O55:H6  O26:H11  O28ac:NM
  O3:H2
 O8:H9  O55:NM  O26:H32  O15:H18  O29:NM
ETEC (LT, STa, STb) Plásmido RIL, PL Aguda acuosa  O11:H27  O86:H34  O26:NM  O44:H18  O112ac:NM
 O15:H11  O86:NM  O55:H7  O86:NM  O124:H30
EHEC (STx I y II) Plásmido HeLa cell Con sangre (± SHU)  O20:NM  O111:H2  O111ab:H8  O77:H18  O124:NM
 O25:H42  O111:H12  O111ab:NM  O111:H21  O136:NM
EIEC Plás & Crom Sereny Disentería  O25:NM  O111:NM  O113:H21  O127:H2  O143:NM
 O78:H11  O119:H6  O117:H14  O?:H10  O144:NM
 O78:H12  O119:NM  O157:H7  O152:NM
EPEC Plás & Crom HEp-2 (LA) Aguda & Persist
 O128:H7  O125ac:H21  O159:H2
 O148:H28  O126:H27  O159:NM
EAggEC Plásmido HEp-2 (AA) Persistente  O126:NM  O164:NM
 O149:H10
 O159:H20  O127:H6  O167:H4
DAEC Plás & Crom HEp-2 (DA) Aguda? Persist?  O173:NM  O127:NM  O167:H5
 O128:H2  O167:NM
 O128:H12
 O142:H6

Guerrant et al. J Infect Dis 1999;179 (Suppl 2) S331-S337

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2
 Escherichia coli
enterotoxigénica (ETEC)
E. coli que elaboran uno o ambas de las dos liberación de enterotoxina
LT o ST
enterotoxinas, ST y LT, que causan un estado
de hipersecreción en el intestino delgado.
ETEC

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Epidemiología Aislamiento y Diagnóstico

 ETEC está asociado con:  La identificación de ETEC se basa en la detección de las

 Diarrea del destete en niños enterotoxinas LT y/o ST.
 Diarrea del viajero; característicamente, ETEC-ST
 Enterotoxina ST:
 Ensayo de asa ligada de conejo
 El ensayo en ratón lactante, considerado ‘gold standard’
 La contaminación fecal de agua y alimentos es la para STa por muchos años
razón principal de la alta prevalencia  Actualmente se detecta por ELISA, PCR.

 No se ha demostrado que la transmisión persona-  Enterotoxina LT:

persona sea tan importante.
 Varios estudios han mostrado que 20 a 40% de casos
de diarrea en viajeros se debe a ETEC.
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 El bioensayo se hace con células adrenales Y1
o con células CHO
 Actualmente se dispone de ensayos inmunológicos:
Biken test, ELISA, aglutinación en látex, coaglutinación.
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3
Detección de la enterotoxina ST Detección de la enterotoxina ST
Ensayo en asa ligada de conejo Ensayo en asa ligada de conejo

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Detección de la enterotoxina ST Detección de la enterotoxina ST

Ensayo en ratón lactante Ensayo en ratón lactante

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4
Detección de la enterotoxina ST Detección de la enterotoxina ST
Ensayo en ratón lactante Ensayo en ratón lactante

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Detección de la enterotoxina ST Detección de la enterotoxina ST

Ensayo en ratón lactante Ensayo en ratón lactante

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5
Efecto citotóxico de ETEC – LT en Efecto citotóxico de ETEC – LT
Células suprarrenales Y1 de ratón en Células CHO

E. coli enterotoxigénica Control Control E. coli enterotoxigénica

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Detección de la enterotoxina LT Detección de la enterotoxina LT

Prueba de Biken Prueba de Biken

Plantilla para la prueba

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6
Detección de la enterotoxina LT
Prueba de Biken
E. Coli enteropatógena
(EPEC)

Inicialmente definida sobre la base de serotipos O y H,

EPEC se define ahora por la capacidad de estas cepas
de producir las lesiones A/E en el epitelio del intestino
delgado y ausencia de elaboración de Stx; las EPEC se
adhieren a las células HEp-2 siguiendo el patrón de
adherencia localizada.

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Epidemiología
Adherencia
inicial vía
BFP

adherencia  La infección por EPEC es primariamente una enfermedad de

íntima de la lactantes menores de 2 años de edad.
bacteria

 Se transmite por contaminación fecal de alimentos de

condensación xxxxx
xxxxx
de actina y destete o fórmula, por manos o fomites; el reservorio natural
borramiento de son personas portadoras asintomáticas.
microvellosidades

 Estudios en Brasil, México y Sudáfrica han encontrado que

30 a 40% de los casos de diarrea infantil son atribuibles a
EPEC; en algunos casos con mayor incidencia que rotavirus.
EPEC

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7
 Adherencia de Escherichia coli a
Aislamiento y Diagnóstico células Hep-2
 Por definición las cepas de EPEC se reconocen como tales
por la característica histopatológica A/E; ya que las EHEC
pueden producir también estas lesiones, es indispensable
demostrar que las cepas EPEC no elaboran toxina shiga.

