INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Licenciatura en Biología

LABORATORIO DE BIOLOGÍA DE PROCARIONTES

Sección 2

PRÁCTICA 3

TAXONOMÍA E IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

2OM2

EQUIPOS 6 Y 7

INTEGRANTES:

● Fuentes Diaz Beatriz Veronica

● Mejia Roldan Angelica Janeth
● Ávila Méndez Jonatan Daniel
● García Hernández Adrián

ENTREGA DE LA PRÁCTICA: 09/Septiembre/2019

OBJETIVOS:

● Identificar por medio de la primera etapa de Cowan el grupo o género al que

pertenece la cepa.
● Realizar una serie de pruebas para una buena identificación de las cepas.

RESULTADOS

Equipo 7

Tabla 1. Morfología Colonial Y Microscópica de bacterias

Características Colonia 1 Colonia 2 Colonia 3
Tamaño (mm) 3 4 2
Color Blanco Blanco Amarillo
Forma Irregular Circular Circular
Elevación Plana Bajo convexo Bajo convexo
Superficie Lisa Lisa Lisa
Aspecto Húmedo Húmedo Seco
Bordes Lobulado Entero Entero
Luz reflejada Brillante Brillante Brillante
Luz transmitida Opaca Translúcida Opaca
Consistencia Suave, butirosa mucosa Suave, butirosa
Gram + - +
Forma bacilos bacilos cortos cocos
Agrupación Empalizada, Empalizada, Estafilococos,
diplobacilos diplobacilos tétradas
sarcinas
Esporas Si No No

Tabla de morfología colonial y microscopia de bacterias observada por el equipo 7, utilizada

en la practica 2 donde podemos observar características morfológicas de las colonias
analizadas para posteriormente poder identificar mediante los datos de Gram, forma de la
célula, la presencia o no de esporas y su tipo.

Tabla 1.1 Tabla primera etapa del sistema de Cowan

Prueba Cepa No.

1 2 3

Movilidad Ausente Presente Ausente

Aerobios Presente Presente Presente

Anaerobios Negativa Positiva Negativa

Catalasa Positiva Positiva Positiva

Oxidasa Negativa Positiva Negativa

Produccion de Acido Positiva Positiva Negativa

Oxidación/ Fermentación Ausente Fermentación Ausente

Producción de indol Ausente Presente Ausente

Cepa 1 Cepa 2 Cepa 3

Bacillus Enterobacteria Aerococcus

Tabla de pruebas realizadas mediante las pruebas de cowan del equipo 7, que nos aportan
información necesaria acerca del metabolismo de las cepas estudiadas durante la practica
donde se realizaron pruebas de movilidad y la cepa 2 y 3 fueron positivas y la 1 tiene
ausencia de movilidad, en prueba de aerobiosis todas la cepas presentaron crecimiento en
la placa, para la prueba de oxidasa la cepa 2 fue la única que resulto positiva, en
producción de ácido resulto positiva la cepa 1 y 2, en la prueba de oxidación y fermentación
la cepa 2 se observó una fermentación y producción de indol

Tabla 1.3. tabla de géneros de cepas encontradas mediante identificación

Mediante la identificación que realizamos con las tablas anteriores y con la comparación de
estas características en la tabla proporcionada en el manual para identificación de géneros
estos fueron los géneros encontrados para las cepas 1, 2 , 3 en base a los datos que se
obtuvieron del equipo 7.

Equipo 6

Tabla 2. Morfología colonial y microscópica de las bacterias.

