MAPA DE

RESTRICCION
DRA. MARICELA SARITA MONTAÑO
VALDEZ

LUIS GERARDO GARCIA MEDINA

BIOTECNOLOGIA GENOMICA
3-2
BIOINFORMATICA Y SIMULACION
INTRODUCCION
El Premio Nobel de Medicina de 1978 fue concedido a los microbiólogos Werner
Arber, Daniel Nathans y Hamilton Smith por el descubrimiento de las
endonucleasas de restricción lo que condujo al desarrollo de la tecnología de ADN
recombinante. El primer uso práctico de su trabajo fue la manipulación de la
bacteria E. coli para producir insulina humana para los diabéticos.
 MAPA DE RESTRICCION

¿Qué es un mapa de restricción?

Es un mapa físico de un segmento de ADN que muestra los lugares de
corte de endonucleasas específicas y la distancia de las pares de bases.
Aplicaciones en el diagnóstico de enfermedades
genéticas
Gracias a las enzimas de restricción somos capaces de diagnosticar
ciertas enfermedades genéticas, bien sean debidas a una variación en
el material genético (duplicación, deleción, etc) o bien sean debidas a
una mutación en una base puntual. El procedimiento para dicho
diagnóstico consistiría en amplificar por PCR una región concreta del
cromosoma donde sepamos que debería estar o no ese cambio
genético y añadir la enzima o enzimas de restricción para que así se
realicen los cortes pertinentes. Tras realizar dichos cortes, correremos
nuestras muestras en un gel de electroforesis y veremos las diferencias
de tamaños que existen. Si la mutación genera una deleción, al correr
en la electroforesis observaremos un fragmento menor al que
esperaríamos de un paciente sano, de tal manera que lo podríamos
diagnosticar. Si la mutación, por el contrario, genera una mutación
puntual, podremos aprovecharla para utilizar una enzima en ese punto
y que así, si no existe dicha mutación, ese corte no se producirá y
obtendremos un fragmento mayor en el gel de electroforesis.
Practica de mapa de restricción
Estaremos trabajando con nuestro gen que cuenta con las siguientes
características:

690 bp

Numero de
acceso: L40509.1

Organismo:
Giardia intestinalis
Autores:
Monis,P.T., Mayrhofer,G., Andrews,R.H.,
Homan,W.L., Limper,L. and Ey,P.L

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MAPA DE RESTRICCION

Descargamos la secuencia en formato FASTA y la abrimos en el

programa de Bioedit

Una vez tenemos nuestra secuencia en bioedit procedemos a

saleccionarla y seguir los siguientes pasos para llegar a la herramienta
“Restriction map” seleccionamos la pestaña “Sequences”, nos vamos a
donde dice “Nucleic Acid” y nos aparece “Restriction map”.

Nos arroja el siguiente resultado, aquí mismo seleccionamos la opción

“Generate map”

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MAPA DE RESTRICCION

Aquí miramos las enzimas que cortan y el lugar donde cortan en su lugar
específico. Continuamos deslizando la pantalla para seguir observando
muchas enzimas, nuestro parte de interés se encuentra hasta el final de
la pestaña ya que ahí es donde se encuentran todas las enzimas que
no cortan nuestro gen y son las que podemos usar para tener nuestro
gen integro.

Por último, estas son las enzimas que nos pueden servir para nuestra
secuencia ya que no cortan nuestro gen.

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