 El fenotipo A/E se identifica en cultivos de células HEp-2 o

células HeLa y por examen con ME de piezas de biopsia; los
métodos genotípicos se hacen con sondas de DNA y primers
para PCR: Gen eae (para el fenotipo A/E) y plásmido EAF
(de función aún no conocida)

 Poseer antígenos específicos O y H no es esencial, aunque

la mayoría de EPEC caen dentro de ciertos serotipos O:H
bien conocidos. Control Adhesión localizada
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Escherichia coli
enterohemorrágica (EHEC)
adherencia
íntima de la
bacteria

condensación xxxxx
xxxxx
de actina y
borramiento de
microvellosidades

E. coli que producen una o más toxinas de la

liberación de toxina shiga
familia Stx (toxina Shiga producida por Shigella
dysenteriae 1) y causan colitis hemorrágica y
EHEC
síndrome hemolítico urémico.

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8
 Epidemiología
 El intestino del ganado vacuno y el de otros
animales (ovinos, caprinos, cerdos, gatos,
perros, pollos y pájaros silvestres) es el
reservorio natural del EHEC.
 La infección se transmite por una amplia
variedad de alimentos, siendo la carne de
vacuno el vehículo más importante.
 La transmisión requiere una dosis infectiva
muy baja por lo que la infección suele
presentarse en forma de brotes con alta
tasa de ataque y transmisión persona a
persona.
Curso de Bacteriología
Aislamiento y Diagnóstico
 La principal razón de salud pública para buscar EHEC es
detectar brotes y poder instituir medidas de control que
limiten el número de casos y de muertes.
 El CDC recomienda que todos los laboratorios
microbiológicos clínicos deben rutinariamente buscar
O157:H7 en toda muestra fecal de personas con diarrea
con sangre o SHU, utilizando el agar SMAC.
 Si la incidencia local de SHU es alta y el cultivo de heces
con sangre no da positivo para O157:H7, debe buscarse
EHECs de otros serotipos.
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Escherichia coli O157:H7 en

Aislamiento y Diagnóstico Agar MacConkey-Sorbitol (SMAC)
 Hay tres métodos para diagnosticar infección por EHEC:
 Aislamiento de cepas O157 de muestras fecales;
 Detección en heces de Stx libre o de organismos
productores de Stx; y
 Detección de niveles elevados en suero de anticuerpos al
lipopolisacárido O157 u algún otro antígeno de EHEC.

 Cuando los cultivos de heces se hacen dentro de los primeros No fermentan sorbitol

2 días de enfermedad, la tasa de aislamiento de E. coli

O157:H7 es de 100%; cuando los cultivos se hacen a los 3 a
6 días o después de 6 días, la tasa de aislamiento decrece a
92 y 33%, respectivamente; por tanto, para cuando aparecen
el SHU, 2/3 de los pacientes ya no tienen E. coli O157:H7 en
sus heces.
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9
 adherencia
agregativa
biofilm
mucoso

Escherichia coli
enteroagregativa (EAggEC) liberación de citotoxina

E. coli que no elaboran enterotoxina LT o ST y

que se adhieren a las células HEp-2 siguiendo
el patrón autoagregativo.
EAggEC

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Epidemiología Aislamiento y Diagnóstico

 Se ha demostrado una asociación consistente entre EAggEC
y el síndrome de diarrea persistente.
 Aún no se ha establecido con certeza el reservorio y el modo
de transmisión.
 Se ha vinculado EAggEC con pobre ganancia de peso aún sin
presencia de diarrea.
 El ensayo en células HEp-2 sigue siendo el ‘gold standard’
para la detección de EAggEC; característicamente, las
bacterias en este ensayo se presentan como agregadas,
semejando un muro de ladrillo, tanto en la superficie de las
células como lejos de ellas.
 Sonda de DNA: Es preparada a partir de un fragmento de
plásmido de 1.0 kb; su sensibilidad varía mucho de un lugar a
otro y no se ha determinado aún el significado epidemiológico
de las cepas sonda-positiva versus las sonda-negativa.

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Adherencia de Escherichia coli
a células Hep-2
Escherichia coli
enteroinvasiva (EIEC)

E. coli bioquímica, genética y patogenéticamente

estrechamente relacionadas a Shigella spp.; las cepas
EIEC son generalmente lisina descarboxilasa negativas,
lactosa negativas y no móviles

Control Adhesión agregativa

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EIEC : Prueba de Sereny

invasión

ruptura del
fagosoma

dispersión
movimiento lateral a la
intracelular célula
EIEC adyacente

Control
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EIEC : Prueba de Sereny

E. Coli enteroadherente
(DAEC)

E. coli que adhieren a las células HEp-2

siguiendo el patrón de adherencia difusa.

Keratoconjuntivitis purulenta en el ojo del cobayo

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microvellosidades
elongadas Adherencia de E. coli a células Hep-2

citoplasma normal

DAEC

Control Adherencia difusa

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