Características Colonia 1 Colonia 2 Colonia 3

Tamaño (mm) 5 mm 5mm 5mm

Color Amarillo Blanca Amarilla

Forma Toruloide Rizada Irregular

Elevación Plana Plana Plana

Superficie Lisa Lisa Lisa

Aspecto Húmeda Húmeda Húmeda

Bordes Ondulado Crenado Ondulado

Luz reflejada Brillante Brillante Brillante

Luz transmitida Opaca Opaca Translúcida

Consistencia Butirosa Butirosa Butirosa

Gram Positiva Positiva Negativa

Forma Coco Bacilos Bacilos

Agrupación Tetrada Diplobacilos Diplobacilos

Esporas Ausentes Central Ausentes

Tabla de morfología colonial y microscopia de bacterias observada por el equipo 6, utilizada

en la practica 2 donde podemos observar características morfológicas de las colonias
analizadas para posteriormente poder identificar mediante los datos de Gram, forma de la
célula, la presencia o no de esporas y su tipo donde la cepa 1 es Gram positiva, tiene
forma de coco con presencia de esporas, la 2 cepa es Gram positiva en forma de bacilo y
con esporas presentes de tipo central y la cepa 3 es Gram negativa en forma de bacilo con
ausencia de esporas.

Tabla 2.1. Primera etapa de del sistema de Cowan

Prueba Cepa No.

1 2 3

Movilidad Ausente Presente Presente

Aerobios Presente Presente Presente

Anaerobios Negativo Positivo Negativo

Catalasa Positivo Positivo Positivo

Oxidasa Negativa Positiva Negativa

Producción de Acido Positivo Positivo Negativo

Oxidación/ Fermentación Ausente Fermentación Ausente

Producción de indol Ausente Presente Ausente

En la tabla de las pruebas de Cowan para la cepa 1 podemos observar que presenta
movilidad, un crecimiento en placa en aerobiosis, en la prueba de oxidasa fue negativa
pero positiva para producción de ácido, las pruebas de oxidación/ fermentación y
producción de indol resultaron negativas, la cepa 2 positiva para movilidad, aerobiosis,
oxidasa, producción de ácido, producción de indol, realiza fermentación, la cepa 3 fue
positiva para movilidad, aerobiosis solamente.

Tabla 2.3. Tabla de géneros de cepas encontradas mediante identificación.

Cepa 1 Cepa 2 Cepa 3

staphylococcus Bacillus Legionella

Mediante la identificación que realizamos con las tablas anteriores y con la comparación de
estas características en la tabla proporcionada en el manual para identificación de géneros
estos fueron los géneros encontrados para las cepas 1, 2 , 3 en base a los datos que se
obtuvieron del equipo 6.

DISCUSIÓN.
Para identificar a las diversas bacterias se realizaron un considerable número de pruebas,
además de anotar sus características observando tanto la morfología colonial como la de
las bacterias. En la prueba de movilidad se determina si las bacterias tienen movimiento, lo
cual puede indicar, a su vez, si tiene presencia o ausencia de flagelos. Ciertas especies de
bacterias móviles mostrarán un crecimiento difuso en todo el medio, mientras otras pueden
mostrar difusión de uno o dos puntos que aparecen como resultados nodulares junto a la
inoculación (Mac Faddin, 2003). En esta prueba también se determinó la producción de
indol, lo cual sirve para determinar la habilidad del organismo de romper el indol del
aminoácido triptófano. Esta división molecular es lograda por una serie de enzimas
intracelulares diferentes, un sistema que en conjunto se le llama con frecuencia
triptofanasa (Martinko y Parker, 2003). En ambos equipos la prueba de movilidad- indol fue
positiva en el cultivo 2, sin embargo, el equipo 6 arrojó igualmente resultados positivos en
el cultivo 3 , lo cual debe tomarse en consideración, ya que esto pueden indicar que se
trata de diferentes tipos de bacterias. Otra diferencia que se observa en el caso de ambos
equipos es la morfología colonial y microscópica, sin embargo esto se puede deber a que
solo se observó una colonia por cultivo en cada equipo. En cuanto a las demás pruebas
realizadas se obtuvieron los mismos resultados en ambos equipos, cabe mencionar que no
se observó la placa en condiciones anóxicas debido a problemas con la incubación por lo
cual no se puede saber si hay otra diferencia significativa en dicha prueba que se deba
resaltar.

