Enzimología

Ejercicios Cinética Enzimática

1. Se añaden 25 u1 de una preparación de una enzima monosustrato a 1 ml de mezcla de

reacción para el ensayo de la actividad enzimática, utilizando diferentes concentraciones
de sustrato. Las velocidades iniciales obtenidas en cada caso fueron las siguientes:

-----------------------------------------------------------------------------
|S| (M) v (nmoles/mín)
-----------------------------------------------------------------------------
-2
10 75,00
-3
10 74,90
-4
10 60,00
-5
7,5 X 10 56,25
-6
6,25 X 10 15,00
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A partir de estos datos:

a) Determinar Km, V y la actividad enzimática, expresada en U/mI.

-5
b) Calcular la velocidad de la reacción, v, para |S| = 2,5 X 10 M, y |S| = 0,02 M.
c) Si |S| = 0,04 M, ¿Cuál sería la cantidad de producto formado una vez transcurrido 3
min?
d) ¿Cuál sería la velocidad inicial obtenida si el ensayo se hace con 50 uI de la
preparación enzimática y a concentración saturante de sustrato? ¿Y si la
-4
concentración de sustrato fuese 10 M?

2. Un tejido embrionario de pollo contiene una enzima que cataliza una reacción Uni-
Uni, según los datos cinéticos que se recogen a continuación:

----------------------------------------------------------------------------
.
|S| (M) v (umoles/min mg proteína)
-----------------------------------------------------------------------------
2.1x10-5 0.67 1.4925
2.5x10-5 0.7 1.4285
3.3x10-5 0.91 1.0989
5.0x10-5 1.16 0.8629
-4
1.0x10 1.56 0,641
1.5x10-4 1.79 0.5586
2.0x10-4 1.92 0,5208
3.0x10-4 2.10 0.4761
5.9x10-4 2.27 0.4405
1.4x10-3 2.50 0.4
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A partir de estos datos, calcúlense gráficamente los valores de Km y Vm según los métodos
de Lineweaver Burk y Eadie-Hofstee.