CONCLUSIONES
  Para la taxonomía de un cultivo bacteriano se requiere de una caracterización
detallada.
 Los criterios para la clasificación de las bacterias utilizado fue el de Cowan.
 Las pruebas más utilizadas para la identificación de bacterias son la de movilidad y
el crecimiento en presencia de oxígeno y/o en anaerobio.

CUESTIONARIO.

1.- ¿Cómo se relaciona la fisiología de las bacterias con su diversidad?

● La fisiología está estrechamente ligada con la diversidad de microorganismos, es
estos organismos la fisiología y los cambios en la misma permiten su permanencia,
adaptación y evolución.
● La fisiología explica cómo los microorganismos se relacionan directamente con su
entorno y cómo pueden obtener energía, almacenarla y desarrollar sus funciones
(subsistir). Por ello la gran diversidad de bacterias que existen se debe a las
modificaciones y adaptaciones que sufre su fisiología, les permite ser cosmopolitas o
dependientes de ambientes.
2.- ¿Cuáles son los fundamentos bioquímicos para las pruebas de catalasa-oxidasa y
oxidación/fermentación?
● La prueba de catalasa-oxidasa se basa en la reacción del citocromo; estos son
proteínas encargadas del transporte de energía química, donde las oxidasas
generar peróxido de hidrógeno al oxidar los citocromos y las catalasas hidrolizan los
citocromos generando agua y oxígeno gaseoso. Nos sirve para identificar a grupos
aerobios (catalasa), y grupos que generan citocromo c (oxidasas).
● La prueba de oxidación/fermentación se lleva a cabo al determinar la utilización de
los hidratos de carbono por parte de un microorganismo, se realiza por vÌa oxidativa
(proceso aeróbico, presencia de oxígeno) o por vÌa fermentativa (proceso
anaeróbico, ausencia de oxígeno).

3.-Enlistar otras 5 pruebas bioquímicas útiles para la identificación de bacterias

● LAP: Enzima leucina aminopeptidasa (LAP) es una prueba para la identificación de
cocos grampositivos catalasa negativa; diferencia especÌficamente los géneros
Aerococcus y Leuconostoc de Streptococcus, Enterococcus, Lactococcus, y
Pediococcus.
● Fermentación de azúcares: Se utiliza para la identificación de bacterias anaerobias y
anaerobias facultativas, estas fermentan carbohidratos y se pueden diferenciar al ver
sus desechos ya sea hidrógeno gaseoso o dióxido de carbono.
● Reducción de nitratos: Se fundamenta en la capacidad de algunas bacterias de
reducir nitratos en nitritos, es útil para la asignación de la familia Enterobacteriaceae.
● Utilización de citrato: Se basa en los organismos que utilizan compuestos derivados
del citrato como fuente de carbono y derivados del amoniaco como única fuente de
nitrógeno, esto provoca una alcalinización del medio y al generar un viraje en el
cultivo podemos identificar bacterias como Enterobacter, Klebsiella, Serratia,
Citrobacter y algunas especies de Salmonella.
 ● Agar Hierro de Kligler: Nos ayuda a lo diferenciación de bacterias que metabolizan
azúcares, este procedimiento utiliza, hidratos de glucosa y lactosa así como un
componente denominado “Triple Sugar Iron” (ITS) que posee un tercer hidrato de
carbono, la sacarosa. Al reaccionar en el medio uno, dos o inclusive los tres son
consumidos y nos denota su vía metabólica.

BIBLIOGRAFÍA

Mac Faddin J. F. 2003. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de

importancia clínica. 3ª edición Médica Panamericana, S. A. De C. V. México Madigan,
M. T., J. M. Martinko y J. Parker. 2003. Brock. Biología de los microorganismos. 10ª
Ed. Prentice Hall Iberia. España.
Ramírez-Gama, R. M., B. Luna Millán, O. Velásquez Madrazo, L. Vierna García, A.
Mejía Chávez, G. Tsuzuki Reyes, L. Hernández Gómez, I. Müggenburg, A. Camacho
Cruz y M del C. Urzúa Hernández. 2006. Manual de Prácticas de Microbiología
General. 5ª edición. Facultad de Química, UNAM. México